先天性巨结肠Pax3和Cx43基因突变及表达

目的:探讨Pax3(pairedbox3)和Cx43(connexin43)基因在先天性巨结肠(Hirschsprungs disease,HD)中突变及表达的意义,分析HD与Pax3和Cx43基因异常的关系. 方法:应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和银染单链构像多态性(SSCP)方法检测Pax3和Cx43基因突变和mRNA表达情况. 结果:正常人38例肠段对照组织中DNA未发现Cx43 SSCP 异常泳动带,而仅有3例(7.9%)出现Pax3 PCR产物单链异常泳动带;HD38例肠管组织中17例(44.7%)出现Pax3 PCR产物单链异常泳动带,11例(28.9%)出现Cx43 PCR 产物单链异常泳动带.HD各段肠管组织中均有Pax3基因mRNA的表达,痉挛段、移行段和扩张段肠管组织中Pax3 mRNA高表达,表达率分别为92.1%,86.8%和76.3% (mean±SD=1.63±0.37;1.42±0.41和1.25±0.17);而正常肠段组织中Pax3 mRNA无表达,有显著性差异(aP<0.05).Cx43 基因mRNA在痉挛段、移行段肠管组织中低表达,表达率为23.7%和18.4%(mean±SD=0.62±0.11和0.51±0.07);而扩张段肠管组织中Cx43有较高表达,表达率为55.3% (mean±SD=1.37±0.19).38名正常人肠段对照组织中无1例Cx43 mRNA阳性表达. 结论:HD组织中Pax3和Cx43基因突变及表达异常可能与HD的发生相关密切,Pax3和Cx43突变可能造成信息传递缺陷,扰乱了神经嵴细胞的迁移,从而导致HD的发生.

Cx43基因在人类及小鼠胎心发育中的时空表达规律

目的 检测Cx4 3在人类和小鼠的胚胎心脏的表达 ,了解该基因在心脏发育过程中的表达规律。方法 选取人类 6～ 18孕周正常胚胎或胎儿心脏 6 3例 ,小鼠孕龄 9 5～ 16 5d胚胎心脏 6 4例 ,采用免疫组化法显示Cx4 3基因在心脏的表达。结果 早期人类胚胎心脏中 ,Cx4 3在心室肌中没有表达 ,心房肌表达微弱 ,原始小梁网中表达很高 ,随着胚胎发育 ,在心房和心室的表达逐渐增强 ,小梁网的表达在胚胎 13～ 14周达到高峰。室间隔的肌部表达量较弱 ,膜部室间隔不表达。房室瓣和大动脉根部管壁Cx4 3没有明显表达。除了在大动脉管壁表达不同 ,小鼠胚胎心脏表达规律与人类基本相同。结论 Cx4 3对于胚胎心脏的发育至关重要。

先天性心脏圆锥动脉干畸形患者Cx43基因突变的初步研究

目的 探讨先天性心脏圆锥动脉干畸形(CTD)患者细胞间隙连接蛋白43(Cx43)基因突变的发生情况。方法 采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析结合DNA测序,对37例CTD、26例非CTD先心病、10例正常小儿进行了Cx43编码序列检测。结果 正常对照SSCP均表现为相同的带型。37例CTD中,仅1例法洛四联症(TOF)合并房间隔缺损(ASD)的患者出现了不同于正常对照的SSCP带型,经测序证实发生了717G→A碱基替换,但由于不引起所编码氨基酸的改变,考虑为沉默多态位点。其他CTD患者及26例非CTD先心病患者均未检测到Cx43编码序列的突变。结论 Cx43基因突变在CTD等先心病患者中可能并不常见。717G→A可能是一种新的单核苷酸多态位点。

