三角帆蚌CypA基因的克隆及其在嗜水气单胞菌感染后的表达分析

为研究亲环蛋白A(Cyclophilin A,CypA)在三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)免疫系统中的作用,研究利用PCR与RACE技术克隆获得三角帆蚌CypA基因全长cDNA序列(基因序列登录号:MN121742)。三角帆蚌CypA基因cDNA序列全长1237 bp,其5′非编码区(UTR)长度为57 bp,3′非编码区长度为688 bp,三角帆蚌CypA基因的开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)长度为492 bp,编码164个氨基酸,CypA蛋白质理论等电点为8.9,相对分子量为17.29 kD。在GenBank中进行同源序列检索,三角帆蚌CypA氨基酸序列与其他贝类CypA的相似性依次为池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii)(99.39%)、青蛤(Cyclina sinensis)(77.44%)、菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)(78.05%)、近江牡蛎(Crassostrea ariakensis)(78.66%)和大竹蛏(Solen grandis)(75.05%)。通过SWISS-MODEL预测三角帆蚌CypA含有8个β折叠和2个α螺旋,可能形成CypA的活性中心区域。利用MEGA 5.1软件将三角帆蚌CypA与其他物种CypA基因进行序列比对并构建系统进化树,分析发现三角帆蚌CypA与池蝶蚌的CypA聚为一支,其与池蝶蚌CypA具有最近的亲源关系。通过qRT-PCR检测CypA基因在三角帆蚌不同组织中表达,发现三角帆蚌性腺中CypA基因的表达量最高,肝脏、肾和鳃中的表达量次之。对三角帆蚌浸泡感染嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),CypA基因在肝脏、性腺、肠和鳃中的表达水平在感染72h先升高后降低,其表达量在性腺和鳃中6h最高,肝脏中12h达到峰值,肠中24h达到最高值,表明三角帆蚌感染嗜水气单胞菌后,可显著诱导CypA基因的表达。CypA基因在性腺中的表达量到达峰值的时间要早于肠与肝脏,且到达峰值时的相对表达量(14.91)也显著高于肝脏(9.89)、肠(9.78)和鳃(7.53),推测CypA在三角帆蚌性腺中具有防御细菌感染的重要作用,三角帆蚌性腺可能不仅具有生殖的功能,同时在免疫防御系统中也发挥着重要的作用。

急性脑梗死患者血清中CyPA、Lp-PLA2含量与动脉粥样硬化、神经损伤的相关性

目的分析急性脑梗死患者血清中亲环素A(CyPA)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)含量与动脉粥样硬化、神经损伤的相关性。方法 2014年5月-2016年5月在郑州人民医院接受住院治疗的急性脑梗死患者49例作为观察组,同期在该院进行体检的健康人49例作为对照组。入院后即刻,检测两组患者的血清CyPA、Lp-PLA2、淀粉蛋白A(SAA)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及脑源性神经营养因子(BDNF)含量,采用数字彩色多普勒超声仪测定颈动脉内膜中层厚度(CIMT)和斑块最大面积,计算颈动脉斑块的Crouse积分。结果入院后即刻,观察组患者的血清CyPA、Lp-PLA2含量高于对照组(P<0.05);观察组患者的动脉粥样硬化指标CIMT、斑块最大面积、Crouse积分高于对照组(P<0.05);观察组患者的血清神经损伤指标SAA、NSE含量高于对照组,观察组患者的IGF-1、BDNF含量低于对照组(P<0.05);经Pearson检验发现,急性脑梗死患者的血清CyPA、Lp-PLA2含量与动脉粥样硬化、神经损伤指标呈直接相关关系。结论急性脑梗死患者血清CyPA、Lp-PLA2含量上升,与动脉粥样硬化、神经损伤等病情直接相关。

