CXCL6在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其对食管癌细胞生物学特性的影响

目的研究趋化因子(C-X-C motif chemokine ligand 6,CXCL6)在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其表达的临床病理学相关性,并观察CXCL6对食管鳞状细胞癌Eca109细胞迁移和侵袭的影响。方法运用免疫组织化学SP法检测食管鳞癌组织(含105例食管鳞状细胞癌组织,75例癌旁正常组织)中CXCL6的阳性表达率,并分析CXCL6阳性表达与临床病理参数之间的相关性。运用细胞划痕实验和Transwell实验检测CXCL6对Eca109迁移和侵袭能力的影响。以食管鳞癌细胞Eca109作为未处理组,用CXCL6重组蛋白(50 ng/mL)刺激Eca109细胞,培养48 h作为CXCL6处理组,以加入PBS代替CXCL6重组蛋白作为阴性对照组。观察CXCL6重组蛋白处理后Eca109细胞的迁移和侵袭能力变化。结果食管鳞状细胞癌组织中阳性表达率(71.43%)明显高于癌旁正常组织(33.33%),差异具有统计学意义(P<0.05);高分化的食管鳞状细胞癌患者CXCL6的阳性表达率(26.32%)明显低于低分化者(73.13%),差异有统计学意义(P<0.05)。CXCL6阳性表达与食管癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、病理形态、浸润深度、临床分期、淋巴结转移均无统计学意义(P>0.05)。生存分析结果显示:CXCL6阳性表达与患者总预后无统计学意义(P>0.05)。在体外,CXCL6重组蛋白处理后,食管癌细胞Eca109迁移和侵袭能力明显增强,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CXCL6在食管鳞状细胞癌组织中高表达,其阳性表达与分化程度有关,而且CXCL6可以促食管鳞状细胞癌细胞的迁移和浸润。

Fibroblast-derived CXCL12/SDF-1α promotes CXCL6 secretion and co-operatively enhances metastatic potential through the PI3K/Akt/m TOR pathway in colon cancer

AIM To investigate the underlying mechanism by which CXCL12 and CXCL6 influences the metastatic potential of colon cancer and internal relation of colon cancer and stromal cells. METHODS Western blotting was used to detect the expression of CXCL12 and CXCL6 in colon cancer cells and stromal cells. The co-operative effects of CXCL12 and CXCL6 on proliferation and invasion of colon cancer cells and human umbilical vein endothelial cells(HUVECs) were determined by enzyme-linked immunosorbent assay,and proliferation and invasion assays. The angiogenesis of HUVECs through interaction with cancer cells and stromal cells was examined by angiogenesis assay. We eventually investigated activation of PI3K/Akt/m TOR signaling by CXCL12 involved in the metastatic process of colon cancer.RESULTS CXCL12 was expressed in DLD-1 cancer cells and fibroblasts. The secretion level of CXCL6 by colon cancer cells and HUVECs were significantly promoted by fibroblasts derived from CXCL12. CXCL6 and CXCL2 could significantly enhance HUVEC proliferation and migration(P < 0.01). CXCL6 and CXCL2 enhanced angiogenesis by HUVECs when cultured with fibroblast cells and colon cancer cells(P < 0.01). CXCL12 also enhanced the invasion of colon cancer cells. Stromal cell-derived CXCL12 promoted the secretion level of CXCL6 and co-operatively promoted metastasis of colon carcinoma through activation of the PI3K/Akt/m TOR pathway.CONCLUSION Fibroblast-derived CXCL12 enhanced the CXCL6 secretion of colon cancer cells,and both CXCL12 and CXCL6 co-operatively regulated the metastasis via the PI3K/Akt/m TOR signaling pathway. Blocking this pathway may be a potential anti-metastatic therapeutic target for patients with colon cancer.

