苦豆子种子中生物碱的分离及lehmannine的结构确定

目的 研究苦豆子种子中生物碱的分离及槐果碱转移氢化制备苦参碱的研究。方法 利用离子交换、萃取和柱层 ,并结合转移氢化增大不同生物碱理化性质差异进行分离。结果 从苦豆子种子中分得 5种生物碱 ,其结构经元素分析、IR、MS、1 H NMR和 1 3CNMR光谱鉴定为氧化苦参碱、氧化槐定碱、苦参碱、槐定碱和 lehannine。结论 首次从苦豆子种子中分得 lehm

CZE法鉴别测定苦豆草药材中多种生物碱成分

建立了一种同时在苦参药材中鉴别9种生物碱并测定其中6种生物碱含量的毛细管区带电泳法。即用未涂渍熔融石英毛细管柱50μm×41.5cm(有效长度33cm),以0.3mol/L Tris水溶液-正丙醇(V/V=60/40,pH=7.0)为运行缓冲液,氯丙那林为内标,在检测波长210nm、运行电压30kV、50mbar压力下进样10s、运行温度25℃和分析时间40min进行毛细管区带电泳。结果表明,宁夏市售苦豆草中含有野靛碱、莱蔓碱、槐安碱、苦参碱、槐定碱、槐果碱、苦豆碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱,其中苦参碱、槐果碱、苦豆碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱的含量接近,槐定碱的含量明显高于它们。本法灵敏、准确、专属性好,适用于苦豆草药材中生物碱成分的鉴别和含量测定。

TLC和HPLC法同时测定苦豆子总碱中槐定碱和苦参碱的体系优化

采用薄层层析法（TLC）,展开剂为氯仿-甲醇-氨水=8∶2∶0.1;同时采用高效液相色谱法（HPLC）,色谱柱为Ultra II^TM C18（5μm×250mm×4.6mm）、流动相为0.01mol/L磷酸盐缓冲液-甲醇（45∶55）、检测波长为216nm、流速为1.0mL/min、柱温为30℃、进样量为10μL;建立TLC和HPLC同时分离测定苦豆子生物碱体系的优化方法。结果表明：槐定碱和苦参碱在200-900μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系,R2分别为0.9994和0.9996。平均回收率（n=9）分别为99.47%和99.82%;试验表明可通过TLC和HPLC法同时测定苦豆子总碱中槐定碱和苦参碱的含量,并可用该方法进行苦豆子药材及含苦豆子药用成分的质量控制。

宁夏产苦豆子不同器官HPLC指纹图谱的分析研究

目的用HPLC指纹图谱的方式研究苦豆子不同器官中各生物碱的变化。方法采用HPLC检测方法,色谱柱Waters X-Brige C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.05 mol/L的磷酸二氢钾溶液(2.0ml/L三乙胺),进行梯度洗脱;检测波长为205 nm,进样量10μl,流速1.0 ml/min。结果 10批不同器官的苦豆子样品得到7个共有峰,通过与对照品比较,2、3、5、6、7号峰确定为野靛碱、槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱。结论该指纹图谱的分析体现了不同器官的苦豆子样品所含各成分及各成分的含量变化较大。

微波法提取苦豆子生物碱的研究

苦豆子资源在国内比较丰富,其有效成分生物碱含量较高,目前国内外对苦豆子的研究和利用重点放在了生物碱上,本文对苦豆子生物碱传统提取法和微波辅助提取法进行了试验比较,在单因素实验的基础上,采用正交设计方法,考察微波时间、微波功率、料液比3个因素对苦豆子生物碱提取的影响,结果表明:微波辅助提取生物碱效果较好,最佳条件是微波提取时间为30S、微波功率为360W、料液比为(g/mL)1∶5。利用这种方法生物碱的提取效率较高,生产成本较低,工序较为简单,适宜于工业化生产。

