强心汤对心梗后心衰大鼠CaN-NFAT3信号通路的影响

目的:观察强心汤对心梗后心衰大鼠CaN-NFAT3信号通路的影响,探讨其治疗心梗后心衰大鼠的作用机制。方法:将64只SD雄性大鼠随机分为对照组10只,模型组、缬沙坦组、强心汤组各18只,除对照组大鼠行假手术外,其余各组制备慢性心衰大鼠模型。8周后,给予对应药物灌胃治疗4周。采用PowerLab/4SP生物信号处理分析系统测定大鼠血流动力学[左心室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、左室舒张末压(left ventricular end-diastolic pressure,LVEDP)、左室压力上升和下降变化最大速度的参数值(±LVdp/dtmax)];采用酶联免疫吸附法分别测定大鼠血浆血管紧张素Ⅱ(plasma angiotensinⅡ,AngⅡ)、血清钙调磷酸酶(calcineurin,CaN)水平;采用Western blot法检测大鼠心肌活化T细胞核因子(nuclear factor activated T3,NFAT3)蛋白表达量。结果:与模型组比较,缬沙坦组、强心汤组LVEDP水平降低(P<0.05),缬沙坦组+LVdp/dtmax、-LVdp/dtmax水平降低(P<0.01),强心汤组LVSP、+LVdp/dtmax及-LVdp/dtmax水平均升高(P<0.05)。与模型组比较,强心汤组、缬沙坦组大鼠血浆AngⅡ、血清CaN、心肌NFAT3蛋白表达水平均明显下降(P<0.01),且强心汤组上述指标下调程度均大于缬沙坦组(P<0.01)。结论:强心汤能够有效地改善心衰大鼠的心功能,其机制可能与影响CaN-NFAT3信号通路相关。

益心泰颗粒对慢性心力衰竭兔Ca^(2+)-CaN-NFAT_3信号通路的影响

目的探讨益心泰颗粒对慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)兔Ca2+-CaN-NFAT3信号通路的影响。方法用阿霉素建立CHF兔模型,将造模成功兔分为模型组、益心泰低、中、高剂量组和氯沙坦钾组;另设正常对照组。灌胃4周后观察心肌组织病理结构,并检测心肌细胞内钙离子浓度,心肌组织钙调神经磷酸酶(CaN)、T细胞活化因子3(NFAT3m RNA)及其蛋白和磷酸化水平。结果与正常对照组比较,模型组心肌细胞内[Ca2+]i含量、心肌组织CaN水平、NFAT3、p-NFAT3及NFAT3m RNA表达显著升高(P﹤0.01)。与模型组比较,益心泰低剂量组心肌组织NFAT3、NFAT3m RNA表达降低(P﹤0.05),心肌细胞内[Ca2+]i含量、心肌组织CaN水平及p-NFAT3表达显著降低(P﹤0.01),而益心泰中、高剂量组和氯沙坦钾组心肌细胞内[Ca2+]i含量、心肌组织CaN水平、NFAT3、p-NFAT3及NFAT3m RNA表达显著降低(P﹤0.01)。结论益心泰颗粒抑制慢性心力衰竭时Ca2+-CaN-NFAT3信号通路激活,可能是其治疗慢性心衰的主要机制之一。

真武汤对慢性心衰大鼠CaN/NFAT3信号转导通路的影响

目的:探讨真武汤对慢性心衰大鼠钙调神经磷酸酶(CaN)/T细胞活化核因子(NFAT3)信号转导通路的影响。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组、模型组及真武汤高、中、低剂量组,皮下注射异丙肾上腺素诱导大鼠慢性心衰。连续给药4周后,观察模型组和真武汤处理组大鼠的心肌组织病理结构变化,检测模型组和真武汤处理组大鼠的心脏质量指数、血浆BNP含量、心肌组织CaN活性和NAFT3蛋白表达情况及各组大鼠的血流动力学指标。结果:真武汤高剂量组左心室射血分数(LVEF)高于模型组(P<0.05);与模型组相比,真武汤高剂量组心脏质量指数、血浆B型利钠肽(BNP)含量、心肌组织CaN浓度、NAFT3蛋白表达水平均低于模型组(P<0.01)。结论:真武汤能改善慢性心衰大鼠心肌组织损伤,抑制心肌细胞肥大,可能与调节CaN/NFAT3信号转导通路有关。

