CXCL12/CXCR4轴在胰腺癌-神经交互作用中的研究

目的本研究旨在阐述CXCLl2/CXCR4轴对胰腺癌神经相互作用的影响,探讨CXCLl2/CXCR4在胰腺癌嗜神经过程中的相关分子机制。方法体外培养胰腺癌Panc-1、Miapaca-2细胞,实验分为空白对照组、外源性CXCLl2组及CXCR4受体特异性阻断剂AMD3100组。采用RT-PCR检测胰腺癌细胞CXCR4及CXCL12mRNA的表达,检测基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)及人尿激酶型纤溶酶原激活物(human urokinase plasminogen activator,uPA)mRNA的表达;采用Transwell侵袭实验观察各实验组中细胞侵袭性的变化;提取大乳鼠脊髓背根神经节,建立胰腺癌细胞Miapaca-2与脊髓背根神经节(DRG)共培养模型,倒置显微镜成像系统动态观察不同实验组中神经轴突生长差异。结果胰腺癌细胞Panc-1、Miapaca-2细胞存在CXCR4mRNA的表达,而CXCL12mRNA无表达;两种胰腺癌细胞之MMP-2、MMP-9及uPAmRNA在AMD3100组、对照组、CXCLl2组中的表达差异具有统计学意义(P<0.01);Transwell细胞侵袭性实验中,外源性CXCLl2明显增强Panc-1、Miapaca-2细胞的侵袭性,而AMD3100有效抑制肿瘤细胞的侵袭能力,组间存在显著差异(P<0.05)。胰腺癌细胞与脊髓背根神经节共培养模型中,外源性CXCLl2明显增强神经轴突的生长,促使胰腺癌细胞与神经轴突接触,而AMD3100有效抑制神经轴突生长及与肿瘤细胞接触;细胞共培养144h后各组神经生长轴突数差异有统计学意义(P<0.01)。结论 CXCLl2/CXCR4一方面增强胰腺癌细胞的侵袭能力,促进胰腺癌细胞神经浸润;另一方面,神经元与施万细胞等构成神经纤维分泌CXCL12并通过化学趋化作用,诱导表达CXCR4的胰腺癌细胞向神经迁移,导致神经浸润的发生。

细胞色素P450-3A4相关的药物相互作用

目的：综述与细胞色素Ｐ４５０ ３Ａ４相关的药物相互作用。方法：检索Ｍｅｄｌｉｎｅ 和中国药学文摘。结果：发现多种由ＣＹＰ３Ａ４催化代谢的药物之间可以竞争药物代谢酶，引起药物相互作用，ＣＹＰ３Ａ４的抑制剂和诱导剂均可以抑制或诱导ＣＹＰ３Ａ４催化代谢的药物代谢，导致有益或不良的药物相互作用。结论：ＣＹＰ３Ａ４催化代谢的药物联合使用，特别是ＣＹＰ３Ａ４抑制剂与底物联合使用时，可能因为抑制了药物的代谢而导致严重的药物不良反应。

CXCR4趋化因子拮抗剂AMD3100对人羊水干细胞抑制作用的体外实验研究

目的通过体外实验研究CXCR4趋化因子拮抗剂AMD3100对人羊水干细胞(h AFSC)的影响。方法羊水干细胞分为对照组(PBS处理)和实验组(AMD3100处理10μg/L)。采用Transwell小室分析细胞迁移力,MTT法检测AMD3100对hAFSC存活的影响,明胶贴壁法测定AMD3100对hAFSC细胞粘附能力影响。结果对照组和实验组hAFSC迁移细胞数分别为80. 35±3. 70和36. 50±3. 66,粘附细胞数分别为31. 48±3. 21和11. 41±1. 89,存活细胞OD值分别为0. 91±0. 04和0. 36±0. 02,实验组均显著低于对照组,差异均有显著性(P <0. 05)。结论 AMD3100在体外实验中抑制羊水干细胞的迁移、粘附和存活,其作用机制可能涉及SDF-1/CXCR4。

金银花提取物及主要成分对药物代谢酶CYP3A4的活性抑制作用研究

目的:考察金银花提取物及其主要成分绿原酸、咖啡酸和芦丁对CYP3A4活性的抑制作用。方法:采用重组人CYP3A4孵育法,以咪达唑仑作为该酶的活性探针药物,采用液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)测定代谢产物1′-羟基咪达唑仑的浓度,计算代谢产物的初始生成速度,比较加入待测药物和空白对照时代谢产物的初始生成速度。结果:金银花提取物、绿原酸、芦丁对该酶有抑制作用,IC50值分别为2.13mg/mL、28.8μmol/L和17.6μmol/L,且金银花提取物和绿原酸对该酶的抑制作用不可逆,咖啡酸的抑制作用很弱,几乎不会导致药物相互作用。结论:金银花可能影响联合使用的CYP3A4的底物药物的代谢。

