Dectin-1在curdlan诱导的慢性肉芽肿病高炎症反应中的作用机制

慢性肉芽肿病(CGD)是一种罕见的遗传免疫缺陷综合症.CGD病人最常见为NADPH氧化酶2(NADPH oxidase 2,NOX2)功能缺失造成吞噬细胞内活性氧生成障碍,不能清除外源的细菌与真菌的感染.凝胶多糖curdlan属于1,3-β-葡聚糖,是白色念珠菌细胞壁的主要成分.目前,作为吞噬细胞中主要的模式识别受体,凝集素dectin-1是否参与curdlan诱导巨噬细胞参与免疫炎症反应以及其分子机制不十分清楚.为了研究这一机制,我们采用luminol和Amplex Red法检测活性氧生成水平,ELISA检测炎症因子IL-1β水平以及免疫荧光法检测NF-κB信号通路的激活情况.结果表明,curdlan浓度依赖性上调巨噬细胞活性氧生成,NOX2缺失显著降低活性氧产生,dectin-1缺失部分降低活性氧的生成和部分阻断NF-κB信号通路的激活.NOX2 KO小鼠炎症因子IL-1β水平显著升高,Dectin-1缺失后NOX2 KO小鼠IL-1β水平降低;Dectin-1 KO小鼠的IL-1β水平与WT小鼠比无显著差异,与Dectin-1/NOX2 KO小鼠比差异显著.上述结果提示,curdlan刺激下机体通过巨噬细胞内的dectin-1受体诱导免疫应答,激活NF-KB信号通路释放炎症因子IL-1β,同时通过dectin-1受体激活NOX2释放活性氧清除病原,促进机体修复.在这一过程中dectin-1不是唯一参与的受体.

Curdlan凝胶机理研究进展

Curdlan(中文名可得然胶或卡德兰胶)是一种新型的具有独特性质的微生物多糖,它是由葡萄糖形成的单一线性的同多糖,属于β-1,3-葡聚糖家族中较为特殊的一种。Curdlan具有水不溶性和高稳定性,而其能够在加热条件下形成高强度热不可逆凝胶的特性使其在食品行业具有广泛的应用价值。目前本文综述了Curdlan的凝胶机理及与凝胶强度相关的一些主要因素。从根本上说,Curdlan的凝胶特性取决于其平均分子聚合度。Curdlan凝胶是其内部分子体系发生一定的变化,在一定温度条件下形成相应的组织结构及相互作用的表观现象,而影响这一表观现象发生的最主要因素是温度。另外,其他一些因素如Curdlan的浓度、加热时间等也对凝胶强度有一定的影响。随着Curdlan浓度的增加、加热时间的延长,它的凝胶强度均得到显著地提高。

Curdlan协同Alcalase嫩化生鲜调理牛肉工艺优化

以新鲜牛肉为原料,分析不同浓度的Curdlan及Alcalase对生鲜调理牛肉剪切力、蒸煮损失及感官品质的影响,并研究该体系下肌浆蛋白质及肌原纤维蛋白质的分解情况,优化生鲜调理牛肉嫩化加工工艺。结果表明:体系中Curdlan对生鲜调理牛肉剪切力、蒸煮损失及感官品质均有显著的影响(P<0.05),但是对牛肉中蛋白质无明显的分解作用;Alcalase对肌原纤维蛋白质及肌浆蛋白质有明显的分解作用。另外,不同的Curdlan及Alcalase添加量对生鲜调理牛肉的剪切力、蒸煮损失均有显著的影响(P<0.05);并且Curdlan、Alcalase对生鲜调理牛肉感官品质有显著的促进作用;通过响应曲面试验二次回归法优化生鲜调理牛肉工艺,得到工艺条件为Curdlan添加量5.43 mg/g,Alcalase添加量4.29 U/g,腌制时间73.4 h,以该工艺进行验证实验后得到产品剪切力为(0.960±0.006)kg,蒸煮损失为(19.96±0.36)%,感官评分为92.81±0.75,与理论值相比,相对误差小于5%,该工艺准确可靠,可以用于生鲜调理牛肉的嫩化加工处理。