Cx43基因启动子甲基化下调乳腺癌Cx43的表达

目的:探讨乳腺癌细胞中Cx43蛋白的表达与基因启动子甲基化的关系。方法:免疫组化检测乳腺标本中Cx43蛋白的表达,甲基化PCR检测Cx43启动子甲基化的频度。5-氮杂脱氧胞苷培养乳腺癌MD-MBA-231细胞后,RT-PCR乳腺癌细胞中Cx43 mRNA,免疫组化、Western Blot检测Cx43蛋白表达,甲基化PCR检测启动子甲基化的变化。结果:与正常乳腺组织相比,乳腺癌中Cx43蛋白的表达下调,启动子甲基化频度高。在应用5-Aza-dC处理前,MD-MBA-231 Cx43基因呈甲基化状态,经4.0μmol/L的5-Aza-dC作用48h后,乳腺癌细胞Cx43基因甲基化逆转,Cx43基因mRNA及蛋白表达增加。结论:Cx43在乳腺癌组织中表达下调可能与启动子甲基化有关。5-Aza-dC能逆转乳腺癌细胞MD-MBA-231的Cx43基因异常甲基化,促进Cx43基因的再表达。

针刺对免疫抑制的Cx43基因敲除小鼠免疫功能的影响

目的：观察针刺对免疫抑制的Cx43基因敲除小鼠（Cx43＋／-鼠）免疫功能的影响，探讨缝隙连接蛋白43（Cx43）与针刺信号传递机制之间的可能关系。方法：8～9周龄雄性Cx43＋／-小鼠及野生型小鼠（Cx43＋／＋鼠）各18只，分别随机分为正常组、模型组和针刺组，每组6只。小鼠腹腔注射环磷酰胺（80mg／kg）制造免疫抑制模型。针刺双侧“足三里”穴及“关元”穴，每5min行针1次，每次30S，留针15min，连续治疗7d。计算各组小鼠的脾脏指数及胸腺指数和外周血白细胞数，并采用流式细胞术检测脾脏T淋巴细胞亚群的百分数。结果：Cx43＋／＋鼠及Cx43＋／-鼠的模型组与各自的正常对照组相比，其脾脏指数、胸腺指数、白细胞数及CD3^＋％、CD4^＋％均明显降低（P〈0．05，0．01），提示两种动物模型组免疫功能显著低下。在Cx43＋／＋小鼠上，针刺组的脾脏指数、胸腺指数、白细胞数、CD3^＋％、CD4^＋％、CD8^＋％与模型组比较均明显升高（P〈0．05，0．01），与正常组比较差异无显著性意义（P〉0．05），提示针刺可增强免疫功能；而对于Cx43＋／-小鼠，针刺组脾脏指数、胸腺指数、白细胞数、CD3^＋％、CD4^＋％、CD8^＋％与模型组相比较差异无显著性意义（P〉0．05），说明基因Cx43敲除后针刺的效应消失。结论：Cx43基因的敲除抑制了针剌改善免疫力效应的产生，提示以Cx43为主要组成的细胞间缝隙连接（GJ）可能在针刺调整机体免疫功能的信号传递通路上起着重要的作用，GJ可能与针刺改善免疫力效应的产生有着密切的关系。