二肽基肽酶-4抑制剂沙格列汀的药物相互作用

二肽基肽酶-4(dipeptidyl peptidase-4,DPP-4)抑制剂是一种通过抑制DPP·4活性,减少体内胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)的分解进而增加GLP-1浓度并促进胰岛素β细胞分泌胰岛素的新型降糖药物。通过检索PubMed文献.分析口服抗糖尿病药物,抗高血压药物,调血脂药物、口服避孕药,地高辛等临床常用药物与DPP-4抑制剂沙格列汀(CYP3A4/5的底物)联用时,对沙格列汀药代动力学的影响。研究结果显示,沙格列汀与上述药物联用不存在有临床意义的药动学方面的不良相互作用。与CYP3A4的底物或中效CYP3A4的抑制剂联用时,不需调整沙格列汀的剂量。当沙格列汀与强效CYP3A4/5抑制剂(如酮康唑等)联用时,沙格列汀的限定剂量为每日2,5mg。

苦参碱对人孕烷X受体介导的CYP3A4调节及药物相互作用分析

目的:研究苦参碱(Matrine)对CYP3A4转录激活、mRNA诱导作用的影响,并对其在联合用药中药物的相互作用进行评价。方法:利用CCK-8方法检测苦参碱对人结直肠癌LS174T细胞、人肝癌Hep G2细胞增殖的影响;瞬时共转染报告基因方法检测苦参碱对人孕烷X受体(PXR)介导的CYP3A4荧光素酶活性影响;Real-time PCR检测苦参碱对人孕烷X受体、CYP3A4 mRNA诱导作用影响。结果:在一定的浓度范围内,苦参碱对Hep G2和LS174T细胞的增殖均具有抑制作用;在Hep G2细胞中,苦参碱可通过激活PXR而诱导CYP3A4转录,并通过诱导PXR mRNA表达进而上调CYP3A4 mRNA表达。在LS174T细胞中,苦参碱可通过激活PXR诱导CYP3A4转录,并通过诱导PXR mRNA表达进而上调CYP3A4 mRNA表达,且其作用呈浓度依赖性。结论:苦参碱对CYP3A4的诱导可能与人孕烷X受体通路有关,与其他药物联合使用时有可能干扰其他药物的代谢。

二肽基肽酶4抑制剂药物相互作用的研究进展

目的:了解二肽基肽酶4(DPP-4)抑制剂药物相互作用的研究进展。方法:查阅近年来国内外相关文献,就DPP-4抑制剂药物相互作用的研究进行归纳和总结。结果与结论:DPP-4抑制剂与大多数药物联用时罕见不良反应发生,无需调整剂量,如二甲双胍、磺脲类、噻唑烷二酮类、格列波糖等传统降糖药,他汀类降脂药,口服避孕药和地高辛等;兰索拉唑、莫沙必利能够增强DPP-4抑制剂的降糖效果;中药辣木提取物和大黄与DPP-4抑制剂存在药物相互作用,能够降低DPP-4抑制剂的疗效,临床联用应谨慎对待;细胞色素P_(450)(CYP)3A4底物或弱效抑制剂辛伐他汀、地尔硫与DPP-4抑制剂联用时无需调整剂量,但与CYP3A4强效抑制剂酮康唑联用时,需按照低剂量给药。尽管DPP-4抑制剂与大多数药物联用具有较好的安全性,但仍需警惕其药物相互作用。

伊曲康唑与细胞色素P4503A(CYP3A)底物和调节CYP3A活性的药物临床相互作用研究

目的:分析伊曲康唑与其他三种与CYP3A4相互作用的药物之间的药物相互作用,以进一步丰富伊曲康唑的药物相互作用谱,为临床安全使用伊曲康唑提供数据基础。方法:40名健康受试者随机分为单独伊曲康唑给药组、伊曲康唑与左炔诺孕酮炔雌醇给药组、伊曲康唑与利福平给药组和伊曲康唑与利福布汀给药组进行PK分析和安全性分析。结果:与单独使用每种药物相比,伊曲康唑与伊曲康唑的共同给药改变了浓度-时间曲线下面积(AUC∞)和最大浓度(C max),如下所示:左炔诺孕酮炔雌醇不影响伊曲康唑的PK参数;利福平联用伊曲康唑相比伊曲康唑单用,暴露量下降约16%,终末半衰期消除下降约27%;利福布汀轻微影响伊曲康唑的PK参数。本研究中,没有死亡,常见不良事件为头痛,且导致研究中止的不良事件很少见。结论:伊曲康唑可以与左炔诺孕酮炔雌醇共同给药,不推荐伊曲康唑与强CYP3A诱导剂(如利福平)共同给药,也不推荐伊曲康唑与弱CYP3A诱导剂利福布汀同时给药。