Dectin-1 agonist curdlan modulates innate immunity to Aspergillus fumigatus in human corneal epithelial cells

· AIM: To explore the immunomodulatory effects of curdlan on innate immune responses against Aspergillus fumigatus(A. fumigatus) in cultured human corneal epithelial cells(HCECs), and whether C-type lectin receptor Dectin-1 mediates the immunomodulatory effects of curdlan.·METHODS: The HCECs were stimulated by curdlan in different concentrations(50, 100, 200, 400 μg/m L) for various time. Then HCECs pretreated with or without laminarin(Dectin-1 blocker, 0.3 mg/m L) and curdlan were stimulated by A. fumigatus hyphae. The m RNA and protein production of tumor necrosis factor-α(TNF-α)and interleukin-6(IL-6) were determined by real-time quantitative polymerase chain reaction and enzyme-linked immunosorbent assay, respectively. The protein level of Dectin-1 was measured by Western blot.· RESULTS: Curdlan stimulated m RNA expression of TNF-α and IL-6 in a dose and time dependent manner in HCECs. Curdlan pretreatment before A. fumigatus hyphae stimulation significantly enhanced the expression of TNF-α and IL-6 at m RNA and protein levels compared with A. fumigatus hyphae stimulation group(P 【0.05).Both curdlan and A. fumigatus hyphae up-regulated Dectin-1 protein expression in HCECs, and Dectin-1expression was elevated to 1.5- to 2-fold by curdlan pretreatment followed hyphae stimulation. The Dectin-1blocker laminarin suppressed the m RNA expression and protein production of TNF-α and IL-6 induced by curdlan and hyphae(P 【0.05).· CONCLUSION: These findings demonstrated that curdlan pretreatment enhanced the inflammatory response induced by A. fumigatus hyphae in HCECs.Dectin-1 is essential for the immunomodulatory effectsof curdlan. Curdlan may have high clinical application values in fungal keratitis treatment.

Ca2＋调控curdlan诱导的巨噬细胞炎症反应中活性氧的生成

目的 观察curdlan刺激下巨噬细胞活性氧（ROS）生成的变化及Ca2对活性氧生成的影响,探讨Ca2＋参与curdlan诱导的巨噬细胞炎症反应的可能机制.方法 将Dectin-1缺失的小鼠和正对照WT小鼠来源的巨噬细胞,以100 μg/mL curdlan处理从上述小鼠中分离培养的巨噬细胞,建立巨噬细胞炎症反应模型.处理后,Amplex Red和luminol法分别检测巨噬细胞中超氧离子和过氧化氢的生成变化.用EGTA螯合检测试剂中Ca2＋,观察无Ca2情况下活性氧的产生情况,以及在检测试剂中加入不同浓度的Ca2＋观察其对ROS产生的影响.结果 Curdlan刺激下,巨噬细胞（骨髓来源和腹腔来源巨噬细胞）中活性氧（包括超氧离子和过氧化氢）水平显著增加.与无Ca2组相比（0 mmol/L）,随着Ca2＋浓度增加（1.5、2.5 mmol/L）,curdlan诱导的巨噬细胞中ROS水平升高.结论 Curdlan能够结合巨噬细胞中相应的免疫识别受体（dectin-1）通过产生大量ROS从而介导炎症反应,调控ROS的水平可能是Ca2＋参与炎症反应的机制之一.

可得然胶添加量对卤牛肉蒸煮得率及品质特性的影响

为解决卤牛肉在实际生产过程中肉汁损失、口感下滑等劣变问题,研究不同添加量(0%、1.0%、2.0%、3.0%)的可得然胶对卤牛肉品质特性的影响。低场核磁(low-field nuclear magnetic resonance,LF-NMR)分析表明,可得然胶使卤牛肉中不易流动水含量显著提高(P<0.05),自由水含量降低,使得蒸煮得率显著提高(P<0.05),当添加量为3.0%时,蒸煮得率增加33.43%。质构分析显示,可得然胶明显降低卤牛肉的硬度、咀嚼性及剪切力,当添加量达到2.0%时,剪切力降低29.31%。可得然胶添加量从0%增加到2.0%时,卤牛肉切面逐渐顺滑、呈色均匀且具有诱人光泽,切面亮度值提高12.69%,总体可接受性评分最高。但当添加量继续增加至3.0%时,卤牛肉切面呈现出大片的类似胶状的成分,感官品质降低。此外,可得然胶添加可有效抑制冷藏过程中卤牛肉的脂肪氧化,且2.0%添加量时效果最佳。