联合检测FeNO、血清sTREM-1、CyPA表达水平在评估COPD患者预后中的价值

目的探讨联合检测呼出气一氧化氮(FeNO)、血清可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)、亲环素A(CyPA)表达水平在评估慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者预后中的价值。方法随机选择2017年1月-2018年12月在本院诊治的COPD稳定期患者80例,同时选择同时段在本院门诊体检的健康志愿者60例。对比两组研究对象的FeNO、sTREM-1、CyPA水平以及与肺功能、CAT评分之间的相关性。结果COPD组患者的sTREM-1、CyPA水平均显著高于健康组,FeNO水平较对照组低,差异均有统计学意义(P<0.05);COPD组患者的IL-16、IL-18、TNF-α的水平显著高于健康组,差异有意义(P<0.05),不同级别GOLD分级患者的FeNO、sTREM-1、CyPA水平之间差异有意义(P<0.05),随着肺功能的下降,sTREM-1、CyPA水平逐渐升高,FeNO水平逐渐下降;随着GOLD分级的升高患者的CAT评分逐渐升高;sTREM-1、CyPA水平与COPD呈正相关,FeNO水平与COPD呈负相关(P<0.05),sTREM-1、CyPA水平与CAT呈正相关,FeNO水平与CAT呈负相关(P<0.05)。使用ROC曲线评价FeNO、sTREM-1、CyPA水平对COPD的诊断价值,结果表明FeNO、sTREM-1、CyPA单独检测的曲线下面积分别为0.794、0.765、0.753,三者联合检测的曲线下面积为0.902,诊断价值较高,敏感度、特异度分别为89.84%、71.54%。结论sTREM-1、CyPA水平与COPD的发生发展有较大关系,并且与病情严重程度呈相关性。FeNO值可用来评估COPD患者的气道损伤情况,并且可反映病情程度,三者联合检测可提高COPD的敏感度、特异度,对病情的评估有重要意义,在临床上可广泛使用。

电针长强穴对FMR1基因敲除小鼠小脑CypA相关蛋白表达的影响及其阻断效应研究

目的:观察针刺长强穴对脆性X精神发育迟缓1(FMR1)基因敲除(KO)小鼠小脑CypA-ERK1/2通路相关蛋白表达的影响,并探讨其作用机理。方法:选取FMR1基因缺失且日龄为28日的KO小鼠24只,通过聚合酶链式反应(PCR)鉴定小鼠基因表型,采用数字随机表法分为空白组、长强穴组、阻断剂+长强穴组和非经非穴组,每组6只。空白组仅给予抓取动作,其余组别采取针刺干预,Western blot手段检测小脑CypA、P-ERK1/2、ERK1/2相关蛋白的表达情况。结果:长强穴组CypA的表达明显高于非经非穴组和空白组(P<0.05);长强穴组和非经非穴组P-ERK1/2的表达明显高于空白组(P<0.05);长强穴组ERK1/2的表达明显高于非经非穴组和空白组(P<0.05);而上述效应能被ERK通路阻断剂PD98059所逆转,但阻断剂+长强穴组与长强穴组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:针刺长强穴能促进FMR1基因敲除小鼠小脑区域CypA-ERK1/2通路相关蛋白的表达,其作用能被ERK通路阻断剂所阻断。

慢病毒介导的CyPA基因沉默对非小细胞肺癌细胞生长的影响

目的构建特异性沉默CyPA基因的慢病毒颗粒,体外观察其对非小细胞肺癌H1299细胞生长的影响。方法根据已筛选的特异性沉默CyPA基因靶序列寡核苷酸,合成一对正义反义寡核苷酸DNA,采用基因克隆技术分别插入PGCL-GFP慢病毒载体,以脂质体法将重组PGCL-GFP与病毒包装载体pHelper1.0、pHelper 2.0共转染293T细胞,制备假包装病毒颗粒(Lv-shCyPA)并感染非小细胞肺癌H1299细胞,4 d后采用RT-PCR、Western-blot及MTT分别检测CyPA基因mRNA、蛋白表达水平及H1299细胞增殖状态。结果构建的LV-shCyPA慢病毒颗粒感染H1299细胞,CyPA mRNA及蛋白表达显著下调,H1299细胞生长明显减缓,与未转染病毒、阴性对照病毒转染的H1299细胞比较有显著差异(P<0.05)。结论成功构建了沉默CyPA基因慢病毒载体,其产生的假包装病毒颗粒能特异地沉默CyPA基因,抑制H1299细胞增殖,提示CyPA可能在非小细胞肺癌的发生发展中发挥一定的作用。

