靶向抑制CXCR7基因表达对结肠癌生长的影响

目的探讨靶向抑制CXCR7基因表达对人结肠癌荷瘤裸鼠瘤体生长的影响。方法建立人结肠癌荷瘤鼠模型。将人结肠癌荷瘤裸鼠随机分为3组,治疗组:瘤体内注射LV-CXCR7shRNA 50μl;阴性对照组:瘤体内注射LV-shRNA negative control 50μl;空白对照组:瘤体内注射PBS 50μl。24天后测量瘤体的体积;处死动物,剥离瘤体,测量其重量。采用Westrn Blotting方法测定瘤体组织中CXCR7蛋白表达水平。结果治疗组瘤体体积显著缩小(P<0.05)、重量显著减轻(P<0.05)。治疗组瘤体组织中CXCR7蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论靶向抑制CXCR7基因的表达能显著抑制人结肠癌荷瘤裸鼠的瘤体生长,CXCR7是人结肠癌治疗潜在的分子靶标。

靶向干扰CXCR7基因表达对肝癌(HCC)细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨CXCR7基因在不同肝癌细胞系及肝癌组织中的表达情况,并研究靶向抑制CXCR7基因表达对肝癌细胞增殖及凋亡的影响。方法应用Western blot检测不同肝癌细胞系及10例肝癌组织中CXCR7蛋白的表达水平。采用短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术沉默HCCLM3与MHCC97L细胞中CXCR7基因的表达,分别采用Western Blot和qRT-PCR检测shRNA的靶向沉默效果。通过CCK-8增殖实验与Annexin V-FITC/PI细胞双染色研究CXCR7抑制对HCCLM3与MHCC97L增殖及凋亡的影响。结果CXCR7表达水平与肝癌细胞的恶性程度呈正相关,肝癌组织中CXCR7表达水平较癌旁显著升高。实验成功构建了9个慢病毒表达载体,其中CXCR7shRNA-566序列干扰效率最高。增殖实验显示干扰表达组细胞生长速度受到明显抑制(P<0.05);流式细胞仪分析显示干扰CXCR7表达可诱导细胞凋亡的发生。结论 CXCR7表达水平与肝癌恶性程度呈正相关,靶向干扰CXCR7表达可抑制细胞的增殖能力,诱导细胞发生凋亡。

Sdf1-Cxcr4信号在斑马鱼后侧线系统发育中的作用

为了探究Sdf1-Cxcr4信号在斑马鱼(Danio rerio)后侧线系统(Posterior lateral line system,PLLs)发育中的作用,本研究首先通过原位杂交发现斑马鱼cxcr4b在迁移的侧线原基-Ⅰ和原基-Ⅱ中表达,sdf1a在原基迁移路径上表达。进一步构建了由热激启动子控制的cxcr7b过表达转基因斑马鱼,在不同时间点过表达cxcr7b抑制Sdf1-Cxcr4信号。结果表明:相较于野生型斑马鱼,过表达cxcr7b的斑马鱼的原基-Ⅰ和原基-Ⅱ的迁移明显减慢。但体侧中线神经丘的腹部迁移、间生和针脚神经丘的形成不受过表达cxcr7b的影响。本研究为理解鱼类侧线系统发育调控和多样性产生奠定基础。