可得然胶功能特性及在肉及肉制品中的应用进展

可得然胶是一种微生物胞外多糖,因其良好的增稠、持水、凝胶以及成膜等性能,近些年在肉类加工及保鲜领域得到了广泛的应用。该文综述了可得然胶的功能特性,重点阐述了可得然胶对肉及肉制品品质特性的影响及其对肉品的品质提升机制,最后总结了由可得然胶制备的不同类型可食性复合膜在肉类保鲜中的应用效果,以期为可得然胶在肉类加工和保鲜领域的广泛应用提供理论参考。

挤压体系中可得然胶对小麦淀粉回生特性和冻融稳定性的影响

小麦淀粉的回生现象和较差的冻融稳定性是限制面制品加工的重要原因。为探索一种有效抑制小麦淀粉回生及改善其冻融稳定性的方法,该文研究了挤压体系中不同质量分数的可得然胶对小麦淀粉回生特性和冻融稳定性的影响,利用差示扫描量热仪、X-射线衍射和傅里叶红外光谱等技术表征了可得然胶-小麦淀粉复合物的分子结构,并结合化学试剂处理、质构仪和扫描电镜探讨了可得然胶与小麦淀粉的结合机制。结果表明:随着可得然胶浓度的增加,可得然胶-小麦淀粉复合物的回生值和析水率先降低后增加;与挤压小麦淀粉相比,添加质量分数0.6%的可得然胶能够显著提高小麦淀粉的糊化温度(P<0.05),并降低小麦淀粉的相对结晶度、短程有序性和碘结合力,抑制直链淀粉的重结晶;挤压体系中可得然胶与小麦淀粉主要通过氢键和弱的静电相互作用结合,使小麦淀粉的结构更加致密,从而抑制小麦淀粉的回生并改善其冻融稳定性,该研究可为开发抗回生和低析水率的挤压小麦淀粉基食品提供参考。

白细胞介素-1β参与curdlan诱导的慢性肉芽肿性疾病高炎症反应的初步研究

目的探讨curdlan诱导慢性肉芽肿性疾病（CGD）高炎症性反应的分子机制，初步探讨NOX2（NADPH oxidase 2）缺失与高炎症反应之间的关系及可能机制。方法β-葡聚糖（β-glucan）是CGD感染并发症的主要刺激物，以NOX2基因缺失的小鼠耳背注射curdlan（1，3-β-slucan，200μg／50μL）／PBS 50μL建立CGD高炎症反应动物模型，观察其炎症反应并分析炎症因子的表达变化。在注射后的第2、7天提取鼠耳蛋白检测其中炎症因子白细胞介素（IL）-1β（interleukin-1β）的表达变化。Westernblot检测对照组及NOX2缺失组caspase-1的表达情况。体外实验中，用10、50、100、200μg／mL curdlan处理从上述小鼠中分离培养的巨噬细胞，建立CGD细胞模型。在处理后第1、2天和第5天收取细胞上清用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测相关的炎症因子IL-1β表达变化。结果NOX2缺失的小鼠注射curdlan后表现出高炎症性反应，与对照组相比，炎症因子IL-1β显著高表达（第2天：P=0．0189，第7天：P=0．0450）；NOX2缺失小鼠caspase-1的活性形式caspase-1 p10表达显著增加（第2天：P=0．3980，第7天：P=0．0001）。在CGD细胞模型中，我们发现在注射后第5天与正常对照组相比，炎症因子IL-1β水平显著升高（P=0．0011），且局限于NOX2缺失的骨髓来源的巨噬细胞（BMDM）中，其水平与curdlan浓度呈剂量依赖性。结论Curdlan通过激活巨噬细胞中的caspase-1导致炎症因子IL-1β显著高表达，炎症因子IL-1β参与了NOX2缺失导致的慢性肉芽肿病高炎症性反应。

