枇杷有色体特异番茄红素β-环化酶基因的克隆及表达分析

为了解枇杷有色体特异番茄红素β-环化酶基因(CYC-B)的序列及表达特点,本研究以‘大五星’(红肉)和‘川农1-5-9’(白肉)枇杷为材料,采用同源克隆法,从枇杷果实中克隆了类胡萝卜素生物合成途径中关键酶基因之一(CYC-B的c DNA全长序列),运用生物学软件对该序列及推导的氨基酸序列进行相关生物信息学分析,同时利用荧光定量PCR技术探究CYC-B基因在枇杷果实不同发育时期的表达模式。结果显示,该基因全长1579 bp,具有1491 bp的完整开放阅读框,编码496个氨基酸。氨基酸同源性分析表明,该基因编码的氨基酸序列与白梨(XP009377819.1)和苹果(Malus domestica)CYC-B基因(XP008361015.1)的同源性分别高达98%和97%,由此推测这个基因属于枇杷CYC-B基因(EjCYC-B)。荧光定量PCR分析结果表明,随着枇杷果实的发育,EjCYC-B的表达量明显增加,且不同发育阶段EjCYC-B基因的表达存在显著变化;其中,在果皮和果肉中的表达分别在黄熟期和成熟期达到最高峰。因此可以推测,EjCYCB在枇杷类胡萝卜素合成中,参与调控,并存在一定的作用机理,使得枇杷的果皮、果肉在不同发育阶段的呈色不同。本研究结果可为深入认识CYC-B调控类胡萝卜素合成机理提供基础。

B细胞淋巴瘤／白血病-2相关X蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白27在中心型软骨肉瘤组织的表达及临床意义

目的研究中心型软骨肉瘤（Central chondrosarcoma）中B细胞淋巴瘤／白血病12相关X蛋白（bax）及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白27（p27^kipl）蛋白的表达与病理分级及预后的关系，并探讨两者表达的临床意义。方法选取60例确诊的中心型软骨肉瘤患者，术后随访超过5年，按照病理分型及预后对其病理标本分别进行分组，并选用20例非肿瘤软骨标本作为对照，采用免疫组织化学法检测上述标本中bax和p27^kipl蛋白的表达。结果60例中心型软骨肉瘤中，bax蛋白各级别间阳性表达率分别为Ⅰ级90％、Ⅱ级78．9％、Ⅲ级66．7％，差异有统计学意义（P〈0．05），在不同预后组中bax蛋白阳性表达率分别为治愈组80．0％、复发组75．0％、转移组75．0％，差异无统计学意义（P〉0．05）；p27^kipl州蛋白各级别阳性表达率分别为Ⅰ级90％、Ⅱ级70．9％、Ⅲ级61．9％，差异有统计学意义（P〈0．05），在不同预后分组中p27^kipl蛋白阳性表达率分别为治愈组80．4％、复发组66．7％、转移组37．5％，差异亦有统计学意义（P〈0．05）。结论bax及p27^kipl蛋白的表达与中心型软骨肉瘤的病理分级明显相关，但bax不能作为判断预后的指标，而p27^kipl蛋白则可作为判断预后的指标。