腺苷诱导耗竭型CD8^(+)T细胞影响肾癌细胞迁移及凋亡

目的探索腺苷是否诱导耗竭型T细胞生成以及对肾透明细胞癌细胞迁移和凋亡的影响。方法流式细胞术检测肾透明细胞癌及癌旁组织中CD8^(+)T细胞及耗竭表型分子3(TIM-3)的表达。生物信息学分析肾透明细胞癌及癌旁组织中基因表达差异,寻找影响T细胞耗竭基因。利用shRNA技术构建稳定敲除该基因的肾透明细胞癌786-O细胞株,检测细胞的迁移、凋亡等生物学行为。制备不同肿瘤条件培养基,培养CD8^(+)T细胞,研究敲除基因后的肾透明细胞癌细胞对耗竭型T细胞的影响。结果肾透明细胞癌与癌旁组织相比高表达CD8^(+)T细胞及TIM-3。生物信息学分析发现腺苷合成限速酶NT5E(CD73)在肾透明细胞癌中的表达高于癌旁组织。检测临床标本发现肾透明细胞癌组织中腺苷及CD73的表达高于癌旁组织。与对照组比较,敲除NT5E组的786-O细胞迁移能力下降及凋亡增加。敲除NT5E的肿瘤条件培养基培养的CD8^(+)T细胞中程序性死亡蛋白1表达减少,抑制T细胞增殖能力下降。结论肾透明细胞癌组织存在耗竭型CD8^(+)T细胞、腺苷及CD73的高表达。敲除NT5E的肾透明细胞癌786-O细胞迁移能力下降、凋亡增加。敲除NT5E可减少腺苷合成,减少耗竭型T细胞的生成。

系统性红斑狼疮患者外周血CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞上PD1表达及意义

目的探讨程序性死亡分子1(PD1)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞上的表达及临床意义。方法流式细胞术检测47例SLE患者、35例健康对照者(HC)外周血PD1^(+)CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞百分率和CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达平均荧光强度(MFI),比较两组之间的差异,分析其与SLE临床、实验室指标、浆母细胞的相关性,并分析其预测SLE的价值。结果(1)SLE患者PD1^(+)CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞百分率高于HC,差异有统计学意义(P=0.0083,U=540.5);SLE患者CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI高于HC,差异有统计学意义(P<0.0001,U=187.0)。(2)SLE患者PD1^(+)CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞百分率与补体C3(r_(s)=-0.3352,P=0.0228)、抗SSA抗体(P=0.0166,t=2.5)、抗组蛋白抗体(P=0.0303,t=2.3)、治疗(P=0.0202,t=3.4)、浆母细胞比例(r_(s)=0.3871,P=0.0072)相关;SLE患者CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI与系统性红斑狼疮疾病活动性评分(SLE-DAI)(r_(s)=0.4031,P=0.0050)、红细胞沉降率(r_(s)=0.3561,P=0.0177)、C-反应蛋白(r_(s)=0.3374,P=0.0289)、红细胞(r_(s)=-0.2970,P=0.0426)、血红蛋白(r_(s)=-0.3029,P=0.0385)、血细胞比容(r_(s)=-0.3816,P=0.0081)、淋巴细胞计数(r_(s)=-0.3937,P=0.0062)、淋巴细胞百分比(r_(s)=-0.3912,P=0.0065)、中性粒细胞百分比(r_(s)=0.3150,P=0.0311)、NLR(r_(s)=0.3730,P=0.0098)、LMR(r_(s)=-0.4315,P=0.0025)、dNLR(r_(s)=0.3150,P=0.0311)、anti-Ro52(P=0.0295,t=63.5)、治疗(P=0.0355,W=21)、浆母细胞比例(r_(s)=0.3158,P=0.0306)相关。(3)逻辑回归分析显示CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI是SLE的危险因素。(4)ROC曲线分析显示CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI预测SLE的AUC为0.886,构建了基于CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI和HGB的预测模型,预测模型的AUC为0.979,预测模型与SLEDAI呈正相关(r_(s)=0.3136,P=0.0303)。结论SLE患者升高的外周血PD1^(+)CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞百分率、CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI与疾病严重程度及活动性相关,且构建了基于CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI和HGB的SLE预测模型。

