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宁夏汉族Graves病与CYP27B1基因启动子-1260C/A多态性相关性研究 被引量:2
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作者 康毓芝 陈耀平 +4 位作者 杨宝珍 王立斌 吴若芬 师志云 尹琳琳 《宁夏医科大学学报》 2011年第6期540-542,共3页
目的探讨CYP27B1(Cytochromo P450 CYP)基因启动子C-1260A位点多态性与宁夏汉族Graves病(GD)的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction restriction frag-ment length polymorphism,PCR-RFLP)技... 目的探讨CYP27B1(Cytochromo P450 CYP)基因启动子C-1260A位点多态性与宁夏汉族Graves病(GD)的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction restriction frag-ment length polymorphism,PCR-RFLP)技术,分析汉族GD 99例和正常对照83例CYP27B1基因启动子-1260C/A多态性。结果宁夏汉族CYP27B1基因-1260C/A检出GD组与对照组的基因型频率分别为37.37%、53.54%、9.09%和43.37%、40.96%、15.66%,两组差异无统计学意义(χ2=4.19,P>0.05);等位基因频率为64.16%、35.86%和63.86%、43.14%,两组差异无统计学意义(χ2=0.00,P>0.05)。结论 CYP27B1基因1260C/A的与宁夏地区汉族GD无相关性。 展开更多
关键词 GRAVES病 cyp27b1基因 基因多态性
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人CYP27B1真核表达构建及其在293T细胞表达
2
作者 尚书凤 王杨科 +3 位作者 路宏朝 王琦 陈为 张琳 《湖北农业科学》 2016年第13期3486-3489,共4页
CYP27B1是血清活性维生素D_3合成的关键酶,根据Gen Bank报道的序列设计特异引物,以Hep G2细胞的c DNA为模板,扩增CYP27B1的编码区,构建CYP27B1的真核表达载体,在293T细胞表达并检测其催化活性。结果表明,重组表达载体pc DNA-CYP27B1构... CYP27B1是血清活性维生素D_3合成的关键酶,根据Gen Bank报道的序列设计特异引物,以Hep G2细胞的c DNA为模板,扩增CYP27B1的编码区,构建CYP27B1的真核表达载体,在293T细胞表达并检测其催化活性。结果表明,重组表达载体pc DNA-CYP27B1构建成功,pc DNA-CYP27B1及对照质粒pc DNA分别瞬时转染293T细胞。Western blot检测结果表明CYP27B1在293T成功表达。HPLC检测结果显示重组表达的CYP27B1能羟化25(OH)D_3生成1α,25(OH)_2D_3。 展开更多
关键词 cyp27b1 真核表达载体 羟化 HPLC
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衰老大鼠肾上腺皮质VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达变化以及淫羊藿苷的干预作用 被引量:10
3
作者 陈伟 柴艺汇 +4 位作者 管连城 王焕珍 高洁 李文 陈云志 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第2期351-353,共3页
目的:探讨淫羊藿苷对D-半乳糖致衰老大鼠肾上腺皮质VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为6组:对照组,衰老模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组,维生素D组。ELISA法观察大鼠血清25(OH)D_3,1,25(OH)_2... 目的:探讨淫羊藿苷对D-半乳糖致衰老大鼠肾上腺皮质VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为6组:对照组,衰老模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组,维生素D组。ELISA法观察大鼠血清25(OH)D_3,1,25(OH)_2D_3水平,Real-Time QPCR法观察大鼠肾上腺皮质VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达。结果:ELISA结果显示模型组的血清25(OH)D_3与1,25(OH)_2D_3水平均相对对照组降低(P〈0.05),维生素D组与部分淫羊藿苷不同剂量组的血清25(OH)D_3与1,25(OH)_2D_3水平相对衰老模型组上升(P〈0.05)。Real-Time QPCR结果显示相比对照组,模型组大鼠肾上腺皮质CYP27B1与VDR表达下降(P〈0.05),CYP24A1表达上升(P〈0.05);相比模型组,维生素D组与淫羊藿苷不同剂量组的大鼠肾上腺皮质CYP27B1与VDR基因相对模型组表达上升(P〈0.05),CYP24A1则相对下降(P〈0.05)。结论:淫羊藿苷可以通过影响相关基因表达上调衰老大鼠肾上腺皮质的维生素D活化水平。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 肾虚 VDR cyp27b1 CYP24A1
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RAD50、CDHR3、CYP27B1基因多态性与儿童哮喘易感性的关系 被引量:3
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作者 于美丽 马兆越 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第13期59-61,共3页
目的探讨RAD50、CDHR3、CYP27B1基因多态性与儿童哮喘发病风险的关系。方法采用病例-对照的研究方法,对入组的80例哮喘儿童(哮喘组)和80例健康儿童(对照组)应用质谱SNP技术,研究RAD50基因位点rs6871536、CDHR3基因位点rs 6967330、C... 目的探讨RAD50、CDHR3、CYP27B1基因多态性与儿童哮喘发病风险的关系。方法采用病例-对照的研究方法,对入组的80例哮喘儿童(哮喘组)和80例健康儿童(对照组)应用质谱SNP技术,研究RAD50基因位点rs6871536、CDHR3基因位点rs 6967330、CYP27B1基因位点rs10877012的单核苷酸多态性,计算其基因型频率和等位基因频率,并分析基因位点的多态性与儿童哮喘发病风险间的关系。结果哮喘组与对照组rs6871536位点基因型及等位基因频率差异均有统计学意义(P均〈0.05);哮喘组与对照组rs6967330、rs10877012基因型比较差异无统计学意义(P均〉0.05)。突变等位基因C、T与哮喘有相关性,TT、CC型的OR(95%CI)分别为0.407(0.231~0.718)、0.677(0.546~0.839)。结论 RAD50基因rs6871536位点多态性可能与儿童哮喘相关;CDHR3基因rs 6967330位点多态性和CYP27B1基因位点rs10877012位点多态性可能与儿童哮喘无相关性。 展开更多
