α-亚麻酸和花生四烯酸对Nrf 2和Ⅰ相代谢酶CYP7A1表达的影响

为了检测α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)和花生四烯酸(arachidonic acid,AA)对于人肝癌细胞系(HepG2细胞)中核转录因子Nrf 2和Ⅰ相代谢酶胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)的mRNA和蛋白质表达的影响,并探究CYP7A1是否受Nrf 2的调控,试验以不同浓度的ALA和AA诱导HepG2细胞24 h,之后采用Real-time PCR法和Western-blot法分别检测HepG2细胞内Nrf 2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量。结果表明:当使ALA浓度为0.25,0.5,1 mmol/L作用于HepG2细胞时,Nrf 2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量相比于细胞对照均呈剂量依赖性升高(P<0.01);当使AA浓度为0.25,0.5,1 mmol/L作用于HepG2细胞时,Nrf 2的mRNA和蛋白质的表达量相比于细胞对照呈剂量依赖性升高(P<0.01),但CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量相比于细胞对照则呈剂量依赖性减少(P<0.01)。说明不同剂量的ALA和AA对Nrf 2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量影响不同,Nrf 2和CYP7A1呈正相关或负相关。

胆固醇7α-羟化酶调节的研究进展

胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)是在肝脏合成并促使胆固醇转化成胆酸的限速酶,对维持体内胆固醇代谢平衡起到关键作用。CYP7A1基因表达受脂代谢相关的多个核因子的精细调控,诸如HNF4a,LXR,FXR,SHP和FGF15/19及相关激素等其他因子,以维持胆固醇代谢平衡;多种中药及饮食成分对CYP7A1的基因表达也有明显调节作用,进而影响血脂代谢。本文就近10年来有关CYP7A1调节的研究进展综述如下。

胆固醇7α-羟化酶的研究进展

胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase, CYP7A1)是催化胆固醇在肝脏分解为胆汁酸的限速酶,受多种因子调控,以维持胆固醇代谢平衡,多种中药及饮食成分对CYP7A1的基因表达有明显调节作用,影响血脂代谢,本文就CYP7A1基因的研究进展综述如下。

CYP7A1基因多态性对脂代谢异常人群影响

目的了解胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)基因多态性对中老年脂代谢紊乱的影响。方法 2008年3月—2009年3月对江苏省南京市2 200名常住汉族中老年人(45～75岁)进行实验室检查,从高脂血症患者中随机抽取223例作为血脂异常组,从健康体检者中随机抽取228人作为对照组,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和CYP7A1基因多态性。结果 CYP7A1-204 A/C多态位点等位基因A、C频率在血脂异常组和正常对照组分别为30.0%、70.0%和30.7%、69.3%,等位基因频率和基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05);血脂异常组中AA、AC和CC 3种基因型的TC水平分别为(4.34±1.08)、(5.67±1.02)、(5.52±1.08)mmol/L,AC、CC型与AA型比较差异均有统计学意义(P<0.05);AA型患者的HDL-C和LDL-C水平分别为(0.88±0.28)、(1.65±0.69)mmol/L,均低于AC型[(1.15±0.27)和(2.28±0.61)mmol/L]和CC型[(1.17±0.32)和(2.31±0.80)mmol/L](P<0.05);正常对照组中仅TC水平在CC型[(4.94±0.75)mmol/L]和AC型[(5.48±0.91)mmol/L]间差异有统计学意义(t=5.104,P<0.05)。结论携带CYP7A1基因突变型的个体,发生脂代谢紊乱的风险增高。

胆宁片防治非酒精性脂肪肝的实验研究

目的研究胆宁片对大兔脂肪肝的防治作用。方法采用高胆固醇膳食致兔脂肪肝模型,研究胆宁片对大兔非酒精性脂肪肝的防治作用。结果模型组与胆宁片组的TC数值分别为(15.36±9.01)mg/dL、(2.67±5.35)mg/dL,TG分别为(1.11±0.42)mmol/L、(0.56±0.2)mmol/L,LDL-C分别为(13.16±7.39)mmol/L、(1.98+5.00)mmol/L,HDL-C分别为(0.49±0.23)mmol/L、(0.90±0.29)mmol/L,2组数据相比较,差异有显著性统计学意义(P<0.01),模型组新西兰兔的肝脏组织CYP7A1 mRNA表达较胆宁片组低,其中模型组与胆宁片组条带值分别为(0.56±0.14)(1.02±0.09),差异有统计学意义(P<0.001)。而模型组CYP2E1 mRNA表达较胆宁片组高,其中模型组与胆宁片组条带值分别为(1.49±0.31)(1.22±0.20),差异有统计学意义(P<0.05)。结论胆宁片对实验性大兔脂肪肝有一定的治疗作用。

不同脂肪酸负荷膳食对小鼠胆固醇代谢的影响

目的 为研究脂肪酸对胆固醇代谢可能的分子机制。方法 C5 7小鼠 75只 ,随机分为 5组 ,各组饲以相应配方饲料 6周。结果 与胆固醇膳食 (Chol)相比 ,胆固醇 +多不饱和脂肪酸膳食 (Chol+PUFA)可增加血清总胆固醇、机体总胆汁酸 (P <0 0 5 ) ,降低肝脏胆固醇 (P <0 0 5 ) ;胆固醇 +单不饱和脂肪酸膳食 (Chol+MUFA)动物血清总胆固醇不变 ,机体总胆汁酸明显增加 (P <0 0 5 ) ,肝脏胆固醇降低 (P <0 0 5 ) ;胆固醇 +饱和脂肪酸 (Chol+SFA)膳食可明显增加 (P <0 0 5 )血清总胆固醇和肝脏胆固醇 ,降低 (P <0 0 5 )机体总胆汁酸。此外 ,PUFA、MUFA和SFA均明显降低肝脏胆固醇 7α -羟化酶 (CYP7a1)mRNA和蛋白的表达。结论 膳食脂肪酸可通过CYP7a1调节机体胆固醇内稳态 ,多不饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸可诱导胆固醇转化为胆汁酸进而维持机体胆固醇在较低水平 ,而此过程中产生的大量胆汁酸又可反馈抑制CYP7a1的表达 ;相反 ,饱和脂肪酸可能通过直接抑制或不改变CYP7a1的表达 。

