辛伐他汀和阿托伐他汀与CYP3A4酶抑制剂/诱导剂在心内科患者中联用情况调查

目的:调查临床治疗中辛伐他汀和阿托伐他汀与CYP3A4酶抑制剂/诱导剂联合使用的情况。方法:随机抽取某三甲医院2012年度心内科应用辛伐他汀和阿托伐他汀的病例各50份,应用SPSS18.0统计软件,对患者的一般状况、用药情况及化验指标进行统计分析,计算各项指标的平均值或比例。结果:本调查纳入100名患者,66%的患者在使用辛伐他汀或阿托伐他汀的同时使用CYP3A4酶抑制剂,其中,辛伐他汀占30%,阿托伐他汀占36%,平均联合用药时间为(7.04±0.29)d。联合使用的CYP3A4酶抑制剂药物有氨氯地平片、地尔硫片、雷尼替丁片、胺碘酮、银杏叶片;CYP3A4酶诱导剂药物主要有卡马西平和醋酸泼尼松龙片。辛伐他汀或阿托伐他汀与CYP3A4酶抑制剂联合使用频率远远多于与CYP3A4酶诱导剂联合使用频率。比较合用和无合用CYP3A4酶抑制剂患者的主要生化指标,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:辛伐他汀或阿托伐他汀与CYP3A4酶抑制剂联合使用情况在该医院较常见。建议尽量避免联用具有相互作用的药物,如必须使用,应按说明书要求不超剂量用药,并充分关注药物相互作用导致的不良反应,对患者后续情况定期随访。

附子配伍干姜对CYP1A2和CYP3A4酶活性影响

目的:探索附子配伍干姜对附子主要成分乌头类生物碱的代谢酶亚型CYP1A2和CYP3A4酶活性的影响。方法:通过采用"Cocktail"探针药物法,利用特异性探针底物咖啡因和咪达唑仑,建立同时测定两种探针药物血药浓度的高效液相色谱方法,并计算其药动学参数,评价两种代谢酶活性。结果:干姜组与对照组比较,咖啡因的主要药动学参数t1/2β、AUC、CL和K10均没有显著性差异(P>0.05),表明干姜组对CYP1A2酶活性无影响;咪达唑仑的主要药动学参数t1/2β和AUC增大,CL和K10降低,且都具有显著性差异(P<0.05),表明干姜组能够抑制CYP3A4酶活性。附子干姜组与对照组比较,咖啡因和咪达唑仑的主要药动学参数t1/2β、AUC、CL和K10均无统计学差异(P>0.05)。结论:干姜组对CYP3A4酶具有抑制作用,能够减慢附子中主要药效成分乌头类生物碱在体内的代谢,因此,从代谢酶的角度可以阐明姜附配伍,能够增强附子的药效。

附子人参配伍对CYP1A2和CYP3A4酶活性的影响

目的:通过建立"Cocktail"探针药物法及体外肝微粒体孵育体系,测定大鼠肝微粒体中CYP1A2和CYP3A4酶的活性,探索附子配伍人参对附子主要成分乌头类生物碱的代谢酶CYP1A2和CYP3A4酶活性的影响。方法:采用"Cocktail"探针药物法,利用CYP1A2和CYP3A4酶的特异性探针底物咖啡因和咪达唑仑,建立同时测定两种探针底物的体外肝微粒体孵育体系;采用RP-HPLC法测定两种探针底物在大鼠肝微粒体孵育体系中的浓度,计算CYP1A2和CYP3A4酶活性的变化。结果:与空白组比较,附子组、人参组、附子人参组对CYP1A2酶活性没有影响,附子组、附子人参组对CYP3A4酶活性没有影响,人参组对CYP3A4酶活性有抑制作用,进而减慢附子主要药效成分乌头类生物碱的代谢,因此,从代谢酶角度可以阐释,附子人参配伍能够增强附子的药效。

某院2016～2018年CYP3A4酶中效抑制剂地尔硫?联合用药情况调查

目的调查某院CYP3A4酶中效抑制剂与地尔硫[艹卓]的联合用药情况,为临床合理用药提供参考.方法对某院门诊药房2016~2018年地尔硫[艹卓]的联用处方进行汇总分析,包括患者的基本情况,联用CYP3A4酶诱导剂或者底物药物的种类、联用处方数和联用剂量.参考现有文献,从CYP3A4酶代谢角度对联合用药的合理性进行分析.结果收集地尔硫[艹卓]联用处方397例,联用具有药物间相互作用的处方309例,占77.8%.联用药物包括CYP3A4酶诱导剂吡格列酮,CYP3A4酶底物阿托伐他汀、辛伐他汀、硝苯地平、氨氯地平、非洛地平、沙格列汀和瑞格列奈.结论应该避免已经明确的具有相互作用的药物联用,如果联用,应该调整剂量、加强患者用药教育,并监测可能导致的药物不良反应.