关键词 哮喘 基因多态性 RAD50 CDHR3 cyp27b1
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CYP27B1在溃疡性结肠炎肠上皮组织中的表达及其与防御素-2的关系 被引量:5
5
作者 麻继臣 张晓岚 +4 位作者 朱芳丽 安杰 田慧 时晓东 姜慧卿 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期507-511,516,共6页
目的:检测人溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)患者结肠黏膜中CYP27B1和HBD-2变化,探讨维生素D在UC发病中的可能机制。方法:选择在河北医科大学第二医院消化内科诊断明确的活动期UC患者35例,应用免疫组织化学方法:、real-time PCR、w... 目的:检测人溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)患者结肠黏膜中CYP27B1和HBD-2变化,探讨维生素D在UC发病中的可能机制。方法:选择在河北医科大学第二医院消化内科诊断明确的活动期UC患者35例,应用免疫组织化学方法:、real-time PCR、western blot方法:测定正常对照、UC患者炎症和非炎症部位CYP27B1和HBD-2的表达和分布。结果:①HBD-2蛋白分布于UC炎症部位上皮细胞胞浆,炎性细胞核中也有表达。HBD-2总体表达在炎症部位较正常对照组显著升高(P<0.01);CYP27B1蛋白在正常组织、UC非炎症部位及炎症部位均表达。在上皮细胞主要位于近隐窝腺腔面细胞膜,在UC炎症部位淋巴细胞核中表达明显,炎症部位较正常对照组显著升高(P<0.05),UC炎症部位结肠上皮HBD-2和CYP27B1的表达呈正相关(r=0.710,P<0.01)。②HBD-2和CYP27B1的蛋白表达结果:显示:UC患者炎症部位二者的表达较正常黏膜均显著升高(P<0.01,P<0.05)。UC炎症部位HBD-2和CYP27B1的蛋白表达呈正相关(r=0.620,P<0.01)。③HBD-2和CYP27B1的mRNA表达结果:显示:UC患者炎症部位二者的表达较正常对照组均显著升高(P<0.01),且UC炎症部位结肠上皮HBD-2和CYP27B1的mRNA水平表达呈正相关(r=0.893,P<0.01)。结论:CYP27B1和HBD-2在病变部位显著高表达且呈正相关,CYP27B1可能参与了维生素D局部活化及调控防御素表达。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 维生素D 25-羟维生素D1α-羟化酶 防御素
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基于VDR及CYP27B1对冠脉通片拆方补肾活血作用靶点研究 被引量:4
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作者 吕楠 沈宇燕 +4 位作者 刘洪斌 王佳 王蕾 张一 杜雪梅 《天津中医药》 CAS 2017年第9期629-633,共5页
[目的]探讨冠脉通片及其拆方基于维生素D受体(VDR)及1α-羟化酶(CYP27B1)对补肾活血的作用。[方法]采用"腺嘌呤+左冠状动脉前降支结扎法"制备肾阳虚心梗模型。将大鼠分为假手术对照组、肾阳虚心梗模型对照组、冠脉通片全方组... [目的]探讨冠脉通片及其拆方基于维生素D受体(VDR)及1α-羟化酶(CYP27B1)对补肾活血的作用。[方法]采用"腺嘌呤+左冠状动脉前降支结扎法"制备肾阳虚心梗模型。将大鼠分为假手术对照组、肾阳虚心梗模型对照组、冠脉通片全方组、补肾拆方组、活血开窍拆方组、维生素D对照组。采用预防性给药,于AMI术前2 d灌胃相应受试物,术后给药5 d,每日1次。检测评价肾阳虚的血清肌酐(Scr)、三碘甲状腺原氨素(T3)、甲状腺素(T4)水平。酶联免疫法测血清活化1,25(OH)_2D_3水平。免疫组化法观察心室肌组织、肾组织VDR、肾组织CYP27B1表达。Western blot法检测心室肌组织、肾组织VDR和肾组织CYP27B1蛋白相对表达量。[结果]冠脉通片全方降低Scr作用明显(P<0.05),升高T3、T4作用明显(P<0.05);可明显升高血清1,25(OH)_2D_3水平(P<0.05)。全方组肾组织CPY27B1蛋白表达增多,全方及补肾组可增加心肌和肾组织中的VDR表达。[结论]冠脉通片可通过CPY27B1和VDR作为核心环节,对其用于肾虚血瘀的补肾活血作用机制提供了基础研究的数据支持。 展开更多
关键词 冠脉通片 VDR CPY27B1 补肾活血
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缺乏维生素D受体激活及CYP27B1代谢调控在心肾综合征中的作用 被引量:4
7
作者 王蕾 孙凤姣 李旭 《天津医药》 CAS 北大核心 2018年第9期1013-1018,共6页
近年来研究发现,缺乏维生素D受体(VDR)激活与心肾综合征的发生发展关系密切。循环血液中90%以上的活性维生素D,即1,25(OH)2D3必须经由肾脏25-羟基维生素D-1α-羟化酶(CYP27B1)的羟化作用产生,从而发挥生物学效应。心肾综合征时,CYP27B1... 近年来研究发现,缺乏维生素D受体(VDR)激活与心肾综合征的发生发展关系密切。循环血液中90%以上的活性维生素D,即1,25(OH)2D3必须经由肾脏25-羟基维生素D-1α-羟化酶(CYP27B1)的羟化作用产生,从而发挥生物学效应。心肾综合征时,CYP27B1酶受损,循环内分泌1,25(OH)2D3生成不足,其与心脏和肾脏VDR结合减少,从而加重心肾损伤。因此,CYP27B1和VDR可能成为联系肾脏病和心血管疾病的重要靶标。本文就维生素D/VDR和CYP27B1的代谢调控在心肾综合征中的作用进行综述,以期为心肾综合征的治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 维生素D 骨化三醇 受体 骨化三醇 25-羟基维生素D-1α-羟化酶 心肾综合征
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CYP27B1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其与预后的关系 被引量:1
8
作者 郭俊峰 张纲 谭颖徽 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2020年第10期930-933,共4页