CYP3A4酶相关的临床药物相互作用

目的为CYP3A4酶的强抑制剂、强诱导剂的合理使用提供参考。方法查阅国内外相关文献,对CYP3A4酶强抑制剂、强诱导剂相关的临床药物相互作用研究及案例进行归纳和总结。结果 CYP3A4酶强抑制剂克拉霉素、蛋白酶抑制剂、三唑类抗真菌药等的临床药物相互作用报道较多,特别是与钙通道阻滞剂、他汀类药物、激素类药物、他克莫司等;强诱导剂利福平、卡马西平、苯妥英等的临床药物相互作用也有报道,如与口服避孕药、他克莫司、替格瑞洛等。结论临床应用CYP3 A4酶强抑制剂、强诱导剂时需注意其对CYP3A4底物的影响,及时调整用药方案。

基于mRNA翻译起始因子eIF4E结构的药物发现

目的探究mRNA翻译起始因子eIF4E的结构和作用机理,为靶向eIF4E的药物设计提供参考信息。方法综合性阐述eIF4E家族的三维结构,运用生物信息学方法分析eIF4E家族氨基酸序列的保守性;运用DoGSiteScorer软件预测eIF4E表面的结合口袋;运用LigPlot和PRODIGY软件,分析eIF4E与药物分子的作用模式、预测两者之间的结合自由能;最后运用Autodock Vina软件,针对eIF4E表面结合口袋,筛选ZINC数据库FDA批准的药物分子。结果eIF4E表面存在5个潜在的药物分子结合口袋,其中结合口袋P0体积最大,且大部分关键氨基酸都高度保守,为靶向eIF4E药物分子的主要结合口袋。结合口袋P2比较刚性,且氨基酸的保守性不高。P2适用于高通量筛选靶向eIF4E的药物分子,实验报道靶向P2的药物分子Z5D具有很强的亲和力。研究结果发现有5个FDA批准的药物分子与eIF4E具有较强的结合能力,可作为设计eIF4E抑制剂的先导化合物。结合口袋P3主要通过疏水作用结合药物分子,且与P0和P2之间存在协同效应。该协同效应表明可设计靶向eIF4E的联合用药方案。结论eIF4E家族高度保守的氨基酸参与稳定eIF4E的三维结构,是结合口袋的重要组成部分,严重影响eIF4E与药物分子之间的相互作用。eIF4E表面存在5个结合口袋,其中P2与药物分子Z5D具有很强的亲和力,可作为筛选药物分子的参考标准。有5个FDA批准的药物分子与eIF4E具有较强结合能力。

抗CXCR4单克隆抗体12G5对阿糖胞苷杀伤HL-60细胞效应的影响

本研究通过观察抗CXCR4单克隆抗体12G5对Ara C杀伤HL-60细胞效应的影响,评价其在白血病骨髓 残留病变中的治疗价值。培养并共培养HL-60细胞,在共培养体系中采用12G5(10μg／ml)阻抑基质细胞SDF-1的 生物作用后,通过MTT法及细胞形态学观察检测不同浓度Ara c对HL-60细胞杀伤作用的变化。药物杀伤效应曲 线显示,在20μg／ml Ara C组,对照组中前2天A540值明显下降,但从3-4天开始出现上升,而加12G5实验组中 A540值虽然下降平缓,但持续下降,并于观察第5天后低于对照组,整个观察期中未出现反弹。在40μg／ml Ara C 组,对照组A540在0-3天明显下降,从第4天开始回升,于第5-6天与实验组曲线交叉,从7-12天时照组A540值 总体呈上升趋势,并明显高于实验组,而加12G5实验组曲线在整个观察期间虽然在7-9天有小幅度攀升,但总的 趋势是下降。细胞形态学观察显示,在两个浓度组,对照组HL-60细胞数量最初明显减少,随着培养时间延长,细 胞数量逐渐增多,实验组结果正相反。结论:12G5减弱Ara C对HL-60细胞的早期杀伤作用,但12G5增强Ara C 总体杀伤作用,同时,延缓HL-60细胞对Ara c的耐药性,因此12G5有助于白血病骨髓残留病变的治疗。

