氨基胍对糖尿病(消渴)大鼠肝脏氧化应激及线粒体CYP450 2E_1的作用

目的研究氨基胍对糖尿病(消渴)大鼠肝脏氧化应激状态的影响及线粒体CYP450 2E1的干预作用。方法 28只三月龄健康雄性W istar大鼠,随机化分为3组。正常对照组(NC组)8只,其余采用链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型。造模后一周将糖尿病大鼠分为糖尿病对照组(DM组),氨基胍治疗组(Ag组)。治疗9周后处死大鼠。采用比色法测定大鼠肝脏匀浆和肝脏线粒体内MDA、Cu/Zn-SOD及T-AOC。采用比色法测定大鼠肝脏线粒体CYP450 2E1酶活力。结果与NC组相比,DM组大鼠肝脏匀浆和肝脏线粒体的MDA含量显著升高(P<0.01),Cu/Zn-SOD、T-AOC有明显降低(P<0.01);与DM组相比,Ag组能显著地降低肝脏匀浆和线粒体MDA含量(P<0.01),Ag组可提高肝脏匀浆T-AOC(P<0.05)和线粒体T-AOC(P<0.01)。与DM组相比,Ag组能降低肝脏线粒体CYP450 2E1酶活性。结论 Ag可能通过降低肝脏线粒体CYP450 2E1活性,减轻肝脏线粒体脂质过氧化反应,改善糖尿病肝脏氧化/抗氧化失衡状态,对糖尿病大鼠肝脏具有保护作用。

胆宁片防治非酒精性脂肪肝的实验研究

目的研究胆宁片对大兔脂肪肝的防治作用。方法采用高胆固醇膳食致兔脂肪肝模型,研究胆宁片对大兔非酒精性脂肪肝的防治作用。结果模型组与胆宁片组的TC数值分别为(15.36±9.01)mg/dL、(2.67±5.35)mg/dL,TG分别为(1.11±0.42)mmol/L、(0.56±0.2)mmol/L,LDL-C分别为(13.16±7.39)mmol/L、(1.98+5.00)mmol/L,HDL-C分别为(0.49±0.23)mmol/L、(0.90±0.29)mmol/L,2组数据相比较,差异有显著性统计学意义(P<0.01),模型组新西兰兔的肝脏组织CYP7A1 mRNA表达较胆宁片组低,其中模型组与胆宁片组条带值分别为(0.56±0.14)(1.02±0.09),差异有统计学意义(P<0.001)。而模型组CYP2E1 mRNA表达较胆宁片组高,其中模型组与胆宁片组条带值分别为(1.49±0.31)(1.22±0.20),差异有统计学意义(P<0.05)。结论胆宁片对实验性大兔脂肪肝有一定的治疗作用。

CYP2E1和GST基因多态性对二甲基甲酰胺代谢及毒性的影响

二甲基甲酰胺(DMF)是一种广泛应用的工业原料。DMF的毒性与其在体内的代谢过程有关。CYP2E1是DMF的主要Ⅰ相代谢酶,Ⅱ相代谢酶谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)则可能在DMF的解毒过程中起重要作用。代谢酶的基因多态性对毒物的代谢及毒作用有较大的影响。本文就CYP2E1和GST基因多态性与DMF的代谢及毒性的关系进行综述。

CYP2E1-RsaⅠ、GSTT1基因多态性与胰腺癌遗传易感性的病例对照研究

目的探讨吸烟和细胞色素P4502El-RsaⅠ（CYP2E1-RsaⅠ）、谷胱甘肽硫转移酶T1（GSTT1）基因多态性与胰腺癌发病之间的关系。方法采用病例-对照研究的方法,以150例胰腺癌患者及150例非癌对照者的外周血白细胞为样本,利用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）技术分析了Ⅰ相代谢酶CYP2E1-RsaⅠ和Ⅱ相代谢酶GSTT1基因多态性。结果CYP2E1-RsaⅠ野生纯合型（c1/c1）和GSTT1基因缺陷型[GSTT1（-）]频率分布分别为38.7%、69.3%（病例组）和20.7%、44.7%（对照组）,二者经χ2检验差异有显著性（χ2=15.75,P〈0.01;2χ=18.62,P〈0.01）。c1/c1基因型者患胰腺癌的风险显著增加（OR=3.19,95%CI=2.534.26）。GSTT1（-）者患胰腺癌的风险也显著增加（OR=2.85,95%CI=1.924.64）。基因突变的协同分析发现CYP2E1-RsaⅠ（c1/c1）/GSTT1（-）在胰腺癌组和对照组中的分布频率分别为30.7%和6.7%,二者经2χ检验有显著性差异（2χ=42.39,P〈0.01）。CYP2E1-RsaⅠ（c1/c1）/GSTT1（-）患胰腺癌的风险显著增加（OR=16.63,95%CI=8.9422.01）。病例组的吸烟率显著高于对照组的吸烟率（OR=2.74,95%CI=1.324.58,P〈0.01）,CYP 2E1-RsaⅠ（c1/c1）及GSTT1（-）与吸烟有协同作用（OR=8.84,95%CI=5.5111.62;OR=20.40,95%CI=4.9829.53）。结论CYP2E1-RsaⅠ（c1/c1）和GSTT1（-）是胰腺癌的易患因素,二者对胰腺的发生有协同作用,吸烟与胰腺的易感性也有关,CYP2E1-RsaⅠ（c1/c1）、GSTT1（-）与吸烟在胰腺癌的发生上也有相互促进作用。