CXCR5+ CD8+ T细胞在儿童传染性单核细胞增多症中的反应特点及临床价值

目的:本研究旨在探讨C-X-C趋化因子受体5型(CXCR5) CD8+ T细胞在儿童EBV相关传染性单核细胞增多症(IM)中的反应特点及临床价值。方法:采用流式细胞术及EB病毒(EBV)病原学检查分析入组儿童的外周血,同时收集临床资料进行统计分析。结果:EBV感染急性期CXCR5+ CD8+ T细胞绝对值计数显著增加,CXCR5+ CD8+ T/CD8+ T细胞比值、CD19+ B细胞的绝对值计数及CD19+ B细胞/LYM比值显著降低。CXCR5+ CD8+ T细胞绝对值计数与EBV DNA病毒载量、CD19+ B细胞绝对值计数呈负相关与肝损伤指标呈正相关。将EBV相关性IM急性期患儿以CXCR5+ CD8+ T细胞绝对值计数中位值分为高、低表达两组,高表达组中出现淋巴结肿大、肝脾肿大的几率明显高于低表达组。ROC曲线分析显示CXCR5+ CD8+ T细胞对儿童IM具有诊断价值,对于EBV相关肝损伤具有预测价值。结论:CXCR5+ CD8+ T细胞在EBV的急性感染中发挥了抗病毒作用,而其过度反应可能导致组织器官损伤。此外,CXCR5+ CD8+ T细胞可作为EBV相关IM诊断的诊断指标及EBV相关性肝损伤的预测指标。

CXCR5^+CD8^+ T细胞在HIV感染中的免疫特征及其与疾病进展关系的研究

目的探讨HIV感染者外周血CXCR5^+CD8^+T细胞的频率、功能变化及其与病情进展的相关性。方法收集40例HIV感染者和15例健康对照者,采用流式细胞分析术检测其外周血CXCR5^+CD8^+T细胞频率及IFN-γ和IL-10表达,并分析其与血浆HIV载量和外周血CD4^+T细胞计数的相关性。结果与健康对照组相比,HIV感染组外周血CXCR5^+CD8^+T细胞频率上调(P<0.05),且与外周血CD4^+T细胞计数呈弱正相关(r=0.349,P=0.027),与血浆HIV载量呈弱负相关(r=-0.377,P=0.040);HIV感染者外周血CXCR5^+CD8^+T细胞IFN-γ表达与血浆HIV载量呈负相关(r=-0.514,P=0.002);而CXCR5^+CD8^+T细胞IL-10的表达在HIV感染者中明显上调(P<0.05),与外周血CD4^+T细胞计数呈弱负相关(r=-0.317,P=0.046),与血浆HIV载量呈正相关(r=0.670,P=0.002)。结论 HIV感染者外周血CXCR5^+CD8^+T细胞频率功能变化与疾病进展密切相关。

慢性HBV感染者外周血CXCR5^+ CD_8^+ T细胞亚群的特点及意义

目的:研究慢性HBV感染者外周血CXCR5^+CD_8^+T细胞亚群的特点,探讨CXCR5^+CD_8^+T细胞在慢性HBV感染进程中的作用。方法:收集76例慢性HBV感染者,分四组,其中肝功能正常高病毒载量组8例、肝功能异常高病毒载量组26例、肝功能正常低病毒载量组26例、肝功能异常低病毒载量组16例。另收集健康对照组21例。检测各项指标,统计并分析数据。结果:慢性HBV感染组外周血CXCR5^+CD_8^+T细胞水平(2.24±0.66)高于健康对照组(0.41±0.12);肝功能正常感染组外周血CXCR5^+CD_8^+T细胞水平(2.77±0.45)高于肝功能异常感染组(1.82±0.48);低病毒载量组外周血CXCR5^+CD_8^+T细胞水平(2.75±0.39)高于高病毒载量组(1.62±0.31),且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:CXCR5^+CD_8^+T细胞在慢性HBV感染进程中起抗病毒作用,进一步深入研究CXCR5^+CD_8^+T细胞的相关特点,可为治疗慢性HBV感染提供新方法。