经尿道联合灌注SCL和Cx43基因慢病毒对糖尿病膀胱功能的影响

目的探究干细胞白血病基因(SCL)重组慢病毒和缝隙连接蛋白基因(Cx43)重组慢病毒联合作用对豚鼠糖尿病膀胱(DCP)功能的影响。方法90只健康豚鼠适应性喂养1周后,按照200 mg/kg一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ),定期每周监测随机血糖,正常饲养12周后,通过尿流动力学检查筛选出40只符合标准的豚鼠,将其随机分成4组:糖尿病组、SCL组、Cx43组、SCL+Cx43组。糖尿病组经尿道向膀胱内灌注0.2 ml不含基因的空慢病毒,SCL组、Cx43组使用同样方法分别灌注SCL慢病毒和Cx43慢病毒0.2 ml,SCL+Cx43慢病毒组经尿道灌注SCL、Cx43慢病毒各0.2 ml。转染14 d后进行尿流动力学检查,检查后处死豚鼠,并迅速摘取膀胱,进行冰冻膀胱切片及荧光双染。结果与糖尿病组相比,SCL组、Cx43组在尿流动力学检查中差异无统计学意义(P>0.05),SCL+Cx43组尿流动力学检查可见逼尿肌压力、腹压、膀胱压均有改善(P<0.05)。糖尿病组激光共聚焦可见Cajal间质细胞(ICC)的数量减少,梭形结构及细胞突起明显被破坏,出现细胞裂解状态。SCL组、Cx43组可见ICC样细胞的梭形结构和细胞突起有所改善,细胞数量无明显变化。SCL+Cx43组可见ICC样细胞的数量增多,梭形结构及细胞突起有改善,并可形成ICC-二聚体。结论经尿道联合灌注SCL和Cx43基因重组慢病毒可以成功在豚鼠DCP膀胱中转染,可恢复损伤的ICC细胞的数量及结构,并形成ICC二聚体结构,提高糖尿病膀胱逼尿肌压力,改善排尿无力、腹压排尿等特点,为治疗DCP提供了新的方向。

观察在体联合灌注SCL和Cx43基因重组慢病毒对豚鼠糖尿病膀胱逼尿肌的影响

目的:探究干细胞白血病基因(Stem Cell Leukemia,SCL)重组慢病毒和缝隙连接蛋白基因[Gap Junction Protein Alpha 1,GJA1(又名Connexin43,Cx43)]重组慢病毒联合作用对豚鼠糖尿病膀胱(Diabetic Cystipathy,DCP)逼尿肌的影响。方法:40只健康豚鼠适应性喂养1周后,按照200mg/kg一次性腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ),定期每周监测随机血糖,正常饲养12周后,通过尿流动力学检查筛选出40只符合标准的豚鼠,将其随机分成4组:糖尿病组、SCL慢病毒组、Cx43慢病毒组、SCL+Cx43慢病毒组。糖尿病组经尿道向膀胱内灌注0.2mL不含基因的空慢病毒,SCL组、Cx43组使用同样方法分别灌注SCL慢病毒和Cx43慢病毒0.2mL,SCL+Cx43慢病毒组经尿道灌注SCL、Cx43慢病毒各0.2mL。转染14天后进行尿流动力学检查,检查后处死豚鼠,取出豚鼠膀胱,制作逼尿肌肌条,行逼尿肌肌条收缩实验。结果:SCL组和Cx43组与糖尿病组相比,在尿流动力学检查中逼尿肌压力无明显差异(P>0.05),SCL+Cx43组较糖尿病组尿流动力学检查可见逼尿肌压力有明显改善(P<0.05)。在逼尿肌肌条实验中,糖尿病组较正常组逼尿肌收缩幅度及频率明显下降(P<0.05),SCL组与糖尿病组相比逼尿肌收缩幅度及频率有所改善(P<0.05),Cx43组与糖尿病组相比,收缩幅度及收缩频率未见改善(P<0.05),SCL组和Cx43组之间比较无统计学差异(P>0.05)。SCL+Cx43组与糖尿病组相比,逼尿肌收缩幅度及频率有明显差异(P<0.05),SCL+Cx43组与正常组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:经尿道联合灌注SCL+Cx43基因重组慢病毒可以成功在豚鼠DCP膀胱中转染成功,可提高糖尿病膀胱逼尿肌压力,离体试验证实联合灌注较单一灌注可提高逼尿肌收缩幅度及收缩频率,为临床治疗DCP提供新的思路。