基于CYP1A2、CYP3A4酶活性的苍耳子炮制减毒机制研究

目的:研究苍耳子炮制前后对小鼠肝微粒体中CYP1A2和CYP3A4酶相对活性及肝细胞损害程度的影响。方法:49只小鼠按体质量随机分为正常组、苍耳子生品低剂量组、苍耳子生品中剂量组、苍耳子生品高剂量组、苍耳子炮制品低剂量组、苍耳子炮制品中剂量组、苍耳子炮制品高剂量组,每组7只。各给药组小鼠灌胃分别相应药物水煎液,正常组小鼠灌胃等体积的生理盐水,1次/d,连续10 d。运用Cooktail探针法将咖啡因(CYP1A2酶反应物)、咪达唑仑(CYP3A4酶反应物)、地西泮(内标物)和肝微粒体一同进行体外孵育,HPLC法测定肝微粒体中两种探针药物的消耗,计算酶的相对活性;ELISA法测定血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)水平;肝组织HE染色切片进行病理观察。结果:苍耳子生品中、高剂量组和苍耳子炮制品高剂量组小鼠血清AST、ALT活性均高于正常组(P<0.05或P<0.01),苍耳子生品低剂量组、苍耳子炮制品中剂量组小鼠血清ALT活性均高于正常组(P<0.05),且在相同剂量下,苍耳子生品低、中、高剂量组小鼠血清AST、ALT活性均分别高于苍耳子炮制品低、中、高剂量组,但差异均无统计学意义(P>0.05);小鼠肝组织HE染色病理切片显示在相同剂量下苍耳子生品组比苍耳子炮制品组小鼠肝损伤情况更严重;苍耳子生品中、高剂量组和苍耳子炮制品中、高剂量组小鼠肝脏微粒体中CYP1A2活性均明显高于正常组(P<0.05或P<0.01),苍耳子生品高剂量组、苍耳子炮制品高剂量组小鼠肝脏微粒体中CYP3A4活性均明显高于正常组(P<0.05),同等剂量下,苍耳子生品低、中、高剂量组小鼠肝脏微粒体中CYP1A2、CYP3A4活性均分别高于苍耳子炮制品低、中、高剂量组,但差异均无统计学意义(P>0.05)。CYP1A2和CYP3A4酶相对活性与血清生化指标检测和肝组织病理切片观察结果有相同的趋势,即CYP1A2、CYP3A4酶相对活性越高,肝损害越严重。结论:苍耳子能够诱导CYP1A2、CYP3A4酶的活性,炮制后可降低对CYP1A2、CYP3A4酶的诱导作用,同时减轻肝损伤,可能是其炮制减毒的机制之一。

基于荧光探针技术检测30种农兽药及其二元、三元组合对CYP3A4酶的联合毒性

在农业生产中混合使用多种农药或兽药越来越普遍,但因药剂联合毒性效应的不确定性而对人体健康产生严重威胁。本文基于酶抑制法原理,利用荧光探针NEN(N-乙基-1,8-萘二甲酰亚胺)直接检测CYP3A4酶的活性,建立了广谱筛查混合农兽药联合毒性效应的方法,并以常用的30种农兽药及其典型的23种二元和26种三元组合为研究对象,检测了农兽药混合物对CYP3A4酶的联合毒性效应,其中标准质量浓度根据食品安全国家标准规定的农兽药最大残留限量确定。结果表明:3种质量浓度梯度下对CYP3A4酶均具有协同作用的混合农兽药组合有克百威+多菌灵、克百威+吡虫啉、啶虫脒+烯酰吗啉、吡虫啉+多菌灵、氯氰菊酯+啶虫脒+烯酰吗啉、克百威+啶虫脒+多菌灵、吡虫啉+啶虫脒+多菌灵、吡虫啉+啶虫脒+烯酰吗啉、毒死蜱+啶虫脒+多菌灵和联苯菊酯+啶虫脒+多菌灵。当单一农兽药对CYP3A4酶活性的抑制率较高时,与其他农兽药混合后联合毒性效应呈拮抗作用,而当单一农兽药对酶活性的抑制率低于2%时,则与其他农兽药混合后联合毒性效应呈现不确定性。农兽药组合在低浓度下对CYP3A4酶的联合毒性往往存在较强的协同作用,但随着浓度的升高,联合毒性效应从协同变为拮抗作用。分析农兽药与CYP3A4酶之间的构效关系可知,含有芳氯基团的数量与对酶活性的抑制程度成正相关,含有3个芳氯及以上基团的农兽药对CYP3A4酶活性的抑制作用最为显著,抑制率在30%以上,如百菌清、毒死蜱、甲基毒死蜱、咪鲜胺等;含有2个芳氯或“强吸电子基团+1个芳氯”基团的农兽药,对CYP3A4酶活性的抑制作用较强,抑制率在18%以上,如苯醚甲环唑、哒螨灵和异菌脲等。具有氨基甲酸酯基团的农兽药单独作用于CYP3A4酶毒性较小或几乎没有毒性时,与其他农兽药混合后显示较强的协同作用。本研究建立的检测方法为广谱筛查混合农兽药联合毒性提供了新思路,检测结果可为进一步在细胞和动物水平制订农兽药混剂的风险评估方案提供依据。

