尖锐湿疣差异基因筛选及CXC趋化因子配体10与人乳头瘤病毒分型及复发的相关性研究

目的探讨CXC趋化因子配体10(CXCL10)在尖锐湿疣(CA)组织中的表达及其与人乳头瘤病毒(HPV)分型及复发的关系。方法采用GEO数据库筛选CA组织和正常组织的差异表达基因。另选取2022年1月至12月无锡市惠山区人民医院收治的120例CA患者(CA组)和40例健康体检者(对照组)作为研究对象,检测其血清CXCL10表达水平。对CA组皮损进行HPV分型检测,采用5-氨基酮戊酸光动力疗法且随访CA组6个月,根据是否复发分为未复发组和复发组。探讨CA患者治疗后复发的独立危险因素及CXCL10表达水平预测CA治疗后复发的临床效能。结果CA组织和正常组织中差异表达基因共184个,其中显著上调58个(包括CXCL10、IGFL1等),显著下调126个(包括MFAP5、PRG4等)。120例CA患者皮损中HPV高危型占64.17%(以HPV16和HPV18感染为主),低危型占37.50%(以HPV6和HPV11感染为主),两种感染占5.83%,两种以上感染占6.67%。与对照组比较,CA组血清CXCL10表达水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。复发组和未复发组疣体数量、疣体直径、合并人类免疫缺陷病毒(HIV)/梅毒、HPV分型、CXCL10表达水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05);HPV分型(OR=1.563,P=0.001)、合并HIV/梅毒(OR=1.842,P<0.001)、CXCL10表达(OR=2.061,P<0.001)是CA患者治疗后复发的独立危险因素。血清CXCL10表达水平预测CA治疗后复发的曲线下面积(AUC)为0.911,当CXCL10截断值为26.66 ng/mL时,诊断灵敏度和特异度分别为89.34%和91.56%。结论CA患者血清CXCL10表达水平显著升高,其可作为CA治疗后复发的一项预测指标。

CXC趋化因子受体5及其配体CXCL13在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的研究CXC趋化因子受体5(CXCR5)及其配体CXCL13在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链式反应法(FQ-PCR)和蛋白印记法(Western blot)检测37例NSCLC患者癌组织及癌旁组织和21例非炎性正常肺组织CXCR5及其配体CXCL13 mRNA及蛋白的表达。结果 FQPCR及Western blot结果显示,癌组织中CXCR5及其配体CXCL13 mRNA及蛋白表达水平均明显高于相应癌旁组织(mRNA:2.92±0.31 vs.1.16±0.18和2.46±0.28 vs.1.07±0.20,P<0.01;蛋白:1.93±0.21 vs.0.93±0.11和2.13±0.33 vs.1.07±0.21,P<0.01)。CXCR5与CXCL13 mRNA及蛋白的表达呈正相关(mRNA:r=0.648,P<0.01;蛋白:r=0.669,P<0.01)。癌组织CXCR5与CXCL13 mRNA及蛋白阳性表达率显著高于相应癌旁组织(P<0.01),且癌组织CXCR5及CXCL13 mRNA和蛋白的表达与肿瘤类型、肿瘤分化程度、是否有淋巴结转移和肿瘤TNM分期有关(P<0.05);而正常肺组织中均无CXCR5与CXCL13 mRNA及蛋白的表达。结论 CXCR5与CXCL13在NSCLC患者癌组织、癌旁组织中均高表达,其协同作用可能参与NSCLC的发生及发展过程。

