铜、镉及其联合毒性对唐鱼肝脏CYP3A基因表达影响

运用荧光定量PCR方法检测不同暴露时间和暴露浓度的铜、镉单一毒性和其联合毒性对唐鱼(Tanichthys albonubes)肝脏CYP3A基因mRNA表达量的影响。结果表明,铜和镉对唐鱼肝脏CYP3A基因的表达有显著的诱导作用(P<0.05);与单一毒性相比,铜镉联合毒性表现为一定的协同作用。唐鱼CYP3A基因的表达变化对镉、铜胁迫的响应具有一定的可测性和较强的规律性。

CYP3A4与CYP3A5基因多态性与糖皮质激素类药物代谢的研究进展

细胞色素P450酶（CYP450）作为生物体内的催化剂,参与体内约90%的临床常用药的代谢和转化。CYP3A4与CYP3A5是CYP450主要亚家族CYP3A的重要成员,在临床上参与约50%的药物代谢。CYP450遗传多态性是不同个体对同一药物产生不同药物应答的主要原因之一。糖皮质激素作为抗炎药物和免疫抑制剂在临床上广泛应用,其代谢过程主要由CYP3A亚家族介导。

草鱼肾细胞中细胞色素P450 3A基因诱导表达及其酶活性分析

采用基因克隆技术获取草鱼(Ctenopharyngodon idellus)细胞色素P450 3A(CYP3A)cDNA序列长1 849 bp,包含完整开放阅读框(open reading frame,ORF)1 542 bp,1个终止密码和含polyA信号3′UTR;ORF编码514个氨基酸,含信号肽(29 aa),2个跨膜螺旋区(23 aa,23 aa),血红素结合域(21 aa)和6个底物识别位点(SRS1-6);与其他脊椎动物CYP3A氨基酸序列相似度达60%～92%。用实时定量PCR和分光光度计法分别研究了草鱼肾细胞系(Ctenopharyngodon idellus kidney cell line CIK)中利福平(rifampicin,RIF)诱导CYP3A基因表达和红霉素-N-脱甲基酶(ERND)活性,采用红霉素脱甲基酶活性法测定CYP3A的活性。结果显示,诱导组CIK细胞中CYP3A mRNA表达量在8 h最高,而CYP3A酶活在10 h最高;CYP3A mRNA和酶活性与对照组均具显著差异性(P<0.05)。CYP3A转录水平先于相应酶活变化表达,且转录水平表达显著高于酶活性,这很可能反映了RIF对CYP3A的诱导主要作用于转录水平而不直接作用于酶活,本研究旨为药物对CYP3A转录调控和活性调节提供科学依据,并为渔药代谢酶的研究提供理论依据。

肝癌细胞耐药诱导过程中过氧化物酶增殖物激活受体α的表达

目的研究阿霉素(adriamycin,ADM)诱导肝癌细胞(HepG2)耐药过程中过氧化物酶增殖物激活受体(PPARα)表达的变化及意义。方法通过梯度增加培养液中阿霉素的浓度,长期筛选培养,建立肝癌HepG2/ADM耐药细胞株。Western blot检测耐药细胞中多药耐药基因(MDR1)、PPARα蛋白的表达变化,RT-PCR检测耐药细胞中PPARα和CYP3A mRNA的表达变化。结果HepG2/ADM细胞是一个明确的多药耐药细胞模型,在耐药诱导过程中,MDR1表达上调,PPARαmRNA和蛋白的表达下降,CYP3A mRNA的表达也呈下降趋势。结论在耐药诱导过程中,PPARα表达的下降可能与HepG2细胞耐药的发生有关,其机制可能在于PPARα能影响MDR1和CYP3A的表达。