CYP2家族表氧化酶在心肌缺血再灌注损伤中的表达及MS-PPOH的抑制性效应

目的：为进一步认识心肌缺血再灌注损伤中的介导因素，本文研究了CYP2家族表氧化酶在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的表达特征及表氧化酶特异性抑制剂MS-PPOH的作用。方法：雄性SD大鼠随机分成5组：假手术组，缺血40min组，缺血／再灌注15min组、60min组和180min组。取缺血心肌，共聚焦法检测超氧化物自由基水平；RT-PCR法测定CYP281／2、2E1、2C6、2J3 mRNA表达；ELISA法检测14，15-二氢二十碳三烯酸（DHET）含量；制备心微粒体，Western blot法检测CYP2C、2J3蛋白水平。结果：缺血再灌注损伤中，超氧化物自由基的水平在再灌注15min达高峰，较假手术组升高110%（P〈0．01）。CYP2C6 mRNA表达上调，于再灌注15min达到峰值（P〈0．05）；CYP2E1 mRNA水平呈时间依赖性降低，再灌注180min降至假手术组的43．9％（P〈0．01）；CYP2B1/mRNA的表达在再灌注不同时间点未见明显差异。CYP2C蛋白于再灌注15min表达上调，较假手术组升高42％（P〈0．05）；CYP2J3蛋白呈时间依赖性表达升高，再灌注180min组较假手术组上升80．7％（P〈0．01）。缺血心肌14，15-DHET含量在再灌注阶段明显升高。MS-PPOHl5 mg／kg除降低血浆CK、LDH活力（P均〈O．05）外，并抑制心肌超氧化物自由基的生成（P〈0．05）、显著降低缺血心肌14，15-DHET含量（P〈0．01），同时明显缩小心肌梗死面积（P〈0．05）。结论：CYP2家族表氧化酶不同亚型在心肌缺血再灌注损伤中变化特征各异。CYP2C6 mRNA和蛋白表达与超氧化物自由基生成呈相关性，提示CYP2C6参与介导心肌缺血再灌注损伤中活性氧的产生。CYP2J3非活性氧的主要来源，本文中CYP2J3蛋白表达上调滞后于超氧化物自由基的生成，提示其升高可能为活性氧促发的反馈性保护机制。表氧化酶抑制剂MS-PPOH能明显减轻心肌缺血再灌注损伤。

花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶在自发性高血压大鼠血压的调节中的作用

背景与目的 花生四烯酸细胞色素P450(CYP)表氧化酶代谢花生四烯酸产生表氧化廿烷酸(EETs),又称为内皮源性超极化因子(EDHFs),在局部微循环的调节中起着重要作用。然而EETs在血压的调节中是否起作用还不清楚。本研究通过对成年自发性高血压大鼠导入花生四烯酸细胞色素表氧化酶基因来观察其血压变化,从而进一步明确EETs在血压调节中的作用。方法:将含人类细胞色素P450表氧化酶CYP2J2 cDNA的真核细胞表达质粒pcDNA.2J2经静脉注射(3mg/kg)入雄性成年自发性高血压大鼠,并以pcDNA3.1对照。然后用尾部血压计测量血压。并在注射后3周和4周时处死动物,检测CYP2J2在不同组织中的表达情况。结果:注射质粒后对照组血压一直无显著性变化,而pcDNA.2J2治疗组大鼠血压显著降低(P<0.05),这一降压效应持续两周以上。Western blotting显示在实验组动物肺、肝和肾的总蛋白中通过特异性抗-CYPP2J2抗体可检测出显著量的人类CYP2J2蛋白的表达。结论:本实验显示对成年自发性高血压大鼠导入人类CYPP2J2基因,使CYP2J2可以在动物组织中高表达,从而引起相对持久的降压作用,这些结果提示花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶通过产生EDHFs参与了动物血压的调节作用。

