针刺太冲穴对自发性高血压大鼠血压、CYP4A 2/3、20-HETE及肾损伤影响

目的观察针刺对自发性高血压大鼠血压、CYP4A2/3、20-HETE水平及肾损害的影响效果。尝试寻求针刺治疗自发性高血压大鼠的降压机制以及肾脏损害的保护机制,为阐明针刺降低血压以及对靶器官保护的原理提供理论和实验依据。方法选24只8周龄雄性自发性高血压大鼠,随机分为针刺组、中药组、模型组,各8只;另选8只同龄Wistar大鼠为正常组。实验开始前为大鼠进行为期1周的适应性训练,增加大鼠对人为操作的熟悉度,预防在实验过程中以及测量血压过程中血压应激性升高。针刺组针刺大鼠太冲穴、足三里穴、合谷穴,垂直插入,顺时针均匀提插捻转,采用平补平泻手法,行针30 s,逆时针捻转提出。中药组使用天麻钩藤饮灌胃治疗4周。采用尾动脉搏动法分别检测大鼠治疗前1周,治疗前1 d以及治疗4周后大鼠血压值,测量血压值后取大鼠肾组织,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测不同组CYP4A2/3基因表达量,并运用2-△△ct法计算基因表达量,酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法测量不同组大鼠血清中20-HETE含量,制作组织切片观察肾脏组织变化。结果治疗前1周与治疗前1 d相比,各组血压无明显变化(P>0.05);治疗4周后,与模型组相比,针刺组、中药组血压明显降低(P<0.01);治疗后与治疗前相比,中药组、针刺组血压明显降低(P<0.01);与模型组相比,针刺组与中药组肾脏中CYP4A2/3下调并有显著性差异(P<0.01);针刺组对CYP4A2/3的影响与正常组之间无差异(P>0.05);与模型组相比,针刺组与中药组的血清20-HETE水平下调并有显著性差异(P<0.01);针刺组对20-HETE的影响与正常组之间无差异(P>0.05),针刺组对20-HETE影响较模型组相比有显著性差异(P<0.01);针刺组与中药组肾脏组织病理损伤程度较模型组明显减轻。结论针刺太冲穴可以降低大鼠血压,降低肾脏中CYP4A2/3表达,降低20-HETE的表达,改善肾组织损害,这表明通过影响CYP4A/20-HETE可能是针刺治疗自发性高血压病以及靶器官损害的机制。但是由于CYP4A在人身体内分布的广泛性以及发生作用的复杂性,同时,对于20-HETE发挥作用的双面性,针刺是否是通过影响CYP4A/20-HETE通路而降低血压,保护靶器官损害还需要进一步研究。

20-HETE在苯扎贝特保护糖尿病肾病中的作用

目的探讨苯扎贝特(BEZ)对糖尿病肾病小鼠的保护作用及20-HETE的变化。方法利用高糖高脂饮食(HFD)联合链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,以尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿白蛋白、肾脏病理检测为指标,确定糖尿病肾病模型建立; Western blot法检测过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)和CYP4A蛋白表达; ELISA法检测20-HETE含量。结果 HFD喂养4周后,连续5 d腹腔注射STZ(40 mg·kg-1·d-1),7 d后,模型组小鼠空腹血糖(FBG)持续超过11. 1 mmol·L-1,糖尿病形成且保持稳定; 4周后,糖尿病小鼠BUN、Scr、尿白蛋白增加(P <0. 01),肾脏指数和肾小球体积增大(P <0. 01),同时胶原纤维增加、基底膜增厚,提示糖尿病肾病模型形成。给予BEZ(75 mg·kg-1·d-1)治疗4周,肾脏结构和功能明显改善;同时,BEZ使糖尿病肾病小鼠PPARs、CYP4A表达升高,20-HETE含量增加(P <0. 01)。结论 BEZ对糖尿病肾病有保护作用,该作用可能与其激活CYP4A-20-HETE有关。

20-HETE水平对PCI术后造影剂肾病发生的预测作用

目的探讨20-HETE水平对PCI术后CIN发生的预测价值。方法CIN组19例,非CIN组23例,对比两组患者20-HETE的水平。结果与对照组相比,CIN组20-HETE水平显著升高(P<0.05)。结论20-HETE可能预测CIN的发生,减少20-HETE的合成或增加其分解,可能降低CIN的风险。

柚皮素调节20-HETE改善糖尿病小鼠肾损伤

目的探讨柚皮素(naringenin,NAR)对糖尿病小鼠肾脏的保护作用及其与20-HETE可能相关机制。方法利用高糖高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)建立小鼠糖尿病模型,检测肾脏病理变化及尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、尿白蛋白等肾功能相关指标;Western blot法检测CYP4A表达;ELISA法检测20-HETE含量。结果高糖高脂饮食喂养4周后,腹腔注射STZ(40 mg·kg^(-1)·d^(-1))连续5 d,7 d后,模型组小鼠空腹血糖持续超过11.1 mmol·L^(-1),糖尿病形成且保持稳定;4周后,糖尿病小鼠BUN、SCr、尿白蛋白增加(P<0.01),肾脏指数和肾小球体积增大(P<0.01),并出现胶原纤维增加、基底膜增厚等病理特征,同时,肾脏CYP4A表达降低,20-HETE含量减少(P<0.01)。给予NAR(25、75 mg·kg^(-1)·d^(-1))治疗4周,肾脏结构和功能明显改善,同时,CYP4A表达升高,20-HETE含量增加(P<0.05)。结论 NAR对糖尿病引起的肾脏损害有保护作用,这可能与其激活CYP4A-20-HETE有关。

三七总皂苷对拟缺血损伤脑微血管内皮细胞PLA2G4A表达及其下游产物的影响

目的:观察三七总皂苷(panax notoginseng saponins,PNS)对拟缺血损伤脑微血管内皮细胞胞浆型磷脂酶A2IVA(phospholipase A2 group IVA,PLA2G4A)表达及其功能的影响。方法:培养大鼠原代脑微血管内皮细胞,氧糖剥夺法制备拟缺血模型,用三七总皂苷及PLA2G4A抑制剂进行干预,通过RT-PCR和Western blotting法检测各组PLA2G4A基因及蛋白表达水平,ELISA法检测各组花生四烯酸(arachidonic acid,AA)、20-羟二十烷四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE)、血栓素A2(thromboxanea2,TXA2)/前列环素(prostaglandin I2,PGI2)表达水平。结果:三七总皂苷可显著下调PLA2G4A的基因和蛋白表达,对AA、20-HETE、TXA2/PGI2也有下调作用。结论:三七总皂苷可以下调拟缺血损伤脑微血管内皮细胞PLA2G4A及其下游产物的表达,这可能是三七总皂苷在脑缺血损伤中发挥化瘀通络作用的机制之一。