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桑树Ca^(2+)/H^+反向转运体基因MCAX-1的克隆及序列与表达分析 被引量:1
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作者 刘赵越 童伟 +3 位作者 张英华 方荣俊 赵卫国 李龙 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期192-198,共7页
植物体内的Ca2+/H+反向转运体在Ca2+介导的营养和信号转导中发挥着重要作用。选择桑树幼叶cDNA文库中功能注释为Ca2+/H+反向转运体基因(CAX)的一条EST序列设计引物,通过cDNA末端快速扩增(RACE)与反转录PCR(RT-PCR)在桑品种育71-1的幼叶... 植物体内的Ca2+/H+反向转运体在Ca2+介导的营养和信号转导中发挥着重要作用。选择桑树幼叶cDNA文库中功能注释为Ca2+/H+反向转运体基因(CAX)的一条EST序列设计引物,通过cDNA末端快速扩增(RACE)与反转录PCR(RT-PCR)在桑品种育71-1的幼叶中克隆获得该基因的全长cDNA序列,命名为MCAX-1(GenBank登录号:JN716318)。序列分析显示:MCAX-1全长1 784 bp,包括197 bp的5'端非翻译序列和243 bp的3'端非翻译序列,含有一个1 344 bp的完整ORF,编码447个氨基酸残基,预测蛋白质分子质量为47.93 kD,等电点为5.67。构建的桑树和其它植物基于CAX蛋白氨基酸序列的系统进化树显示:桑树与盐地碱蓬(Suaeda salsa)、毛果杨(Populus trichocarpa)、蓖麻(Ricinus communis)等有较近的亲缘关系。半定量RT-PCR分析表明:MCAX-1在桑树幼芽、嫩叶、根和幼花中的表达量较高,在韧皮部、木质部和成熟果实中的表达量较低;MCAX-1在低温胁迫下的表达量减少,-1℃时几乎无表达,在干旱胁迫下的表达量随着胁迫时间延长逐渐达到最大值之后又迅速降低,在盐分胁迫初期的表达量无变化,但胁迫18 d时表达量明显降低。初步推测MCAX-1与桑树的抗逆性能有一定关联。 展开更多
关键词 桑树 ca2+/H+反向转运体蛋白 基因克隆 序列特征 基因表达
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肌浆网Ca^(2+)转运变化与冠心病心气虚证发病相关性的理论探讨
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作者 孔春明 马月香 《中医药信息》 2015年第4期34-36,共3页
中医学认为,心主血脉,心气是推动血液运行的基本动力,心气虚可导致心功能减退。现代研究认为心功能的改变是冠心病心气虚型发病的主要病理基础。已有研究发现肌浆网Ca2+转运对于维持心肌的兴奋收缩藕联起着重要作用,心肌肌浆网内(SR)Ca2... 中医学认为,心主血脉,心气是推动血液运行的基本动力,心气虚可导致心功能减退。现代研究认为心功能的改变是冠心病心气虚型发病的主要病理基础。已有研究发现肌浆网Ca2+转运对于维持心肌的兴奋收缩藕联起着重要作用,心肌肌浆网内(SR)Ca2+转运的变化是引起心功能减退的重要机制。据此我们推断Ca2+转运的变化与冠心病心气虚证的发病机制具有某种相关性,可以用以阐明中医心气虚证的证候实质和科学内涵。 展开更多
关键词 冠心病 心气虚 ca2+转运的变化
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腺相关病毒载体介导的PLB基因反义RNA对大鼠心肌细胞肌浆网Ca^(2+)-ATPase活性和[Ca^(2+)]i的作用 被引量:2
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作者 李江 胡申江 +6 位作者 赵晓燕 汪国忠 郑霞 姚宇玫 陈乃云 孙坚 朱朝晖 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期39-42,共4页
目的:探讨腺相关病毒载体介导的磷酸受纳蛋白(PLB)反义RNA对肌浆网Ca2+-ATPase活性以及细胞内钙浓度([Ca2+]i)的作用。方法:构建PLB反义RNA的重组腺相关病毒载体(rAAV-asPLB)和携带报告基因LacZ的重组腺相关病毒载体(rAAV-LacZ)。分别... 目的:探讨腺相关病毒载体介导的磷酸受纳蛋白(PLB)反义RNA对肌浆网Ca2+-ATPase活性以及细胞内钙浓度([Ca2+]i)的作用。方法:构建PLB反义RNA的重组腺相关病毒载体(rAAV-asPLB)和携带报告基因LacZ的重组腺相关病毒载体(rAAV-LacZ)。分别转染培养的大鼠心肌细胞,测定PLBmRNA和蛋白质表达,检测肌浆网Ca2+-ATPase活性和[Ca2+]i。结果:RT-PCR和Westernblotting显示,感染rAAV-asPLB的心肌细胞的PLBmRNA和蛋白质表达低于正常对照和感染rAAV-LacZ组;而Ca2+-ATPase活性大于正常对照和感染rAAV-LacZ组。激光共聚焦显微镜检测显示,静息状态时,rAAV-asPLB感染组[Ca2+]i降低;异丙肾上腺素刺激后,各组[Ca2+]i均升高,但是rAAV-asPLB感染组[Ca2+]i变化幅度大。结论:腺相关病毒介导的PLB反义RNA对大鼠心肌细胞PLB表达具有抑制作用,增强Ca2+-ATPase活性,降低静息状态的[Ca2+]i,增加异丙肾上腺素刺激后[Ca2+]i的变化幅度。 展开更多