血液IFN-γ、IL-21、CXCR5及CD8^+T淋巴细胞与HIV感染病程进展的相关性

目的:探讨血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-21(IL-21)、趋化因子CXCR受体5(CXCR5)水平及血液CD8^+T淋巴细胞数与HIV感染病程进展的相关性。方法:HIV抗体确诊阳性病人75例为研究组,根据血液CD4^+T淋巴细胞计数分为A组(CD4^+T<200个/μL)、B组(CD4^+T200~500个/μL)及C组(CD4^+T>500个/μL),另选取同期健康体检者25例为对照组;研究组于抗反转录病毒治疗(ART)前1天、ART后3个月时、健康对照组体检时采取空腹静脉血,采用流式细胞术检测CD4^+T、CD8^+T淋巴细胞计数,采用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测血清IFN-γ、IL-21及CXCR5水平;采用Pearson相关分析HIV感染者各组所测指标与该疾病病程的相关性。结果:ART前IFN-γ、CXCR5及IL-21的水平比较,随着CD4^+T淋巴细胞计数逐渐降低,所测指标水平逐渐减少,A组<B组<C组,差异有统计学意义(P<0.01);ART后3个月时,各组HIV感染患者血清IFN-γ、CXCR5及IL-21水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);各组HIV感染患者ART后血清IFN-γ、CXCR5及IL-21水平均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.01);Pearson相关分析结果显示,HIV感染患者血清IFN-γ、CXCR5、IL-21水平与CD4^+T淋巴细胞、CD8^+T淋巴细胞计数呈正相关;IFN-γ、CXCR-5、IL-21水平与艾滋病病毒载量呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HIV感染患者血清IFN-γ、CXCR5、IL-21水平与其疾病进展存在一定的相关性。

类风湿关节炎患者外周血CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞上PD1表达及意义

目的探讨程序性死亡分子1(PD1)在中国人群类风湿关节炎(RA)患者外周血趋化因子受体5(CXCR5)^(-)CD4^(+)T细胞上的表达及临床意义。方法应用流式细胞仪检测82例RA患者和46例健康对照者外周血CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞上PD1表达水平,比较RA组和健康对照组之间CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞上PD1表达水平,分析其与RA实验室检查指标的相关性。结果①RA患者CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达百分比和平均荧光强度(MFI)均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.0001,U=1082;P<0.0001,U=917.5)。②RA患者外周血CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达百分比与类风湿因子(RF)(r_(s)=0.2679,P=0.0229)、升高的RF(r_(s)=0.419,P=0.0011)、升高的anti-CCP抗体(r_(s)=0.2607,P=0.0407)、浆母细胞比例(r_(s)=0.3024,P=0.0293)、疾病活动性评分(DAS28)ESR(r_(s)=0.2447,P=0.0427)呈正相关。③RA患者外周血CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI与淋巴细胞计数(L)(r_(s)=-0.3387,P=0.0020)、L%(r_(s)=-0.3479,P=0.0014)、淋巴细胞与单核细胞比值(LMR)(r_(s)=-0.2637,P=0.0174)呈负相关;与中性粒细胞百分比(N%)(r_(s)=0.3047,P=0.0054)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)(r_(s)=0.3411,P=0.0018)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)(r_(s)=0.2321,P=0.0371)、系统性免疫炎症指数(SII)(r_(s)=0.2880,P=0.0091)、衍生中性粒细胞与淋巴细胞比值(dNLR)(r_(s)=0.3203,P=0.0036)、血沉(ESR)(r_(s)=0.2595,P=0.0193)、视觉模拟评分(VAS)(r_(s)=0.2416,P=0.0439)呈正相关。高活动组RA患者(DAS28-ESR>5.1)CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI高于非高活动组(DAS28-ESR≤5.1),差异有统计学意义(P=0.0407,U=406.0)。结论RA患者外周血CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达异常,与疾病的抗体产生、浆母细胞比例、炎症程度及活动性有关。