Cx43基因转染胶质瘤细胞抑制细胞增殖与下调若干重要生长因子

目的：研究连接蛋白43(Cx43)基因对胶质瘤细胞增殖的抑制作用及其可能的机制。方法：以脂质体介导，将Cx43cDNA转染于内源性Cx43表达缺失的鼠C6胶质瘤细胞和人TJ905胶质母细胞瘤细胞。采用MTT法及AgNORs(核仁组成区嗜银蛋白)平均数检测细胞增殖、。TUNEL法检测细胞凋亡、划痕标记染料示踪技术检测细胞间隙连接通讯(GJIC)。应用Western蛋白印迹及免疫组化法检测CX43cDNA转染细胞前后若干与胶质瘤发生密切相关的重要生长因子及受体表达，其中包括IGF1、bFGF、PDGF、IGFBP3、EGFR。结果：胶质瘤细胞转染Cx43cDNA后细胞增殖被抑制，细胞凋亡并未增加；GJIC明显恢复。BFGF、PDGF，IGF1、IGFBP3表达显著下调，但EGFR表达无变化。结论：Cx43基因对胶质瘤细胞增殖的抑制作用与GJIC恢复以及bFGF，PDGF，IGF1，IGFBP3表达下调相关，CX43可望成为胶质瘤基因治疗的靶基因。

高血糖致畸小鼠胚胎Pax3与Cx43基因的表达及定量研究

目的 探讨高血糖是否是糖尿病致畸的原因及其致畸机理。方法 采用皮下注射高渗糖的途径制成高血糖小鼠模型 ,并设立敌枯双实验组和空白、5 %葡萄糖及敌枯双对照组 ,通过逆转录聚合酶链反应及免疫组化的方法检测各组小鼠胚胎体中Pax3及Cx4 3基因的mRNA及蛋白的表达。结果 皮下注射高渗糖可致孕小鼠高血糖 (13 4mmol/L± 0 8mmol/L) ,其明显高于空白和 5 %葡萄糖对照组 (两者分别为 4 9mmol/L± 0 4mmol/L及 4 8mmol/L± 0 4mmol/L) ;高糖组吸收胎、死胎及畸胎发生率均显著高于两对照组 (P <0 0 1) ,胎重明显低于两对照组 ;高糖组Pax3的表达明显低于两对照组 (P <0 0 1) ,而Cx4 3的表达则明显高于两对照组 (P <0 0 1)。敌枯双组Pax3的表达无明显改变 ,Cx4 3的表达则明显高于两对照组 (P <0 0 1)。结论 高血糖是糖尿病致畸的主要原因 ;高血糖可通过诱导Pax3基因突变 ,使其蛋白表达下降 ,进而使Cx4 3基因及其蛋白过表达而致畸。

人类Cx43基因的生物信息学分析及其法医学研究意义

目的:生物信息学方法分析和预测人类Cx43(connexin 43)全长基因及其编码蛋白的结构和功能特征,探索其在法医学中的研究前景。方法:利用生物信息网站如美国国家生物技术信息中心(NCBI)和瑞士的生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY)中相关的基因和蛋白的序列和结构信息以及各种分析工具,并结合其它大型生物信息学分析软件包,如Vector NTI suite,分析该基因的结构并预测其编码的蛋白质的结构和功能特征等。结果:该基因全长1828 bp,编码382个氨基酸,含有四个跨膜区,含有多个磷酸化位点,其理论分子量为42960.3Da,具有较稳定的理化性质。结论:应用生物信息方法分析人类Cx43基因的功能和结构,对其法医病理学鉴定具有重要意义。

小梅山猪骨髓间充质干细胞Cx43基因修饰

通过在小梅山猪骨髓间充质干细胞(BMSCs)中过表达缝隙连接蛋白43基因(Cx43),探究Cx43对小梅山猪BMSCs增殖及凋亡的影响,为构建转基因动物模型奠定基础。利用分子技术构建Cx43真核表达载体p EGFP-Cx43,Nucleofector TM法转染P3代BMSCs,检测细胞转染效率,经RT-PCR、免疫荧光和Western blotting鉴定Cx43的表达,流式细胞技术分析BMSCs的增殖能力和凋亡情况。酶切鉴定和测序结果表明,p EGFP-Cx43真核表达载体构建成功,转染BMSCs后,EGFP阳性细胞约占60%。转基因BMSCs中Cx43蛋白表达显著增加,细胞增殖能力显著提高、凋亡率显著下降。结果表明,在小梅山猪BMSCs中过表达Cx43不仅能促进细胞增殖而且抑制其凋亡,为下一步在体研究奠定了基础。