关键词 磷酸受纳蛋白 腺病毒科 RNA 反义 ca(2+)转运ATP酶 心肌
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拟南芥CAX1转运体蛋白的跨膜拓扑结构预测 被引量:1
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作者 陈志远 王国栋 +1 位作者 邸丽俊 武永军 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期12-14,共3页
目的:对拟南芥的CAX1蛋白进行跨膜结构预测,构建CAX1的跨膜结构模型。方法:以生物信息学工具Signal 3.0、Conpred Ⅱ、TMHMM 2.0、HMMTOP、MEMSAT3、ConPred2分析拟南芥CAX1蛋白的一级序列。结果:模型显示CAX1共有10个跨膜区,分别为氨... 目的:对拟南芥的CAX1蛋白进行跨膜结构预测,构建CAX1的跨膜结构模型。方法:以生物信息学工具Signal 3.0、Conpred Ⅱ、TMHMM 2.0、HMMTOP、MEMSAT3、ConPred2分析拟南芥CAX1蛋白的一级序列。结果:模型显示CAX1共有10个跨膜区,分别为氨基酸残基73-93,128-147,163-185,198-219,236-256,286-307,322-344,357-379,387-407,414-432。结论:与现有的资料相印证,此模型可以作为CAX1功能研究的参考模型。 展开更多
关键词 ca2+交换体家族 跨膜结构预测 信号转导 ca2+转运
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钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗大鼠慢性心力衰竭 被引量:5
5
作者 郭豫涛 李小鹰 +5 位作者 鲁小春 吴迪 姚克群 陈平 马康涛 周春燕 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1267-1270,I0004,共5页
目的:观察肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植对慢性心力衰竭大鼠心功能的影响。方法:实验于2004-07/2005-12在北京医科大学生物化学系实验室完成。选取4周龄清洁级雄性SD大鼠作为骨髓供体。雌性SD大鼠作为细胞移植、基因治... 目的:观察肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植对慢性心力衰竭大鼠心功能的影响。方法:实验于2004-07/2005-12在北京医科大学生物化学系实验室完成。选取4周龄清洁级雄性SD大鼠作为骨髓供体。雌性SD大鼠作为细胞移植、基因治疗受体,随机数字表法分为4组:肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组(n=7)、骨髓干细胞移植治疗组(n=7)、肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植组(n=8)、腺病毒空载体对照组(n=7)。结扎左冠状动脉制作急性心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠模型,每组进行相应的基因治疗和细胞移植。治疗后21d,采用苏木精-伊红染色和MASSON染色评价心脏形态及结构变化,组织多普勒评价各组心功能。并检测肌浆网钙离子ATP酶2a基因和蛋白在宿主心脏的表达。结果:29只雌性大鼠均进入结果分析。①与腺病毒空载体对照组大鼠相比,骨髓干细胞移植治疗组和肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠心室腔明显减小。MASSON染色显示,肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠蓝色的胶原纤维染色区域减少,红色的肌纤维染色区域增多。②肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组、骨髓干细胞移植治疗组和肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠左室前壁、室间隔收缩及舒张期纵向峰值速度均较腺病毒空载体对照组显著升高[左室前壁:(0.58±0.03),(0.67±0.02),(0.78±0.05),(0.31±0.02)cm/s;(0.81±0.04),(1.26±0.04),(1.39±0.05),(0.40±0.01)cm/s;室间隔:(0.60±0.05),(1.00±0.08),(1.33±0.04),(0.40±0.01)cm/s;(0.70±0.04),(1.28±0.05),(1.57±0.03),(0.44±0.03)cm/s,P<0.001]。与肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组相比,肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠左室前壁、室间隔收缩及舒张期纵向峰值速度升高(P<0.001)。③肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组和肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组心肌内肌浆网钙离子ATP酶2amRNA表达强度明显高于骨髓干细胞移植治疗组和腺病毒空载体对照组。结论:肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植能显著改善慢性缺血性心力衰竭大鼠心脏的收缩和舒张功能。 展开更多