目的:探讨CYP27B1在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及其与预后的关系。方法:在TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库中下载372例OSCC患者数据作为TCGA数据库研究队列,使用edgR算法计算OSCC患者的癌组织和... 目的:探讨CYP27B1在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及其与预后的关系。方法:在TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库中下载372例OSCC患者数据作为TCGA数据库研究队列,使用edgR算法计算OSCC患者的癌组织和癌旁组织中CYP27B1表达的差异,并进行分析;在新桥医院(陆军军医大学第二附属医院)口腔科选取146例OSCC患者作为新桥医院研究队列,将OSCC患者的癌组织和癌旁组织的临床石蜡组织切片进行免疫组织化学染色,检测CYP27B1的表达,按照CYP27B1表达结果的中位值将OSCC患者分为CYP27B1高表达组和CYP27B1低表达组,并结合患者临床资料分析CYP27B1表达与预后的关系。结果:TCGA数据库队列与新桥医院队列中CYP27B1在OSCC组织中呈低表达,Kaplan-Meier生存分析显示CYP27B1高表达组总体生存时间(overall survival,OS)显著高于低表达组,且具有统计学差异(P<0.05)。结论:CYP27B1在OSCC患者癌组织中低表达,可能与OSCC的发生、发展相关,并影响预后。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 cyp27b1 预后
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Effect of Danggui Buxue Decoction on the expression of VDR,CYP27B1,CYP19,and ERβin the ovary of osteoporosis rats
9
作者 Zong-Ling Wang Yi-Hui Chai +4 位作者 Meng-Zhi Zhang Lian-Cheng Guan Hui-Min Ren Zhong Qin Yun-Zhi Chen 《TMR Aging》 2020年第3期80-88,共9页
Investigate the effects of the classic ancient prescription Danggui Buxue decoction on the vitamin D receptor,25-hydroxyvitamin D-1αhydroxylase,estrogen synthesis aromatase and estrogen receptorβmRNA and protein exp... Investigate the effects of the classic ancient prescription Danggui Buxue decoction on the vitamin D receptor,25-hydroxyvitamin D-1αhydroxylase,estrogen synthesis aromatase and estrogen receptorβmRNA and protein expression in osteoporotic rats.The classic ancient prescription Danggui Buxue decoction may affect the levels of estrogen synthesis aromatase,estrogen receptorβ,FSH,and Klotho in the body through regulating the expression of ovarian vitamin D receptor and 25-hydroxyvitamin D-1αhydroxylase to achieve the therapeutic effect of retinoic acid-induced osteoporosis in rats.The results of this experiment showed that compared with the control group,the serum FSH level of the model group was significantly increased,the Klotho level was decreased,the relative expression of ovarian tissue CYP27B1,CYP19,ERβmRNA and protein was significantly reduced,and the relative expression of vitamin D receptor mRNA and protein was significantly rise.After the intervention of the classic ancient prescription Danggui Buxue decoction and vitamin D,compared with the model group,the serum FSH content decreased,Klotho content increased,ovarian CYP27B1,CYP19,ERβmRNA and protein expression significantly increased,ovarian vitamin D receptor mRNA and protein expression significantly decreased.Based on the effect of the classic ancient prescription Danggui Buxue decoction on the vitamin D system,combined with the results of this experiment,it is concluded that the classic ancient prescription Danggui Buxue decoction may affect the levels of CYP19,ERβ,follicle-stimulating hormone,and Klotho in the body by regulating the expression of ovarian VDR and CYP27B1.The specific mechanism of the treatment of ovarian injury in osteoporosis rats needs further study.Background:Investigate the effects of the classic ancient prescription Danggui Buxue decoction on the vitamin D receptor,25-hydroxyvitamin D-1αhydroxylase,estrogen synthesis aromatase and estrogen receptorβmRNA and protein