扁桃体和外周血CD8+T细胞表达CXCR5和IL-21水平对比分析

目的对比分析扁桃体和外周血单个核细胞(PBMCs)中CD8+T细胞表达CXCR5和IL-21的水平是否存在差异。方法分离扁桃体和正常人PBMCs,四色流式细胞术(FCM)检测扁桃体单个核细胞和PBMCs中CD8+T细胞表达CD69和CXCR5的水平。采用佛波酯(PMA)和离子霉素(Ionomycin)刺激扁桃体单个核细胞和PBMCs后,流式细胞术检测CD8+T细胞表达IL-21的水平。结果与PBMCs中CD8+T细胞相比,扁桃体组织中CD8+T细胞高表达CD69和CXCR5(P<0.05),经PMA+Iono-mycin刺激后,扁桃体CD8+T细胞可检测到IL-21的表达,而PBMCs中CD8+T细胞基本不产生IL-21。结论CD8+T细胞的表型和功能在扁桃体组织和PBMCs中存在差异,扁桃体中CD8+CXCR5+和CD8+IL-21+T细胞的免疫功能有待进一步研究。

肾癌患者中外周血淋巴细胞亚群、T-reg、MDSC的表达及临床意义

目的 采用流式细胞术分析肾癌患者MDSC、T-reg、CD_(3)^(+)CD4^(+)T细胞、CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)T细胞和CD3-CD_(1)^(+)6CD_(5)^(+)6细胞的表达情况,以及各项指标与肾癌进展的相关性,探讨各项指标在肾癌治疗预后中的相关价值。方法 选取2021年9月至2022年11月住院的肾癌患者44例为肾癌组,选取29例健康人作为对照组。清晨,空腹采集3 mL静脉血。所有肾癌患者均已通过组织病理学诊断。采用全血9色荧光11参数流式细胞术检测肾癌患者和健康体检者MDSC、Treg、CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)T细胞、CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)T细胞、CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)T细胞/CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)T细胞比值和CD3-CD_(1)^(+)6CD_(5)^(+)6细胞表达水平。收集患者的临床数据:包括年龄、性别、BMI、临床分期、肿瘤大小、病理类型。结果 肾癌组与对照组之间性别、年龄、BMI差异均无统计学意义(P>0.05)。肾癌组与对照组之间外周血CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)、CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)、CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)/CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)、NK、T-reg、PMN-MDSC、M-MDSC水平差异有统计学意义(P<0.05)。肾癌患者CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)、CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)的表达水平低于对照组(P<0.05),T-reg、PMN-MDSC、M-MDSC的表达水平高于对照组(P<0.05)。肾癌周血中患者外的CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)、CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)、CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)/CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)、NK、T-reg、PMN-MDSC、M-MDSC的表达水平与性别、年龄、BMI、病理学类型水平无显著相关(P>0.05)。CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)T、CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)/CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)、NK与肿瘤大小、临床分期之间无明显相关性(P>0.05),CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)、M-MDSC、PMN-MDSC、Treg与肿瘤大小、临床分期有相关性(P<0.05)。经Logistic回归分析结果显示:外周血CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)淋巴细胞低表达,T-reg、PMN-MDSC、M-MDSC的高表达可能与肾癌患者分期相关(P<0.05)。通过构建ROC曲线结果显示:按照临床分期进行分组,“0”为Ⅰ期、Ⅱ期组,“1”为,Ⅲ期、Ⅳ期组,T-reg、PMN-MDSC、M-MDSC血清指标水平检测肾细胞Ⅲ期、Ⅳ期患者的AUC均>0.70,均有一定的评估价值。T-reg、PMN-MDSC、M-MDSC、M-MDSC+Treg、PMN-MDSC+Treg与参考线比较差异有统计学意义(P<0.05),其中PMN-MDSC+Treg联合检测的差异性最为显著(P<0.05)。结论 肾癌患者与对照组相比CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)T细胞、CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)T、CD3-CD_(1)^(+)6CD_(5)^(+)6细胞有明显降低,CD4/CD8比值升高,PMN-MDSC、M-MDSC和Treg细胞明显升高,提示机体的免疫功能受损。CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)、PMN-MDSC、M-MDSC、T-reg在肿瘤大小、临床分期中表达水平不同,肿瘤直径越大,临床分期越晚,PMN-MDSC、M-MDSC、T-reg表达水平越高。外周血MDSC、T-reg与肾癌临床分期相关,外周血MDSC、T-reg对于肾癌的发生、发展和预后可能有一定的提示意义。