结合光谱法和计算模拟分析CYP3A4酶与己烯雌酚的作用机制

本文结合分子对接、动力学模拟和光谱法,研究了己烯雌酚(Diethylstilbestrol,DES)与CYP3A4酶在模拟生理环境下(pH7.4)的相互作用机制.利用分子对接和动力学模拟方法从理论上模拟CYP3A4与DES相互作用后的构象变化情况.通过光谱法从实验角度进行验证,荧光光谱得出DES对CYP3A4的猝灭机制属于静态猝灭,红外和紫外光谱结果表明, DES与CYP3A4结合后,改变了CYP3A4的内部环境和构象.理论模拟和实验结果相互印证,为探究DES和CYP3A4的相互作用提供了重要信息和参考依据.

不同剂量炔雌醚对小鼠器官鲜重、繁殖生理和肝肠CYP3A4酶含量的影响

为探究不同剂量炔雌醚对小鼠器官、激素和肝肠药解酶的影响,分别以0.008 mg/kg、0.04 mg/kg、0.2 mg/kg、1.0 mg/kg和5.0 mg/kg的炔雌醚油溶液连续3 d灌胃小鼠,首次给药7 d后解剖取材,检测其器官鲜重、雄鼠精子数量、血清中激素浓度、小肠和肝脏中CYP3A4酶含量的变化。结果发现:雌鼠肝脏鲜重随剂量增加而增大,5.0 mg/kg组比对照组增大89.7%;雌鼠小肠、肾脏和脾脏出现不同程度变化,但无明显剂量效应;0.2 mg/kg以上剂量炔雌醚导致雌鼠子宫不同程度的水肿;炔雌醚对雌鼠血清中雌二醇和促黄体素浓度无显著影响,仅1.0 mg/kg组雌鼠血清中卵泡生成素浓度较对照组显著升高;1.0 mg/kg和5.0 mg/kg组雌鼠肝脏中CYP3A4酶总含量较对照组分别显著增加59.1%和102.9%。不同剂量炔雌醚对雄鼠肝脏和脾脏鲜重影响显著,5.0 mg/kg剂量组肝脏和脾脏鲜重较对照组分别增大23.3%和130%,但小肠和肾脏无明显剂量效应;不同剂量炔雌醚对雄鼠睾丸鲜重无显著影响,附睾仅有5.0 mg/kg组较对照组显著减小;1.0 mg/kg和5.0 mg/kg组的精子密度和精子总数分别较对照组降低43.9%和70.5%;高剂量炔雌醚使血清中促黄体素和睾酮浓度均显著降低;5.0 mg/kg组雄鼠肝脏CYP3A4酶单位组织含量和总含量较对照组分别升高7.1%和30%。总之,炔雌醚对雌雄小鼠的繁殖均有抑制作用,但最低有效剂量不同,雌性有效剂量更低,而雌性肝脏及CYP3A4酶对炔雌醚的反应显著强于雄性,提示雌鼠肝脏对炔雌醚的代谢更快。