expression in osteoporotic rats.Methods:The experiment was divided into 6 groups:control group,model group(retinoic acid 100 mg/kg/d),vitamin D group(calcitriol 30 ng/kg/d),the classic ancient prescription Danggui Buxue decoction high,middle and low dose group(7.2 g/kg/d,3.6 g/kg/d,1.8 g/kg/d).Enzyme-linked immunosorbent assay method was used to detect the effects of different doses of the classic ancient prescription Danggui Buxue decoction on serum follicle-stimulating hormone and Klotho levels in retinoic acid-induced osteoporosis rats;real-time fluorescence quantitative PCR was used to detect the classic ancient prescription Danggui Buxue decoction on retinoic acid effect of ovary vitamin D receptor,25-hydroxyvitamin D-1αhydroxylase,estrogen synthesis aromatase,estrogen receptorβmRNA expression in induced osteoporosis rats;Western-blot detection of the classic ancient prescription Danggui Buxue decoction on retinoic acid-induced osteoporosis ovary vitamin D receptor,CYP27B,estrogen synthesis aromatase,estrogen receptorβprotein The impact of expression.Results:Compared with the control group,the serum follicle-stimulating hormone level of the model group was significantly increased,the Klotho level was decreased,the relative expression levels of 25-hydroxyvitamin D-1αhydroxylase,estrogen synthesis aromatase,estrogen receptorβmRNA and protein in the ovarian tissue were significantly decreased,and the relative expression levels of vitamin D receptor mRNA and protein were significantly increased.After the intervention of the classic ancient prescription Danggui Buxue decoction and vitamin D,compared with the model group,the serum follicle-stimulating hormone content decreased,Klotho content increased,ovarian 25-hydroxyvitamin D-1αhydroxylase,estrogen synthesis aromatase,estrogen receptorβmRNA and protein expression significantly increased,ovarian vitamin D receptor mRNA and protein expression significantly decreased.Conclusion:The classic ancient prescription Danggui Buxue decoction may affect the levels of estrogen synthesis aromatase,estrogen receptorβ,follicle-stimulating hormone,and Klotho in the body through regulating the expression of ovarian vitamin D receptor and 25-hydroxyvitamin D-1αhydroxylase to achieve the therapeutic effect of retinoic acid-induced osteoporosis in rats. 展开更多
关键词 Danggui Buxue decoction OSTEOPOROSIS Ovarian function VDR cyp27b1 CYP19 ERΒ
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CYP27B1基因启动子多态性与自身免疫性甲状腺疾病的相关性 被引量:6
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作者 杨静 熊丰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期606-608,共3页
目的探讨CYP27B1基因启动子多态性与自身免疫性甲状腺疾病的相关性。方法用PCR-RFLP的方法在158例中国重庆汉族Graves病(GD)患儿、174例桥本甲状腺炎(HT)患儿和172例正常对照中检测CYP27B1启动子区域-1260位点的基因型。结果该位点基因... 目的探讨CYP27B1基因启动子多态性与自身免疫性甲状腺疾病的相关性。方法用PCR-RFLP的方法在158例中国重庆汉族Graves病(GD)患儿、174例桥本甲状腺炎(HT)患儿和172例正常对照中检测CYP27B1启动子区域-1260位点的基因型。结果该位点基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。正常对照组CYP27B1启动子区域-1260A/C的3种基因型频率和等位基因频率分别为CC34.3%、AA19.2%、AC46.5%、C57.6%、A42.4%;GD组相应为48.1%、13.3%、38.6%、67.4%、32.6%;HT组相应为47.1%、10.3%、42.5%、68.4%、31.6%。CYP27B1-1260位点基因型和等位基因的频率分布在疾病组与对照组之间存在有显著性的差异(GD/对照组:基因型频率比较χ2=6.80,P<0.05,等位基因频率比较χ2=6.79,P<0.05;HT/对照组:基因型频率比较χ2=8.39,P<0.05,等位基因频率比较χ2=8.71,P<0.05)。结论中国汉族人群中CYP27B1启动子区域-1260位点的基因多态性与GD及HT易感性有关,其中C为易感基因位点。 展开更多