CyPA与慢性肾衰竭相关性及作用研究

目的研究亲免素A(CyPA)在正常人及慢性肾衰竭(CRF)患者外周血中的浓度水平变化,明确CyPA是否与慢性肾衰竭有关联性及可能的作用机制.方法 CRF患者及正常人对照组各50例,采用ELISA法分别测定(1)正常人外周血CyPA,同时测定AngII、、TNFα、IL-6、IL-1α、单核细胞趋化蛋白(MCP-1).(2)慢性肾衰竭患者厄贝沙坦治疗前抽取外周血测定CyPA,AngII、TNFα、IL-6、IL-1α、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)水平.治疗1月后再次抽取外周血测定外周血CyPA,AngII、TNFα、IL-6、IL-1α、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)水平.比较组间差异及分析CyPA与CRF的相关性及CyPA与AngII、TNFα、IL-6、IL-1α、MCP-1等炎性因子的关联性.结果 (1)CRF组外周血CyPA水平治疗前后均高于健康对照组;(2)在CRF组与正常对照组中,外周血CyPA水平与AngII、TNFα、IL-6IL-1α、MCP-1等存在组间差异(P<0.01);(3)经spearman相关分析,在对照组中,慢性肾衰竭治疗前,及慢性肾衰竭氯沙坦治疗后,CyPA均与AngII及TNFα、IL-6、IL-1α、MCP-1有相关性.结论 CyPA可能与AngII协同作用,增加炎性细胞因子趋化水平,促进了CRF患者炎性反应,加重肾小球、肾小管及间质损伤.炎症反应是慢性肾衰竭加速进展的重要原因之一.通过选择性的抑制CyPA或阻断CyPA受体可能为我们提供了一条新的可供选择的治疗途径.

CypA的生物学功能及其与肺癌相关的研究进展

肺癌已经成为对人类健康威胁最严重的恶性肿瘤，发病率和病死率逐年上升。根据卫生部公布的第三次全国居民死亡原因调查结果显示，我国肺癌的死亡率已经高达30．83／10万，比30年前上升了465％。肺癌的病因至今仍不完全明确，吸烟、遗传因素、环境污染、自身免疫状态、肺部慢性疾病等均被认为对肺癌的发病有影响。

24 h动态心电图联合CyPA检测在高血压性心脏病诊断中的应用

目的:探讨24 h动态心电图联合亲环素A(CyPA)检测对高血压性心脏病(HHD)的诊断价值。方法:80例HHD患者设为HHD组,另选取同期年龄、性别相匹配且排除心脏损伤的80例高血压患者作为对照组,均行24 h动态心电图检查,并检测血清CyPA水平;比较两组动态心电图ST-T改变阳性率和血清CyPA水平,并应用受试者工作特征曲线(ROC)评价两种检查及其联合对HHD的诊断效能。结果:HHD组ST-T改变阳性率、CyPA水平、CyPA阳性率均高于对照组[83.54%vs.11.25%、(8.15±1.37 ng/L)vs.(10.49±2.06 ng/L)、80.00%vs.16.25%,P<0.05]。24 h动态心电图联合血清CyPA诊断HHD的敏感度为93.75%,特异度为87.50%,ROC曲线下面积(AUC)为0.906,诊断效能优于各单一检查。结论:24 h动态心电图、血清CyPA检测联合应用可提高对HHD诊断的敏感度。