关键词 细胞移植 干细胞 基因疗法 心力衰竭 充血性 肌浆网 ca(2+)转运ATP酶/代谢
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传统方剂五苓散加减后2种复方制剂对细胞毒性脑水肿的作用 被引量:19
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作者 刘泰 唐宇平 吕晶 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第11期53-55,共3页
目的:观察在传统方剂五苓散的基础上加用田七、丹参等组成制剂健神利水Ⅰ号与加用石菖蒲、夏枯草等组成的制剂醒脑消肿胶囊治疗脑出血细胞毒性脑水肿的效果差异,并分析引起差异的原因。方法:①实验于2001-05/06在广西中医学院第一附属... 目的:观察在传统方剂五苓散的基础上加用田七、丹参等组成制剂健神利水Ⅰ号与加用石菖蒲、夏枯草等组成的制剂醒脑消肿胶囊治疗脑出血细胞毒性脑水肿的效果差异,并分析引起差异的原因。方法:①实验于2001-05/06在广西中医学院第一附属医院中心实验室完成。选用出生6个月的新西兰大耳白兔32只,雌雄不拘。②先用区组随机法将动物分为4组:空白对照组(未造模,只灌胃温水),模型组,健神利水Ⅰ号组和醒脑消肿胶囊组,每组8只;再将每组分为造模后12和24h2个时间点进行观察,每时间点4只动物。健神利水Ⅰ号水煎剂由三七15g,丹参15g,茯苓10g,猪苓10g,泽泻10g,白术10g,桂枝10g组成,由广西中医学院第一附属医院药房提供,用韩国产煎药机煎成200mL药液,真空密封袋4℃保存。醒脑消肿胶囊:批准文号南药(96)05079,由夏枯草15g,石菖蒲15g,茯苓10g,猪苓10g,泽泻10g,白术10g,桂枝10g组成,含生药13.33g/粒;由广西中医学院第一附属医院制剂室提供;用温水制成混悬液。2种中药给药量均为11.5mL/kg,于实验前30min经胃管注入,其余各组以温水11.5mL/kg,于实验前30min经胃管注入,每组干预12及24h后以空气栓塞法处死动物。③采用全脑重/体质量×100%的公式计算脑系数;(湿重-干重)/湿重×100%的公式计算脑含水量;ATP酶试剂盒定磷法测定ATP酶含量;火焰光度法测定K+,Na+含量;邻一甲酚酞络合酮比色法测定Ca2+含量。④正态性检验用矩法,组间比较用F检验,组间两两比较用q检验,时间段(同组)内比较用t检验,方差不齐用秩和检验。结果:兔32只均进入结果分析。①两用药组兔脑系数与脑含水量均明显低于模型组(P<0.01),其中健神利水Ⅰ号组兔脑系数与脑含水量明显低于醒脑消肿胶囊组(P<0.05)。②模型组造模后12,24h兔左侧颞叶脑组织Na+含量明显高于两用药组(P<0.01),健神利水Ⅰ号组明显低于醒脑消肿胶囊组(P<0.05);模型组造模后24h兔左侧颞叶脑组织Na+-K+-ATP酶活力明显低于假手术组和两用药组(P<0.01),健神利水Ⅰ号组明显高于醒脑消肿胶囊组(P<0.05)。模型组造模后24h兔左侧颞叶脑组织K+含量明显低于假手术组(P<0.01)。③各组兔左侧额叶脑组织Ca2+含量和Ca2+-ATP酶活力在造模后12,24h差异不明显(P>0.05)。结论:健神利水Ⅰ号对脑细胞的保护和脱水作用要强于醒脑消肿胶囊,可能与其提升Na+-K+-ATP酶含量有关。 展开更多
关键词 脑水肿/中药疗法 胶囊 利湿 五苓散/治疗应用 消肿 疾病模型 动物 Na(+)K(+)交换 ATP酶 ca(2+)转运ATP酶
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油桃花芽破眠过程中H_2O_2代谢与Ca^(2+)转运的关系 被引量:5
7
作者 谭钺 高东升 +3 位作者 李玲 魏海蓉 王甲威 刘庆忠 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期425-429,共5页
利用化学测定法分析高温、单氰胺和TDZ 3种破眠处理对"曙光"油桃休眠花芽H2O2代谢的主要影响,利用非损伤微测技术检测H2O2对休眠芽Ca2+转运的影响,研究H2O2在芽休眠解除过程中的调控作用.结果表明:在深休眠时期,高温和单氰胺... 利用化学测定法分析高温、单氰胺和TDZ 3种破眠处理对"曙光"油桃休眠花芽H2O2代谢的主要影响,利用非损伤微测技术检测H2O2对休眠芽Ca2+转运的影响,研究H2O2在芽休眠解除过程中的调控作用.结果表明:在深休眠时期,高温和单氰胺处理均能诱导芽内H2O2含量升高和过氧化氢酶(CAT)活性降低,并具有显著的破眠作用;TDZ对H2O2含量及CAT、过氧化物酶(POD)活性影响不大,破眠效果较差.休眠花芽原基组织钙通道活跃,对外源Ca2+呈吸收状态.外源H2O2可诱导休眠花芽原基组织Ca2+转运发生变化,低浓度H2O2降低Ca2+吸收速率,高浓度H2O2使组织对Ca2+的转运由吸收转变为释放.这表明休眠芽内H2O2信号和Ca2+信号相关联,通过诱导H2O2积累调控Ca2+信号可能在高温和单氰胺打破休眠的信号转导过程中起重要作用. 展开更多