齐墩果酸对健康人体CYP1A2，CYP2E1及CYP3A4抑制作用的研究

目的在人体内研究齐墩果酸对CYP1A2,CYP2E1及CYP3A4酶活性的影响,以预测齐墩果酸与常用临床药物的相互作用。方法分别以咖啡因、氯唑沙宗和咪哒唑仑作为CYP1A2,CYP2E1及CYP3A4的探药,采用随机、开放、双周期交叉设计,12名健康男性受试者在服用7d齐墩果酸前后均服用100mg咖啡因、400mg氯唑沙宗和7·5mg咪哒唑仑,服探药后采血测定探药及相应代谢产物的浓度,并计算相关参数。探药和代谢物的浓度分别用RP-HPLC和HPLC-MS测定。结果服用齐墩果酸7d后,咖啡因的代谢受到显著的抑制,其达峰时间、消除半衰期及药-时曲线下面积显著增加;氯唑沙宗的代谢受到轻微抑制,达峰浓度、达峰时间、消除半衰期及药-时曲线下面积均有升高趋势,但无显著性差异;咪哒唑仑的代谢未受影响。结论服用7d齐墩果酸对CYP1A2体内活性有显著抑制作用,对CYP2E1体内活性有轻微抑制作用,而对CYP3A4酶活性无影响。

多药耐药性P-糖蛋白在药物肠道吸收中的作用

目的综述近五年来多药耐药性P 糖蛋白作用于药物肠道吸收过程的研究进展。方法在查阅文献的基础上介绍了P 糖蛋白的分子结构、作用机制及其底物、抑制剂和诱导剂 ,并阐明P 糖蛋白对药物肠道吸收的作用及其所引起的临床上药物相互作用。结果与结论P 糖蛋白积极参与药物肠道吸收过程 ,充分了解这一点有助于合理设计药物制剂处方 ,提高药物生物利用度 。

葡萄柚汁与药物的相互作用

饮食中的烟、酒、茶对药物的影响报道较多,但有关饮料与药物的相互作用国内尚未见报道,国外临床上已经观察到饮料与药物的相互作用可影响药物疗效并诱发药物不良反应。本文就国外近年来报道较多的葡萄柚汁与药物的相互作用加以综述。在研究酒精与非洛地平的相互作用中偶然发现用于掩盖酒精味道的葡萄柚汁能明显增加非洛地平的口服生物利用度,随后的研究证明葡萄柚汁通过选择性抑制细胞色素P4503A4(CYP3A4)在肠壁的表达进而抑制非洛地平的首过效应而起作用。葡萄柚汁的作用可维持24h,多次给予葡萄柚汁可导致非洛地平AUC和Cmax 的积累增加。个体间相互作用的差异与肠CYP3A4酶的蛋白表达有关,如具有较高CYP3A4水平的个体,其相互作用较大,即非洛地平的AUC和Cmax 增加较多。到目前为止,至少已研究了20种药物与葡萄柚汁之间的相互作用。具有被CYP3A4催化首过效应而致低生物利用度的药物与葡萄柚汁间有明显的相互作用,临床上常见的有:双氢吡啶类、特非那定、沙喹那韦、环孢素、咪达唑仑、三唑仑和维拉帕米等,也见于洛伐他汀(美降之)、西沙必利和阿司咪唑(息斯敏)。葡萄柚汁与药物相互作用的程度与不同个体的敏感性、饮用的葡萄柚汁种类和品种以及与服药有关的因素的影响有关。

EGFR和4-苯胺喹唑啉类抑制剂之间相互作用模式的研究

采用分子动力学和MM PBSA相结合的方法预测了表皮生长因子受体和 4 苯胺喹唑啉类抑制剂的相互作用模式 .在分子动力学采样的基础上 ,采用MM PBSA的方法分别预测了四种可能结合模式下表皮生长因子受体和 4 苯胺喹唑啉类抑制剂间的结合自由能 .在MM PBSA计算中 ,受体和抑制剂之间的非键相互作用能采用分子力学(MM)的方法得到 ;溶剂效应中极性部分对自由能的贡献通过解Possion Boltzmanne (PB)方程的方法得到 ;溶液效应中非极性部分对自由能的贡献则通过分子表面积计算 (SA)的方法得到 .计算表明 ,在四种结合模式下 ,表皮生长因子受体和 4 苯胺喹唑啉类抑制剂之间的结合自由能有较大的差别 .在最佳的相互作用模式中 ,抑制剂的苯胺部分位于活性口袋的底部 ,能够与受体残基的非极性侧链产生很强的范德华和疏水相互作用 .抑制剂喹唑啉环上的N(1)原子能够和Met 76 9上的NH形成稳定的氢键 ,而抑制剂上的N(3)原子则和周围的一个水分子形成氢键 .同时 ,抑制剂双环上的取代基团也能和活性口袋外部的部分残基形成一定的范德华和疏水相互作用 .