强心饮配合综合治疗对慢性充血性心力衰竭老年患者血清中Galectin-3、CyPA及Copeptin水平的影响

目的探讨强心饮配合综合治疗对慢性充血性心力衰竭老年患者血清中半乳糖凝集素3(Galectin-3)、亲环素(Cy PA)及和肽素(Copeptin)水平的影响。方法前瞻性选取2018年6月至2020年10月在上海市北站医院老年医学科住院治疗的慢性充血性心力衰竭患者168例,按照随机数字表法分为对照组和治疗组,各84例。对照组患者给予综合治疗(贝那普利、双氢克脲噻、琥珀酸美托洛尔),治疗组患者在对照组的基础上给予加用中药剂型强心饮治疗,两组均连续治疗15 d。观察两组患者的临床疗效及临床症状好转时间;比较两组患者的心功能的每搏输出量(SV)、心输出量(CO)、心脏指数(CI)、左心室射血分数(EVEF),血清Galectin-3、Cy PA及Copeptin水平以及不良反应发生情况。结果治疗组患者总有效率(98.81%)明显高于对照组(88.09%),差异有统计学意义(P <0.05)。治疗组患者心悸、气短、胸闷、四肢浮肿等临床症状好转时间均低于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05)。治疗1个月后,治疗组患者的心功能SV、CO、CI、EVEF指标水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05)。治疗组患者血清Galectin-3、CyPA、Copeptin水平均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05)。治疗组不良反应总发生率(7.14%)明显低于对照组(14.29%),差异有统计学意义(P <0.05)。结论慢性充血性心力衰竭老年患者给予强心饮配合综合治疗效果明显,能有效改善心功能,并有效降低血清Galectin-3、Cy PA、Copeptin水平,且安全有效。

克氏原螯虾(Procambarus clarkii)CypA基因应答WSSV侵染的表达研究

克氏原螯虾亲环素蛋白A(Procambarus clarkii Cyclopllilin A,简称PcCypA)是一种存在于克氏原螯虾(P.clarkii)中高度保守的重要蛋白,具有多种生物学功能。为了初步阐明CypA在病毒侵染克氏原螯虾过程中的免疫应答机制,本研究利用qRT-PCR等技术分析了克氏原螯虾在WSSV病毒感染后,PcCypA在不同组织中的转录表达情况。研究结果表明克氏原螯虾在感染WSSV后,心脏和肌肉组织中都出现了肌纤维断裂溶解的情况,在肝胰腺组织中出现了脂肪颗粒脱落、细胞空泡化和细胞膜溶解现象。同时,不同组织中的PcCypA基因表达存在明显的时序差异,以24hpi为界,0—24hpi为注射应激期,在此期间,肝胰腺、心脏等组织中的PcCypA转录表达量均有上调;24—36hpi为应激恢复期,绝大多数的组织中PcCypA转录表达均出现了回落,但在心脏、肌肉、血淋巴组织中出现了上调,说明这三个组织对WSSV感染的响应可能早于其他组织;48hpi之后为病毒感染响应阶段,在此期间鳃和肌肉组织中PcCypA表达量显著提升,而在肝胰腺和精巢组织中却出现表达下调;96—120hpi为感染响应后期阶段,肝胰腺和肠组织的PcCypA转录水平再次上调。因而,可以初步推断PcCypA在病毒WSSV侵染克氏原螯虾过程中参与了机体的免疫应答,且在不同的组织中PcCypA的转录表达水平存在显著差异。