关键词 油桃 花芽 休眠解除 H2O2 ca2+转运
原文传递
电针内关穴对糖尿病心肌病大鼠线粒体Ca2+转运及心肌细胞凋亡效应的影响 被引量:4
8
作者 肖凤英 崔金涛 +3 位作者 张压西 贺劲 李敏 张军 《国际中医中药杂志》 2014年第6期544-546,共3页
目的:探讨电针内关穴对糖尿病心肌病大鼠线粒体Ca2+转运及心肌细胞凋亡效应的影响。方法 Wistar大鼠雄性30只,按照随机数字表法将大鼠随机分为正常组、模型组和治疗组各10只,采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病心肌病... 目的:探讨电针内关穴对糖尿病心肌病大鼠线粒体Ca2+转运及心肌细胞凋亡效应的影响。方法 Wistar大鼠雄性30只,按照随机数字表法将大鼠随机分为正常组、模型组和治疗组各10只,采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病心肌病大鼠模型。治疗组电针内关穴治疗8周后,迅速取出心肌,提取线粒体,采用双光束紫外分光光度仪通过测试Ca2+指示剂AⅢ吸光值检测Ca2+转运,心肌细胞凋亡指数检测采用TUNEL法测定。结果与模型组线粒体Ca2+转运检测吸光值(0.077±0.025)、心肌细胞凋亡指数(0.53±0.04)比较,治疗组[Ca2+转运(0.051±0.014)、心肌细胞凋亡指数(0.49±0.36)]明显降低(P<0.05)。结论电针内关穴可降低糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡指数,可能与其降低线粒体Ca2+内流有关。 展开更多
关键词 大鼠 糖尿病心肌病 内关穴 线粒体ca2+转运 心肌细胞凋亡
原文传递
运动对骨骼肌线粒体通透性转换孔及细胞凋亡的影响 被引量:5
9
作者 王冬梅 董军 +1 位作者 漆正堂 丁树哲 《西安体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2011年第4期471-475,共5页
目的观察耐力训练和一次性力竭运动对大鼠骨骼肌线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transi-tion pore,MPTP)相关因素及细胞凋亡的影响。方法 24只大鼠随机分为3组:对照组(C组)、耐力训练组(T组)和一次性力竭组(E组)。T组... 目的观察耐力训练和一次性力竭运动对大鼠骨骼肌线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transi-tion pore,MPTP)相关因素及细胞凋亡的影响。方法 24只大鼠随机分为3组:对照组(C组)、耐力训练组(T组)和一次性力竭组(E组)。T组进行无负重游泳训练,6次/周,共6周,训练时间从每天45 min逐渐增加到90 min;E组正常笼内饲养6周后进行一次力竭性游泳运动。通过紫外分光光度仪检测MPTP的开放;Western blot检测细胞色素c(Cyt c)的释放;RT-PCR检测Bcl-2和Bax mRNA;双光束紫外分光光度仪检测线粒体Ca2+的转运。结果与对照组相比:(1)T组线粒体吸光度值和Ca2+的转运量无显著性变化,Cyt c的释放量与Bax mRNA的表达显著减少,Bcl-2 mRNA的表达显著增加;(2)E组线粒体吸光度值显著减少,Cyt c释放量及Ca2+转运量显著增加,Bcl-2mRNA表达显著下降,Bax mRNA表达显著增强。结论 耐力运动可能通过上调Bcl-2/Bax基因表达,减少Cyt c释放,稳定MPTP开放,从而减少细胞凋亡;一次性力竭运动可能通过下调Bcl-2/Bax基因表达,MPTP异常开放,增加Cyt c和Ca2+释放,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 线粒体通透性转换孔 细胞色素C ca2+转运 BCL-2 BAX
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左旋氨氯地平对缺氧心肌细胞钙信号系统的影响 被引量:6
10
作者 刘遂心 李彤 孙明 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期287-290,共4页