自身免疫性糖尿病患者CD_4^+CD_(25)^+T细胞的变化

目的通过观察自身免疫性糖尿病患者外周血CD4+CD25+T细胞的变化,探讨其在发病中的可能作用。方法流式细胞仪检测20例LADA、20例T1DM、20例T2DM及21例正常对照外周血CD4+CD25+、CD3+CD8+T细胞。结果①LADA、T1DM组外周血CD4+CD25+T细胞低于T2DM、正常对照组(p均<0.05)。②LADA、T1DM患者外周血CD3+CD8+T细胞较T2DM、正常对照组增高(LADAvs正常对照p<0.01,其余p<0.05)。结论自身免疫性糖尿病患者免疫调节性CD4+CD25+T细胞减少,不能有效维持对胰岛自身抗原的耐受;外周细胞毒性CD3+CD8+T细胞增多进而破坏胰岛β细胞,导致自身免疫性糖尿病的发生和发展。

αβ-TCR^+CD3^+CD4^-CD8^-双阴性T细胞:一种新发现的免疫调节T细胞

免疫系统对自身或异体抗原产生免疫耐受的主要机制之一 ,是免疫调节T细胞的抑制性调节反应。此理论已在数种进行器官移植和自身免疫研究的动物模型中被证实。现已明确 ,免疫调节T细胞由多种不同的细胞亚型所组成。最近发现 ,一种新的抗原特异性αβ TCR+ CD4 CD8 免疫调节T细胞 (双阴性T细胞 ,DNT )能够抑制具有相同T细胞受者特异性的CD8+和CD4 + T细胞 ,从而抑制异体皮肤移植的排斥反应。有关DN调节T细胞及其独特抑制机制的研究 ,对于了解受者如何获得针对供体移植器官的特异性耐受 ,及正确理解如何保持对自身抗原的外周免疫耐受 。

无症状期艾滋病HIV感染者CD_4^+ CD_8^+T淋巴细胞检测结果分析

目的分析本地区人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者免疫力被破坏情况,制订相应的艾滋病(AIDS)防治方案。方法对1344例无症状HIV感染者进行CD+4、CD+8T淋巴细胞检测。结果发现18例免疫力极度低下(CD+4<30个/mm3)的处于无症状期的HIV感染者,其CD+8T淋巴细胞值≥(400～800个/mm3)。结论无症状的HIV感染者中存在着免疫力极度低下者,由于高水平的CD+8T淋巴细胞的抗病毒作用而使之处于无症状期,但其免疫系统已严重受损,任何机会性感染都会诱发他们发展为AIDS。测定其CD+4、CD+8T淋细胞作为预见HIV感染状态和进展为AIDS的重要参考指标,具有不可替代的作用。