蒙花散对急性心肌梗死大鼠心功能及心肌CyPA、XBP1、p-ERK、HO-1蛋白表达的影响

目的:探索蒙花散对急性心肌梗死(AMI)大鼠心功能及心肌CyPA、XBP1、p-ERK、HO-1蛋白表达的影响。方法:80只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组及蒙花散低、中、高剂量组,戊巴比妥钠麻醉后,采用左冠状动脉前降支穿线并结扎的方式制备AMI大鼠模型,蒙花散各剂量组灌胃相应剂量蒙花散,假手术组和模型组灌胃相应体积生理盐水,连续给药6 w后,比较各组大鼠心脏功能指标,血清SOD、MDA、CK-MB、cTnⅠ水平,炎性因子、凝血因子,心脏组织CyPA、XBP1、p-ERK、HO-1蛋白表达,心肌组织氧化应激指标SOD、MDA。结果:与模型组比较,蒙花散各剂量组SBP、DBP、LVSP、LVFS、LVEF、±dp/dt_(max)、AT-Ⅲ及血清SOD、HMGB1和心肌组织p-ERK、HO-1显著升高,LVEDD、LVESD、QT间期、T波幅度、ST段抬高幅度显著降低,心肌组织MDA水平及CyPA、XBP1蛋白表达显著降低,血清MDA、CK-MB、cTnⅠ、TGF-β、TNF-α、IL-1、IL-6、MMP-9、β-TG、FPA、DD、GMP-140、BNP水平显著降低(P<0.05)。结论:蒙花散对AMI大鼠的心脏功能和心肌CyPA、XBP1、p-ERK、HO-1蛋白表达具有较好的改善作用,可减轻机体氧化应激水平和心肌损伤程度。

新型根管填充介质治疗根管周病的临床疗效及对CypA RANKL水平的影响

目的:探讨新型根管填充介质治疗根管周病的临床疗效及其对病灶区CypA(亲环蛋白A)、RANKL(核因子-κB受体活化因子配基)水平的影响。方法:将2013年1月至2016年1月间我院收治的120例牙髓病及根尖周炎患者随机分为观察组和对照组各60例,观察组患者采用牙胶尖及环氧树脂类糊剂进行干预,对照组患者采用使用牙胶尖及氢氧化钙类糊剂进行填充;治疗结束8周后对患者的临床疗效及疼痛情况进行评价;治疗时及治疗后8周时,取患牙牙周组织进行做切片样本,使用免疫组织化学染色法对组织切片中的CypA及RANKL水平进行检查。结果:观察组患者临床疗效优良率明显高于对照组,差异存统计学意义(P<0.05);经治疗后观察组患者重度疼痛人数比例显著低于对照组(P<0.05),无疼痛人数比例显著高于对照组(P<0.05);经治疗后两组CypA及RANKL水平均显著降低(P<0.05),经治疗后观察组患者病理组织中CypA及RANKL水平明显低于对照组,差异存统计学意义(P<0.05)。结论:采用新型根管填充介质治疗后可显著提高根管周病患者治疗的临床疗效,并可降低病灶区CypA、RANKL水平,有利于患者康复。

银杏内酯对过氧化氢损伤的皮层神经元和SH-SY5Y细胞亲环蛋白A(CypA)表达的影响

目的:研究银杏内酯(ginkgolides,Gin)对过氧化氢(H2O2)诱导的皮层神经元及SH-SY5Y细胞(神经母细胞瘤细胞)损伤的保护作用及其机制。方法:在培养1周的小鼠皮层神经元培养基中加入H2O2,建立神经元氧化损伤模型,用同样方法建立SH-SY5Y细胞氧化损伤模型。采用MTT比色法检测细胞活力,Western Blot技术分析亲环蛋白A的表达变化。结果:H2O2可诱导神经元和SH-SY5Y细胞损伤,使细胞活力降低,可下调亲环蛋白A的表达;Gin预处理12 h可提高细胞活力,可使亲环蛋白A表达增加。结论:Gin可抑制H2O2引起的神经元及SH-SY5Y细胞损伤,该保护作用与其上调亲环蛋白A的表达有关。

Effect and mechanism of CyPA in radiosensitization of lung adenocarcinoma using CRISPR/Cas9 technology