HeLa细胞中抑癌基因-间隙连接基因Cx43及其蛋白产物表达缺失

目的：探讨新一代肿瘤抑制基因-间隙连接基因Cx43及其蛋白产物在人子宫颈癌细胞系HeLa中的表达及意义。方法：应用核酸分子原位杂交和流式细胞仪分析技术，研究人子宫颈癌细胞系HeLa及阳性对照细胞人正常肝细胞系QZG中，间隙连接基因Cx43mRNA及其蛋白产物的表达规律。结果：原位杂交显示，Cx43mRNA在HeLa细胞中呈阴性，在QZG细胞中呈强阳性。流式细胞仪分析示Cx43蛋白在HeLa、QZG细胞中阳性细胞计数率分别为1．9％和99．0％，差异有高度显著性（P＜0．01）。结论：CX43基因及其蛋白产物在HeLa中表达缺失可能与子宫颈癌发生恶性表型相关。

单链构象多肽性检测人胃癌中Cx43基因点突变

目的进一步探讨人胃癌基因组中Cx43基因表达下调的分子机制。方法运用RT-PCR-SSCP方法对30例人胃癌活检组织及其相应配对正常组织的Cx43基因编码区进行突变检测。结果30例人胃癌活检组织未发现突变。结论Cx43基因在人胃癌中表达下调的原因不是其基因编码区的点突变,其表达下调的原因可能与其非编码区序列,尤其是5′端调控区序列的结构改变有关,这为进一步研究Cx基因在胃癌发生中的作用打下了一定基础。SSCP方法检测突变有效、快速、经济、无放射线污染,它可能作为胃癌基因诊断的筛选方法之一。

黑龙江鲤肌肉发育中miRNA对间隙连接蛋白基因(Cx43)的调控

鲤鱼是世界上养殖最广泛的淡水鱼类之一,其肌肉具有高蛋白、低脂肪等特点,具有重要的经济价值。前期对鲤鱼肌肉特异的微小RNA(miRNA)文库分析发现,miR-1和miR-206在鲤鱼肌肉中均高水平存在,但其对鲤鱼肌肉发育的调节作用尚不完全清楚。以黑龙江鲤为试验材料,通过生物信息学预测肌肉生长相关的间隙连接蛋白基因(Cx43)可能是miR-1和miR-206的靶基因。因此利用荧光素酶报告系统以及原位杂交等方法探究miR-1和miR-206对其的调控机制。试验结果表明,miR-1和miR-206均能下调Cx43启动子报告基因,其中miR-206作用更明显。整体原位杂交检测Cx43基因在鲤鱼胚胎期表达情况显示,鲤鱼受精6 h后Cx43基因开始表达,表达量随胚胎发育呈上升趋势,受精后24 h体节表达最高,此后逐渐降低,暗示Cx43基因在鲤鱼肌肉发育早期发挥重要作用。该研究为从分子生物学水平进行鲤鱼的遗传育种,优化黑龙江鲤品质,提高生产性能奠定基础。

