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基于碳量子点-银纳米簇荧光共振能量转移纳米探针的荧光传感器检测转基因成分CaMV35S
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作者 翟应惠 王婷婷 +5 位作者 唐家璇 张鸿雁 操小栋 叶永康 郑海松 李云飞 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期550-558,共9页
利用荧光共振能量转移(FRET)纳米探针结合催化发夹组装(CHA)无酶扩增信号放大途径建立了一种可用于转基因成分的荧光检测方法。首先为CaMV35S目标序列(tDNA)设计了可诱导的CHA循环的两个发夹结构序列HP1和HP2。当单链DNA标记碳点(sDNA-C... 利用荧光共振能量转移(FRET)纳米探针结合催化发夹组装(CHA)无酶扩增信号放大途径建立了一种可用于转基因成分的荧光检测方法。首先为CaMV35S目标序列(tDNA)设计了可诱导的CHA循环的两个发夹结构序列HP1和HP2。当单链DNA标记碳点(sDNA-CDs)和DNA模板化银纳米团簇(Ts-AgNCs)杂交后,AgNCs和碳量子点(CDs)靠近,形成FRET效应,得到sDNA-CDs/Ts-AgNCs荧光猝灭的比率荧光探针。当tDNA存在时,通过杂交反应打开HP1发夹,形成HP1-tDNA双链结构;该结构可将HP2的发夹结构打开,从而形成HP1-HP2双链结构,同时释放出tDNA进入下一轮杂交,触发CHA循环。由于HP1-HP2中HP1的部分序列与Ts部分序列间的亲和性较sDNA强,因此,加入sDNA-CDs/Ts-AgNCs后,sDNA-CDs从探针中释放,使CDs(λem=464 nm)的荧光得以增强。而AgNCs仍在双链结构中,其荧光强度(λem=560 nm)基本保持不变。以IF464/IF560为检测信号,在最优条件下,该比率荧光传感器对CaMV35S检测的线性范围为0.1~50 nmol/L,检出限(LOD,S/N=3)为0.02 nmol/L。制备的传感器具有良好的选择性,将该传感器用于转基因番茄叶中CaMV35S成分的检测,结果可靠。 展开更多
关键词 催化发夹组装 碳量子点 银纳米簇 camv35S序列 比率荧光检测
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转基因大豆外源基因CaMV35S启动子测定不确定度分析 被引量:4
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作者 王东 宋君 +5 位作者 郭灵安 雷绍荣 刘文娟 常丽娟 尹全 张富丽 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期40-45,共6页
为了了解转基因成分定量分析结果不确定度的主要贡献因素,提高转基因成分定量检测质量,本文对转基因大豆GTS40-3-2粉末样品进行了CaMV35S启动子(参数)含量测定,对其测量不确定度进行了初步估算。CaMV35S启动子测量不确定度评定结果:A类... 为了了解转基因成分定量分析结果不确定度的主要贡献因素,提高转基因成分定量检测质量,本文对转基因大豆GTS40-3-2粉末样品进行了CaMV35S启动子(参数)含量测定,对其测量不确定度进行了初步估算。CaMV35S启动子测量不确定度评定结果:A类不确定度(uA)为0.0004,B类不确定度(uB)为0.002,合成不确定度(uc)为0.002;在置信水准(p)95%时,包含因子(k)取1.96,扩展不确定度(U)为0.004。本次测量结果(C)为0.028±0.004,接近约定真值(0.03),测量不确定度相对较小,检测质量较高。不确定度评估表明试验中的微量液体转移偏差是本次测量不确定度的主要贡献者,在以后的检测中应重点注意降低微量液体转移的偏差,提高检测质量。 展开更多
关键词 转基因大豆 camv35S启动子含量 不确定度 评估
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CaMV35S双启动子显著提高转基因在拟南芥中表达水平的研究(简报) 被引量:15
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作者 郝林 曹军 《植物生理学通讯》 CSCD 2000年第6期517-519,共3页
以大肠杆菌 (E .coli)UidA为报道基因定量研究CaMV35S双启动子在拟南芥中的表达强度表明 ,35S双启动子的平均表达强度比 35S启动子高
关键词 camv35S双启动子 GUS活性 拟南芥 转基因沉默
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大豆样品中DNA的提取与外源基因CaMV35S的PCR检测 被引量:3
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作者 尚智美 高宏伟 +1 位作者 王学亮 孙伟 《菏泽学院学报》 2006年第2期73-75,共3页
采用试剂盒从大豆样品中成功提取出DNA,对花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus,CaMV)35S启动子进行了PCR扩增,并对扩增产物进行了电泳检测,建立了提取大豆DNA与CaMV35S启动子PCR检测的方法,对实验操作中的问题进行了探讨.