目的:观察缺氧对心肌细胞内游离钙离子浓度和细胞膜及肌浆网上钙离子泵,即Ca2+ AT Pase表达的影响及左旋氨氯地平的干预作用。方法:制备大鼠心肌细胞缺氧模型,随机分为正常对照组、缺氧损伤组和左旋氨氯地平组。测定心肌细胞内游离钙... 目的:观察缺氧对心肌细胞内游离钙离子浓度和细胞膜及肌浆网上钙离子泵,即Ca2+ AT Pase表达的影响及左旋氨氯地平的干预作用。方法:制备大鼠心肌细胞缺氧模型,随机分为正常对照组、缺氧损伤组和左旋氨氯地平组。测定心肌细胞内游离钙离子的浓度(FURA2 /AM荧光探针法)、细胞膜上Ca2+ ATPase表达水平(RT PCR法)以及肌浆网上钙泵(SERCA2 )含量(WesternBlot法)。结果:缺氧损伤组心肌细胞内游离钙离子浓度[ (716±s164)nmol·L-1 ]较正常对照组[ (208±32)nmol·L-1 ]显著上升(P<0. 01 ),细胞膜及肌浆网上钙泵的表达(0. 54±0. 12和158±15)较正常对照组( 0. 86±0. 07和210±12 )均明显降低(均P<0. 01),经左旋氨氯地平干预后细胞内游离钙浓度降低至(359±75 )nmol·L-1,P<0. 01,细胞膜上及肌浆网上钙泵的表达(0. 81±0. 11和184±11)均明显增强(均P<0. 01)。结论:左旋氨氯地平可能通过增加细胞膜及肌浆网上钙泵的表达有效减轻心肌细胞内的钙超载,对缺氧心肌具有保护作用。 展开更多
关键词 心肌 细胞 培养的 缺氧 ca(2+)转运A1]P酶 左旋氨氯地平
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穴位电刺激对大鼠急性运动后腓肠肌收缩功能的影响 被引量:4
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作者 刘堂义 杨华元 +2 位作者 蒯乐 高明 杨旭明 《上海针灸杂志》 2011年第10期707-710,共4页
目的探讨穴位电刺激疗法对大鼠急性运动后腓肠肌收缩功能的影响。方法 45只SD大鼠,随机分成三组,适应性游泳训练1星期后,进行急性运动(2 h的游泳),全麻下取腓肠肌,应用差速离心法提取SR,检测肌质网(SR)钙泵(Ca2+-ATPase)、Ca2+浓度;30... 目的探讨穴位电刺激疗法对大鼠急性运动后腓肠肌收缩功能的影响。方法 45只SD大鼠,随机分成三组,适应性游泳训练1星期后,进行急性运动(2 h的游泳),全麻下取腓肠肌,应用差速离心法提取SR,检测肌质网(SR)钙泵(Ca2+-ATPase)、Ca2+浓度;30只SD大鼠,随机分成正常对照组、急性运动模型组、穴位电刺激治疗组三组,运动后制备坐骨神经-腓肠肌标本,在SMUP-E型生物信息处理系统上观察腓肠肌最大收缩力。结果模型组大鼠腓肠肌SR Ca2+-ATPase的活力明显低于对照组(P<0.05),治疗组则明显高于模型组(P<0.05);模型组大鼠腓肠肌SR Ca2+浓度明显高于对照组(P<0.05),治疗组则明显低于模型组(P<0.01),治疗组与对照组差异无统计学意义(P>0.05);模型组大鼠腓肠肌的最大收缩力明显小于对照组(P<0.05),而治疗组则明显大于模型组(P<0.05)。结论一次性急性游泳(2 h)大鼠腓肠肌SR的Ca2+-ATPase活性明显下降,Ca2+浓度显著升高,腓肠肌的最大收缩力下降;穴位电刺激则可以明显提高大鼠腓肠肌SR Ca2+-ATPase的活力,降低SR内Ca2+浓度,增强大鼠腓肠肌的最大收缩力。这可能是穴位电刺激疗法延缓运动疲劳的机理之一。 展开更多
关键词 电针疗法 肌质网 ca2+转运ATP酶 钙离子 最大收缩力 足三里 承山
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大枣多糖对血虚大鼠全血细胞及红细胞ATP酶活力的影响 被引量:26
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作者 苗明三 苗艳艳 孙艳红 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第11期97-99,共3页
目的:观察大枣多糖对血虚大鼠全血细胞及红细胞膜ATP酶活力的影响,分析大枣的补气血作用的可能途径。方法:实验于2002-02/06在河南中医学院动物实验中心完成。①选用Wistar大鼠60只,体质量170~190g,雄性。随机选用50只采用以下方法造... 目的:观察大枣多糖对血虚大鼠全血细胞及红细胞膜ATP酶活力的影响,分析大枣的补气血作用的可能途径。方法:实验于2002-02/06在河南中医学院动物实验中心完成。①选用Wistar大鼠60只,体质量170~190g,雄性。随机选用50只采用以下方法造成气血双虚模型:分别于实验第1,3,5,7,9天,尾部放血1mL/180g,于第2天腹腔注射环磷酰胺生理盐水溶液40mg/kg,于第4,6,8,10,12天腹腔注射环磷酰胺20mg/kg,造气血双虚模型;其余10只大鼠为空白对照组(仅注射同体积生理盐水)。②将50只气血双虚模型大鼠随机分为5组:大、中、小剂量大枣多糖组[灌胃大枣多糖溶液,由河南中医学院药物化学学科提供。本品为鼠李科植物枣干燥成熟果实的提取精制物(经乙醇回流脱脂、水提取、浓缩、醇沉、除蛋白、透析、醇沉、真空干燥等程序,得大枣多糖)溶液剂量为200,100,50mg/kg,灌胃体积为10mL/kg],当归补血口服液组[灌胃当归补血口服液(郑州市协和制药厂生产,剂量为2次/d,10mL/次,批号010301)3.3mL/kg,原药液稀释1.5倍]及模型组(灌胃等体积生理盐水)。空白对照组仅灌同体积生理盐水。每天给药1次,连续给药14d。③于第14天给药后2h,用库尔特细胞全自动分析仪测定血中红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白和血小板计数。ATP酶测定用定磷法,按南京建成生物工程研究所提供的ATP酶试剂盒说明书测定红细胞Na+-K+-ATP酶和Ca2-Mg2-ATP酶活性。④计量资料组间比较采用t检验,方差不齐者采用t’检验。结果:大鼠60只均进入结果分析。