关键词 CYP2781基因 多态性 限制性片段长度 自身免疫 甲状腺疾病
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淫羊藿苷对D-半乳糖致衰老大鼠肾脏VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达的影响 被引量:13
11
作者 陈伟 柴艺汇 +4 位作者 管连城 王焕珍 高洁 李文 陈云志 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1572-1574,共3页
目的目的:探讨淫羊藿苷对D-半乳糖致衰老大鼠肾脏VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为6组:对照组,衰老模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组,维生素D组。Elisa法观察大鼠血清25(OH)D_3与1,25(OH)_2D_3水平,R... 目的目的:探讨淫羊藿苷对D-半乳糖致衰老大鼠肾脏VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为6组:对照组,衰老模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组,维生素D组。Elisa法观察大鼠血清25(OH)D_3与1,25(OH)_2D_3水平,Real-Time QPCR法观察大鼠肾脏VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达。结果Elisa结果显示模型组的血清25(OH)D_3与1,25(OH)_2D_3水平均相对对照组降低(P<0.05),维生素D组与部分淫羊藿苷不同剂量组的血清25(OH)D_3与1,25(OH)_2D_3水平相对衰老模型组上升(P<0.05)。Real-Time QPCR结果显示相比对照组,模型组大鼠肾脏CYP27B1与VDR表达下降(P<0.05),CYP24A1表达上升(P<0.05);相比模型组,维生素D组与淫羊藿苷不同剂量组的大鼠肾脏CYP27B1与VDR基因相对模型组表达上升(P<0.05),CYP24A1则相对下降(P<0.05)。结论淫羊藿苷可以干预衰老大鼠维生素D活化表达水平,提示淫羊藿苷抗衰老作用可能与维生素D轴有关。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 衰老 维生素D VDR cyp27b1 CYP24A1
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CYP27B1基因突变所致维生素D依赖性佝偻病ⅠA型患儿临床特征与基因分析 被引量:1
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作者 杜牧 陈晓波 +2 位作者 宋福英 刘子勤 钱坤 《中华妇幼临床医学杂志(电子版)》 CAS 2022年第2期175-184,共10页
目的探讨维生素D依赖性佝偻病(VDDR)ⅠA型患儿的临床特征,以及CYP27B1基因突变情况。方法选择2019年3月至12月,于首都儿科研究所附属儿童医院内分泌科确诊为VDDRⅠA型的2例患儿(患儿1、2)为研究对象。采用回顾性研究方法,①分析其临床表... 目的探讨维生素D依赖性佝偻病(VDDR)ⅠA型患儿的临床特征,以及CYP27B1基因突变情况。方法选择2019年3月至12月,于首都儿科研究所附属儿童医院内分泌科确诊为VDDRⅠA型的2例患儿(患儿1、2)为研究对象。采用回顾性研究方法,①分析其临床表现,基因检测、治疗、转归及随访结果等。②对2例患儿检出的新突变,采用MutationTaster、SIFT、PROVEAN、Polyphen-2等蛋白质功能预测软件,预测该基因新突变的致病性。按照2015年美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)制定的《ACMG遗传变异分类标准与指南》,对该基因新突变致病性进行分级。③通过比对8种灵长类及100种脊椎动物CYP27B1基因编码蛋白质序列,判断新突变位点在不同物种中的保守性。④利用Rosetta软件,对CYP27B1基因新突变后编码蛋白质建立同源3D模型,分析突变前、后蛋白质结构。本研究经首都儿科研究所伦理委员会批准(审批文号:首都儿科研究所SHERLL2020003)。结果①一般临床资料:患儿1、2均为男性患儿,年龄分别为5岁7个月和1岁8个月,分别因为"双下肢畸形3年"及"走路始步态不稳8个月",于病例收集医院住院治疗。②入院查体:身高均低于同性别、年龄健康儿童,均存在肋下缘、双膝关节外翻,双下肢呈"X"型。患儿1存在方颅畸形、"鸡胸"、肋骨"串珠"样改变。③入院时实验室及影像学检查:血钙、磷均降低,25-羟维生素D3[25(OH)-D3]稍低(患儿1)或正常(患儿2),碱性磷酸酶(ALP)、甲状旁腺素(PTH)均明显升高。腕、膝关节X射线摄片检查均可见尺、桡骨干骺端先期钙化带不规则,放射冠征、杯口征等佝偻病特征性改变。④基因检测:患儿1存在CYP27B1基因c.1358G>A与c.184C>T复合杂合突变;患儿2存在c.1325_1326insCCCACCC纯合突变,均遗传自其父母,被确诊为VDDRⅠA型。⑤治疗及随访:对2例患儿采取骨化三醇及钙剂口服治疗后分别随访15个月和22个月,佝偻病相应症状、体征好转,出现追赶生长,实验室及影像学指标恢复正常,可见干骺端光整。⑥新突变致病性及其分级:CYP27B1基因c.184C>T在人类基因突变数据库(HGMD)(http://www.hgmd.cf.ac.uk)中尚未收载,为新突变。采用MutationTaster、SIFT、PROVEAN、Polyphen-2蛋白质功能预测软件分析发现,该新突变具有致病性;根据《ACMG遗传变异分类标准与指南》,该新突变被判断为可能致病性突变。⑦新突变位点在不同物种中的保守性分析:对CYP27B1基因该新突变位点编码蛋白质序列,在8种灵长类及100种脊椎动物中的保守性分析发现,该位点高度保守。⑧新突变前、后编码蛋白质三维结构分析:采用Rosetta软件对CYP27B1基因c.184C>T突变前、后编码蛋白质同源3D模型发现,该位点突变后,第62位氨基酸由组氨酸突变成酪氨酸后,增加了与第491位苏氨酸残基的极性相互作用,可能引起编码蛋白质结构变化。结论对于血钙、磷均降低,伴有PTH升高,25(OH)-D3非明显降低患儿,需考虑VDDRⅠA型可能,应采取CYP27B1基因检测确诊。如果CYP27B1基因c.184C>T突变后续被HGMD证明是新突变,则本研究将丰富CYP27B1基因突变类型。 展开更多
关键词 佝偻病 维生素D依赖性佝偻病ⅠA型 25-羟化维生素D3 1-α-羟化酶 维生素D 骨化三醇 cyp27b1基因 基因突变 碱性磷酸酶 甲状旁腺素 患儿
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低氧对妊娠SD大鼠维生素D代谢的影响及可能机制