宫颈癌中CXC趋化因子配体13表达及其对宫颈癌细胞增殖和迁移的影响

目的探究CXC趋化因子配体(CXCL)13在宫颈癌组织样本中的表达及其对宫颈癌细胞肿瘤生物学行为的影响和可能的作用机制。方法应用ualcan开放存取数据库对肿瘤基因组图谱(TCGA)中正常宫颈和宫颈鳞状细胞癌样本中CXCL13 mRNA表达进行差异分析,并分析CXCL13 mRNA表达与患者生存的关系。将培养的宫颈癌HeLa细胞随机分为对照组、2、5、10 ng/ml人CXCL13重组蛋白处理组,利用细胞计数试剂(CCK)-8实验明确CXCL13对HeLa细胞生长的影响,采用Transwell细胞迁移实验明确CXCL13对HeLa细胞迁移的影响,采用Western印迹实验明确CXCL13对HeLa细胞CXC趋化因子受体(CXCR)5和磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)蛋白表达的影响。结果生物信息分析表明,与正常宫颈组织比较,CXCL13 mRNA在宫颈癌组织中的表达显著上调,但CXCL13 mRNA表达与患者的生存没有相关性;生长实验表明,与对照组比较,24 h后5、10 ng/ml CXCL13处理组细胞生长能力显著增强;48 h和72 h后2、5、10 ng/ml CXCL13处理组细胞生长能力显著增强;迁移实验表明,与对照组比较,24 h后2、5、10 ng/ml CXCL13处理组细胞迁移能力显著增强;Western印迹实验表明,与对照组相比,48 h后5 ng/ml CXCL13处理组细胞CXCR5和p-ERK蛋白相对表达量显著上调。结论CXCL13在宫颈癌中表达上调,可通过其受体CXCR5和ERK通路促进肿瘤细胞生长和迁移。

CXC趋化因子配体5对前列腺癌细胞生长的作用

目的研究CXC趋化因子配体(CXCL)5受体(CXCR2)蛋白在前列腺癌细胞株PC-3、DU145和LNCaP细胞中的表达情况及CXCL5对LNCaP细胞生长的影响。方法应用Western印迹技术检测CXCR2在3种前列腺癌细胞株PC-3、DU145和LNCaP细胞中的表达情况,筛选出表达量最高的细胞株,然后用MTT法检测5、10、20 ng/ml浓度CXCL5对CXCR2蛋白表达量最高的前列腺癌细胞生长的影响。结果在PC-3、DU145和LNCaP细胞中均有CXCR2蛋白的表达,LNCaP细胞中最高(1.65±0.089),DU145细胞次之(1.44±0.107),PC-3细胞中最低(0.36±0.056)(P<0.05);5、10、20 ng/ml CXCL5浓度组作用LNCaP细胞6 d后,吸光度值分别为0.55±0.06,0.61±0.08和0.73±0.10,与对照组(0.52±0.14)比较,20 ng/ml CXCL5浓度组增长率明显增高(P<0.05)。结论 CXCL5可通过作用于其自身受体CXCR2进而促进LNCaP细胞生长。

IFN-γ通过激活STAT3促进甲状腺上皮细胞分泌CXC趋化因子配体10(CXCL10)

目的探讨γ干扰素(IFN-γ)对甲状腺细胞分泌趋化因子的作用及机制。方法 HE染色检测桥本甲状腺炎组织中淋巴细胞浸润情况,免疫组织化学染色检测IFN-γ的表达。用500 U/mL IFN-γ处理Nthy-ori 3-1甲状腺细胞后,利用Western blot法检测信号转导子及转录激活子3(STAT3)及磷酸化的STAT3的水平。用STAT3抑制剂Stattic处理后,ELISA测定CXC趋化因子配体10(CXCL10)的变化,TranswellTM法检测淋巴细胞的迁移能力。结果与正常甲状腺组织比较,桥本甲状腺炎组织中淋巴细胞浸润较多,IFN-γ表达水平较高。与对照组比较,IFN-γ处理增加甲状腺细胞p-STAT3水平,增加CXCL10分泌和淋巴细胞迁移,而Stattic处理后CXCL10分泌减少,淋巴细胞迁移减少。结论 IFN-γ激活STAT3促进甲状腺上皮细胞分泌趋化因子,增加淋巴细胞的迁移。

冠心病患者血清中趋化因子CXC配体5的表达及其临床意义

目的研究不同临床类型冠心病(CHD)患者和正常人血清中趋化因子CXC配体(L)5蛋白的表达差异。方法酶联免疫吸附法检测59例CHD患者和23例正常人血清中CXCL5蛋白的表达。结果正常对照组、稳定型心绞痛(SAP)组、不稳定型心绞痛(UAP)组和急性心肌梗死(AMI)组血清中的CXCL5蛋白水平分别为(63.47±5.67)、(64.37±7.26)、(69.74±7.99)和(70.84±9.44)ng/ml,与正常对照组和SAP组比较,UAP组和AMI组显著增高(P<0.05);与血清CXCL5水平<60 ng/ml组比较,CHD组血清CXCL5水平>70 ng/ml组Gensini评分显著增高(P<0.05)。结论血清CXCL5水平与CHD病情具有相关性,其可能作用一个经典的炎症因子参与CHD进程。检测血清CXCL5的水平和针对CXCL5相关治疗可为CHD的临床诊断和治疗提供新的标志物和靶点。