花生四烯酸细胞色素p450表氧化酶基因对野百合碱诱导大鼠肺动脉高压的治疗作用

目的研究过表达花生四烯酸细胞色素p450表氧化酶基因CYP2J2对野百合碱(MCT)诱导的大鼠原发性肺动脉高压的治疗作用,并对其机制进行初步探讨。方法模型组18只雄性大鼠一次性注射MCT(60 mg/kg·w),对照组18只。三周后分六组:MCT+生理盐水(n=6),MCT +pCB6(n=6),MCT+pCB6-2J2(n=6),生理盐水(n=6),pCB6(n=6),pCB6-2J2(n=6)。两周后,测右室收缩压RVSP和右室肥厚指数RV/(LV+s),western blot检测CYP2J2、Smad4蛋白的表达。结果模型组注射生理盐水、pCB6组RVSP分别为(41.48±0.45)和(38.13±3.68)mm Hg,显著高于正常对照组动物(20.89±3.09)mm Hg,(P<0.05)和模型组注射pCB6-2J2组(29.48±5.67)mm Hg,(P<0.05)。模型组注射生理盐水、pCB6组RV/(LV+S)分别为(0.425±0.08)和(0.358±0.07)显著高于正常对照组动物(0.24±0.03)(P<0.01)和模型组注射pCB6-2J2组(0.28±0.02) (P<0.05)。Western blots显示模型组注射生理盐水、pCB6组Smad4蛋白表达水平均明显低于注射pCB6-2J2组。结论过表达CYP2J2基因显著缓解野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压,降低右室收缩压和减轻右心室肥厚程度,上调了TGFβ信号通道中的Smad4蛋白。

炎症状态对CYP2B6活性改变及其作用机制的研究进展

肝脏细胞色素P450（cytochromeP450，CYP450）氧化酶又称混合功能氧化酶和单加氧酶，广泛存在于动物、植物、微生物的各种组织中，是负责大多数临床药物、环境致癌物、外源毒物及内源活性物质生物转化的主要酶系统，具有重要的药理、生理及病理学意义。CYP450是一类亚铁血红素一硫醇盐蛋白的基因超家族，由不同的基因家族和亚家族组成，其中与药物代谢关系最为密切的主要有CYP1A2、

花生四烯酸细胞色素p450表氧化酶基因对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠IL-6,IL-8的影响

目的观察花生四烯酸色素p450表氧化酶基因CYP2J2过表达对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压大鼠炎症细胞因子IL-6、IL-8、CRP和TNF-α表达的影响,探讨CYP2J2作用于肺动脉高压的机制。方法 :选取8周龄250-280gSD大鼠60只随机分为正常对照组(n=30)和模型组(MCT组)(n=30),模型组注射野百合碱(60mg/kg)造模。三周后分为6组:NS组(n=10),pCDNA3.1(n=10),pCDNA3.1-CYP2J2(n=10),MCT+NS(n=10),MCT+pCDNA3.1(n=10),MCT+pCDNA3.1-CYP2J2(n=10),注射质粒三周后,检测大鼠平均肺动脉压(mPAP),计算右心肥大指数(RVHl=RV/LV+S)。ELISA法检测大鼠血清中IL-6、IL-8、CRP和TNF-α水平。RT-PCR检测大鼠肺组织中IL-6和IL-8的mRNA表达。结果 :模型对照组mPAP、RVHI值、血清IL-6、IL-8、CRP和TNF-α水平及肺组织中IL-6和IL-8的mRNA表达均显著增高,与正常对照组相比有显著性差异(P<0.01);pCDNA3.1-CYP2J2治疗组mPAP、RVHI值、血清IL-6、IL-8、CRP和TNF-α水平及肺组织中IL-6和IL-8的mRNA表达均明显下调(P<0.05),但仍高于正常对照组(P<0.05)。结论花生四烯酸色素p450表氧化酶基因可通过抑制MCT诱导大鼠肺动脉高压模型中肺组织炎性细胞因子的表达、下调大鼠炎性细胞因子的分泌达到对肺动脉高压的治疗作用。