关键词 转基因大豆 PCR camv35S DNA
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CaMV35S启动子及其在转基因作物中的应用和检测 被引量:9
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作者 汤婷 谢实龙 +3 位作者 祝旋 徐俊锋 唐俊 汪小福 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期161-170,共10页
花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S)是植物基因工程中应用最广泛的启动子之一,它在转基因植物的安全评价及检测研究中具有重要意义。了解CaMV35S启动子的起源及其发展情况,是开展转基因安全评价和检测的前提。文章对CaMV35S启动子的发展... 花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S)是植物基因工程中应用最广泛的启动子之一,它在转基因植物的安全评价及检测研究中具有重要意义。了解CaMV35S启动子的起源及其发展情况,是开展转基因安全评价和检测的前提。文章对CaMV35S启动子的发展历史及其结构、功能作了简要描述,分析总结了CaMV35S启动子在转基因作物中的应用情况和目前对其相应的检测方法。针对目前在转基因作物中检测CaMV35S启动子存在的问题,认为今后转基因相关作物的序列信息及检测数据需要交流和共享,同时各个检测机构或实验室之间需要展开数据共享与共同验证,从而建立针对CaMV35S启动子的相对统一的标准检测方法。 展开更多
关键词 camv35S启动子 转基因作物 增强子 PCR
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抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的建立与应用 被引量:35
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作者 吕山花 常汝镇 +4 位作者 陶波 李向华 栾凤侠 郭珊花 邱丽娟 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期883-887,共5页
应用PCR检测方法 ,以大豆凝集素 (lectin)基因为内置标准 ,检测了抗草甘膦转基因大豆中的外源CaMV35S启动子、NOS终止子和CP4 EPSPS成分 ,并通过Southern杂交进一步证实了PCR检测结果的可靠性 ,建立了基于PCR的抗草甘膦转基因大豆检测... 应用PCR检测方法 ,以大豆凝集素 (lectin)基因为内置标准 ,检测了抗草甘膦转基因大豆中的外源CaMV35S启动子、NOS终止子和CP4 EPSPS成分 ,并通过Southern杂交进一步证实了PCR检测结果的可靠性 ,建立了基于PCR的抗草甘膦转基因大豆检测方法 ,最低检测限度为 0 .0 5 %。用此方法检测转基因情况未知 ,分别来自欧盟、美国、阿根廷、未知国别的进口大豆及未知国别的进口豆粕 ,除从欧盟进口的大豆无CaMV35S启动子、NOS终止子、CP4 EPSPS基因成分外 ,其余样品均含有上述成分 ;而从国内非转基因大豆中未检出上述成分。用此方法检测抗草甘膦大豆京引D1×豫豆 12的F2 和F2∶5群体植株 ,PCR检测结果与大田施药 (草甘膦有效成分 1.0kg·ha-1)检测结果一致率分别达 10 0 %和 93.0 %。 展开更多
关键词 抗草甘膦转基因大豆 PCR检测方法 应用 大豆 凝集素基因 内置标准 camv35S启动子
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电化学发光PCR技术检测转基因植物 被引量:18
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作者 刘晋峰 邢达 +1 位作者 沈行燕 朱德斌 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第4期375-378,共4页
随着转基因植物种类的增多 ,转基因植物的检测也成了当今的热门话题 .电化学发光法是将电化学与化学发光两种高灵敏度方法相结合 ,实现了检测的高效、准确、无毒害 .电化学发光PCR法首次将电化学发光技术、PCR技术和双探针杂交技术结合... 随着转基因植物种类的增多 ,转基因植物的检测也成了当今的热门话题 .电化学发光法是将电化学与化学发光两种高灵敏度方法相结合 ,实现了检测的高效、准确、无毒害 .电化学发光PCR法首次将电化学发光技术、PCR技术和双探针杂交技术结合起来 ,用于检测CaMV (cauliflowermosaicvirus) 35S启动子 ,从而判断其是否含有转基因成分 .PCR产物与生物素标记的探针杂交 ,可以起到筛选的作用 ;与三联吡啶钌标记的探针杂交则可用于电化学发光检测 .两种探针同时与转基因样品PCR产物杂交 ,使结果避免假阳性的影响而更加准确 .实验表明 :此方法可以准确地检测到 35S启动子的存在 .该方法灵敏度高 ,可靠性强 ,操作简便 ,结果准确 ,有望成为一种高效的转基因检测方法 . 展开更多