Objective:To explore the role of cyclophilin A(CyPA)in sensitization of lung adenocarcinoma to radiotherapy using CRISPR/Cas9 technology.Methods:A CyPA knockout human lung adenocarcinoma cell line H1975 was established by CRISPR/Cas9 technology.Groups included a control group(wildtype),CyPA knockout group,traditional Chinese medicine(TCM)extract with Fuzhengzengxiao decoction group,and TCM extract with Fuzhengzengxiao decoction t CyPA knockout group.Each group was exposed to radiation at doses of 0,2,4,6,and 8 Gy.After 24 h,MTT assays were used to determine the survival rate of lung cancer cells and calculate radiosensitivity.The qPCR was used to measure mRNA expression of DDIT3,CDKN1A,and CDC25A associated with DNA damage repair.Results:Without irradiation,Fuzhengzengxiao decoction reduced the survival rate of lung adenocarcinoma cells(P<.0001).After irradiation,TCM extract with Fuzhengzengxiao decoction,CyPA knockout,and TCM extract with Fuzhengzengxiao decoction t CyPA knockout groups had reduced survival rates(P<.0001)and radiosensitivity was increased significantly.Expression of DDIT3,CDKN1A,and CDC25A was upregulated after knockout of CyPA(P<.0001).Expression of DDIT3 and CDC25A was increased after irradiation in wildtype cells treated with TCM extract with Fuzhengzengxiao decoction(DDIT3,P<.0001;CDC25A,P紏.0059).The TCM extract with Fuzhengzengxiao decoction t CyPA knockout group also had increased expression of DDIT3 and CDC25A after irradiation(P<.0001).Conclusion:Fuzhengzengxiao decoction significantly decreases the survival rate of lung cancer cells,and its mechanism may be related to radiosensitization by decreasing expression of CyPA and inducing G1/S cell cycle arrest.

热带假丝酵母1230细胞色素P450基因CYPA14与CYPA16的克隆和表达

细胞色素P450(CYP)是一种单加氧酶,在热带假丝酵母(Candidatropicalis)ω-氧化过程中发挥关键作用。通过对来源不同的P450基因进行同源性分析,首先克隆到热带假丝酵母1230中P450基因的部分序列,再利用基因组步行法克隆其未知序列,结果分别获得了两个P450同工酶基因CYPA14和CYPA16的完整序列。经PCR方法证实,二者在染色体上的位置相邻,其读码框分别编码522和540个氨基酸残基的肽链。经NCBIBLAST搜索比较后发现,二者与热带假丝酵母ATCC20336中的P450成员CYP52A14和CYP52A16分别编码的序列几乎完全一致,与热带假丝酵母ATCC750中的P450成员CYP52A2和CYP52A1也具有较高的相似性。同时,对经诱变后的几株二元酸生产菌株的CYPA14与CYPA16也进行了克隆和序列比较,发现部分序列中的个别氨基酸残基发生了突变。CYPA14和CYPA16均在酿酒酵母中获得了有效表达,其中CYPA16的P450表达含量高于CYPA14,后者有部分表达产物发生了变性。

血清CypA对糖尿病患者大血管病变发病的影响

目的:探究血清亲环素A(Cyclophilin A,CyPA)对糖尿病患者大血管病变发病的影响.方法:选取2016年1月~2018年1月于我院接受治疗的84例糖尿病患者,根据患者大血管是否发生病变将其分为大血管病变组(MCV组,n=64)与无大血管病变组(N-MCV组,n=20),另选取同期在我院体检、经相关大血管病变检查正常者25例作为对照组(NC组,n=25),对三组患者进行临床一般资料收集后对其血清CypA、空腹血糖(FPG)、血清总胆固醇(TC)、身体质量(BMI)、甲状腺球蛋白(TG)、心室收缩压(SBP)、心室舒张压(DBP)、转录因子蛋白κB(NF-κB)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、糖化血红蛋白(Hb A1c)等常规生化指标进行检测,可能造成糖尿病患者大血管病变发病的因素进行Logistic回归模型分析.结果:N-MCV组、NC组的血清CypA、hs-CRP水平明显比MCV组低,差异具有统计学意义(P<0.05);单因素分析结果表明,患者不同年龄、身高、体重、TG、SBP、DBP、HbA1c等因素与其大血管病变发病率比较差异无统计学意义(P>0.05);Logistic回归分析结果表明,血清CypA和hs-CRP是糖尿病患者大血管病变发病的影响因素.MCV组与N-MCV组患者体内血清CypA含量明显高于NC组,MCV组患者体内血清CypA含量高于N-MCV组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:血清CypA是影响糖尿病患者大血管病变发病的重要因素之一,早期对糖尿病患者治疗来降低体内血清CypA值,对延缓其大血管病变的发展有一定帮助作用.