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作者 王雪妮 陈文静 +1 位作者 李丹 李建华 《中国高原医学与生物学杂志》 CAS 2024年第2期90-97,共8页
目的探讨低氧对妊娠SD大鼠维生素D代谢的影响及可能机制。方法选择成年SD雌性大鼠20只,将其分为常氧组(Normoxia组,8只)和低氧组(Hypoxia组,12只),按雌雄比例2∶1将10只成年SD雄性大鼠分配到以上两组,与雌鼠合笼饲养建立妊娠动物模型。... 目的探讨低氧对妊娠SD大鼠维生素D代谢的影响及可能机制。方法选择成年SD雌性大鼠20只,将其分为常氧组(Normoxia组,8只)和低氧组(Hypoxia组,12只),按雌雄比例2∶1将10只成年SD雄性大鼠分配到以上两组,与雌鼠合笼饲养建立妊娠动物模型。应用ELISA法检测雌鼠血清维生素D水平;采用Real-time qPCR技术分析与肝、肾、胎盘维生素D代谢相关基因的表达情况;通过常规染色和免疫组织化学技术对胎盘进行形态学观察、分析。结果Normoxia组血清维生素D代谢活性物25(OH)2D3含量低于Hypoxia组,差异有统计学意义(P<0.05),即Hypoxia组代谢水平加快;Real-time qPCR结果显示,在低氧条件下,肝的CYP2R1基因表达量上调(P<0.05),肾的CYP27B1基因表达量上调(P<0.05),肾的CYP24A1基因表达量下调(P<0.05),胎盘的CYP2R1、CYP27B1基因表达量在两组无明显差异(P>0.05);胎盘的免疫组织化学结果显示,与Normoxia组相比,Hypoxia组CYP2R1、CYP27B1蛋白在胎盘的表达增加(P<0.05),而CYP24A1蛋白表达下降(P<0.05),且三种蛋白主要在胎盘滋养层细胞中表达;从胎盘染色切片的结果可知,Normoxia组和Hypoxia组在胎盘的形态上无明显改变。结论低氧可加快妊娠母体维生素D的代谢,其机制可能是由于低氧增加肝、肾、胎盘维生素D的代谢,同时破坏CYP24A1介导的维生素D负反馈机制;胎盘滋养层细胞中存在维生素D代谢系统和自分泌调节系统,且滋养层细胞可能是妊娠母体1,25(OH)2D3的来源。 展开更多
关键词 低氧 妊娠 维生素D CYP2R1 cyp27b1 CYP24A1 实时荧光定量聚合酶链式反应 大鼠
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GC和CYP27B1基因多态性与汉族人群尘螨致敏的持续性变应性鼻炎的关联研究 被引量:4
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作者 田慧琴 吴中飞 +1 位作者 陆莹 程雷 《山东大学耳鼻喉眼学报》 CAS 2019年第3期71-78,共8页
目的探讨维生素D代谢相关的维生素D结合蛋白基因(GC)及1α-羟化酶基因(CYP27B1)的多态性与汉族人群变应性鼻炎(AR)易感性的关联。方法应用病例-对照研究,纳入苏皖汉族人群中尘螨致敏的持续性AR患者564例和健康对照583例。选取GC及CYP27B... 目的探讨维生素D代谢相关的维生素D结合蛋白基因(GC)及1α-羟化酶基因(CYP27B1)的多态性与汉族人群变应性鼻炎(AR)易感性的关联。方法应用病例-对照研究,纳入苏皖汉族人群中尘螨致敏的持续性AR患者564例和健康对照583例。选取GC及CYP27B1的单核苷酸多态性(SNPs)位点共8个,分别为GC的rs4588、rs7041、rs3733359、rs16847024、rs843008、rs1565572,rs11939173和CYP27B1的rs10877012。采用TaqMan法对两组研究对象的候选位点SNPs进行分析。结果 GC的7个位点及CYP27B1的rs10877012位点与持续性AR的易感性均未发现有统计学关联。但对病例组进行年龄、性别、是否合并哮喘及总IgE水平的高低分层后发现,GC的rs16847024位点中,年龄≥17岁的基因型CT(调整OR=0.62,95%CI=0.41~0.94)和CT/TT(调整OR=0.62,95%CI=0.42~0.90)、男性的基因型CT/TT(调整OR=0.68,95%CI=0.48~0.96)、不伴哮喘的基因型CT(调整OR=0.70,95%CI=0.52~0.95)和CT/TT(调整OR=0.72,95%CI=0.54~0.97),以及总IgE水平较低者的基因型CT(调整OR=0.70,95%CI=0.52~0.95)和CT/TT(调整OR=0.71,95%CI=0.53~0.94)与野生基因型CC相比,均可降低持续性AR的发病风险。GC和CYP27B1的基因交互作用分析发现,涉及GC基因两个位点(rs3733359和rs1565572)的模型具有统计学意义(P=0.001),而同时涉及两个基因位点的模型均未发现统计学意义。结论维生素D代谢相关基因GC的rs16847024位点与汉族人群尘螨致敏的持续性AR的易感性关联可能受患者年龄、性别、是否合并哮喘及总IgE水平的影响。GC基因rs3733359位点和rs1565572位点在持续性AR的遗传学发病机制中可能存在联合作用。 展开更多
关键词 变应性鼻炎 GC基因 cyp27b1基因 单核苷酸多态性 遗传学关联研究
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左归降糖益肾方对糖尿病肾病MKR鼠肾组织VDR、CYP27B1表达的影响 被引量:8
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作者 陈聪 陈家旭 +5 位作者 喻嵘 王安军 周哲 刘炽鉴 李芊芊 邬阿飞 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期5665-5669,共5页
目的:探讨左归降糖益肾方对糖尿病肾病(DN)MKR鼠肾组织VDR、CYP27B1表达的影响。方法:8周龄MKR鼠随机分为假手术组、模型组(高脂喂养联合单侧肾切除)、中药(左归降糖益肾方)组、阳性药物组(格列喹酮片与盐酸贝那普利片),每组15只;正常... 目的:探讨左归降糖益肾方对糖尿病肾病(DN)MKR鼠肾组织VDR、CYP27B1表达的影响。方法:8周龄MKR鼠随机分为假手术组、模型组(高脂喂养联合单侧肾切除)、中药(左归降糖益肾方)组、阳性药物组(格列喹酮片与盐酸贝那普利片),每组15只;正常组选取同龄C57鼠10只。造模8周后灌胃给药,治疗8周。留取尿标本,心脏采血处死各组小鼠。电化学法检测空腹血糖,常规生化法检测尿蛋白含量;取新鲜肾组织,实时荧光定量PCR检测肾组织VDR、CYP27B1 mRNA的表达水平;Western blot法检测肾组织VDR、CYP27B1蛋白的表达水平;HE及电镜观察肾组织病理变化。结果:与模型组比较,中药组能升高DN小鼠体质量(P<0.05),降低肾质量、肾肥大指数、空腹血糖、尿蛋白含量、血清肌酐、尿素氮含量(P<0.01);上调VDR、CYP27B1的mRNA及蛋白的表达水平(P<0.01);改善肾组织病理损伤结构。结论:左归降糖益肾方可以通过调控VDR、CYP27B1的表达水平,改善肾组织病理结构损伤。 展开更多
关键词 左归降糖益肾方 MKR鼠 糖尿病肾病 VDR cyp27b1