慢性乙型肝炎患者病程中CD5^+ B细胞及CD4/CD8的变化研究

目的研究CD5+B细胞和CD4/CD8在慢性乙型肝炎发病中的作用,以及他们之间的相关性。方法采用免疫荧光双标记技术和流式细胞仪对48例慢性乙型肝炎患者发病前后周围血中CD4/CD8比例和CD5+B细胞的百分率和37例健康对照者进行比较。结果在慢性乙型肝炎患者发病高峰期周围血CD4/CD8比例显著低于病情恢复期,且和健康对照组比较差异有显著性;而CD5+B细胞在慢性乙型肝炎患者发病高峰期,显著高于健康对照组和慢性乙型肝炎患者恢复期,差异有显著性。结论慢性乙型肝炎的发病和T细胞免疫功能的紊乱相关,而CD5+B可能在乙型肝炎的慢性化机制中发挥作用。

趋化因子受体CCR3、CCR5和CXCR3与自然流产的相关性

目的探讨外周血、脾脏、胸腺趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3与自然流产的关系。方法用双标记流式细胞分析技术检测自然流产模型组小鼠(CBA/J×DBA/2,n=14)、正常妊娠模型组小鼠(CBA/J×BALB/c,n=13)和正常非孕组小鼠(CBA/J,n=11)外周血、脾脏以及胸腺中CD4+T细胞CCR3、CCR5和CXCR3这三类趋化因子受体的表达。结果自然流产模型组外周血CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01),CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05,P<0.01);但三个指标与正常非孕组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。自然流产模型组脾脏CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01),高于正常非孕组(P<0.05);而CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05),但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。自然流产模型组胸腺CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.05),高于正常非孕组(P<0.01);而CXCR3的表达率高于正常妊娠模型组(P<0.05),但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05);CCR5与其他两组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论CD4+T细胞上CCR3、CCR5和CXCR3的表达异常可能在自然流产的发病中起作用。

DLGAP5作为肾透明细胞癌的诊断标志物及其与CD8^(+)T细胞的相关性

目的探讨Discs大同源物关联蛋白5(DLGAP5)表达在肾透明细胞癌(KIRC)中的作用。方法基于癌症基因组图谱(TCGA)分析KIRC中DLGAP5的表达情况与临床参数之间的相关性。应用比例风险(Cox)回归模型和Kaplan-Meier(K-M)分析评估了DLGAP5在KIRC患者中的预后价值。CIBERSORT分析DLGAP5和CD8^(+)T细胞之间的相关性,基因集富集分析(GSEA)方法筛选和DLGAP5表达相关的生物学途径。结果与正常肾脏组织比较,KIRC中DLGAP5的表达呈显著上调。其高表达情况与肿瘤组织的分化程度、病理分期、复发和死亡均显著相关。K-M分析结果表明,DLGAP5高表达与KIRC患者的不良总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)相关,且DLGAP5是OS和PFS的独立预后因子。免疫微环境分析表明,DLGAP5的表达量与多种肿瘤免疫细胞相关,尤其是CD8^(+)T细胞。DLGAP5表达在“细胞周期”“泛素介导的蛋白水解”“蛋白酶体通路”和“T细胞受体信号通路”上显著富集。药敏分析结果显示,高危组患者对阿昔替尼、舒尼替尼更敏感。结论DLGAP5是KIRC的一种潜在生物标志物,与KIRC的诊断与预后显著相关,这将为临床的诊断与治疗提供新的研究方向。