可得然胶与瓜尔豆胶的复配特性及其在酸奶中的应用

复配可得然胶和瓜尔豆胶,通过复配胶的表观黏度、凝胶强度研究二者的复配特性。将可得然胶-瓜尔豆胶复配胶应用到酸奶中,通过做酸奶的单因素和响应面分析实验,确定可得然胶、瓜尔豆胶和白砂糖的最佳和优化添加量。结果表明:可得然胶和瓜尔豆胶的复配能够在提高表观黏度方面产生显著的协同增效作用。当可得然胶与瓜尔豆胶的复配质量比为9∶1~6∶4时可提高复配胶的凝胶强度。单因素实验结果表明可得然胶、瓜尔豆胶和白砂糖在酸奶中的最佳添加量为0.08、0.02和6 g/100 mL。在响应面实验中三者的优化添加量为0.0839、0.0193和6.1290 g/100 mL,在此条件下制备的酸奶口感细腻、稳定性好。本实验为可得然胶及其复配胶在食品中的应用提供了一定的理论依据。

可得然胶与变性淀粉对鲶鱼鱼糜凝胶特性的影响

为了解决鲜鲶鱼鱼糜凝胶品质劣化的问题,在其中添加木薯醋酸酯淀粉和可得然胶(curdlangum,CDG),通过测定鱼糜凝胶的质构特性、白度、持水力、感官评分、水分迁移变化规律和动态流变学特性,研究木薯醋酸酯淀粉和CDG复配对鲜鲶鱼鱼糜凝胶品质的影响。结果表明:添加木薯醋酸酯淀粉能显著提高鲶鱼鱼糜凝胶品质;CDG与木薯醋酸酯淀粉复配,且添加量分别为6%和0.9%时,可进一步改善鱼丸品质,此时鱼丸的弹性、白度、持水力最大,分别为0.91 mm、64.400、92.07%,硬度和咀嚼性分别达到2606.639 g、1924.219 g,结合水相对含量(P_(21))增大、自由水相对含量(P_(23))减小,储能模量(G′)增大。

凝胶多糖对果胶/百里香精油纳米乳液复合膜特性的改进

该文利用凝胶多糖对果胶/百里香精油纳米乳液薄膜进行特性改进,探索不同质量凝胶多糖对薄膜耐水性、机械性能、表面结构、二级结构、热稳定性以及生物活性等的影响。结果表明,复合膜的耐水性和机械性能随凝胶多糖的增加得到提升(P<0.05);二级结构、微观结构、热稳定结果也显示出凝胶多糖有助于改善果胶/百里香精油纳米乳液复合膜的网络结构,且几乎不影响抗菌活性;当添加1.2 g凝胶多糖时,复合膜综合性能最优。该研究证明凝胶多糖能够提升果胶/百里香精油纳米乳液复合膜的耐水性、热稳定性和机械性能,并提升其在活性包装中的应用潜力。

热凝胶的结构、功能、改性方法及在食品领域的应用进展

热凝胶(Curdlan)是由微生物产生的,由D-葡萄糖以β-1,3糖苷键相连构成的一种无分支天然胞外多糖,目前常作为稳定剂、增稠剂用于食品领域。热凝胶具有良好的凝胶特性、抗消化以及免疫调节能力,但水溶性差,严重限制了其应用范围。通过改性技术可以改良热凝胶的功能特性,尤其是水溶性,促进其在食品领域的开发利用。本文从物理改性、化学改性、酶法修饰三个方面探讨了改性方法对热凝胶功能特性的影响。此外,从食品包装材料、提升食品质构、开发仿生食品、功能性食品载体四个角度总结了近年来热凝胶在食品领域的研究热点。总之,热凝胶在食品工业中有很大的应用潜力,本综述为热凝胶的进一步开发与应用奠定基础。