益心泰对心肌梗死大鼠心室重构及CaN、NFAT_3蛋白表达的影响

目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)、T细胞活化因子3(NFAT3)蛋白表达对心肌梗死后大鼠心室重构的影响及益心泰对其干预作用。方法制备心肌梗死大鼠模型。随机分成模型组、益心泰组、开博通组、复方丹参滴丸组和假手术组。模型组和假手术组以蒸馏水等量灌胃,其余各组分别给予相应药物灌胃,用药8周后分别检测心室质量指数及CaN、NFAT3蛋白表达情况。结果与假手术组比较,模型组左、右心室质量指数均增加(P<0.01);与模型组比较,益心泰组、复方丹参滴丸组和开博通组左、右心室质量指数均降低(P<0.01)。与假手术组比较,模型组CaN、NFAT3蛋白明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,益心泰组、复方丹参滴丸组和开博通组CaN、NFAT3蛋白均降低,差异有统计学意义(P<0.01);益心泰组与复方丹参滴丸组和开博通组各项指标组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论益心泰可能通过抑制CaN、NFAT3蛋白表达,从而在一定程度上干预心肌梗死后心室重构。

强心方改善心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能的实验研究

目的:观察强心方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌重构的影响,探讨其治疗心肌梗死后心力衰竭大鼠的作用机制。方法:选取结扎左冠状动脉法制备大鼠心肌梗死后慢性心力衰竭动物模型;将心肌梗死的54只大鼠随机分为强心方组、缬沙坦组、模型组,每组18只,另选10只为对照组,对照组大鼠穿线后不行冠脉结扎,其余操作同模型组。12周后通过彩色多普勒超声心动图检测左室舒张末期内径(LVDd)、左室收缩末期内径(LVDs)、射血分数(EF);采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定血浆钙调磷酸酶(CaN)的水平;采用WesternBlotting法检测心肌钙调控蛋白肌浆网钙泵(SERCA2a)、雷尼丁受体2(RYR2)、活化T细胞核因子(NFAT3)蛋白表达。结果:模型组即未经中药和西药灌胃治疗的大鼠心功能明显下降,心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2表达均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);CaN、NFAT3的表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。给予强心方灌胃治疗后强心方组,大鼠的心功能得到明显的改善,心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2的表达得到明显的升高,差异有统计学意义(P<0.05),CaN、NFAT3水平明显降低。结论:强心方能够有效的改善心力衰竭大鼠的心功能,改善钙回摄及钙释放,抑制心肌重构,其作用机制可能与抑制CaN-NFAT3信号通路相关。

基于CaN-NFTA3信号通路探讨充血性心力衰竭常见中医证候物质基础

目的 研究充血性心力衰竭(CHF)气虚血瘀证、气阴两虚证、阳虚水泛证中钙调神经磷酸酶-活化T细胞核因子3(CaN-NFAT3)通路关键蛋白的表达变化及与临床指标的关联。方法 收集CHF气虚血瘀证、气阴两虚证、阳虚水泛证患者及健康对照者各30名,应用酶联免疫吸附法测定血清中CaN、NFAT3、GATA4蛋白含量。采用Pearson和Spearman统计学方法进行关联研究。结果 CHF患者CaN、NFAT3、GATA4蛋白表达水平高于健康人群(P<0.01)。与阳虚水泛证比较,气虚血瘀证、气阴两虚证患者CaN、NFAT3、GATA4蛋白含量降低(P<0.01)。CaN、NFAT3、GATA4蛋白含量与NYHA心功能分级呈正相关性(r=0.897,P=0.000;r=0.903,P=0.000;r=0.921,P=0.000),与B型脑钠肽(BNP)含量呈正相关性(r=0.851,P=0.000;r=0.853,P=0.000;r=0.789,P=0.000),与左室射血分数(LVEF)水平呈负相关性(r=-0.793,P=0.000;r=-0.803,P=0.000;r=-0.631,P=0.000)。CaN对CHF常见中医证候诊断价值较高,界值如下:气虚血瘀证为878.10 pg/mL,气阴两虚证为932.42 pg/mL,阳虚水泛证为1 080.36 pg/mL。结论 CaN-NFAT3通路关键蛋白含量变化可反映CHF病情及常见中医证候程度,反映CHF不同中医证候内在物质基础;CaN可作为辨别CHF常见中医证候的潜在标志物。