剔除CCR5基因供者小鼠细胞加重急性移植物抗宿主疾病

目的评价供者CCR5在经过强化预处理的骨髓移植动物模型受者体内的作用,为异基因造血干细胞移植的临床应用提供科学依据。方法经过致死剂量照射的BALB/C小鼠接受异基因C57BL/6小鼠骨髓移植。根据回输的细胞不同分为4组:1)B6 CCR5 KO组,受者接受C57BL/6 CCR5-/-小鼠骨髓和脾脏细胞;2)B6 WT组,受者接受野生型C57BL/6小鼠骨髓和脾脏细胞;3)B6 CCR5 KO BMC组,受者只接受C57BL/6 CCR5-/-小鼠骨髓细胞;4)B6 WT BMC组,受者只接受野生型C57BL/6小鼠骨髓细胞。结果与B6 WT组比较,B6 CCR5 KO组小鼠以更快的速度死于急性移植物抗宿主疾病(GVHD);其受者体内的CD8+T细胞大量增生;T细胞恢复后产生更多的干扰素-γ(INF-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),T细胞有丝分裂原刀豆素水平处于较高水平,进一步促进T细胞增生。组织学检测提示移植剔除CCR5基因受者细胞的小鼠肾脏出现病理损伤,肝脏存在更为严重的病理变化。结论剔除CCR5基因的异基因骨髓移植使GVHD发病率增加,供者CD8+T细胞在受者体内增生加重肝肾损害。提示CCR5在异基因骨髓移植中起着重要作用。

剔除CCR5基因供者小鼠细胞加重急性移植物抗宿主疾病

目的评价供者CCR5在经过强化预处理的骨髓移植动物模型受者体内的作用,为今后的异基因造血干细胞移植的临床应用提供科学依据。方法经过致死剂量照射的BALB/C小鼠接受异基因C57BL/6小鼠骨髓移植。根据回输的细胞不同分为4组:B6CCR5KO组,受者接受C57BL/6CCR5-/-小鼠骨髓和脾脏细胞;B6WT组,受者接受野生型C57BL/6小鼠骨髓细胞;B6CCR5KOBMC组,受者只接受C57BL/6CCR5-/-小鼠骨髓细胞;B6WTBMC组,受者只接受野生型C57BL/6小鼠骨髓细胞。结果较之B6WT组,B6CCR5KO组小鼠以更快的速度死于急性GVHD;其受者体内的CD8+T细胞更大量的增殖;其T细胞恢复后产生更多的IFN-γ和TNF-α,并且由于其T细胞有丝分裂原刀豆素水平处于较高水平从而进一步促进T细胞增殖,提示CCR5的作用之一是下调参与排异反应的供者CD8+T细胞的增殖。组织学评价提示移植剔除CCR5基因受者细胞的小鼠肾脏出现了病理损伤并且肝脏存在更为严重的病理变化。结论剔除CCR5基因的异基因骨髓移植使GVHD发病率增加,供者CD8+T细胞在受者体内增殖增加以及肝肾损害加重,提示CCR5在异基因骨髓移植中起着重要作用。

HIV感染者外周血CXCR5+CD4^(+)T细胞水平与HIV病毒载量相关性

目的研究外周血CXCR5+CD4^(+)滤泡辅助性T细胞(follicular helper T,TFH)水平与HIV感染者血浆HIV病毒载量的相关性。方法纳入2019年1月—2020年12月期间青海省第四人民医院收治的100例HIV感染者,根据CD4^(+)T淋巴细胞计数分为A组(CD4^(+)T淋巴细胞计数<200/μL)23例和B组(CD4^(+)T淋巴细胞计数200~<500/μL)77例,以同期行健康体检80名健康者为对照组。分别检测HIV感染者外周血中HIV病毒载量、CD4^(+)T淋巴细胞计数和TFH水平以及健康对照组CD4^(+)T淋巴细胞计数以及TFH水平,并进行相关性分析。结果A组血浆HIV病毒载量为(4.70±1.13)log/mL显著高于B组(2.74±0.74)log/mL(P<0.05)。A、B和健康对照组CD4^(+)T淋巴细胞计数分别为(113.64±23.44)/μL、(334.10±31.52)/μL和(995.41±49.23)/μL,三者比较差异有统计学意义(P<0.05)。A、B和健康对照组TFH细胞计数绝对值分别为(18.63±5.67)/μL、(59.35±13.73)/μL和(194.85±25.78)/μL,A、B组均低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);A、B和健康对照组TFH细胞百分比分别为(15.83±4.05)%、(17.57±5.08)%和(19.59±4.25)%,A、B组均低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,HIV病毒载量与CD4^(+)T淋巴细胞计数以及TFH细胞计数呈负相关(P<0.05)。结论HIV感染者外周血CD4^(+)T淋巴细胞计数和TFH计数与HIV病毒载量呈负相关,且TFH计数可作为病情诊断和预后评估的重要指标,并有望成为HIV感染免疫治疗的新靶标。