关键词 转基因植物 电化学发光 PCR技术 camv35 S启动子 蛋白质
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9种大豆制品中转基因成分定性PCR检测 被引量:6
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作者 孙红炜 路兴波 +3 位作者 杨崇良 尚佑芬 赵玖华 王升吉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期234-237,共4页
本研究从豆粕、豆粉、豆腐等9种大豆产品中提取到高质量的DNA,在对内标准基因Lectin进行扩增的基础上,设计相应的特异性引物,建立了稳定的定性PCR反应体系,对35S启动子基因、外源目的基因Cp4-epsps基因进行了扩增,发现豆粕、豆奶粉、豆... 本研究从豆粕、豆粉、豆腐等9种大豆产品中提取到高质量的DNA,在对内标准基因Lectin进行扩增的基础上,设计相应的特异性引物,建立了稳定的定性PCR反应体系,对35S启动子基因、外源目的基因Cp4-epsps基因进行了扩增,发现豆粕、豆奶粉、豆腐、豆皮、豆豉中含有转基因成分,而其它产品中未发现转基因成分存在。 展开更多
关键词 大豆制品 转基因成分定性检测 Lectin基因 camv35S基因 Cp4-epsps基因
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用绿色荧光蛋白和洋葱表皮细胞检测拟南芥rd29A基因启动子活性的方法 被引量:12
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作者 张俊莲 王蒂 +1 位作者 张金文 陈正华 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2005年第6期815-819,共5页
将rd29A基因的启动子与绿色荧光蛋白基因(GFP)融合在一起,构建成植物表达载体,并以CaMV35S启动子驱动的GFP基因的植物表达载体为对照,用基因枪介导法转化置于4种类型培养基上的洋葱表皮细胞。对其进行不同温度下的培养,16h后观察GFP基... 将rd29A基因的启动子与绿色荧光蛋白基因(GFP)融合在一起,构建成植物表达载体,并以CaMV35S启动子驱动的GFP基因的植物表达载体为对照,用基因枪介导法转化置于4种类型培养基上的洋葱表皮细胞。对其进行不同温度下的培养,16h后观察GFP基因瞬时表达水平的结果表明,rd29A启动子对高盐和脱水逆境的响应较温度显著,特别是在含PEG6000的培养基上,细胞无破损,绿色荧光强烈,适合于GFP的瞬时表达。而高盐由于易导致细胞出现离子毒害,不宜作为GFP瞬时表达的培养基。 展开更多
关键词 RD29A启动子 camv35S启动子 绿色荧光蛋白(GFP) 洋葱表皮细胞 拟南芥
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不同启动子驱动下acdS基因转化烟草及耐盐性研究 被引量:3
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作者 秦智慧 刘艳昆 +4 位作者 孙彦 康俊梅 王凭青 Margaret Gruber 白永琴 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期120-125,共6页
acdS基因编码产生ACC脱氨酶,该酶属于脱巯基家族,可以降低逆境乙烯的合成量。利用农杆菌介导的叶盘法将CaMV35S-2启动子和rolD启动子驱动下的acdS基因转入烟草NC89叶片中。在含有卡那霉素的MS培养基上筛选得到Kanr转化烟草。通过PCR、So... acdS基因编码产生ACC脱氨酶,该酶属于脱巯基家族,可以降低逆境乙烯的合成量。利用农杆菌介导的叶盘法将CaMV35S-2启动子和rolD启动子驱动下的acdS基因转入烟草NC89叶片中。在含有卡那霉素的MS培养基上筛选得到Kanr转化烟草。通过PCR、Southern blotting对得到的Kanr转基因烟草进行分析,结果表明,acdS基因已经整合到了烟草的基因组中。对转基因烟草的RT-PCR及cDNA进行测序分析表明,acdS基因能够正确转录。对转基因烟草进行耐盐性测定,结果显示,与对照相比,两种启动子驱动下的转基因烟草耐盐性均有增强。但是rolD启动子驱动下的转基因植株的耐盐性最强。 展开更多
关键词 转基因 acdS基因 camv35S-2启动子 rolD启动子
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转基因玉米的定性PCR检测 被引量:6