趋化因子CXCL5调控NF-κB与Wnt/β-catenin信号通路抑制肿瘤免疫促进胃癌的机制研究

目的探讨CXC趋化因子配体-5(CXCL5)促进胃癌的作用及其潜在分子机制。方法纳入胃癌患者83例,另选取健康者40例作为对照。比较两者的血清CXCL5水平;比较癌组织及癌旁正常组织中CXCL5与CXCR2的表达。检测CXCL5对胃癌细胞ERK/MAPK、PI3K/AKT、NF-κB及Wnt/β-catenin信号通路的影响。用对照与过表达CXCL5的MFC细胞建立胃癌移植瘤模型,记录肿瘤生长和小鼠生存曲线;检测各组小鼠移植瘤中CXCL5、p-NF-κB与p-β-catenin的表达及CD4^+T、CD8^+T与CD56^+CD16^+NK细胞数量。结果胃癌患者的血清CXCL5水平较健康者显著升高(P<0.05)。癌组织中CXCL5与CXCR2的表达较癌旁正常组织显著升高(P<0.05)。CXCL5能显著增加SNU216与MFC细胞p-NF-κB与p-β-catenin的表达(均P<0.05)。与对照组小鼠相比,过表达CXCL5组小鼠的肿瘤体积显著增高(P<0.05),生存期显著降低(P<0.05),癌组织中CXCL5、p-NF-κB与p-β-catenin的表达显著升高(P<0.05),癌组织中CD4^+T、CD8^+T与CD56^+CD16^+NK细胞数量均显著降低(均P<0.05)。结论 CXCL5可能通过调控NF-κB与Wnt/β-catenin信号通路抑制肿瘤免疫从而发挥促进胃癌的作用。

趋化因子CXCL5启动子区-156G/C基因多态性与2型糖尿病的关系

目的:探讨趋化因子CXCL5基因启动子-156位点G/C单核苷酸多态性与2型糖尿病的关系。方法:随机选择我院2型糖尿病患者(T2DM组)210例,对照组171例。采用聚合酶链式反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测趋化因子CXCL5基因启动子-156位点G/C多态性。结果:趋化因子CXCL5启动子-156G/C多态性(各基因型频率、C等位基因频率)在T2DM组与对照组的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CXCL5基因多态性可能不是糖尿病发病的危险因素。

miR-135a-5p通过调控CXCL12表达降低吗啡耐受

目的研究miR-135a-5p调控CXCL12对C57BL/6J小鼠吗啡耐受的影响。方法将64只小鼠随机分为:对照(NS)组、吗啡耐受(MT)组、CXCL12沉默(CXCL12-siRNA)组、沉默阴性对照(NC-siRNA)组、miR-135a-5p激动剂(miR-agomir)组、激动剂阴性对照(miR-NC)组、miR-135a-5p激动剂+CXCL12过表达(miR-agomir+LV-CXCL12)组、miR-135a-5p激动剂+过表达阴性对照(miR-agomir+LV-control)组。通过皮下注射给药建立吗啡镇痛耐受模型,采用温水甩尾法测定各组小鼠给药前和给药后的热甩尾时间(TL);造模结束后麻醉处死小鼠并取L4~L5脊髓组织,RT-qPCR检测miR-135a-5p及CXCL12 mRNA的表达,Western blot检测CXCL12蛋白的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-135a-5p、CXCL12的靶向关系。结果1)成功建立吗啡耐受小鼠模型,与NS组相比,MT组CXCL12 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05),miR-135a-5p显著下调(P<0.05)。2)沉默Cxcl12及过表达miR-135a-5p均提高吗啡耐受小鼠热痛阈值,显著减缓吗啡耐受的发生发展(P<0.05)。3)与miR-NC相比,miR-agomir组CXCL12 mRNA及蛋白表达均下降(P<0.05)。4)双荧光素酶报告基因实验显示miR-135a-5p靶向作用于Cxcl12。5)过表达CXCL12可逆转miR-135a-5p对吗啡耐受小鼠的热痛保护作用。结论miR-135a-5p通过靶向抑制CXCL12表达进而缓解吗啡耐受的形成。

