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蚯蚓钙调素结合蛋白的研究 被引量:10
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作者 张燕红 张庭芳 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期731-735,共5页
以赤子爱胜蚓(EiseniaFoetida)为材料,通过DEAE-FastFlow离子交换层析、CaM-Sepharose亲和层析,分离纯化得到蚯蚓钙调素结合蛋白(CaMBPs)。纯化的CaMBPs对CaM激活的环核... 以赤子爱胜蚓(EiseniaFoetida)为材料,通过DEAE-FastFlow离子交换层析、CaM-Sepharose亲和层析,分离纯化得到蚯蚓钙调素结合蛋白(CaMBPs)。纯化的CaMBPs对CaM激活的环核苷酸磷酸二酯酶活性有抑制作用,而且这种抑制作用可通过加入过量的CaM达到完全恢复。SDS-PAGE显示CaMBPs有3条明显主带,在EGTA存在时表现分子量分别为62,49和30kD。紫外扫描测定含量分别为7.17%,7.31%和51.8%。用生物素-CaM覆盖法检测到3种CaM结合蛋白,与SDS-PAGE结果一致。酶活性测定实验表明在蚯蚓CaMBPs中有Ca2+-ATPase活性,但无NAD激酶活性。 展开更多
关键词 钙调素结合蛋白 蚯蚓 钙调素 cambps
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钙调素结合蛋白定位研究进展 被引量:2
2
作者 宋春风 吕佩源 孙大业 《解剖科学进展》 CAS 2000年第1期11-13,共3页
钙调素是生物体中一种重要的调控物质 ,它广泛存在于各种原核、真核生物中 ,在不同的组织和细胞内 ,通过与不同的 Ca MBPs结合参与不同功能的调控。因此 ,特定组织和细胞中 Ca MBPs的定位 ,特别是生理、病理条件下对其分布变化的研究 ,... 钙调素是生物体中一种重要的调控物质 ,它广泛存在于各种原核、真核生物中 ,在不同的组织和细胞内 ,通过与不同的 Ca MBPs结合参与不同功能的调控。因此 ,特定组织和细胞中 Ca MBPs的定位 ,特别是生理、病理条件下对其分布变化的研究 ,对于阐明 Ca M的调控机制及生物体的生理机能、发病机制具有重要意义。本文对近些年在这方面的研究方法和有关工作进行了简要概述。 展开更多
关键词 钙调素 结合蛋白 cambps 定位
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CaMBP-10的cDNA克隆和表达及钙调素结合活性分析 被引量:8
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作者 祁倩 饶恩于 +3 位作者 王喆 刘华 凌启阆 李翠凤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期451-456,共6页
采用RT PCR法 ,从中国大白菜中分离了编码CaMBP 1 0的cDNA克隆 .该cDNA全长 4 96bp ,编码 92个氨基酸 ,3′端含有 2 1 6bp的非编码区和poly A尾 .将此BP 1 0cDNA的成熟蛋白序列导入表达质粒pET1 5b并转化至大肠杆菌E .coliBL2 1 (DE3)co... 采用RT PCR法 ,从中国大白菜中分离了编码CaMBP 1 0的cDNA克隆 .该cDNA全长 4 96bp ,编码 92个氨基酸 ,3′端含有 2 1 6bp的非编码区和poly A尾 .将此BP 1 0cDNA的成熟蛋白序列导入表达质粒pET1 5b并转化至大肠杆菌E .coliBL2 1 (DE3)condonplus RIL进行表达 .以免疫印迹和钙调素结合分析法对重组BP 1 0进行鉴定 ,证明其保持了与天然BP 1 0相同的钙调素结合活性 .氨基酸和核苷酸序列分析结果显示 ,它与植物转脂蛋白高度同源 ,特别是含有 8个保守半胱氨酸 .BP 1 0与转脂蛋白之间具极为相似的理化性质如分子量、等电点、热稳定性等 .据此认为 ,CaMBP 1 0是转脂蛋白家族的新成员 ,Ca2 + 展开更多
关键词 CAMBP-10 非特异转脂蛋白(nsLTP) 钙调素(CaM) 钙调素结合蛋白(CaMBP) 结合活性
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白菜转脂蛋白基因CaMBP10的RNAi沉默体系的初步建立
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作者 张蕊 胡文全 +1 位作者 谢万钦 李翠凤 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第10期168-172,共5页
为研究白菜转脂蛋白——CaMBP10的体内功能,构建含有该基因片段的RNAi质粒,以农杆菌介导法对大白菜‘津育60’进行遗传转化,通过对转基因植物在生物与非生物胁迫中表型变化的研究,确定其体内功能。文章报告RNAi质粒的构建、鉴定及其转... 为研究白菜转脂蛋白——CaMBP10的体内功能,构建含有该基因片段的RNAi质粒,以农杆菌介导法对大白菜‘津育60’进行遗传转化,通过对转基因植物在生物与非生物胁迫中表型变化的研究,确定其体内功能。文章报告RNAi质粒的构建、鉴定及其转化植株基因组DNA中外源片段的鉴定。DNA分析结果显示,外源基因已成功插入了白菜基因组,RT-PCR检测结果显示转化植株内源CaMBP10基因的表达明显降低,为后续的转脂蛋白体内功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 转脂蛋白 CaMBP10 RNA干扰 遗传转化