中国人群细胞色素CYP2E1基因多态性与肝癌易感性的Meta分析

目的探讨细胞色素P4502E1（CYP2E1）基因多态性与肝癌易感性的关系。方法计算机检索CBM、CNKI、VIP、Pubmed、Ovid等数据库,收集有关中国人群CYP2E1基因多态性与肝癌易感性的病例对照研究,以病例组和对照组CYP2E1基因型分布的比值比（odds ratio,OR）为效应指标,对文献进行评价筛选、异质性检验,应用RevMan4.3软件对各研究原始数据进行统计,计算合并OR值及95%可信区间（confidential interval,CI）。结果最终纳入5篇病例对照研究,其中肝癌患者789例,对照864例,Meta分析结果OR及95%CI为1.15（0.94~1.41）,说明CYP2E1基因型分布与肝癌的关联性无统计学意义。结论虽然中国人群CYP2E1基因型频率分布可能与患肝癌风险增加有关,但目前相关研究结果的Meta分析尚不能得出单一基因CYP2E1是肝癌易感性基因的肯定结论,需进一步开展严格设计的流行病学研究加以证实。

细胞色素P4502E1与乙醇代谢相关的肝损伤研究进展

近年细胞色素P450酶系中的2E1亚家族与乙醇相关的肝损伤研究结果进一步验证了CYP2E1酶在乙醇代谢中的关键作用。CYP2E1酶的多态性对乙醇导致肝损伤的影响包含该酶的代谢效率差异(C2/C2)>(C1/C2)>(C1/C1)造成不同程度的肝脏细胞损伤以及不同等位基因造成饮酒倾向的差异越来越受到关注。研究证实,多种物质尤其是中药材饮片及提取物可影响该酶含量及活性,从而保护肝细胞以及对乙醇损伤后肝脏细胞的修复。本文就近年来细胞色素P4502E1及其基因与乙醇相关的肝损伤研究进展做一综述。

连翘提取物对对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的保护作用

试验旨在探究连翘提取物(FSE)预防性干预对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导小鼠肝损伤的保护作用及其潜在作用机制。采用半仿生-生物酶法提取连翘有效成分,使用APAP构建小鼠肝损伤模型。随机将60只雌性昆明小鼠分入正常对照(NC)组、APAP肝损伤模型(LD)组、连翘提取物(FSE)对照组、连翘提取物高剂量(HFSE+LD)组、连翘提取物中剂量(MFSE+LD)组和连翘提取物低剂量(LFSE+LD)组,每组10只。HFSE+LD组、MFSE+LD组、LFSE+LD组分别按每天200、100、50μg/g灌胃给予连翘提取物,NC组和LD组分别灌胃等量生理盐水,每天2次,连续给药6 d。预防性给药3 d后,腹腔注射APAP,每天1次。末次给药12 h后,试验小鼠眼球采血并快速取出肝脏,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,以评价肝损伤程度;检测肝脏匀浆液中还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)水平,以评价肝脏氧化应激程度;制作肝脏病理切片,经苏木精伊红(HE)染色后观察肝脏病理变化;采用探针药物法测定肝脏线粒体细胞色素P4502E1(CYP2E1)活性;采用实时荧光定量PCR检测肝脏线粒体CYP2E1 mRNA表达水平;采用Western blotting法检测肝脏CYP2E1蛋白表达情况。结果表明:与NC组相比,LD组小鼠血清中ALT、AST活性均显著增加(P<0.05);肝脏SOD活性、GSH含量均显著降低(P<0.05),MDA、H2O2含量,CYP2E1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),成功构建小鼠肝损伤模型。200、100和50μg/g的连翘提取物可显著降低肝损伤小鼠血清ALT和AST活性(P<0.05),显著提高肝脏中SOD活性(P<0.05);200、100μg/g连翘提取物可显著提高肝脏中GSH水平(P<0.05),显著降低肝脏中MDA、H2O2水平及CYP2E1的mRNA和蛋白表达量(P<0.05)。以上结果表明,连翘提取物可减轻APAP诱导的小鼠肝损伤程度且呈剂量依赖性,其潜在作用机制可能与所含活性物质的抗氧化作用以及对CYP2E1酶活性和表达的抑制有关。

一氧化碳对CYP2E1介导的微粒体酒精氧化应激的保护作用

目的探讨诱导I型血红素氧合酶(heme oxygenase-1,HO-1)催化血红素产生的代谢产物一氧化碳(CO)对大鼠肝微粒体细胞色素P4502E1(cytochrome P4502E1,CYP2E1)酶活性影响及其介导的酒精性氧化应激的保护作用。方法超速离心法制备大鼠肝脏微粒体,加入血红素(hemin)、血红蛋白(Hb)、不同剂量的CO释放剂CORM-2(carbonmonoxide-releasing molecules-2),检测CYP2E1酶活性;在微粒体酒精氧化反应体系中加入血红素、血红蛋白及CORM-2,检测微粒体超氧化物歧化酶(SOD)活力及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)及氧自由基(ROS)水平。结果 hemin处理后肝微粒体CYP2E1的酶活性下降,联合Hb后CYP2E1酶活性明显升高,外源性CO则显示出类似的CYP2E1酶抑制效应;针对乙醇孵育的肝微粒体,hemin处理后明显抑制了肝微粒体MDA和ROS水平的升高,有效维持了GSH水平和SOD活力,联合Hb处理后明显抑制了上述保护效应,外源性CORM-2也显示出类似的保护效应,而灭活的CORM-2则无明显的保护效应。结论 CO对大鼠肝微粒体酒精性氧化应激具有保护作用,其机制可能与CO对CYP2E1酶活性的直接抑制有关。