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作者 袁磊 赵蕾 +2 位作者 孙红炜 颜世磊 路兴波 《山东农业科学》 2009年第11期8-10,共3页
根据玉米内参照基因zSSIIb和转基因玉米中常见的CaMV35S、NOS、Bt、hpt等基因的特异性结构,设计5对定性PCR引物,经定性PCR检测,可以准确地将转基因玉米的目的基因检出,说明这5对引物具有较高的特异性和准确性。由此建立了一套转基因玉... 根据玉米内参照基因zSSIIb和转基因玉米中常见的CaMV35S、NOS、Bt、hpt等基因的特异性结构,设计5对定性PCR引物,经定性PCR检测,可以准确地将转基因玉米的目的基因检出,说明这5对引物具有较高的特异性和准确性。由此建立了一套转基因玉米定性PCR检测方法,用于转基因玉米及其产品的筛查、抽检。 展开更多
关键词 转基因玉米 定性PCR zSSIIb基因 camv35S基因 NOS基因 BT基因 hpt基因
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硒化铅纳米粒子DNA电化学传感器检测花椰菜花叶病毒35S启动子基因序列 被引量:2
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作者 谢江坤 焦奎 +3 位作者 刘鹤 汪庆祥 刘树峰 傅洵 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第7期874-878,共5页
以水热法合成十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)修饰的PbSe纳米粒子。在碳糊电极表面制备的PbSe纳米粒子壳聚糖(CHIT)复合膜上,实现了DNA的固定和杂交,并用循环伏安法和电化学交流阻抗法进行了表征。应用电活性分子亚甲紫(MV)作为杂交指示剂,... 以水热法合成十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)修饰的PbSe纳米粒子。在碳糊电极表面制备的PbSe纳米粒子壳聚糖(CHIT)复合膜上,实现了DNA的固定和杂交,并用循环伏安法和电化学交流阻抗法进行了表征。应用电活性分子亚甲紫(MV)作为杂交指示剂,以微分脉冲伏安法对转基因植物CaMV35S启动子基因片段进行测定,检测范围为5.0×10-11~5.0×10-6mol/L;检出限为1.6×10-11mol/L(3σ)。该传感器能很好地识别DNA互补序列、非互补序列和2碱基错配序列。 展开更多
关键词 硒化铅纳米粒子 壳聚糖 脱氧核糖核酸(DNA) 电化学传感器 微分脉冲伏安法 camv35S基因
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乙型肝炎病毒表面抗原基因在人参细胞中的高效表达 被引量:2
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作者 高正伦 盛军 +5 位作者 刘丹 刘晓宇 李娟 郝淑美 吉海滨 刘建华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期119-122,130,共5页
目的提高乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)在人参愈伤组织细胞中的表达。方法构建一种植物细胞表达载体pBIBeo,该载体携带CaMV 35S双增强启动子和TMV(U1株)翻译增强子。用pBIBeo转化的农杆菌LBA4404与人参愈伤组织细胞共培养,经G418筛... 目的提高乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)在人参愈伤组织细胞中的表达。方法构建一种植物细胞表达载体pBIBeo,该载体携带CaMV 35S双增强启动子和TMV(U1株)翻译增强子。用pBIBeo转化的农杆菌LBA4404与人参愈伤组织细胞共培养,经G418筛选获得新生抗性细胞团PBIBeo,连续继代培养选育出用于植物源口服乙肝疫苗生产的高产细胞株。提取基因组DNA和mRNA,进行PCR和RT-PCR鉴定,Western blot鉴定HBsAg的特异性,电镜下观察纯化抗原颗粒大小,并以ELISA检测HBsAg的表达水平。结果转化的人参细胞基因组DNA进行PCR反应,得到约700 bp的启动子基因片段。提取mRNA进行RT-PCR反应,得到约700 bp的HBsAg基因片段。Western blot分析可见相对分子质量为24 000的特异性条带。亲和层析纯化细胞表达的HBsAg抗原,电镜观察可见平均直径为32 nm的颗粒。ELISA检测结果表明pBIBeo转化细胞株HBsAg表达量比pBIBSa转化细胞株提高1~2倍。结论人参细胞基因组已经整合了目的基因并稳定高效表达。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒表面抗原 人参愈伤组织细胞 表达 camv35S启动子 翻译增强子