①空白对照组、各剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠血红细胞计数、白细胞计数、血小板计数及血红蛋白含量明显高于模型组(P<0.05~0.01)。②空白对照组、各剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠红细胞Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力明显高于模型组(P<0.05~0.01)。空白对照组,大、中剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠红细胞Ca2+-ATP酶活力明显高于模型组(P<0.05),小剂量大枣多糖组大鼠Ca2+-ATP酶活力与模型组相近。结论:大枣多糖可以改善气血双虚大鼠的造血功能和红细胞能量代谢,从而起到补血作用。 展开更多
关键词 血虚/中药疗法 大枣 多糖类 血细胞计数 ca(2+)转运ATP酶 NA(+)K(+)交换ATP酶
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腺苷A_1受体拮抗剂DPCPX对脑神经元低氧复氧损伤的影响 被引量:2
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作者 王静雯 汪海 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期803-805,共3页
目的观察腺苷A1受体拮抗剂DPCPX对脑神经元低氧复氧(H/R)损伤的影响及其机制。方法通过建立体外培养大鼠大脑皮质神经元H/R损伤模型,观察终浓度分别为0(对照组)、25、50、100nmol/L的DPCPX对常氧(低氧0h)和低氧暴露8、12、24h后复氧24h... 目的观察腺苷A1受体拮抗剂DPCPX对脑神经元低氧复氧(H/R)损伤的影响及其机制。方法通过建立体外培养大鼠大脑皮质神经元H/R损伤模型,观察终浓度分别为0(对照组)、25、50、100nmol/L的DPCPX对常氧(低氧0h)和低氧暴露8、12、24h后复氧24h的H/R神经元乳酸脱氢酶(LDH)释放量的影响,并检测了100nmol/LDPCPX对低氧暴露12h的H/R神经元丙二醛(MDA)含量及黄嘌呤氧化酶(XO)、Ca2+-ATP酶活性的影响。结果与对照组比较,100nmol/LDPCPX显著增加低氧暴露12h的H/R神经元LDH释放量(P<0·05),明显升高其MDA含量(P<0·01)和XO活性(P<0·05),明显降低其Ca2+-ATP酶活性(P<0·05)。结论DPCPX可加重培养神经元H/R损伤,其机制可能包括降低神经元抗氧化能力及Ca2+-ATP酶活性。 展开更多
关键词 神经元 缺氧/复氧损伤 受体 腺苷A1 活性氧 ca2+转运ATP酶
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心肌缺血再灌注损伤时细胞核膜钙泵功能的改变 被引量:2
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作者 付爱玲 何华美 张乐之 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1453-1455,共3页
目的 :研究心肌缺血再灌注损伤时心肌细胞核膜钙泵 (Ca2 + -ATPase)功能的改变。方法 :采用大鼠心肌缺血再灌注模型 ,密度梯度离心分离纯化细胞核 ,定磷法测定Ca -ATPase活性 ,[45Ca2 + ]直接测定核钙摄取。结果 :缺血再灌注损伤动物血... 目的 :研究心肌缺血再灌注损伤时心肌细胞核膜钙泵 (Ca2 + -ATPase)功能的改变。方法 :采用大鼠心肌缺血再灌注模型 ,密度梯度离心分离纯化细胞核 ,定磷法测定Ca -ATPase活性 ,[45Ca2 + ]直接测定核钙摄取。结果 :缺血再灌注损伤动物血浆MDA和FFA显著高于正常大鼠 (P <0 0 1) ,再灌注心肌细胞核膜Ca -ATPase在[Ca2 + ]i 较低时 ,酶活力低于正常细胞 ,而在 [Ca2 + ]i 较高浓度 5 0 μmol/L时酶活力高于正常细胞。对 [45Ca2 + ]摄取的变化与Ca-ATPase活性变化相似。结论 :心肌缺血再灌注损伤时核膜Ca2 + -ATPase功能发生了改变。 展开更多
关键词 心肌缺血再灌注损伤 ca(2+)转运ATP酶 细胞核 病理生理过程 核膜钙泵
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2,3,7,8-四氯二苯并二噁英急性染毒对小鼠脑组织中Na^+-K^+-ATP酶和Ca^2+-ATP酶活力的影响 被引量:1
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作者 刘云儒 汤乃军 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期450-451,共2页