负载MnO_(2)纳米颗粒的可得然复合水凝胶的构建及其联合光热疗法对黑色素瘤B16-F10细胞的杀伤效果

目的:构建负载二氧化锰(MnO_(2))纳米颗粒的可得然(Cur)复合水凝胶MnO_(2)@Cur(简称MGel),研究其对黑色素瘤B16-F10细胞的杀伤效果。方法:采用热诱导法制备Cur水凝胶(Gel),物理负载MnO_(2)构建MGel,表征其宏观和微观形貌,检测其机械性能、降解性能以及光热转换性能等理化性能,并研究其联合PTT对小鼠皮肤黑色素瘤B16-F10细胞的光热杀伤效果。结果:MGel具有优异的机械和可降解性能,抗拉伸强度达(127.97±3.60)kPa、抗压缩强度达(151.44±5.23)kPa,28 d降解率约58.17%。MGel负载MnO_(2)纳米片(粒径约180 nm)获得优异的光热转换性能,负载1.0 mg/mL MnO_(2)的MGel在1.0 W/cm^(2)的808 nm NIR光照4 min后到达最高温度50℃。细胞毒性实验和Calcein-AM/PI荧光双染色实验表明,MGel联合PTT有效杀伤B16-F10黑色素瘤细胞,NIR光照使得MGel组细胞存活率降低至(4.68±0.66)%(P<0.0001)。结论:MGel复合水凝胶具备优异的机械性能、可降解性能以及光热转换性能,其联合PTT能有效杀伤肿瘤细胞,可能成为一种有效治疗黑色素瘤的新手段。

新型抑制剂可得然胶在萤石与方解石浮选分离中的应用及其机理

在使用脂肪酸类捕收剂浮选萤石时,萤石与脉石矿物方解石的可浮性都很高。因此,必须使用高效抑制剂使方解石得到抑制。本文采用一种高效、环保的方解石抑制剂可得然胶用于萤石和方解石的浮选分离。首先,对可得然胶的结构和分子量进行表征;然后,进行浮选试验。结果表明,可得然胶的添加扩大了萤石与方解石的可浮性差异,从而实现了萤石和方解石的浮选分离。通过研究可得然胶对方解石的选择性抑制机理发现,可得然胶是通过其分子中羟基与方解石表面的钙形成化学键而进行吸附的,其吸附能力远大于萤石,从而选择性抑制方解石。这种选择性吸附导致了方解石表面在浮选过程中被可得然胶进行了亲水改性,并阻碍了NaOl吸附引起的疏水改性。而可得然胶在萤石表面的吸附能力较弱,NaOl仍可吸附在其表面,产生疏水性。因此,可得然胶可以作为萤石和方解石浮选分离时的新型抑制剂。

可得然胶基水凝胶及其应用研究进展

可得然胶具有独特的凝胶特性以及三螺旋特殊构象,其产生的凝胶具有保水性、增稠性、成膜性、冻融稳定性、pH值稳定性等特点,在食品和生物医药领域具有极大的应用潜力。可得然胶基水凝胶可通过不同方法制备,不同制备方法所得水凝胶理化特性及其应用领域也有所不同。此外,与其他物质复合也可改善凝胶特性,从而获得具有独特功能性质的水凝胶。本文综述了可得然胶单一多糖水凝胶的制备方法、凝胶特性、凝胶化机理,以及可得然胶基复合水凝胶的相关研究进展,并对可得然胶基水凝胶近年来在食品和生物医药领域的应用进行概述,以期为可得然胶基水凝胶的进一步研究与应用提供参考。