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两种启动子调控下的CBF4基因植物表达载体的构建 被引量:2
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作者 徐春波 王勇 +1 位作者 李兴酉 赵海霞 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期1-5,共5页
目的:构建由组成型启动子CaMV35s和诱导型启动子CBF4P调控的转录因子CBF4基因的两个植物表达载体。方法:用EcoRⅠ酶将CBF4和CBF4P两个基因切下,连接到BluescriptM13(SK)上,分别构建成两个中间载体SK-CBF4和SK-CBF4P,再利用SK上的多克隆... 目的:构建由组成型启动子CaMV35s和诱导型启动子CBF4P调控的转录因子CBF4基因的两个植物表达载体。方法:用EcoRⅠ酶将CBF4和CBF4P两个基因切下,连接到BluescriptM13(SK)上,分别构建成两个中间载体SK-CBF4和SK-CBF4P,再利用SK上的多克隆位点与植物表达载体p3301上相同的酶切位点,将CBF4和CBF4P连接到植物表达载体p3301上,分别构建了由组成型启动子CaMV35s和诱导型启动子CBF4P调控的转录因子CBF4基因的两个植物表达载体p3301-CBF4和p3301-CBF4P。结果:用PCR扩增重组质粒p3301-CBF4和p3301-CBF4P,分别得到了670bp和1200bp的特异性片段。酶切检测也分别得到了与预期结果一致的DNA片段。结论:所构建的两个表达载体均正确,可用于植物遗传改良和两种启动子的启动效率的研究。 展开更多
关键词 camv35s启动子 CBF4P启动子 CBF4基因 表达载体
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进口转基因抗Basta^(TM)除草剂油菜籽检测方法研究 被引量:23
15
作者 潘良文 沈禹飞 +2 位作者 陈家华 胡永强 陶军 《粮食与油脂》 2001年第5期36-37,共2页
建立了从油菜籽中提取总DNA和用PCR技术检测外源基因的方法,用该方法从进口油 菜籽中检出外源的草丁膦乙酰转移酶基因(PAT)、新霉素磷酸转移酶基因(NptII)、花椰 菜花叶病毒35S启动子(CaMV 35S)。
关键词 油菜籽 草丁膦乙酰转移酶基因 新霉素磷酸转移酶基因 camv35S启动子 外源基因 检测方法 进口农产品
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Kringle5的真核植物细胞穿梭表达载体的构建 被引量:1
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作者 郑合明 薛乐勋 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2002年第2期156-159,共4页
目的 :构建含有目的基因kringle5的真核植物细胞穿梭表达载体。方法 :应用RT PCR方法 ,从正常人肝脏组织中获得kringle 5基因 ,测序后 ,再通过DNA重组技术 ,将kringle 5基因片段克隆到真核植物细胞表达载体pBI12 1和pCAMBIA330 1上。结... 目的 :构建含有目的基因kringle5的真核植物细胞穿梭表达载体。方法 :应用RT PCR方法 ,从正常人肝脏组织中获得kringle 5基因 ,测序后 ,再通过DNA重组技术 ,将kringle 5基因片段克隆到真核植物细胞表达载体pBI12 1和pCAMBIA330 1上。结果 :得到的kringle 5基因序列测定结果与文献相符 ,重组载体pB1k5和pC33k5经酶切鉴定正确 ,含有植物高效表达CaMV35S启动子。结论 :重组载体pB1k5和pC33k5不仅可以在大肠杆菌中稳定复制 。 展开更多
关键词 血管抑素 kringle5基因 穿梭表达载体 反转录PCR 启动子camv35S 真核植物细胞
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多聚酶对转基因产品PCR检测的影响分析
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作者 夏玉平 吴刚 +2 位作者 武玉花 张丽 卢长明 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期110-114,共5页
本文参考出入境检验检疫行业标准中转基因油菜外源基因的PCR检测体系,分析了18种不同DNA聚合酶对定性PCR检测转基因油菜OXY235中的CaMV35S启动子的影响。结果表明,不同DNA聚合酶对CaMV35S启动子定性PCR检测中非特异扩增的产生以及检测... 本文参考出入境检验检疫行业标准中转基因油菜外源基因的PCR检测体系,分析了18种不同DNA聚合酶对定性PCR检测转基因油菜OXY235中的CaMV35S启动子的影响。结果表明,不同DNA聚合酶对CaMV35S启动子定性PCR检测中非特异扩增的产生以及检测灵敏度影响较大。其中热启动Taq酶效果较好,目标条带清晰,检测灵敏度高,而且完全没有非特异性扩增条带,非常适合用于定性PCR检测。对于同样条件下无法有效扩增0.1%DNA样品的Taq酶,则不推荐用于检测途径。 展开更多