牛磺酸降低高胆固醇HepG2细胞内胆固醇的作用机制研究

目的:探讨牛磺酸对高胆固醇Hep G2细胞胆固醇降解作用及其机制。方法:以0.02 mmol/L胆固醇加入培养液中建立高胆固醇细胞模型后,分别加入1、10、20 mmol/L牛磺酸培养48 h,测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)、胆固醇酯(EC)及细胞内总胆汁酸(TBAc)和培养液总胆汁酸(TBAm)水平;并检测20 mmol/L牛磺酸作用24 h后细胞CYP7A1及其调控分子的蛋白表达水平。结果:10 mmol/L和20 mmol/L牛磺酸作用48 h可显著降低细胞内TC、FC和EC(p<0.01),同时升高了TBAc和TBAm(p<0.05或p<0.01);20 mmol/L牛磺酸作用24 h时使CYP7A1显著增加(p<0.05);20 mmol/L牛磺酸作用24 h后MAPK、ERK、JNK、c-jun和p-c-jun表达明显降低(p<0.05),而对HNF4α则无显著影响。结论:牛磺酸可抑制高胆固醇Hep G2细胞MAPK/ERK和MAPK/JNK表达水平,降低c-jun蛋白表达及c-jun磷酸化水平,促进CYP7A1蛋白表达升高,从而加速胆固醇转化为胆汁酸。

牛磺酸对HepG2细胞胆固醇水平的影响

目的:探讨牛磺酸对人肝癌细胞HepG2总胆固醇(total cholesterol,TC)、游离胆固醇(free cholesterol,FC)、胆固醇酯(cholesterol ester,EC)水平及对胆固醇代谢限速酶——胆固醇7α-羟化酶(cholesterol7α-hydroxylase,CYP7A1)蛋白表达的影响。方法:在培养液中添加终浓度为0.1、1、10、20 mmol/L的牛磺酸,分别在培养24、48 h后测定细胞内TC、FC及EC水平;在培养液中添加终浓度为20 mmol/L的牛磺酸,分别培养12、24、48、72 h后检测CYP7A1蛋白表达水平。结果:1、10、20 mmol/L的牛磺酸均可使HepG2细胞内TC、FC水平明显下降,且与牛磺酸浓度呈正比,但EC水平在牛磺酸浓度达1 mmol/L后即不随牛磺酸浓度的增加而进一步降低;培养48 h后HepG2细胞TC、FC水平的降低幅度大于24 h时;20 mmol/L牛磺酸使FC含量减少的作用强于对EC减少的作用;培养24h后HepG2细胞中CYP7A1蛋白表达最强。结论:牛磺酸可增强CYP7A1蛋白表达,促进HepG2细胞内的胆固醇代谢,胆固醇降低程度与牛磺酸浓度及作用时间相关,作用48 h的效果明显优于24 h,且牛磺酸主要是降低了细胞内的FC水平。

珊瑚状猴头菌多糖降血胆固醇作用及机制

目的探讨珊瑚状猴头菌多糖对高胆固醇大鼠血脂的影响机制。方法 SD大鼠随机分为4组:正常对照组(NC组)、高胆固醇模型组(HCM组)、试验Ⅰ组[EⅠ组,100 mg/(kg bw d)]及试验Ⅱ组[EⅡ组,200 mg/(kg bw d)],每组8只。35 d后,测定血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、以及低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)含量,同时计算血浆致动脉硬化指数(ΑIP);收集粪便,检测其中胆汁酸的量;通过Real-time RT-PCR法测定肝脏HMG-CoΑ还原酶、LDL受体(LDL-R)、胆汁酸合成限速酶(CYP7α-1)m RNA表达量。结果珊瑚状猴头菌多糖可显著降低模型组大鼠的血TC和LDL-C,增加HDL-C,使动脉硬化发生的概率减小,增加粪便胆汁酸排泄量(P<0.01或P<0.05),控制体重增长(P<0.01),降低HMG-CoΑ还原酶m RNΑ表达量,增加LDL-R、CYP7α-1 m RNΑ表达量(P<0.01或P<0.05)。结论珊瑚状猴头菌多糖能有效调节高胆固醇大鼠的血脂水平。

羟化酶活性降低是心脑血管疾病的根源

目前世界各国医学界多年研究几乎已经达成共识：高血脂症即胆固醇及脂类代谢异常,是导致心脑血管疾病的＂罪魁祸首＂.然而经过笔者多年来对心脑血管疾病的深入研究发现,7α-羟化酶（CYP7Α1）、25α-羟化酶（CYP25Α1）、27α-羟化酶（CYP27Α1）等多种羟化酶活性降低才是心脑血管疾病发病的根源.本文就羟化酶活性降低对胆固醇及酯类代谢的影响及其它相关作用机制进行了综述,并提出如何提高多种羟化酶的生物活性,使人类羟基化代谢途径正常化,从根源上预防人类的心脑血管疾病.