结核性胸膜炎胸水CD4^+与CD8^+ T细胞的TCR和CDR3谱型分析

本研究的目的是了解结核性胸膜炎患者胸水中CD4^＋、CD8^＋T细胞聚集情况，并建立高效、灵敏的TCRα和β链多重PCR扩增方法，扩增出其特异性CD4^＋、CD^＋T细胞的TCRα和β链全长编码序列，研究病变局部特异性克隆增殖TCR的重排特点以及CDR3（complementarity-determining region 3）谱型，可供构建结核分枝杆菌（Mtb）特异反应性TCR四聚体参考。

CD5^+CD19^+B细胞在乙型肝炎病毒慢性感染中对CD8+细胞的作用和机制

目的观察CD5^+CD19^+B细胞在体外是否具有分泌IL-10的功能,并探讨其在HBV感染过程中对CD8^+细胞的作用和机制。方法纳入2017年7月至2018年6月在南京医科大学附属无锡第二医院确诊的慢性乙型肝炎(乙肝组)23例、肝硬化(肝硬化组)18例患者,以及同期健康对照(健康对照组)19名。通过外周血单个核细胞(PBMC)分离、细胞培养、流式细胞术分析、CD5^+CD19^+B细胞分离等操作,比较3组CD5^+CD19^+B细胞含量较多(占淋巴细胞百分比>6%)的患者比例、CD5^+CD19^+B细胞分泌IL-10的情况和IL-10^+细胞含量较多(占淋巴细胞百分比>4%)的患者比例,分析CD5^+CD19^+B细胞对CD8^+细胞分泌γ干扰素的影响和可能机制。通过对慢性乙型肝炎13例和肝硬化5例患者行肝活组织和免疫组织化学检查,分析CD5^+CD19^+B细胞在人体肝组织中表达情况。统计学分析采用卡方检验和Fisher确切概率法。结果肝硬化组中CD5^+CD19^+B细胞含量较多的患者比例高于健康对照组(8/18比2/19),差异有统计学意义(Fisher确切概率法,P=0.029)。健康对照组(10名)、乙肝组(23例)、肝硬化组(18例)的CD5^+CD19^+B细胞分别占IL-10^+细胞的81.6%、82.3%、70.1%,IL-10^+细胞含量较多的患者分别为2、7和2例,3组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。在脂多糖刺激培养48 h后,健康对照组(10名)CD8^+γ干扰素^+细胞占淋巴细胞百分比与乙肝组(10例)、肝硬化组(10例)比较(10.73%比7.05%和9.52%)差异均无统计学意义(P均>0.05);剔除CD5^+CD19^+B细胞后,健康对照组(10名)、乙肝组(10例)和肝硬化组(10例)中分别有5、4、4例患者CD8^+γ干扰素^+细胞占淋巴细胞百分比升高。添加IL-10受体阻滞剂后,PBMC中CD8^+γ干扰素^+占淋巴细胞百分比较添加IL-10受体阻滞剂前升高(7.23%比6.87%)。肝活组织标本免疫组织化学分析结果显示,CD4^+和CD8^+细胞在患者肝小叶汇管区强表达,CD5^+和CD19^+细胞较少表达。结论CD5^+CD19^+B细胞在HBV慢性感染的进展过程中并未体现出明显数量和功能上的差异,但对CD8^+细胞分泌γ干扰素的能力具有抑制作用,并且可能是通过分泌IL-10而不是通过细胞间的直接接触实现。