疏肝健脾活血方对肝纤维化模型小鼠肝组织CUG结合蛋白1表达及TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的探讨疏肝健脾活血方防治肝纤维化的可能作用机制。方法48只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、疏肝健脾活血方组、CUGBP1敲减组,每组12只。CUGBP1敲减组一次性尾静脉注射CUGBP1敲减腺相关病毒,其余各组尾静脉注射对照腺相关病毒,每只小鼠注射量为100μl,病毒滴度不少于1×10^(12)vg/ml。4周后,除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射20%四氯化碳(CCl_(4))2.5 ml/kg,每3天注射1次,连续4周,诱导肝纤维化模型;同时疏肝健脾活血方组小鼠予33.3 g/(kg·d)疏肝健脾活血方药液灌胃,正常组、模型组及CUGBP1敲减组予10 ml/kg蒸馏水灌胃,每天1次,连续4周。末次给药12 h后取材,采用HE染色、Masson染色、天狼星红染色进行肝脏病理学观察;检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平及肝组织中羟脯氨酸(HYP)含量;检测肝组织中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、α平滑肌激动蛋白(α-SMA)、磷酸化Smad2(p-Smad2)、磷酸化Smad3(p-Smad3)、Smad7、CUG结合蛋白1(CUGBP1)蛋白表达,肝组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、CollagenⅠ、α-SMA、Smad7、CUGBP1 mRNA表达。结果与正常组比较,模型组小鼠肝组织病理显示肝细胞排列紊乱,有大量炎性细胞浸润与大量胶原纤维沉积,并且形成明显的纤维间隔;血清中ALT、AST水平及肝组织中HYP含量上升,肝组织中CollagenⅠ、CUGBP1、p-Smad2、p-Smad3、α-SMA蛋白表达升高,TGF-β1、CollagenⅠ、CUGBP1、α-SMA mRNA表达升高,Smad7蛋白及mRNA表达下降(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,疏肝健脾活血方组和CUGBP1敲减组小鼠肝组织病理显示有少量炎性细胞浸润,纤维组织增生不明显,纤维间隔稀疏;血清中ALT、AST水平及肝组织中HYP含量下降,上述蛋白及mRNA水平均有所改善(P<0.05或P<0.01)。与疏肝健脾活血方组比较,除Smad7 mRNA表达升高外,CUGBP1敲减组其余各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论疏肝健脾活血方可能通过抑制肝组织CUGBP1表达,从而阻断TGF-β1/Smads信号后续转导,进而抑制肝纤维化进展。

CUG结合蛋白1在非小细胞肺癌中的表达及与预后的关系

目的探讨非小细胞型肺癌组织中CUG结合蛋白1（CUGBP1）mRNA及蛋白的表达以及与预后的关系。方法选取2009年7月至2011年4月在青岛大学附属医院胸外科接受手术治疗的57例非小细胞型肺癌患者，男32例，女25例；年龄43～74（60．6±8．9）岁。通过半定量逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫组织化学技术检测癌组织及周围正常组织CUGBP1的基因和蛋白表达情况。所有患者术后每2个月电话随访1次，采用肿瘤进展时间（TTP）作为观察评估指标，分析CUGBP1 mRNA及临床病理各指标与预后的关系。采用χ^2检验对CUGBP1 mRNA及蛋白的表达进行统计分析，采用COX单因素及多因素分析CUGBP1 mRNA对于肺癌预后的意义。结果CUGBP1 mRNA及CUGBP1蛋白在肺癌组织中高表达，并且与TNM分期及分化密切相关。通过单因素及多因素分析，CUGBP1 mRNA[P=0．0074，HR=3．701，95％CI（1．420，9．648）]、TNM分期[P〈0．0001，HR=4．043，95％CI（2．098，7．794）]及年龄（P=0．0018，HR=3．207，95％CI（1．544，6．664）]可以作为非小细胞肺癌患者的独立预后因素。结论CUGBP1 mRNA及蛋白在肺癌组织中高表达。作为非小细胞肺癌患者的独立预后因素，CUGBP1 mRNA高表达患者预后较差。