目的研究2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(TCDD)对小鼠脑组织中Na^+-K^+-ATP酶、Ca^2+-ATP酶活力的影响。方法将48只雌雄各半的昆明种小鼠按性别随机分为高、中、低剂量TCDD染毒组和对照组,每组雌雄各6只,TCDD染毒剂量分别为100、10... 目的研究2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(TCDD)对小鼠脑组织中Na^+-K^+-ATP酶、Ca^2+-ATP酶活力的影响。方法将48只雌雄各半的昆明种小鼠按性别随机分为高、中、低剂量TCDD染毒组和对照组,每组雌雄各6只,TCDD染毒剂量分别为100、10、1μg/kg,用腹腔注射的方式一次染毒,48h后,测定脑组织中Na^+-K^+-ATP酶、Ca^2+-ATP酶活力。结果雌性低剂量、中剂量染毒组和雄性高剂量染毒组小鼠脑组织中Na^+-K^+-ATP酶活力[分别为(17.35±3.07)、(16.13±2.42)、(20.25±2.72)μmolPi·mg pro^-1·h^-1]明显升高,与对照组[分别为(13.60±1.72)、(15.97±1.90)μmolPi·mgpro^-1·h^-1]相比,差异均有统计学意义(P〈0.05)。各染毒组小鼠Ca^2+-ATP酶活力有增加的趋势,但与对照组比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论TCDD急性染毒能提高小鼠脑组织中Na^+-K^+-ATP酶的活力,且存在性别差异。 展开更多
关键词 四氯二苯并二恶辛 Na(+)K(+)ATP酶 ca(2+)转运ATP酶
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外源钙对盐胁迫下盐地碱蓬生长影响的初步探讨 被引量:2
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作者 韩宁 何熹 王伟 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第7期34-36,80,共4页
以不同浓度的Ca2+(0、20 mmol/L)及不同浓度的NaCl(0、100、400 mmol/L)处理盐地碱蓬(Suaeda salsa)幼苗,探索盐渍条件下Ca2+对该植物在生理和分子水平上的影响。结果表明,外源Ca2+处理使盐地碱蓬幼苗鲜质量明显高于对照,Ca2+、K+浓度... 以不同浓度的Ca2+(0、20 mmol/L)及不同浓度的NaCl(0、100、400 mmol/L)处理盐地碱蓬(Suaeda salsa)幼苗,探索盐渍条件下Ca2+对该植物在生理和分子水平上的影响。结果表明,外源Ca2+处理使盐地碱蓬幼苗鲜质量明显高于对照,Ca2+、K+浓度也高于对照;叶片液泡膜Ca2+-AT-Pase活性升高。Ca2+/H+逆向转运体(Ca2+/H+antiporter)基因的表达量不仅随外源Ca2+处理而升高,而且NaCl处理后也明显升高。以上结果说明,盐对盐地碱蓬生长的促进是依赖Ca2+的,维持盐胁迫下胞质Ca2+浓度稳态的运输体主要是液泡膜Ca2+/H+逆向转运体。 展开更多
关键词 盐地碱蓬 盐处理 ca2+ ca2+/H+逆向转运 ca2+-ATPase
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KB-R7943对高脂饮食大鼠心肌离体缺血再灌注损伤的保护作用及机制
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作者 吕岩 吴楠 +1 位作者 李雯娜 贾大林 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第37期26-28,共3页
目的探讨选择性Na+/Ca2+交换体反向转运抑制剂KB-R7943对高脂饮食大鼠心肌离体缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法大鼠心脏给予完全缺血30 min,之后再灌注120 min。其中正常饮食喂养大鼠12只为对照组(C组),高胆固醇饮食喂养大鼠48... 目的探讨选择性Na+/Ca2+交换体反向转运抑制剂KB-R7943对高脂饮食大鼠心肌离体缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法大鼠心脏给予完全缺血30 min,之后再灌注120 min。其中正常饮食喂养大鼠12只为对照组(C组),高胆固醇饮食喂养大鼠48只。缺血后高胆固醇饮食大鼠做如下处理:12只不干预(高胆固醇对照组,HC组);12只给予KB-R7943(KB组);12只给予KB-R7943和ATP敏感性钾通道阻滞剂格列本脲(KB+G组);12只仅给予格列本脲(G组)。通过血流动力学指标评价心脏功能,2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色测量心肌梗死范围,电镜下观察心肌超微结构及TUNEL染色评价心肌细胞凋亡程度。结果高脂喂养后,大鼠血清TC、LDLC、HDL-C均升高。与HC组比较,其余各组HR均加快(P均<0.05);与HC组再灌注5、30、120 min比较,KB组左室发展压、等容收缩期左室压力上升的最大速率、等容舒张期左心室压力下降的最大速率均升高(P均<0.05)。各组再灌注30 min内的各指标无统计学差异。C组心肌梗死程度明显低于HC组,KB组梗死程度最轻(P均<0.05)。与C组比较,HC组TUNEL阳性心肌细胞所占百分比均高(P均<0.05),KB组明显低于HC、KB+G组、G组(P均<0.05)。HC组、KB+G组及G组心肌纤维排列紊乱,Z线扭曲,肌带长短不一。肌细胞核形状不规则,核心内异染色质凝聚,核膜局部模糊。KB组少数肌丝灶性溶解,线粒体肿胀轻微,少许肌浆网扩张。结论高胆固醇血症可增加缺血心肌的损伤程度,但不影响心脏收缩功能;KB-R7943通过ATP敏感性钾通阻滞剂减少高脂饮食大鼠缺血心肌坏死及细胞凋亡,从而减轻缺血再灌注损伤。 展开更多