CYP3A4酶相关的临床药物相互作用

目的为CYP3A4酶的强抑制剂、强诱导剂的合理使用提供参考。方法查阅国内外相关文献,对CYP3A4酶强抑制剂、强诱导剂相关的临床药物相互作用研究及案例进行归纳和总结。结果 CYP3A4酶强抑制剂克拉霉素、蛋白酶抑制剂、三唑类抗真菌药等的临床药物相互作用报道较多,特别是与钙通道阻滞剂、他汀类药物、激素类药物、他克莫司等;强诱导剂利福平、卡马西平、苯妥英等的临床药物相互作用也有报道,如与口服避孕药、他克莫司、替格瑞洛等。结论临床应用CYP3 A4酶强抑制剂、强诱导剂时需注意其对CYP3A4底物的影响,及时调整用药方案。

多奈哌齐血药浓度及其代谢酶CYP3A4基因多态性在轻中度Alzheimer's病治疗中的应用

目的探讨多奈哌齐(DNP)治疗轻中度Alzheimer’s病(AD)患者的有效血药浓度及代谢酶CYP3A4基因多态性对DNP血药浓度的影响。方法对70例首诊的轻中度AD患者进行MMSE测评,随后予DNP治疗。服药6月后进行DNP血药浓度及代谢酶CYP3A4基因多态性检测,并行MMSE量表复评和临床印象变化量表(CIBIC-plus)评定。根据量表结果确定有效组,分析其DNP血药浓度和CYP3A4基因多态性,探讨DNP治疗AD的有效血药浓度及CYP3A4基因多态性对DNP血药浓度的影响。结果有效组中,患者DNP平均血药浓度为(52.17±7.13)ng/ml,其中服药5 mg患者平均血药浓度为(47.63±8.13)ng/ml,服药10 mg患者平均血药浓度为(52.80±6.85)ng/ml。携带等位基因CYP3A4*18B-G和/或CYP3A4*1G-T者的DNP血药浓度高于未携带者,在服药10 mg组中差异更显著。结论DNP治疗轻中度AD的有效血药浓度为45~59 ng/ml;CYP3A4基因多态性影响DNP血药浓度。血药浓度监测和CYP3A4基因多态性检测为指导AD患者DNP个体化治疗提供参考。

体内代谢法研究糖类药物对大鼠CYP3A4的影响

目的研究不同结构的糖类药物对肝药酶的影响,从而对这些新药进行安全性评价,并预测它们与其他药物合用的不良相互作用。方法通过研究肝药酶的专属探针药物的体内代谢过程的变化,进而判断不同结构糖类药物对这些酶有无诱导或抑制作用。结果SPMG对雌雄大鼠均有显著的抑制作用,但AOSC对CYP3A4无影响。结论结构不同的药物对CYP3A4的影响存在明显的差异,药物与各种与CYP3A4酶代谢有关的药物合用时,应充分考虑其对肝药酶的不同影响,以避免潜在的毒性或不良反应。

CYP3A4 1G和CYP3A5 3基因多态性对颌面外科手术患者舒芬太尼代谢的影响

目的:研究CYP3A4^(*)1G和CYP3A5^(*)3基因多态性相互作用对颌面外科手术患者舒芬太尼药物代谢的影响。方法:选取2018年10月-2019年12月在西安交通大学口腔医院颌面外科择期全麻下行颌面外科手术的88例患者为研究对象,年龄21-69岁,根据美国麻醉医师学会(ASA)分级为ASAⅠ或Ⅱ级。采用聚合酶链(PCR)-基因测序法对CYP3A4^(*)1G和CYP3A5^(*)3基因位点进行检测,根据两个基因的不同基因分型相互结合,分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ+Ⅳ三组。待患者进行麻醉诱导后,0.5h时抽取患者的外周静脉血液,采用高效液相色谱法(HPLC)检测患者体内舒芬太尼的血药浓度。术后24h时,对患者进行视觉模拟评分(VAS)评价疼痛程度,并记录患者24h内舒芬太尼的用量。结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ+Ⅳ三组患者术中舒芬太尼血药浓度及术后24h VAS评分比较有统计学差异(P<0.05)。结论:CYP3A4^(*)1G与CYP3A5^(*)3共同影响舒芬太尼的体内代谢,两者基因多态性相结合,可作为术中指导舒芬太尼个体化用药的指标。

体内探针药物法研究巴戟天低聚糖对大鼠CYP3A4的影响

目的:研究巴戟天低聚糖(BD)及其活性成分巴戟甲素(BJ)对肝药酶CYP3A4的影响。方法:采用固相萃取法处理血样,UPLC测定探针药物氨苯砜在大鼠体内的血药浓度,采用DAS2.0软件计算药动学参数并进行比较分析。结果:BD对CYP3A4有显著的诱导作用,而BJ对CYP3A4有抑制作用。结论:巴戟天中含有大量对CYP3A4有诱导作用的低聚糖类成分,与其他通过CYP3A4酶代谢的药物合用时需注意配伍禁忌。