苦豆子抗内毒素效应的实验研究

目的:研究苦豆子中提取的苦豆子总碱及氧化苦参碱、槐定碱、槐果碱对内毒素肺损伤小鼠模型的干预作用及其作用机制。方法:以清开灵注射液作为本研究的阳性对照药物。分别连续3天腹腔注射给予ICR小鼠各个生物碱及清开灵,均末次给药后1 h腹腔注射LPS(E.coil,055∶B5)9 mg/kg造成小鼠内毒素性肺损伤,观察小鼠一般状况、白细胞数量、肺W/D比值、肺组织病理形态学改变,以及免疫组织化学法检测肺组织CD14和清道夫受体(SR-A)的表达,放免法检测血清肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量。结果:预防性给予内毒素肺损伤小鼠苦豆子总碱和三种苦豆子单体碱,均不同程度改善了模型鼠的一般状况,并可不同程度地升高外周血白细胞,降低肺脏W/D比值,减轻肺组织病理改变,降低模型鼠肺组织CD14表达,增加SR-A表达,降低血清中TNF-α和IL-6的水平。结论:苦豆子总碱和三种苦豆子单体碱可不同程度地减轻内毒素肺损伤小鼠的病理损害,它们的抗内毒素机制可能与调节LPS的识别受体,并进而影响下游炎症因子表达有关。

苦豆子生物碱单体的分离纯化工艺研究

在对苦豆子的酸水浸提液进行了超滤和脱色预分离的基础上，采用不同的有机溶剂萃取和硅胶柱层析对其中主要的生物碱进行分离纯化及条件优化。结果表明合适的生物碱萃取富集条件是用氯仿为溶剂，pH=10．5。该氯仿萃取液用硅胶柱层析分离，洗脱剂为氯仿．甲醇．氨水（5：0．4：0．01，V/V/V），洗脱速度1柱床体积·h^-1，得到峰1～峰3。峰1和峰2中的化合物经丙酮结晶和重结晶分别得到纯度99％以上的氧化槐果碱和氧化苦参碱；峰3对应的组分再经硅胶柱层析，洗脱剂为丙酮．甲醇（10：1，V／V），洗脱速度1柱床体积·h^-1，得到峰4～峰6，峰4中的化合物经石油醚结晶和重结晶，可以得到纯度95．8％的槐定碱。采用了HPLC-MS，IR，熔点测定和薄层色谱等方法进行上述生物碱单体的定性定量及分子结构确定。本研究为深度开发苦豆子生物碱资源和为制备医药工业所需的高纯度生物碱原料提供了依据。

苦豆子种子中生物碱的冷浸提取实验研究

目的 考察苦豆子种子中生物碱的冷浸工艺条件。方法 在室温下用稀盐酸水提取苦豆籽中的生物碱 ,考查 p H值、浸提时间、豆籽粉粒度及保持负压、超声波振荡下总碱浸出率 ,并对比热浸状况。结果 总生物碱浸出率可达 3 .7%以上。结论 在优选的工艺条件下 ,可能提高收率和浸提速度。

苦豆子内生真菌对宿主培养物生长及喹诺里西啶类生物碱合成的影响

利用苦豆子健康植株中分离鉴定的8株内生真菌菌株为真菌诱导子,分别制备灭活菌丝和菌液浓缩物,研究内生真菌诱导子不同种类、浓度和诱导时间对苦豆子无菌苗和愈伤组织的生长以及喹诺里西啶生物碱含量的影响。结果表明:8株苦豆子内生真菌诱导子中,菌液浓缩物的诱导效果要强于灭活菌丝。菌株HMGKDF1菌液浓缩物和灭活菌丝都能明显促进愈伤组织的生长,净生长率是对照的1.82和1.42倍;菌株NDZKDF13菌液浓缩物对愈伤组织生物碱的合成效果明显,生物碱含量为0.5483 mg·g-1,是对照的23.8倍;在一定浓度范围内(0.01~1.0 mg·L-1),苦豆子内生真菌诱导子能够促进宿主植物喹诺里西啶生物碱的合成。内生真菌诱导子处理苦豆子无菌苗12 d时,喹诺里西啶生物碱含量最高,是对照的2.65倍。在苦豆子无菌苗或愈伤组织中添加一定量的苦豆子内生真菌诱导子,对宿主的生长以及提高喹诺里西啶生物碱含量是一种有效的方法。