Th17细胞过继免疫对DLBCL小鼠CXCL6／CCL2表达的影响及其意义分析

目的建立弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B lymphoma,DLBCL)小鼠模型,在肿瘤发生发展阶段中给予Th17细胞过继免疫治疗,检测肿瘤组织中趋化因子CXCL6/CCL2的表达,了解Th17细胞对DLBCL肿瘤微环境中CXCL6/CCL2表达的影响,及其与DLBCL发生发展的相关性。方法人生发中心B细胞(germinal center B cell,GCB)样DLBCL细胞株SUDHL-4进行传代培养后接种10只SCID小鼠建立DLBCL小鼠模型,观察小鼠肿瘤发生发展过程并得出DLBCL小鼠肿瘤中位发病时间T1及小鼠中位生存时间T2。体外培养Th17细胞,在接种肿瘤细胞株时予30只DLBCL小鼠注射Th17细胞行过继免疫,并分别于T0(接种Th17细胞后)、T1和T2这3个时间点处死小鼠,获得A0、A1和A2组,每组10只小鼠。实时定量PCR法检测DLBCL小鼠肿瘤组织CXCL6/CCL2表达,与同一时间点15只小鼠的生理盐水对照组(B0、B1和B2组,每组5只)进行对比,并对比T0、T1和T2这3个时间点各组CXCL6/CCL2的表达。结果 A0组、A1组和A2组CXCL6mRNA表达量分别为0.115±0.021、0.657±0.142和0.935±0.322,差异有统计学意义,F=7.013,P=0.025。B0组、B1组和B2组CXCL6mRNA表达量分别为0.175±0.024、0.321±0.011和0.631±0.027,差异有统计学意义,F=6.007,P=0.008。A0组CXCL6mRNA表达量与B0组对比差异无统计学意义,t=2.03,P=1.25;A1组明显高于B1组,t=6.43,P<0.01;而A2组也明显高于B2组,t=6.35,P<0.01。A0组、A1组和A2组CCL2mRNA表达量分别为0.133±0.015、0.654±0.534和0.928±0.322,差异有统计学意义,F=7.021,P=0.023。B0组、B1组和B2组CCL2mRNA表达量分别为0.124±0.013、0.327±0.025和0.628±0.322,差异有统计学意义,F=6.005,P=0.007。A0组CCL2mRNA表达量与B0组对比差异无统计学意义,t=1.98,P=1.75;A1组明显高于B1组,t=6.13,P<0.01;A2组也明显高于B2组,t=7.59,P<0.01。结论随着DLBCL肿瘤进程,CXCL6和CCL2的表达上升,CXCL6和CCL2可能是影响DLBCL肿瘤发生发展的因子,而Th17过继免疫治疗可以上调DLBCL肿瘤组织CXCL6和CCL2的表达,可能会对DLBCL肿瘤的发生发展产生影响。

血清TNF-α、CXCL5、CXCL6、SRSF1表达与帕金森病的相关性研究

目的:探讨血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、趋化因子5(CXCL5)、趋化因子6(CXCL6)、精氨酸/丝氨酸丰富剪接因子1(SRSF1)的表达与新疆地区PD的相关性。方法:应用ELISA测定新疆地区115例PD患者和116例健康对照者血清中前述四个指标的表达水平,比较PD组和对照组间四个指标的表达水平是否存在差异,比较PD组按照不同因素分层后四个指标的表达水平是否存在差异,分析PD组四个指标的表的达水平是否与临床特征之间存在相关性。结果:(1)PD组TNF-α表达水平较对照组升高,差异有统计学意义(P=0.000)。PD组CXCL6表达水平较对照组降低,差异有统计学意义(P=0.033)。(2)PD组按不同因素分层后:(1)男性组CXCL5表达水平较女性组降低,差异有统计学意义(P=0.018);(2)H-Y分级>2.5级组CXCL6表达水平较H-Y分级≤2.5级组降低,差异有统计学意义(P=0.018)。(3)PD组SRSF1含量水平与UPDRS评分存在显著相关性(r=-0.191,P=0.041)。结论:TNF-α在PD患者中呈高表达;CXCL6在PD患者中呈低表达。CXCL5在男性PD患者中表达较女性PD患者低。CXCL6在H-Y分级>2.5级PD患者中表达较H-Y分级≤2.5级PD患者低。PD患者SRSF1表达水平与UPDRS评分呈负相关。

活动期强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞CXCL16 mRNA和CXCL6 mRNA的表达及CXCL16对淋巴细胞增殖的影响