间隙连接蛋白Cx43在乳腺癌组织中表达的研究

目的 探讨间隙连接蛋白connexin43 (Cx43 )表达与乳腺癌恶性程度的关系及其生物学意义。方法 应用S -P免疫组织化学方法 ,检测 66例乳腺癌组织和 3 5例良性病变组织中Cx43的表达。结果 Cx43蛋白阳性染色主要位于乳腺癌和乳腺良性病变组织细胞的细胞质和细胞膜上 ,阳性表达率分别为 3 4.8% ( 2 3 /66)和 91.2 % ( 3 2 /3 5 ) ,两者有非常显著性差异 ( χ2 =2 9.3 8,P<0 .0 1) ;Cx43基因表达与肿瘤分化程度呈正相关 (γ =0 .85 2 ,P <0 .0 5 ) ,而与肿瘤恶性进程和转移呈负相关 (γ =-0 .83 1,γ =-0 .73 ,P <0 .0 5 )。结论 Cx43基因表达下调 ,可能是乳腺肿瘤发生发展和恶性进程的 1个重要环节 ,也是乳腺肿瘤的生物学行为特征之一。

肌肉转录调节因子和连接蛋白43转基因成纤维细胞移植对心肌梗死大鼠脑钠素及梗死面积的影响

背景:研究表明基因工程将成纤维细胞改造为可兴奋细胞是可能的;而真皮成纤维细胞是机体内数量最大的"种子细胞库"。目的:观察肌肉转录调节因子(myogenic determination,MyoD)和连接蛋白43(connexin43,Cx43)基因共转染真皮成纤维细胞后在心肌梗死部位原位移植对急性心肌梗死大鼠血浆脑钠素浓度和心肌梗死面积的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-06/2007-03在同济大学附属东方医院细胞治疗室和上海中医药大学动物实验中心完成。材料:雄性SD大鼠60只随机分成正常对照组、心肌梗死对照组、正常移植组和心肌梗死移植组,每组15只。方法:结扎左冠状动脉前降支制备心肌梗死模型。4周后再次开胸在自结扎远端紧靠结扎处,心肌梗死区与非梗死区交界处用微量注射器将100μL经BrdU标记的MyoD/Cx43-FB细胞悬液(细胞数1.0×106)注入左冠状动脉前降支,在结扎远端已缺血的心肌上用同样的针头于靠近心尖部、室间隔部、左室前侧壁缺血的心肌上多点多位置将另外100μL移植细胞悬液注入到心肌内,深度约4mm;对照组同法等量注入未含细胞的DMEM细胞培养液。主要观察指标:细胞移植前和移植后1d,1,2,4周动态检测血浆脑钠素浓度;同时监测各组大鼠心率、动脉压、左心室内压及左心室等容收缩期室内压最大上升速率和下降速率等血流动力学指标的变化;4周后处死大鼠取心肌标本染色后测定心肌梗死面积。结果:①免疫组织化学检测结果显示心肌瘢痕区边缘有BrdU阳性细胞存在。②细胞移植可显著改善心肌梗死大鼠的血流动力学。③心肌梗死对照组和心肌梗死移植组大鼠的血浆脑钠素浓度较正常对照组和正常移植组明显升高(P<0.01);在移植后1d、1周、2周心肌梗死移植组与心肌梗死对照组血浆脑钠素浓度差异无显著性意义,4周后明显降低(P<0.01)。④心肌梗死移植组的梗死面积显著小于心肌梗死对照组(P<0.01)。结论:MyoD和Cx43基因联合转染成纤维细胞后原位移植修复坏死心肌组织,能减小梗死面积。

妊娠期糖尿病的牛磺酸治疗及胎盘组织的发育相关基因表达

为探讨牛磺酸对妊娠合并糖尿病的治疗作用及胎盘组织内发育相关基因Pax3与Cx43的表达情况,对妊娠合并糖尿病孕妇30例每天给予口服牛磺酸12.0 g,观察给药前后的空腹血糖、巨大儿发生率、围产儿死亡率及新生儿病率;采用RT-PCR和免疫组化法检测了胎盘组织内Pax3及Cx43的表达情况,并与30例未治疗的对照组比较。结果表明,治疗3周后空腹血糖明显下降,低于治疗前(P<0.05),巨大儿发生率、围产儿死亡率及新生儿病率均明显低于未治组(P<0.01);2例死亡围产儿Pax3表达下降(mRNA P<0.01,蛋白P< 0.05),Cx43的表达升高(mRNA P<0.01,蛋白P<0.05)。结论:牛磺酸可用于治疗妊娠期糖尿病,并可能通过影响Pax 3及Cx 43基因的表达降低围产儿死亡率。