几种苦豆子生物碱对小菜蛾部分生理指标的影响

四龄小菜蛾幼虫经苦豆子7种生物碱处理后，表现呼吸强度增加，完成完整呼吸次数减少，其中，苦参碱、苦豆碱和槐胺碱均显著促进试虫二氧化碳释放量和释放过程。槐果碱处理试虫体内总糖含量显符降低。所有处理试虫的生长发育均显著受到抑制。

新疆苦豆子种子中生物碱类化学成分的研究

采用硅胶柱层析法、氧化铝柱层析法、Sephadex LH-20柱色谱法,以及重结晶等方法对新疆苦豆子种子中生物碱类化学成分进行研究,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定其结构。结果从新疆苦豆子种子中分离得到4个化合物,分别鉴定为9α-羟基苦参碱(Ⅰ)、苦参碱(Ⅱ)、槐定碱(Ⅲ)、氧化苦参碱(Ⅳ)。其中化合物Ⅰ为首次从本植物中分离得到。

苦豆草中抑制杉炭疽菌分生孢子萌发的物质

预试验发现苦豆草地上部分乙醇提取物对杉炭疽菌有较强的抑制活性 ,进一步用不同溶剂 ,在不同 pH条件下萃取将苦豆草乙醇提取物分离为 4个组分。生测表明其生物碱部分对该菌的抑菌活性最强。将生物碱部分用氧化铝柱层析分离得到 7种单体结晶。用熔点、旋光度、红外、和GC MS得到的MS数据与文献相应数据对照鉴定了这 7种生物碱 ,它们分别是 :槐果碱、苦参碱、槐胺碱、莱曼碱、槐定碱、苦豆碱、野靛碱。用纸环法生测表明这 7种生物碱对杉炭疽菌分生孢子萌发均具有较强的抑制活性 ;它们的EC50 为 :苦豆碱 72 0 μg/mL ,野槐胺碱 1 98 0 μg/mL ,苦参碱 86 0 μg/mL ,槐果碱 2 4 0 μg/mL ,槐定碱 2 6 0 μg/mL ,莱曼碱 1 2 6 0 μg/mL ,而相同条件下的常用杀菌剂 75 %百菌清和 70 %甲基托布津的EC50 值分别为 82 0和 1 1 8 0μg/mL。

酶法提取苦豆草生物碱研究

目的在实验室酶法提取的基础上,优化苦豆草生物碱酶法提取小试工艺条件。方法以苦豆草生物碱的提取率为指标,在小试条件下优化提取次数、料液比、提取时间,并与传统提取法比较。结果酶法提取最佳的小试工艺条件为:酶解时间4h,溶剂pH=6,温度为50℃,加酶量为1∶1 000,酶解后,加入盐酸至浓度为4mL·L-1,料液比1∶16,提取2次,第1次2h,第2次1h。苦豆草生物碱的提取率达到2.17%结论实验室提取工艺与小试生产存在差异,经条件优化基本达到实验室提取生物碱的提取率。

苦豆子生物碱的农用活性初步研究

本研究选择测定了从苦豆子中提取的几种主要生物碱和总生物碱的抑菌、杀虫、除草和植物生长调节活性 ,结果显示其杀虫活性明显高于其它三方面 ,且杀虫活性亦具有显著的选择性 。