肉桂油对蛋清蛋白/可得然胶凝胶理化特性及释放肉桂醛性能的影响

卤制工艺中风味组分的控制释放有望对卤制品品质的工业标准化程度进行调控。以蛋清蛋白和可得然胶为基质材料,以肉桂油为风味组分代表,水油两相均质后通过热诱导法制备乳液凝胶,探究肉桂油添加对乳液凝胶特性及释放肉桂醛性能的影响。结果表明,与大豆油乳液凝胶相比,肉桂油乳液凝胶颜色偏黄,微观结构更加致密,持水率、硬度、储能模量和损耗模量等参数显著增加,且当肉桂油质量分数为5%时凝胶性能最强。随着肉桂油添加量的增加,凝胶转变时间缩短,同时乳液凝胶的黏弹性减弱,亮度增加、黄度降低。红外光谱证实了肉桂油中的肉桂醛与蛋清蛋白发生了席夫碱反应,从而促进乳液凝胶的形成及凝胶性能的提升。在模拟卤制品加工环境下,肉桂油乳液凝胶对所含肉桂醛具有良好的控释效果:水相中肉桂醛的释放率随肉桂油添加量的增加而减小,当肉桂油质量分数从5%增加至11%时,乳液凝胶在水中煮制1 h后,肉桂醛的累积释放率降低35.44%;与在水中煮制相比,调味料氯化钠、醋酸与乙醇可促进水相中肉桂醛的释放,且在醋酸中的累积释放率增幅最大(15.95%);但模拟卤制基质中的蛋白质和多糖会抑制肉桂醛的释放,累积释放率降低9.58%以上。乳液凝胶在模拟食品加工过程中能维持原有块状形貌,但在酸性条件下质地变硬、体积缩小、损失率最大,且凝胶结构破坏程度最严重,促进了肉桂醛的释放。因此,蛋清蛋白/可得然胶乳液凝胶的质地与释放性能可通过肉桂油的活性填充进行调控。研究结果旨在为食品工业中风味控释技术的开发提供理论参考。

魔芋葡甘聚糖/可得然胶复合气凝胶的生物降解性研究

本文以魔芋葡甘聚糖(KGM)和可得然胶(CUD)两种生物多聚物为基材,使用溶胶-凝胶法和真空冷冻干燥制备了不同质量比(KGM/CUD,1:0.6、1:0.9、1:1.2)的复合气凝胶。利用筛选出的四种优势菌株黑曲霉(Fen)、扩展青霉(L)、意大利青霉(B3)、芽孢杆菌(WE-3)对复合气凝胶进行降解,探究其降解形态、重量变化、微观形貌、分子变化、热稳定性及菌株生长适应性。结果表明,经不同种菌株降解后,气凝胶外观塌陷、皱缩、表面覆盖菌体;气凝胶被降解过程中可能由于KGM的强吸湿性而吸收环境中水分,促进了降解过程;降解后无新基团产生,多糖长链被降解为短链;电镜扫描图显示气凝胶多孔结构被破坏,三维网络结构坍塌;热力学分析表明气凝胶热稳定性明显降低;真菌Fen、L和B3适应于复合气凝胶环境的生长,细菌WE-3难以适应。本研究将为多糖复合材料的生物降解提供理论参考。

可得然胶对不同筋力面粉所制鲜湿面品质的影响

为研究可得然胶对高筋和低筋面粉所制鲜湿面品质的影响,该研究探究可得然胶添加量(0%、0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%)对鲜湿面的吸水率、蒸煮损失率、韧性、坚实度、咀嚼性、黏性、最大拉伸力、最大拉断距离以及感官评价的影响。结果表明:高筋组和低筋组鲜湿面的吸水率、韧性、坚实度、咀嚼性在可得然胶添加量为0.5%和0.3%时达到最大,且有最低的蒸煮损失率和黏性;可得然胶添加量为0.3%时,低筋组坚实度、弹性和食味得分最高;可得然胶添加量0.1%时,低筋组光滑性和色泽得分最高;高筋组在可得然胶添加量为0.5%时弹性、光滑性和色泽得分最高;高筋组与低筋组相比,高筋组鲜湿面呈现较低的吸水率和蒸煮损失率,韧性、坚实度和咀嚼性均略高于低筋。

盐酸处理对可得然胶品质提升试验研究

在可得然胶成品贮存过程中,存在可得然胶品质下降明显的问题。根据可得然胶生产工艺研究,以盐酸作为处理剂对成品进行二次精制,以成品凝胶强度为主要评价指标,75%乙醇作为溶剂,考察盐酸浓度、温度、时间、料液比(m(胶体质量)∶m(酸溶液质量))对成品品质的影响。结果表明,盐酸浓度0.6%,温度30℃,时间2 h,料液比1∶4,凝胶强度增加137.5%,收率80.6%,处理后成品品质符合国家标准。