CXC趋化因子配体-5在结直肠癌中的表达及临床意义分析

目的:分析CXC趋化因子配体-5(CXCL5)在结直肠癌中的表达及其临床意义。方法:收集165例患者结直肠癌组织和对应癌旁组织,免疫组化和q RT-PCR实验分别检测组织中CXCL5蛋白和mR-NA表达情况。根据免疫组化评分将患者分为CXCL5高表达组和低表达组,比较两组患者临床病理特征、3年总生存率和3年疾病无进展生存率。结果:结直肠癌组织CXCL5免疫组化评分为9.03±2.08,高于癌旁组织3.18±1.04,差异有统计学意义(t=27.024,P<0.001)。结直肠癌组织CXCL5 mRNA相对表达水平为3.97±1.23,高于癌旁组织0.25±0.16,差异有统计学意义(t=38.461,P<0.001);CXCL5高表达组与CXCL5低表达组TNM分期、浸润深度、淋巴结转移和神经侵犯比较差异有统计学意义(P<0.05);CXCL5高表达组3年总生存率为70.23%(92/131),低于CXCL5低表达组88.23%(30/34),差异有统计学意义(log-rankχ^(2)=4.135,P=0.038)。CXCL5高表达组3年疾病无进展生存率为64.89%(85/131),低于CXCL5低表达组85.29%(29/34),差异有统计学意义(log-rankχ^(2)=4.320,P=0.042)。结论:结直肠癌组织中CXCL5表达升高,其高表达与患者TNM分期、浸润深度、淋巴结转移、神经侵犯以及预后不良有关。

术前血清趋化因子配体5对直肠癌患者术后复发的影响

目的探讨术前血清趋化因子配体(CXCL)5对直肠癌患者术后复发的影响。方法外科手术治疗的直肠癌患者80例血清CXCL5水平检测采用酶联免疫吸附法(ELISA),阴性为CXCL5≤700 pg/ml,阳性为CXCL5>700 pg/ml。结果直肠癌80例患者中CXCL5阳性25例(31.25%),CXCL5水平与肿瘤大小、性别、年龄无关(P>0.05),与病理类型、TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05)。结论血清CXCL5可作为直肠癌患者术后复发的独立预测指标及对病情严重程度的评估指标,具有较好的临床应用价值。

CXC趋化因子配体8促进结直肠癌微环境中M2型巨噬细胞趋化及浸润

CXC趋化因子配体8(CXC chemokine ligand 8,CXCL8)在结直肠癌等多种肿瘤中高表达,并促进肿瘤恶性进展。研究发现,结直肠癌微环境中有大量M2型巨噬细胞浸润,但CXCL8是否影响M2型巨噬细胞的浸润及其潜在机制尚未可知。本文旨在探讨CXCL8对结直肠癌中M2型巨噬细胞浸润及趋化作用的影响。本研究首先分析了TCGA数据库结直肠癌样本中CXCL8表达水平及免疫细胞浸润情况,并在临床组织中进行验证。随后Western印迹及qRT-PCR检测5种结直肠癌细胞株CXCL8的表达情况。佛波酯(PMA)及IL-4诱导THP-1至M2型巨噬细胞后,与HCT116、SW480细胞及过表达CXCL8的HCT116(CXCL8/HCT116)、SW480(CXCL8/SW480)共培养,检测M2型巨噬细胞趋化情况。白细胞介素1β(IL-1β)处理HCT116、SW480细胞,检测CXCL8表达情况,与M2型巨噬细胞共培养,分析趋化结果。结果显示,患者癌组织CXCL8表达高于癌旁组织,CXCL8高表达癌组织中存在更多M2型巨噬细胞浸润;IL-1β作用于HCT116或SW480后,CXCL8的mRNA及蛋白质表达水平升高(P<0.05)。Transwell实验证实,CXCL8趋化M2型巨噬细胞(P<0.05)。综上所述,结直肠癌细胞中CXCL8可由IL-1β诱导产生,CXCL8表达增加能够促进M2型巨噬细胞的趋化,结直肠癌微环境中M2型巨噬细胞大量浸润可能与CXCL8表达升高有关。

