酵母CUP1基因的结构及其蛋白质鳌合金属离子功能的研究进展

酵母CUP1编码的蛋白质属于金属硫蛋白,该蛋白质富含半胱氨酸,大小为61个氨基酸,分子质量约为6165u。CUP1蛋白能够鳌合金属铜离子,使得酵母对铜离子产生耐受力。在铜等金属离子的诱导下,酵母CUP1基因的启动子与转录因子ACE1等结合力增强,从而在转录水平上的表达量大大提高。作者对酵母CUP1基因的研究进行了综述,主要包括CUP1基因的结构、其蛋白质鳌合金属离子的作用、启动子相关的分析及CUP1基因特别是其启动子在转基因中的应用,为深入研究CUP1基因的生理机制奠定基础,同时也为其在转基因中的应用,特别是在转CUP1基因动、植物生产中的应用提供理论依据。

酵母耐铜基因CUP1改良荧光假单胞菌耐铜性研究初报

利用根际促生菌(PGPR)荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)等微生物的生物修复作用可治理土壤重金属污染。酿酒酵母耐铜基因CUP1编码铜金属硫蛋白(Cu-MT),对铜有很高的亲和性,可拮抗重金属铜毒性。为提高荧光假单胞菌的生物修复能力,将酿酒酵母耐铜基因CUP1克隆至荧光假单胞菌。通过引物设计,将SD序列添加至酵母耐铜基因CUP1编码序列前端,PCR扩增得到约200bp的CUP1片段,克隆至测序载体pUC19,经测序证明正确后,胶回收CUP1片段连接到具有广泛宿主范围的柯斯质粒pLAFR3上,经三亲接合转移至荧光假单胞菌AS1.1381,得到重组菌株AS1.1381/pL3CUP1。铜实验表明,重组菌株AS1.1381/pL3CUP1的抗铜能力(6mM Cu2+)显著高于AS1.1381/pLAFR3(4.5mMCu2+),重组菌株抗铜性得到提高。

酿酒酵母耐铜基因CUP1的克隆及其植物表达载体的构建

酿酒酵母铜金属硫蛋白 ( copper metallothionein,Cu MT) ,属于第 II型金属硫蛋白 ,Cu MT由酿酒酵母耐铜基因 CUP1编码 ,由 61个氨基酸残基组成 ,其中半胱氨酸残基 1 3个 ,占 Cu MT总氨基酸数的 2 1 .3%。 Cu MT与铜离子有较强的结合力 ,在酵母细胞中主要参与过量铜的解毒作用。本研究通过PCR方法 ,从酵母基因组 DNA中扩增出了 CUP1基因 ,克隆于 p UC1 9的多克隆位点。扩增片段长 4 86bp,包括 ORF及其部分下游序列。所得克隆与发表序列的 ORF一致 ,推导出的氨基酸序列与发表序列完全一样。用于植物转 CUP1基因用的表达载体已构建完毕 ,分别命名为 p BI CUP1和 p CM CUP1。对植物 (如苎麻、水稻、水生植物等 )