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转脂蛋白CaMBP10的胶体金标记及对白菜中CaMBP10结合蛋白的鉴定
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作者 胖铁良 赵静 +2 位作者 田晓龙 王立强 李翠凤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期649-654,共6页
植物转脂蛋白(LTP)是一类广泛存在于高等植物中的空间结构高度保守的碱性小分子蛋白,其确切功能和调节机制至今仍不清楚.本室从白菜中分离的钙调素结合蛋白10(CaMBP10),经序列分析被鉴定为植物转脂蛋白家族成员.近期研究结果表明,CaMBP1... 植物转脂蛋白(LTP)是一类广泛存在于高等植物中的空间结构高度保守的碱性小分子蛋白,其确切功能和调节机制至今仍不清楚.本室从白菜中分离的钙调素结合蛋白10(CaMBP10),经序列分析被鉴定为植物转脂蛋白家族成员.近期研究结果表明,CaMBP10参与了植物的生物与非生物胁迫反应.为了深入探讨CaMBP10的抗性机制,确定植物中与其相互作用的蛋白质,本文拟建立胶体金标记CaMBP10的方法,通过凝胶覆盖分析,检测植物样品中的CaMBP10结合蛋白.为此,对标记反应的最适条件进行了优化,确定最佳条件为:交联剂戊二醛用量为0.034%,交联反应pH值为7.0,交联反应时间为40 min,胶体金颗粒度为10 nm,胶体金溶液的pH为7.0.本文确定建立了植物样品中CaMBP10结合蛋白的分析与鉴定方法. 展开更多
关键词 钙调素结合蛋白10 CaMBP10结合蛋白 凝胶覆盖分析 胶体金标记
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钙调素结合蛋白研究进展
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作者 吴光玉 文允镒 《国外医学(分子生物学分册)》 CSCD 1991年第2期78-81,共4页
钙调素结合蛋白(CaMBP)指所有能与钙调素(CaM)结合的蛋白质,是CaM多种调节功能的执行者。应用特异性检测手段,已发现有数百种CaMBP,有的存在于所有种类的细胞,有的则为某种组织、细胞或细胞器特有。研究CaMBP对阐明CaM功能具有重要意义。
关键词 CaMBP 钙调素 结合蛋白质 功能
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Effects of calmodulin and calmodulin binding protein BP-10 on phosphorylation of thylakoid membrane protein
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作者 李翠凤 向左云 +1 位作者 凌启阆 尚克进 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1998年第1期64-70,共7页
Light induced phosphorylation of endogenous thylakoid membrane protein can be inhibited markedly by a novel inhibitor CaMBP 10 which is discovered and isolated from plant. The inhibitory effect of BP 10 can be elimina... Light induced phosphorylation of endogenous thylakoid membrane protein can be inhibited markedly by a novel inhibitor CaMBP 10 which is discovered and isolated from plant. The inhibitory effect of BP 10 can be eliminated by addition of CaM. At the same time, the phosphorylation can also be inhibited by EGTA or CaM antagonists , such as TFP (trifluoperazine) and W 7 (N (6 aminohexyl) 5 chloro 1 naphthalene sulfonamide). This result implies that (i) Ca 2+ and CaM most likely participate in and regulate plant photosynthesis; (ii) the kinase that catalyzes thylakoid membrane protein phosphorylation can be regulated by Ca 2+ and CaM. However, the further experiments indicate that BP 10 has no effect on dephosphorylation of thylakoid phosphoproteins . 展开更多
关键词 CALMODULIN (CaM) CaMBP 10 THYLAKOID protein KINASE PHOSPHORYLATION
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