细胞色素P4503A4酶的研究进展

细胞色素P4503A4(CYP3A4)在体内生物转化过程中起着至关重要的作用,是肝脏中重要的药物代谢酶。CYP3A4酶的活性或含量的变化直接影响在体内代谢的药物的有效量和作用持续时间,并且与药物的功效和安全性密切相关。因此,了解药物诱导或抑制CYP3A4的可能性是药物研究中不可或缺的研究内容。本文回顾总结了近年来CYP3A4酶与药物的相互作用以及药物对CYP3A4酶的作用程度的测定方法。

构建MDCK Ⅱ-hMDR1-hCYP3A4共表达体系

构建MDCK-hMDR1-CYP3A4双转表达体系,研究CYP3A4和P-gp之间的相互作用。根据基因文库合成CYP3A4基因编码片段,连接到pc DNA3.1/Hypgro表达载体,进行测序。验证正确的重组质粒pc DNA3.1/Hypgro/h CYP3A4转染MDCK-MOCK细胞以及MDCK-hMDR1细胞,经潮霉素B(Hygromycin B)加压筛选阳性克隆,获得稳定高表达人CYP3A4的MDCK-h CYP3A4单转以及MDCK-hMDR1-h CYP3A4双转稳转细胞株。结果显示相比于空白细胞(MDCK-MOCK)以及阴性细胞(MDCK-MDR1),CYP3A4在MDCK-h CYP3A4、MDCK-hMDR1-h CYP3A4细胞中的表达更稳定并且活性显著增强。MTT结果表明,在MOCK、MDCK-MDR1、MDCK-CYP3A4以及MDCK-MDR1-CYP3A4 4种细胞系中,苏尼替尼的IC_(50)值分别为2.832,5.717,3.628,6.561μmol/L,而伯舒替尼的IC_(50)值分别为0.712 6,4.413,2.184,7.010μmol/L。由于苏尼替尼和博苏替尼是CYP3A4以及P-gp的共同底物,CYP3A4的代谢活性以及P-gp的外排功能共同作用使得苏尼替尼和博苏替尼毒性降低,因而MDCK-hMDR1-h CYP3A4双转细胞株IC_(50)值比MDCK-hMDR1、MDCK-h CYP3A4明显增大。以上结果说明了构建的稳定单转MDCK-h CYP3A4以及MDCK-hMDR1-h CYP3A4双转细胞株是具有功能的,并且CYP3A4与P-gp之间的作用是相互影响的,同时该模型的建立也为药物的转运与代谢研究提供更全面的研究技术与思路。

丹参主要活性成分与他克莫司体外代谢性相互作用的研究

该研究旨在考察丹参主要活性成分对CYP3A4/5酶代谢他克莫司活性的影响,从而预测在临床联合用药时两者间潜在的药物相互作用(DDI)。实验首先利用人肝微粒体和重组人CYP3A4/5酶3种体外孵育体系,考察5种丹参活性成分单体(丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹酚酸B、二氢丹参酮Ⅰ)对他克莫司代谢的可逆性抑制作用;然后选择有较强抑制作用的丹参活性成分,计算其剂量依赖性抑制作用强度;最后利用单点抑制法实验考察5种丹参主要活性成分在高浓度下的时间依赖性抑制作用。此外,该研究建立了生物样品中他克莫司的HPLC-MS/MS测定方法,通过测定体系中他克莫司的剩余量,计算丹参主要活性成分的抑制活性。实验结果显示二氢丹参酮Ⅰ在3种体外孵育体系中对他克莫司的代谢均具有较强的抑制作用,在人肝微粒体中抑制强度IC50为6.0μmol·L^-1,其余4种活性成分的抑制作用较弱(10μmol·L^-1时抑制率均<30%);较高浓度的丹参活性成分单体(50μmol·L^-1)在人肝微粒体中,对他克莫司的时间依赖性抑制强度为5.5%~15.9%。以上结果提示当丹参活性成分体内浓度达到一定限值时,可能会发生具有临床意义的DDI,此时和他克莫司合用时需要提高警惕。该研究对指导临床合理用药提供了一定的理论基础和数据支持。