血清CyPA、sST2、CySC水平变化与慢性心力衰竭心功能分级相关性分析

目的分析血清亲环素A(CyPA)、可溶性血清基质裂解素(sST2)、胱抑素C(CySC)水平变化与慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)患者心功能分级的相关性。方法选取本院72例CHF患者作为观察组,另取本院同期健康体检者72例作为对照组,均行血清CyPA、sST2、CySC水平检测。观察比较两组血清CyPA、sST2、CySC水平,并分析其与CHF心功能分级的相关性。结果观察组血清CyPA、sST2、CySC水平均高于对照组,且随着心功能分级越高其血清CyPA、sST2、CySC水平呈阶梯升高趋势,差异有统计学意义(P<0.05);经相关性分析,心功能分级与血清CyPA(r=0.366)、sST2(r=0.453)、CySC(r=0.328)水平呈正相关(P<0.05)。结论 CHF患者心功能损害越严重,血清CyPA、sST2、CySC水平越高,可用于评估患者病情。

检测CyPA自身抗体滴金免疫测定法的建立

建立一更快速、简便的检测人血清抗ＣｙＰＡ自身抗体的方法．用重组人ＣｙＰＡ和胶体金标记的蛋白Ａ建立了检测抗ＣｙＰＡ自身抗体的滴金免疫测定法．将ｒｈＣｙＰＡ点样包被于硝酸纤维素膜，抗体在血清渗滤过程中与膜上抗原反应而固定，通过胶体金标记的蛋白Ａ直接显色，阳性结果在膜中央出现一红色斑点．整个测定过程在５ｍｉｎ内完成．与ＥＬＩＳＡ法对比检测了４５份ＳＬＥ病人血清，两法均阳性２０份，均阴性２３份，总符合率为９５．６％．本法简便易行，耗时短，试剂安全、灵敏、特异。

CyPA诱导淋巴细胞趋化不依赖其脯氨酸异构酶活性的新机制:CyPA与CD147胞外结构域的直接相互作用

CyPA是广泛存在的一种脯氨酸顺反异构酶（PPIase），具有多种生物学功能。炎症部位通常分泌大量的CyPA，分泌到细胞外的CyPA是一种有效的趋化剂，能够直接诱导淋巴细胞向炎症部位迁移，从而加重炎症介导疾病的进展和恶化。

小鼠抗人亲环蛋白A(CypA)单克隆抗体的制备和应用

目的原核表达人亲环蛋白A (CypA)、制备抗人亲环蛋白A (CypA)单克隆抗体(mAb)并初步探索其在结肠癌发生发展中的作用。方法根据CypA基因序列,以原核表达系统表达CypA重组蛋白,经镍亲和层析柱纯化,免疫小鼠,杂交瘤法制备mAb;采用免疫组织化学染色法检测CypA在结直肠癌与癌旁组织中的差异表达,并分析与临床病理参数的相关性。结果成功构建了CypA原核表达载体,获得纯化的目的蛋白;获得1株稳定分泌抗人CypA mAb的杂交瘤细胞株;研究表明,结直肠癌组织CypA阳性染色率显著增高并与肿瘤分化程度及淋巴结转移相关。结论成功制备了小鼠抗人CypA mAb,并发现CypA在结直肠癌组织中高表达,与低分化和淋巴结转移呈正相关。