外源性趋化因子CXC配体1促进肝癌细胞恶性行为的作用机制

目的探讨外源性趋化因子CXC配体(CXCL)1对肝癌细胞恶性行为的影响及作用机制。方法利用细胞计数试剂(CCK)-8和细胞迁移(Transwell)实验分别研究不同浓度外源性CXCL1对BEL-7402肝癌细胞增殖和迁移的影响,利用Western印迹研究外源性CXCL1对BEL-7402肺癌细胞B细胞淋巴瘤/白血病(Bcl)-2和蛋白激酶B(AKT)蛋白表达的影响。结果与0 ng/ml外源性CXCL1比较,5、10 ng/ml外源性CXCL1显著促进BEL-7402肝癌细胞的增殖,10 ng/ml外源性CXCL1显著促进BEL-7402肺癌细胞迁移,10 ng/ml外源性CXCL1显著上调BEL-7402肺癌细胞Bcl-2和AKT蛋白表达。结论外源性CXCL1可经BCL-2/AKT途径促进肝癌细胞恶性表型。

趋化因子CXC配体1影响人口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的作用机制

目的探讨CXCL1对KB人口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响及其可能的作用机制。方法将处于对数生长期的KB细胞随机分为对照组(无CXCL1处理组)和不同浓度CXCL1处理组,分别采用细胞计数试剂(CCK)-8实验及细胞迁移实验来研究各组细胞增殖和迁移情况,并应用Western印迹实验检测各组细胞中蛋白激酶B(AKT)蛋白表达。结果与对照组比较,5、10、20和30 ng/ml CXCL1处理组KB细胞增殖能力显著增强;与对照组比较,5、10、20和30 ng/ml CXCL1处理组KB细胞迁移能力显著增强;与对照组比较,20和30 ng/ml CXCL1处理组KB细胞AKT表达水平显著上调(均P<0.05)。结论CXCL1可通过活化磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/AKT信号通路来促进人口腔鳞状细胞癌的增殖和迁移能力。

CXCL5基因多态性对多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎及碳青霉烯类药物敏感性的影响

目的探究CXC类趋化因子配体5(CXCL5)基因多态性对多重耐药鲍曼不动杆菌感染及碳青霉烯类药物敏感性的影响。方法将2020年7月至2022年7月于该院被明确诊断为多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎的共121例患者纳入研究作为患者组。另外,将同期于该院体检的健康者121例纳入研究作为对照组。对纳入研究者进行单核苷酸基因多态性位点基因分型、药敏试验及炎症指标的检测。分析CXCL5基因rs352046、rs425535位点的基因型、等位基因分布与多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎发生、炎症指标、严重程度、碳青霉烯类药物敏感性的关系。结果患者组和对照组CXCL5基因rs425535位点的等位基因和基因型分布比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CXCL5基因rs352046、rs425535位点的等位基因和基因型分布与患者白细胞计数无关(P>0.05),而均与患者中性粒细胞、淋巴细胞、C反应蛋白与降钙素原水平有关(P<0.05)。rs425535位点基因型及等位基因分布情况与患者的多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎的严重程度有关(P<0.05)。对耐碳青霉烯类药物的敏感性较高的患者和对这类药物不敏感的患者CXCL5基因rs425535位点的基因型及等位基因分布比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CXCL5基因rs425535位点多态性与多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎的发生、严重程度及碳青霉烯类药物敏感性有关,对CXCL5基因多态性进行检测有助于识别多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎高危患者及合理使用抗菌药物。