连接蛋白基因Cx43抑制胶质瘤细胞增殖及其机理的初步探讨

目的探讨连接蛋白基因Cx43对胶质瘤细胞增殖的抑制及其可能的机理。方法将含Cx43cDNA的质粒以脂质体介导转染Cx43表达缺失的人和鼠的恶性胶质瘤细胞,通过Northem杂交、原位杂交及免疫组化染色检测Cx43mRNA及蛋白表达;MTT法测定细胞增殖率;核仁组成区嗜银蛋白染色检测细胞增殖活性;TUNEL法检测细胞凋亡;划痕标记荧光染料示踪技术检测细胞间隙连接通讯(GJIC);Western杂交及免疫组化染色检测bFGF、PDGF、EGFR、IGF-Ⅰ和IGFBP3的表达。结果转染Cx43基因的胶质瘤细胞增殖下降,GJIC恢复,同时伴有bFGF、PDGF、IGF-Ⅰ和IGFBP3表达下降,而EGFR表达和细胞凋亡则无改变。结论Cx43基因可能通过恢复GJIC功能及抑制某些重要生长因子的自分泌,实现对胶质瘤细胞增殖的抑制。

γ射线对人淋巴细胞cx43和ANLN基因转录表达的影响

目的研究γ射线对人外周血淋巴细胞cx43和ANLN基因转录表达的影响。方法对数生长期的淋巴细胞，分别给予1、2、3、4、5、6 Gy的^60Coγ射线照射，照射后12h，以及2Gy照射后4、8、12、24、36、48、72h，分别提取总RNA，反转录成cDNA。利用实时荧光定量PCR技术，检测各组cx43和ANLN基因表达改变。结果人外周血淋巴细胞cx43 mRNA表达水平在2Gy照射后4、8、12h明显增高，分别为对照组（未照射组）的6．74、9．06、7．22倍（P〈0．05）；24～72h，其表达水平与对照组相比没有明显变化。1、2、3、4、5、6Gy剂量照射后12h，cx43 mRNA表达水平显著增高（P〈0．05）。ANLN mRoNA表达水平在2Gy不同时间点及1～5Gy照射后12h，表达降低（P〈0．05），6Gy照射后12h其表达开始升高，为对照组的6．08倍（P〈0．05）。结论γ射线照射2Gy不同时间点及不同剂量照射后12h，cx43基因表达上调，ANLN基因表达下调。1～3Gy剂量照射后12h，cx43 mRNA表达在此范围内有时间和剂量的依赖性。cx43可能会发展为核事故受照射人员的分子生物学剂量标记物。

Connexin43基因缺陷新生小鼠心脏组织病理学研究

目的观察不同程度Connexin43基因缺陷对新生小鼠心脏发育的影响。方法采用Cx43基因敲除(Cx43KO)和CMV43CT两种Cx43基因缺陷的小鼠模型,聚合酶链反应鉴定基因型。然后将新生小鼠心脏分离固定,HE染色观察心脏的形态结构。普通C57BL6/SJ小鼠作为对照。结果所有11只纯合型Cx43KO小鼠生后1d内均死亡,心脏表现为严重右室流出道梗阻。在20只纯合型CMV43CT新生小鼠中,有12只生后2d内死亡,其心脏不仅表现有右室流出道梗阻,还出现了房间隔缺损、室间隔缺损等其他心脏畸形;而另外8只未见心脏异常。所有杂合型Cx43KO和CMV43CT基因缺陷的小鼠生后均存活,心脏病理学检测未见异常。结论Cx43基因缺陷与心脏发育异常有密切的关系,但不同类型和不同程度的Cx43基因功能缺失对心脏发育的影响也不尽相同。