CYP3A4高表达细胞模型及其应用于药物代谢研究进展

细胞色素P450酶3A4(cytochrome P450 3A4,CYP3A4)属于细胞色素P450酶家族,参与多种化合物代谢及相互作用,是药物(尤其是口服药物)筛选和代谢研究的重要对象。该文按年代顺序对国外文献中CYP3A4高表达细胞模型的建立及在药物代谢中的应用进行综述,旨在将这一有价值的模型引入到新药研究中。

黄连素对HepG2细胞CYP3A4和P-gp的影响和作用机制研究

目的：阐明黄连素即盐酸小檗碱（berberine hydrochloride,BBR）对人肝癌细胞HepG2中细胞色素P450 3A4（CYP3A4）、多药耐药基因（MDR1）在mRNA和蛋白水平表达的影响,初步探讨黄连素对CYP3A4和P-糖蛋白（P-gp）的影响及其作用机制。方法：采用MTT法检测不同浓度的BBR（1～100μg/mL）对HepG2细胞活力的影响;并在BBR对HepG2细胞毒性较小的浓度范围进行实验,实验分为空白对照组、不同浓度BBR组、诱导剂利福平（Rif）组以及不同浓度BBR和Rif共同给药组,与对数期HepG2细胞孵育48h后,提取细胞RNA和总蛋白,分别采用荧光定量PCR法（QRT-PCR）、Western blot法检测HepG2细胞中CYP3A4、MDR1、孕烷X受体（pregnane X receptor,PXR）、视黄醛X受体（retinoid X receptor,RXR）在mRNA水平的表达和CYP3A4、P-gp在蛋白水平的表达。结果：BBR在1～40μg/mL浓度范围内对HepG2细胞毒性小,细胞活力大于80%,超过40μg/mL时对细胞毒性大,细胞存活率低。Western blot结果表明,与空白对照组比较,0.1、0.5和2μg/mL BBR对HepG2细胞CYP3A4和P-gp蛋白的表达有诱导作用（P〈0.05）,但10、40μg/mL BBR对HepG2细胞CYP3A4和P-gp蛋白的表达有显著性抑制作用（P〈0.01）。QRT-PCR结果表明,与空白对照组比较,10、20和40μg/mL BBR均对HepG2细胞PXR、CYP3A4、MDR1mRNA的表达有显著抑制作用（P〈0.05）;但10μg/mL BBR对RXR mRNA无显著性影响（P〉0.05）,20、40μg/mL BBR对RXR mRNA有显著的抑制作用（P〈0.05）。结论：黄连素对CYP3A4和P-gp有双向作用,低剂量时诱导,高剂量时抑制,并且其作用很有可能通过PXR信号通路实现。

大环内酯类抗菌药物介导的药物相互作用临床试验文献评估

目的:评估大环内酯类抗菌药物红霉素、克拉霉素与阿奇霉素介导的药物相互作用,为临床合理用药提供参考。方法:检索PubMed、中国知网(CNKI)、万方等数据库中关于红霉素、克拉霉素与阿奇霉素介导的药物相互作用的临床试验文献,并搜集其药品说明书,采用美国食品与药物管理局(FDA)推荐的药物相互作用标准进行统计分析。结果:临床试验发现有20种药物与红霉素存在药物相互作用可能性,有强、中度和弱相互作用的分别为3、6、11种;22种药物与克拉霉素存在药物相互作用可能性,有强、中度或弱相互作用的分别为2、11、9种;5种药物与阿齐霉素存在药物相互作用可能性,且全部为弱相互作用。以咪达唑仑为CYP3A4底物评估三者介导的药物相互作用强度,发现克拉霉素、红霉素和阿奇霉素分别引起强、中度和弱相互作用。结论:红霉素和克拉霉素发生药物相互作用的可能性较阿奇霉素大,可能原因是红霉素和克拉霉素对CYP3A4抑制强度远大于阿奇霉素。