关键词 转基因检测 定性PCR camv35S启动子 非特异扩增 灵敏度
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大麦核糖体失活蛋白基因与天花粉蛋白基因双价植物表达载体的构建
18
作者 齐岩 李杰 +1 位作者 朱延明 柏锡 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第1期28-32,共5页
大麦核糖体失活蛋白(B-RIP)和天花粉蛋白(TCS)均具有广谱抗病毒作用,研究构建了分别由2×CaMV35S启动子调控的大麦核糖体失活基因(rip)和天花粉蛋白基因(tcs)双价植物表达载体pABTR,其植物选择标记为新霉素磷酸转移酶基因(NPTⅡ),... 大麦核糖体失活蛋白(B-RIP)和天花粉蛋白(TCS)均具有广谱抗病毒作用,研究构建了分别由2×CaMV35S启动子调控的大麦核糖体失活基因(rip)和天花粉蛋白基因(tcs)双价植物表达载体pABTR,其植物选择标记为新霉素磷酸转移酶基因(NPTⅡ),适用于双子叶植物的遗传转化。并通过三亲本杂交法将重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404中,为通过农杆菌介导法将双价基因导入植物,培育理想的抗病毒转基因植物奠定基础。 展开更多
关键词 双价植物表达栽体 rip基因 tes基因 2x camv35S启动子
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一个新的编码大豆DREB转录因子基因的克隆及鉴定 被引量:4
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作者 王巧燕 陈明 +4 位作者 邱志刚 程宪国 徐兆师 李连城 马有志 《西南农业学报》 CSCD 2005年第5期625-628,共4页
DREB转录因子是一类可以调控多个与干旱、高盐及低温耐性有关的功能基因表达的转录因子家族。从大豆耐盐品种铁丰8号中克隆了一个新的DREB基因GmDREB5。该基因编码309个氨基酸,具有典型的AP2/EREBP保守结构域,属于AP2/EREBP类转录因子中... DREB转录因子是一类可以调控多个与干旱、高盐及低温耐性有关的功能基因表达的转录因子家族。从大豆耐盐品种铁丰8号中克隆了一个新的DREB基因GmDREB5。该基因编码309个氨基酸,具有典型的AP2/EREBP保守结构域,属于AP2/EREBP类转录因子中的DREB亚族。同源性比较分析表明,GmDREB5基因与Genbank登录的DREB基因同源性不高,属于新基因。酵母转录激活实验证明,该基因可以与DRE顺式作用元件特异结合,并具有转录激活活性;同时采用CaMV35S启动子驱动,构建了植物表达载体pBI35S-GmDREB5,并通过冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌EHA105中,再利用叶盘转化法将重组质粒导入烟草品种W38中,获得转基因烟草植株30株。 展开更多
关键词 DREB转录因子 转录激活camv35S启动子 植物表达载体
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广州市售豆制品转基因成分的检测与分析 被引量:6
20
作者 黄靖 何敏恒 许喜林 《中国酿造》 CAS 2014年第9期138-142,共5页
为了解广州市市售豆制品的转基因情况,对广州市售散装豆制品和预包装豆制品分别进行抽样检验。采用改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取大豆DNA,利用核酸定性PCR、实时荧光PCR及环介导等温扩增技术(LAMP)对外源基因Ca MV35S,NOS和EPSP... 为了解广州市市售豆制品的转基因情况,对广州市售散装豆制品和预包装豆制品分别进行抽样检验。采用改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取大豆DNA,利用核酸定性PCR、实时荧光PCR及环介导等温扩增技术(LAMP)对外源基因Ca MV35S,NOS和EPSPS进行检测。调查共抽检豆制品207份,研究结果表明,在检测的159份散装豆制品中,87份检出转基因成分;在48份预包装豆制品中,18份检出转基因成分。散装豆制品无任何食品标签,而预包装豆制品均无转基因食品标识。 展开更多
关键词 豆制品 转基因 camv35S基因 NOS基因 EPSPS基因
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