CXC类趋化因子配体5 可溶性白细胞分化抗原14亚型 胰岛素样生长因子-1 胰岛素样生长因子-2在急性细菌性脑膜炎患儿脑脊液中的表达及意义

目的 分析CXC类趋化因子配体5(CXCl-5)、可溶性白细胞分化抗原14亚型(sCD14-ST)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子-2(IGF-2)在急性细菌性脑膜炎患儿脑脊液中的表达及意义。方法 选取2020年7月-2021年7月湖州市中心医院收治的55例急性细菌性脑膜炎患儿为观察组,另选取同期在院进行健康体检的健康儿童45例为对照组。检测对照组血液及观察组血液、脑脊液中CXCl-5、sCD14-ST、IGF-1及IGF-2水平。分析CXCl-5、sCD14-ST、IGF-1及IGF-2在急性细菌性脑膜炎患儿脑脊液中表达及对急性细菌性脑膜炎的诊断价值。结果 与对照组相比,观察组血清、脑脊液中CXCl-5(36.88±11.23 vs. 50.27±5.38 vs. 67.55±20.37)ng/L、sCD14-ST(2.86±0.23 vs. 3.32±0.33 vs. 4.01±1.35)pg/ml、IGF-1(70.96±20.78 vs. 101.69±31.77 vs. 122.36±39.21)mg/L、IGF-2(65.37±18.65 vs. 102.33±27.88 vs. 121.58±37.69)mg/L水平较高(P<0.05);与观察组患儿血清相比,患儿脑脊液中CXCl-5(50.27±5.38 vs. 67.55±20.37)ng/L、sCD14-ST(3.32±0.33 vs. 4.01±1.35)pg/ml、IGF-1(101.69±31.77 vs. 122.36±39.21)mg/L、IGF-2(102.33±27.88 vs. 121.58±37.69)mg/L水平较高(P<0.05)。logistic回归分析显示CXCl-5、sCD14-ST、IGF-1及IGF-2水平升高是急性细菌性脑膜炎发生的影响因素。ROC曲线显示,4项联合对急性细菌性脑膜炎的诊断价值高于CXCl-5、sCD14-ST、IGF-1及IGF-2单项诊断(AUC=0.843、0.747、0.702、0.660、0.765),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 急性细菌性脑膜炎患儿脑脊液中CXCl-5、sCD14-ST、IGF-1及IGF-2表达较高,CXCl-5、sCD14-ST、IGF-1及IGF-2联合对急性细菌性脑膜炎的诊断价值较高。

CCL5、CXCL10和CXCL13在重度脑外伤患者中的表达和意义

目的:观察趋化因子配体5(chemokine C-C motif ligand 5,CCL5)、趋化因子CXC配体[chemokine(C-X-C motif)ligand,CXCL]10、CXCL13在创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)患者外周血液中的表达变化,分析这些趋化因子对损伤程度和预后的影响。方法:选取39例重度TBI患者[格拉斯哥昏迷评分(Glasgow coma scale,GCS)3~8分]与13例健康对照者。酶联免疫吸附测定法检测TBI患者术后1、3、7 d和对照组外周血中CCL5、CXCL10、CXCL13蛋白含量;Spearman相关分析对不同时间点外周血中CCL5、CXCL10、CXCL13和入院GCS、术后30 d GCS和格拉斯哥结局量表评分(Glasgow outcome scale,GOS)进行相关性分析。结果:与对照组相比,重度TBI患者外周血液中CCL5、CXCL10、CXCL13的表达量均明显升高(均P<0.05)。重度TBI患者术后1 d血液中CCL5、CXCL13的蛋白浓度与入院GCS评分呈负相关(P<0.05),术后3 d CXCL10的浓度与术后30 d GCS评分呈负相关(P<0.05)。重度TBI患者术后1 d CCL5的蛋白含量、术后1 d和3 d CXCL10蛋白含量及术后7 d CXCL13的蛋白含量与术后30 d GOS评分呈负相关(P<0.05)。结论:趋化因子CCL5、CXCL10、CXCL13在TBI早期表达量迅速增加,且表达量越高,损伤程度越重,预后可能越差。

N-乙酰半胱氨酸对支气管哮喘大鼠CXCL8-CXCR1/2及TRPV1神经元敏感性的影响

目的探究N-乙酰半胱氨酸对支气管哮喘大鼠CXC趋化因子配体(CXCL)8-CXC趋化因子受体(CXCR)1/2及瞬时受体电位通道蛋白(TRP)V1神经元敏感性的影响。方法选取80只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(NO)组、模型(MO)组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组、急支糖浆(ES)组,每组20只,对MO组、NAC组、ES组进行支气管哮喘建模,建模成功后,NAC组、ES组每天分别于腹腔内注射2 ml N-乙酰半胱氨酸注射液、急支糖浆灌胃10 g/kg剂量,NO组、MO组同期灌胃同体积生理盐水,通过苏木素-伊红(HE)染色法检测肺组织病理形态、酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹检测血清及肺组织中CXCL8、CXCR1、CXCR2、TRPV1含量、mRNA及蛋白表达,并分析N-乙酰半胱氨酸对支气管哮喘大鼠CXCL8-CXCR1/2及TRPV1神经元敏感性。结果与NO组相比,MO组咳嗽次数明显增加(P<0.05),而NAC组、ES组与MO组相比,其咳嗽次数明显降低(P<0.05),且NAC组比ES组降低明显(P<0.05);与NO组相比,MO组细支气管管腔、肺泡腔内可见渗出液、脱落的上皮细胞等,远端肺泡可见局部肺不张及周围肺大泡,且肺间质明显增厚,炎性细胞浸润明显,而与MO组比较,ES组、NAC组症状明显减少,部分肺间质的组织结构趋向正常,部分肺泡轻度扩张,且NAC组比ES组明显降低(P<0.05);与NO组对比,MO组CXCL8、CXCR1、CXCR2、TRPV1含量、mRNA及蛋白表达均明显升高(P<0.05),NAC组、ES组与MO组相比均显著降低(P<0.05),且NAC组比ES组明显降低(P<0.05)。结论N-乙酰半胱氨酸可以显著降低咳嗽次数,减少支气管哮喘症状,可使CXCL8-CXCR1/2及TRPV1神经元敏感性显著降低。