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大鼠骨髓间充质干细胞VDR和CYP27B1的表达
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作者 何琳琳 兰飞 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期447-450,426,共5页
[目的]探讨大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BM-MSCs)中维生素受体(vitamin D receptor,VDR)和CYP27B1的表达。[方法]首先以全骨髓贴壁法分离得到大鼠BM-MSCs,通过成骨和成脂诱导分化鉴定其分化潜能,... [目的]探讨大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BM-MSCs)中维生素受体(vitamin D receptor,VDR)和CYP27B1的表达。[方法]首先以全骨髓贴壁法分离得到大鼠BM-MSCs,通过成骨和成脂诱导分化鉴定其分化潜能,再通过RT-PCR检测大鼠BM-MSCs中VDR和CYP27B1的mRNA表达。[结果]从大鼠骨髓中分离得到具有成骨和成脂分化潜能的BM-MSCs,VDR和CYP27B1基因在大鼠BM-MSCs中有表达,其相对于β-actin的mRNA值分别为1.10和0.39。[结论]这为维生素D3在大鼠BM-MSCs的自分泌和旁分泌代谢研究奠定基础,为维生素D3治疗骨质疏松的研究提供理论依据。 展开更多
关键词 大鼠骨髓间充质干细胞 维生素D3 维生素D受体(vitamin D RECEPTOR VDR) cyp27b1
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Vitamin D_3 increased intestinal Na/Pi-Ⅱb and CYP27B1 mRNA level in rats fed low-phosphorus diets 被引量:1
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作者 Manhu Cao Rejun Fang +1 位作者 Juan Chen Jianhua He 《Animal Nutrition》 SCIE 2016年第3期211-217,共7页
The objective of the study was to determine the role of vitamin D3(VD3) in regulating adaptation and mechanism of rats to low-phosphorus(P) diets. Rats were assigned to 4 diets containing 0.2%, 0.4%, 0.6%,or 0.8% P co... The objective of the study was to determine the role of vitamin D3(VD3) in regulating adaptation and mechanism of rats to low-phosphorus(P) diets. Rats were assigned to 4 diets containing 0.2%, 0.4%, 0.6%,or 0.8% P consisting of 5 replicate cages with 6 rats per replicate cage and fed for 7 days. Four rats from each replicate cage were treated with ethane-1-hydroxy-1,1-diphosphonicacid, tetrasodium salt(EHDP)and 2 rats remained untreated. Twelve hours prior to preparation on d 7, two of the EHDP-treated rats received an intraperitoneal injection of VD3 [1,25-(OH)_2 D_3] at 600 ng per kg body weight, while two rats did not receive the injection. Rats that did not receive VD_3 injection had decreased(P < 0.001) P absorption, but injection of VD3 resulted in increased(P < 0.001) absorption. The effect of VD3 injection was greater(P < 0.001) for rats fed 0.2% P diet than rats fed 0.8% P diet in ileum. Sodium dependent phosphate cotransporter type IIb(Na/Pi-IIb) and 25-hydroxyvitamin D 1-α hydroxylase(CYP27 B1) mRNA level showed the same trend with P absorption. Serum concentration of VD3 and la-hydroxylase activity in rats fed 0.2% P diet were lower than those fed 0.8% P diet. The injection of VD3 increased(P < 0.001)serum concentration of VD3 and la-hydroxylase activity. Thus, VD3 increased Na/Pi-Ⅱb and CYP27 B1 mRNA level and improved serum concentration of VD3 and la-hydroxylase activity in rats fed low-P diets. 展开更多
关键词 Na/Pi-Ⅱb cyp27b1 1 25-(OH)2D3 1α-hydroxylase Low-phosphorus
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细菌性支气管炎患儿25-羟基维生素D-1α羟化酶CYP27B1与抗菌肽LL-37表达的研究
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作者 季汝凤 夏煜 孙瑶 《药物生物技术》 CAS 2022年第5期470-473,共4页
