水稻Ca^(2+)/H^+反向转运体OsCAX3的功能分析和亚细胞定位研究

Ca2+/H+反向转运体作为一类Ca2+外向转运器,在植物的营养和信号转导中起着非常重要的作用.克隆了水稻Ca2+/H+反向转运体基因OsCAX3,序列分析表明OsCAX3具有11个跨膜区,其中在第6和第7个跨膜区之间有一个17个氨基酸组成的酸性基序(acidmotif),功能互补实验证明OsCAX3具有转运Ca2+的功能,并且其N端26个氨基酸序列对转运Ca2+具有一定的抑制作用.RT-PCR分析表明OsCAX3的表达受到外源Ca2+的诱导.利用PSORTprediction进行亚细胞定位分析,和利用OsCAX3-GFP融合蛋白瞬时表达分析证明,OsCAX3定位于细胞质膜.以上结果表明,OsCAX3是一种定位于细胞质膜上的Ca2+/H+反向转运体.

水稻根质膜Ca^(2+)/H^+反向转运体的存在及其特性

由Ca2+/H+反向转运体蛋白的特异多肽制备的抗体,通过免疫印迹显示水稻根质膜上存在分子量为44.5kD的蛋白。同位素闪烁记数法检测水稻根质膜上45Ca2+转运活性显示存在依赖于跨膜质子梯度的Ca2+/H+反向转运体,Mn2+可部分地抑制其转运活性。动力学分析表明,OsCAX2的Vmax=34.72nmol/(min·mg),Km=3.83μmol/L,其最适pH为7.2。

苹果sMdCAX11基因的功能分析与鉴定

【目的】深入分析苹果sMdCAX11(去掉NRR区域的MdCAX11)基因功能。【方法】分别利用蜜脆苹果果实和拟南芥材料,采用过表达sMdCAX11的试验方法,观察果实、叶片等各组织的表型,并测定不同组织的矿质元素含量,同时对苹果MdCAX11基因启动子区域进行预测分析以及启动子转录活性分析。【结果】瞬时过表达sMdCAX11的苹果果肉颜色变褐,并出现皱缩;同时过表达sMdCAX11的苹果果肉和拟南芥叶片的总Ca含量明显下降,且元素比值(K+Mg)/Ca明显升高。【结论】sMdCAX11基因过表达可导致植株组织的元素分配不均,不同元素间的比例失衡。