miR-16-5p靶向抑制CXCL10表达减轻脂多糖诱导的HK-2人肾小管上皮细胞损伤

目的探讨微小RNA-16-5p(miR-16-5p)对脂多糖(LPS)诱导的肾小管上皮细胞损伤和CXC趋化因子配体10(CXCL10)表达的影响。方法体外培养HK-2人肾小管上皮细胞,采用LPS诱导模拟急性肾损伤,细胞分为对照组、LPS组、LPS联合miR-NC组和LPS联合miR-16-5p组。实时荧光定量PCR分析miR-16-5p的表达,噻唑蓝(MTT)比色法检测HK-2细胞的相对存活率,ELISA检测培养细胞上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-12的含量,二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法检测活性氧(ROS)水平,试剂盒检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测CXCL10以及凋亡相关胱天蛋白酶3(caspase-3)和caspase-9的蛋白表达水平。生物信息学预测miR-16-5p和CXCL10相互作用靶点,双荧光素酶报告基因实验验证miR-16-5p和CXCL10的靶向关系。结果与对照组相比,LPS组HK-2细胞miR-16-5p表达、相对细胞存活率和SOD含量均明显降低,而ROS水平、MDA、TNF-α、IL-6和IL-12的含量以及细胞凋亡率、CXCL10、caspase-3和caspase-9的蛋白表达均明显升高;与LPS组相比,过表达miR-16-5p逆转以上各指标变化。miR-16-5p能够靶向调控CXCL10的表达。结论过表达miR-16-5p靶向抑制CXCL10的表达减轻LPS诱导的HK-2肾小管上皮细胞损伤。

CXCL1通过促进蛋白激酶B磷酸化导致bEND.3小鼠脑微血管内皮细胞骨架收缩和通透性增加

目的探讨脓毒症脑病炎症中CXC趋化因子配体1(CXCL1)及其受体CXC趋化因子受体2(CXCR2)对脑内皮细胞骨架重排和通透性的影响及其相关机制。方法野生型小鼠腹腔注射脂多糖(LPS)(10 mg/kg)建立脓毒症脑病模型,ELISA检测全脑组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和CXCL1含量。使用500 ng/mL LPS和200 ng/mL TNF-α刺激bEND.3脑微血管内皮细胞后,Western blot法检测细胞CXCR2的表达。以150 ng/mL CXCL1刺激bEND.3细胞,免疫荧光染色观察脑内皮细胞骨架纤维型肌动蛋白(F-actin)重排的变化。脑内皮细胞通透性实验中,将bEND.3细胞随机分为PBS对照组、CXCL1组、CXCL1联合选择性CXCR2拮抗剂SB225002组,Transwell^(TM)小室检测各组通透性变化情况。CXCL1刺激bEND.3细胞后,Western blot法检测细胞中蛋白激酶B(AKT)和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达。结果腹腔注射LPS导致小鼠全脑组织中TNF-α和CXCL1水平显著升高;LPS和TNF-α刺激可增高bEND.3细胞CXCR2蛋白的表达。CXCL1刺激bEND.3细胞使其细胞骨架收缩,细胞间隙形成增加,且细胞渗透性增加,而CXCR2拮抗剂SB225002预处理可显著抑制CXCL1引起的脑内皮细胞肌动蛋白应力纤维和细胞间隙的形成、以及通透性的增高,同时CXCL1(150 ng/mL)刺激使得脑内皮细胞AKT的磷酸化水平明显升高。结论CXCL1通过AKT磷酸化激活引起脑内皮细胞骨架收缩、细胞通透性增加,CXCR2拮抗剂SB225002可有效抑制CXCL1诱导的细胞骨架收缩和通透性升高。