关键词 缺血再灌注损伤 高脂血症 细胞凋亡 Na+/ca2+交换体反向转运抑制剂 大鼠
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磷酸受纳蛋白的研究进展
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作者 张若松 康曼丽 黄先玫 《国外医学(儿科学分册)》 2001年第5期225-227,共3页
磷酸受纳蛋白(PLB)是心脏肌浆网钙泵的主要调节因子,后者在心肌细胞胞浆钙浓度的调节中发挥主要作用,心肌细胞胞浆钙浓度是心肌兴奋-收缩偶联的关键因子,因此,PLB在维持细胞内钙稳态和正常的心肌舒缩功能上有着重要的作用... 磷酸受纳蛋白(PLB)是心脏肌浆网钙泵的主要调节因子,后者在心肌细胞胞浆钙浓度的调节中发挥主要作用,心肌细胞胞浆钙浓度是心肌兴奋-收缩偶联的关键因子,因此,PLB在维持细胞内钙稳态和正常的心肌舒缩功能上有着重要的作用,近年来有关PLB在心脏病中作用的研究逐渐增多。本文就PLB的结构、基因表达和对肌浆网钙泵的调节作用及其在心脏病中的意义作一综述。 展开更多
关键词 钙结合蛋白质类 ca(2+)转运 ATP酶 磷酸受纳蛋白
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0.4mT工频磁场对骨骼肌肌质网囊泡游离钙离子转运的影响 被引量:4
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作者 刘仁臣 周贞洁 +3 位作者 褚克平 刘秀丽 陈树德 夏若虹 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期168-172,共5页
目的探讨工频磁场对骨骼肌肌质网钙转运动力学的影响。方法利用动态光谱法检测0.4mT、50Hz正弦磁场辐照过的骨骼肌肌质网Ca2+转运和钙泵活性,用3H兰尼碱结合实验检测Ca2+释放通道的活性,用荧光偏振法检测肌质网膜的流动性等。结果0.4mT... 目的探讨工频磁场对骨骼肌肌质网钙转运动力学的影响。方法利用动态光谱法检测0.4mT、50Hz正弦磁场辐照过的骨骼肌肌质网Ca2+转运和钙泵活性,用3H兰尼碱结合实验检测Ca2+释放通道的活性,用荧光偏振法检测肌质网膜的流动性等。结果0.4mT、50Hz正弦磁场辐照导致提取的肌质网囊泡Ca2+摄取初速率由每秒(29.18±3.90)pmol/mg下降到(24.60±3.81)pmol/mg,钙泵的活性由每分钟(0.93±0.05)μmol/mg下降到(0.69±0.07)μmol/mg;导致Ca2+释放初速率由每秒(4.83±0.82)pmol/mg上升到(5.65±0.43)pmol/mg,3H兰尼碱结合度由(1.10±0.12)pmol/mg上升到(1.16±0.13)pmol/mg,分别上升了15%和5%。结论0.4mT工频磁场辐照引起的肌质网Ca2+摄取下调和Ca2+释放上调是由于肌质网钙泵活性降低和Ca2+释放通道活性升高所致。 展开更多
关键词 电磁场 肌浆网 ca(2+)转运ATP酶 兰尼碱受体钙释放通道 肌质网膜
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SERCA抑制剂抑制人结肠癌SW480细胞生长的作用机制研究
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作者 卢敏 《中国医师杂志》 CAS 2009年第3期334-335,共2页
目的探讨SERCA抑制剂抑制结肠癌细胞株SW480生长的作用机制,为结肠癌治疗提供实验依据。方法(1)应用Ca^2+荧光指示剂Fura-2检测细胞内Ca^2+的浓度。(2)MTT法检测细胞抑制率。结果毒胡萝卜素(Tg)可使SW480细胞内Ca^2+水平由(... 目的探讨SERCA抑制剂抑制结肠癌细胞株SW480生长的作用机制,为结肠癌治疗提供实验依据。方法(1)应用Ca^2+荧光指示剂Fura-2检测细胞内Ca^2+的浓度。(2)MTT法检测细胞抑制率。结果毒胡萝卜素(Tg)可使SW480细胞内Ca^2+水平由(133.26±5.17,197.46±4.62)明显升高到(436.63±5.21,766.41±3.12),差异有统计学意义(P〈0.05);毒胡萝卜素(Tg)对人结肠癌细胞株SW480的抑制率随浓度(10~50μmol/L)的提高而增高,由(10.67±5.28)%至(31.46±7.21)%,抑制率差异有统计学意义(P〈0.05);毒胡萝卜素(Tg)与W7合用时,这种效应则受到抑制。结论随着毒胡萝卜紊(Tg)浓度的增大,细胞内钙浓度同步上升;同时毒胡萝卜素(Tg)对该细胞株的抑制率增高。但其所诱导的细胞抑制具体钙信号途径还有待进一步研究。 展开更多
关键词 ca(2+)转运ATP酶 拮抗剂和抑制剂 药理学 结肠肿瘤 药物疗法
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