响应曲面法优选苦豆子总生物碱的提取工艺研究

以甘肃苦豆子为原料,利用超声波辅助提取苦豆子总生物碱,并采用Box-Behnken对超声波超声时间、乙醇浓度、料液比进行响应面优化。结果表明:最佳提取工艺参数为乙醇浓度65%,料液比1∶8 g/m L,提取时间30 min。在此条件下,总生物碱提取率为29.1 mg/g,超声提取工艺合理、可行,为苦豆子总生物碱的新药开发提供了理论参考。

大孔吸附树脂分离纯化苦豆草总生物碱的工艺研究

目的采用大孔树脂分离纯化苦豆草总生物碱,优选最佳工艺条件。方法以苦豆草总生物碱的吸附量及解吸率为评价指标,比较DF01、D101等8种型号大孔树脂对苦豆草总生物碱的分离纯化性能,选出最佳树脂并优选纯化工艺。结果 D101型大孔树脂对苦豆草总生物碱具有较好的吸附分离性能,在实验条件下对苦豆草总生物碱的吸附量和解吸率可达到9.2mg·mL-1和90%以上。结论该优选工艺可为苦豆草总生物碱纯化的产业化生产提供依据。

苦豆子总生物碱提取工艺的优化研究

对汉中苦豆子中总生物碱的提取工艺进行了研究,结果表明:提取在A2B3C1D2条件下,即乙醇浓度为65%,料液比(g/mL)为1∶15,浸提时间为5 h,浸提温度为60℃。此时,提取得到苦豆子生物碱含量为6.7%。

苦豆子生物碱对内毒素的体外灭活作用

目的观察苦豆子生物碱对内毒素(LPS)的体外灭活作用。方法利用鲎试剂显色基质法定量测定苦豆子总碱、槐果碱、槐定碱、氧化苦参碱体外灭活LPS的作用及其剂量效应关系。结果槐果碱浓度为1.25μg/ml、槐定碱5μg/ml,作用1小时即有显著灭活LPS的作用,灭活百分率分别为79.04%和79.34%;苦豆子总碱浓度为40μg/ml时灭活LPS达77.20%;氧化苦参碱浓度为125μg/ml时可减少LPS 44.68%。4种苦豆子碱对LPS的灭活率在一定范围内随药物浓度增加而提高。结论苦豆子总碱及3种单体碱具有体外直接灭活内毒素作用,并在一定范围内呈现量效关系。

宁夏道地药材苦豆子的不同药用部位中生物碱成分和含量的测定分析

为分析研究宁夏苦豆籽、苦豆草2个药用部位的生物碱成分及各成分含量,采用HPLC法分析测定了苦豆籽、苦豆草中槐定碱、苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱、苦豆碱6种生物碱成分及含量的变化,以期为综合开发利用苦豆子这一具有地域性特色的药用植物提供参考。结果表明:槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱的含量在苦豆子药材不同药用部位中存在明显差异;其质量浓度和峰面积在线性范围内,呈良好的线性关系(R≥0.999),加样平均回收率分别为97.6%、98.2%、99.5%、96.4%、100.2%,RSD分别为2.7%、1.9%、3.8%、0.91%、2.2%。

苦豆子提取物及其7种生物碱单体对埃玛菌素的增效作用

以苦豆子（Sophora alopecuroids L．）种子的甲醇提取物、水提取物及其7种生物碱单体和小菜蛾（Plutella xylostella）幼虫为试材，对生物源杀虫剂埃玛菌素进行增效作用研究。结果表明，7种生物碱单体对埃玛菌素增效比值为1．013～1．565。其中，苦豆碱和槐胺碱的增效作用最为明显，增效比值分别为1．565和1．413；而苦参碱和槐定碱对埃玛菌素的增效作用较差，增效比值仅为1．138和1．013，这2种生物碱单体对埃玛菌素仅表现出联合作用。苦豆子甲醇提取物和水提取物对埃玛菌素增效活性大于各生物碱单体，增效比值分别为3．443和2．027。