文章研究25-羟基维生素D-1α羟化酶CYP27B1与抗菌肽LL-37在细菌性支气管炎患儿的外周血中的表达及临床意义。收集2019年4月—2019年12月东南大学附属中大医院溧水分院住院的细菌性支气管炎患儿血清样本,其中急性细菌性支气管炎(ABB)患... 文章研究25-羟基维生素D-1α羟化酶CYP27B1与抗菌肽LL-37在细菌性支气管炎患儿的外周血中的表达及临床意义。收集2019年4月—2019年12月东南大学附属中大医院溧水分院住院的细菌性支气管炎患儿血清样本,其中急性细菌性支气管炎(ABB)患儿30例,迁延性细菌性支气管炎(PBB)患儿30例,30例在本医院体检的健康志愿者血清样本作为血清对照。采用免疫比浊法检测血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平;采用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群;采用ELISA法检测血清25-(OH)D3和1,25-(OH)2D3水平及CYP27B1、LL-37含量。结果显示,三组研究对象免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平不具有统计学意义(P>0.05),与对照组比较,ABB组及PBB组T淋巴细胞水平差异具有统计学意义(P<0.05)。三组研究对象25-(OH)D3水平比较(P>0.05);1,25-(OH)2D3水平ABB组和PBB组低于对照组,PBB组低于ABB组(P<0.05)。CYP27B1的表达量PBB组低于ABB组和对照组(P<0.05),ABB组和对照组比较无显著差异(P>0.05)。结果表明CYP27B1表达与LL-37表达之间具有相关性,CYP27B1表达不足可能导致LL-37的表达不足,致使急性细菌性支气管炎发展为迁延性细菌性支气管炎。 展开更多
关键词 急性细菌性支气管炎 迁延性细菌性支气管炎 25-羟基维生素D-1α羟化酶cyp27b1 抗菌肽LL-37 抗微生物短肽 细菌感染
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黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞CYP24A1,CYP27B1 mRNA和蛋白的影响 被引量:11
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作者 李倩 吴雍真 +5 位作者 管连城 高洁 李文 秦忠 陈云志 柴艺汇 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第17期49-55,共7页
目的:通过探讨不同浓度黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化过程中24-羟基化酶(CYP24A1),1α羟化酶(CYP27B1)mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨其治疗原发性骨质疏松症作用机制。方法:将SD大鼠随机分为6组,正常组、模型组... 目的:通过探讨不同浓度黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化过程中24-羟基化酶(CYP24A1),1α羟化酶(CYP27B1)mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨其治疗原发性骨质疏松症作用机制。方法:将SD大鼠随机分为6组,正常组、模型组、黄芪含药血清低、中、高质量分数组(20%,40%,60%),维生素D组。细胞增殖毒性检测(CCK-8)法检测不同浓度黄芪含药血清对衰老BMSCs成骨分化细胞存活率的影响;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同浓度黄芪含药血清对衰老BMSCs成骨分化细胞CYP24A1,CYP27B1 mRNA和蛋白的表达情况。结果:CCK-8法显示,与正常组比较,模型组BMSCs成骨分化细胞经D-半乳糖诱导后细胞增殖存活率显著降低(P<0.01);与模型组比较,黄芪含药血清中、高质量分数组及维生素D组均可在不同程度上提高衰老BMSCs成骨分化细胞增殖存活率(P<0.01);Real-time PCR和Western blot结果显示,与正常组比较,模型组CYP27B1 mRNA和蛋白相对表达量显著降低,CYP24A1 mRNA和蛋白相对表达量显著升高(P<0.01);与模型组比较,黄芪高质量分数组均可升高CYP27B1 mRNA和蛋白相对表达量(P<0.01),降低CYP24A1 mRNA和蛋白相对表达量(P<0.01),呈质量分数依赖性。结论:不同浓度黄芪含药血清可治疗骨质疏松症,其机制可能与调节衰老骨髓间充质干细胞成骨分化过程中CYP24A1,CYP27B1 mRNA及蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 黄芪含药血清 骨质疏松 24-羟基化酶 1α羟化酶
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当归补血汤对维甲酸诱导的骨质疏松大鼠肾脏VDR、CYP27B1的影响 被引量:4
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作者 李文 张孟之 +6 位作者 陈云志 顾春松 高洁 管连城 李倩 龚华乾 柴艺汇 《时珍国医国药》 CSCD 北大核心 2021年第5期1025-1028,共4页
目的通过研究当归补血汤对维甲酸诱导的骨质疏松(OP)大鼠肾脏中维生素D受体(VDR)、25羟基维生素D-1α羟化酶(CYP27B1)mRNA及蛋白表达情况的影响,初步探讨其对干预OP的分子机制。方法实验分为6组:对照组、模型组[维甲酸100mg/(kg·d)... 目的通过研究当归补血汤对维甲酸诱导的骨质疏松(OP)大鼠肾脏中维生素D受体(VDR)、25羟基维生素D-1α羟化酶(CYP27B1)mRNA及蛋白表达情况的影响,初步探讨其对干预OP的分子机制。方法实验分为6组:对照组、模型组[维甲酸100mg/(kg·d)]、维生素D组(骨化三醇30ng/kg)、当归补血汤高剂量组(7.2g/kg)、当归补血汤中剂量组(3.6g/kg)、当归补血汤低剂量组(1.8g/kg)。使用酶联免疫检测法(ELISA)检测大鼠血清25-羟基维生素D_(3)[25(OH)D_(3)]、骨钙素(BGP)含量;实时荧光定量PCR法(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠肾组织中VDR、CYP27B1 mRNA及蛋白表达的影响。结果与对照组比较,模型组血清25(OH)D_(3)、肾脏CYP27B1 mRNA及蛋白表达水平显著下降(P<0.01),血清BGP、肾脏VDR mRNA及蛋白表达水平显著上升(P<0.01)。与模型组比较,维生素D及当归补血汤高、中剂量组血清25(OH)D_(3)水平显著上升(P<0.01);维生素D及当归补血汤高、中、低剂量组血清BGP水平显著下降(P<0.01);维生素D及当归补血汤高、中剂量组肾脏VDR mRNA及蛋白表达水平显著下降(P<0.01),肾脏CYP27B1 mRNA表达水平上升(P<0.05,P<0.01);维生素D及当归补血汤高、中、低剂量组肾脏CYP27B1蛋白表达水平显著上升(P<0.01)。结论当归补血汤通过调节肾脏组织中VDR、CYP27B1 mRNA及蛋白表达情况,改善血清25(OH)D_(3)、BGP水平,发挥其干预OP的作用。 展开更多
关键词 当归补血汤 骨质疏松 VDR CYP27B
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