目的观察活动期强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞CXC型趋化因子配体(CXC tchemokine ligand,CXCL)16和CXCL6的表达情况,探讨CXCL16对淋巴细胞增殖的影响。方法选择金华市中医医院2014年1月—2015年12月活动期强直性脊柱炎患者62例作为实验组,健康体检者62例作为对照组。测定血清CXCL16,外周血单个核细胞CXCL16 mRNA和CXCL6 mRNA水平、淋巴细胞增殖、培养上清液中RANKL水平。结果实验组患者血清CXCL16水平(2.47±0.97)ng/ml高于对照组(1.87±0.64)ng/ml(t=4.375,P=0.009),实验组CXCL16 mRNA和CXCL6 mRNA相对表达量(0.063±0.004、0.047±0.008)均高于对照组(0.034±0.003、0.020±0.005)(t=5.274、6.252,P=0.003、P<0.001)。在重组蛋白CXCL16作用下,实验组淋巴细胞增值率(169.23%±34.26%)和光密度值(0.038±0.002)均高于对照组(116.45%±23.54%、0.021±0.002)(t=6.847、6.035,均P<0.001),实验组淋巴细胞分泌RANKL水平(1.794±0.315)pmol/L高于对照组(0.957±0.264)pmol/L(t=5.264,P=0.002)。实验组中CXCL16组淋巴细胞p-ERK1/2、p-Raf-1蛋白表达量均高于其他3组(P=0.013、0.017、0.008;0.011、0.012、0.001)。实验组中CXCL16组S期和G_2/M期细胞比例高于其他3组(P=0.021、0.018、0.009;均P<0.001)。结论 CXCL16及其受体CXCL6可能参与强直性脊柱炎发病,其机制可能与CXCL16促进淋巴细胞增殖有关。

CXCL6基因在大鼠睾丸组织发育过程中的表达

目的检测CXCL6基因在大鼠发育睾丸组织中的表达,探讨该基因在精子发生过程中的作用。方法取三组不同窝别来源,出生2到65日龄之间,21个时间点的雄性大鼠的睾丸组织,采用Real-time PCR方法检测CXCL6基因的转录表达。采用免疫组织化学染色的方法检测65日龄大鼠睾丸组织中CXCL6的表达情况。结果CXCL6基因m RNA表达在大鼠出生后第2天呈高表达,随后开始迅速下降,在第8天下降到最低值,一直持续到第16天。从第20天起迅速线性升高表达,在第29天达到整个发育过程的最高值之后开始下降。第35天可见CXCL6基因的表达再次呈现升高趋势,在第45天形成一个小高峰表达之后,维持一定的表达量持续至第65天。免疫组织化学染色结果显示,CXCL6蛋白在精母细胞边缘和圆形精子以及长形精子处表达。结论CXCL6基因可能参与精原干细胞的增殖过程,并且可能在圆形精子的形成以及精子成熟的过程中发挥作用。

趋化因子CXCL16与动脉粥样硬化性卒中

颈动脉粥样硬化是缺血性卒中的重要发病机制。炎症在动脉粥样硬化的发生、发展及其引起的并发症中起着关键作用。作为一种新型的趋化因子，人CXC型趋化因子配体16（CXCthe-mokineligand16，CXCL16）参与了动脉粥样硬化斑块的形成和发展，可能与动脉粥样硬化性卒中有关。

趋化因子及其受体CXCL16/CXCR6在人肺癌转移中的作用

目的 探讨CXCL16/CXCR6在肺癌的表达模式及其对肺癌细胞系生物学行为的影响.方法 免疫组织化学技术分析CXCL16/CXCR6蛋白在人肺癌组织的表达；免疫细胞化学分析CXCL16/CXCR6在3种肺癌细胞系A549、95D和H292的表达；MTT试验及迁移、侵袭试验分别分析CXCL16时A549、95D和H292细胞体外增殖活力和侵袭能力的调节作用.结果 人肺癌组织高表达CXCR6和CXCL16蛋白；A549、95D和H292细胞均表达CXCL16和CXCR6蛋白；外源性CXCL16可明显促进A549、95D和H292细胞的体外增殖活力和侵袭能力,且CXCL16中和抗体可以有效阻断CXCL16蛋白对3种肺癌细胞系的刺激作用.结论 CXCL16/CXCR6可能是参与肺癌侵袭转移的分子.

趋化因子及其受体CXCL16/CXCR6体外促前列腺癌增殖、侵袭作用

目的:探讨趋化因子及其受体CXCL16/CXCR6在人前列腺癌细胞系体外增殖侵袭中的作用。方法:免疫细胞化学技术检测CXCL16/CXCR6在人前列腺癌细胞系DU145中的表达;MTT法分析CXCL16/CXCR6对DU145细胞的促增殖作用;迁移、侵袭实验分析CXCL16对DU145细胞体外侵袭能力的调节作用。结果:DU145既表达CX-CR6蛋白,也表达CXCL16蛋白;外源性CXCL16可明显提高DU145细胞体外增殖活力和促进DU145细胞的体外迁移、侵袭能力,CXCL16中和抗体可以有效消除CXCL16对细胞的促侵袭作用,但CXCL12或CXCR4中和抗体不能阻断CXCL16的促侵袭作用。结论:CXCL16/CXCR6可能是参与前列腺癌转移的重要趋化因子配受体对。