益心泰对慢性心力衰竭大鼠心肌重构钙调神经磷酸酶信号通道的影响

目的探讨益心泰对慢性心力衰竭大鼠心肌重构钙调神经磷酸酶信号通道的影响。方法 50只健康Wistar雄性大鼠分为模型组、益心泰高剂量组、益心泰中剂量组、益心泰低剂量组和培哚普利组,每组10只;另设没有进行造模处理的空白对照组10只。实验动物每日上午按下列剂量灌胃给药1次:正常组不进行药物干预;模空组灌服同等容积的生理盐水;益心泰丸高剂量组灌服10.5 g/(kg.d);益心泰丸中剂量组灌服5.5 g/(kg.d);益心泰丸低剂量组灌服2.5 g/(kg.d);培哚普利组灌服4.5 g/(kg.d),均每日1次。用药8周后观察心肌组织心肌组织钙调神经磷酸酶(CaN)、CaN、活化T细胞核因子(NFAT3)磷酸化及蛋白的相对表达。结果与模型组比较,益心泰高、中、低剂量组和培哚普利组左室质量指数、右室质量指数、CaN、CaN和活化T细胞核因子的蛋白表达均降低,差异有统计学意义。与培哚普利组比较,益心泰中、低剂量组左、右心室重量指数、CaN、CaN和活化T细胞核因子的蛋白表达升高,差异有统计学意义;而益心泰高剂量组与培哚普利组各项指标组间比较,差异无统计学意义。结论益心泰可能通过抑制心衰大鼠CaN活性及心衰大鼠CaN及NFAT3的蛋白表达,从而抑制心肌重构,改善心衰。

益气温阳活血方对慢性心衰大鼠心室重构钙调磷酸神经酶信号通路的影响研究

目的探讨中药复方益气温阳活血方对慢性心衰大鼠心室重构钙调磷酸神经酶(CaN)信号通路的影响。方法体内、外试验应用Fura-2/AM比率荧光成像系统检测心肌细胞内钙离子浓度([Ca2+]i);以RT-PCR法以及Western-blot法检测CaN、活化T细胞核因子3(NFAT3) mRNA及蛋白质表达水平在益气温阳活血方及拆方治疗前后的变化。结果与正常组比较,模型组[Ca2+]i、心肌组织及心肌细胞CaN、NFAT3 mRNA及蛋白质的表达水平均明显明显升高;益气温阳活血方能够明显减少[Ca2+]i、抑制CaN、NFAT3mR-NA及蛋白质表达水平的升高。结论CaN信号通路在慢性心衰心室重构机制中起重要作用;益气温阳活血方可能通过抑制CaN信号通路改善心室重构。

基于钙调磷酸酶-活化T细胞核因子3信号转导通路探究四逆汤治疗心力衰竭的分子机制

目的:分析钙调磷酸酶-活化T细胞核因子3(CaN-NFAT3)信号转导通路在四逆汤治疗心衰过程中的分子机制。方法:取SPF级SD大鼠60只,分10只作为空白对照组外,余50只采用连续ip盐酸阿霉素(0.002 5 g.kg-1,每周1次,连续6周)方法复制大鼠心力衰竭模型,待造模成功后将动物分为模型对照组与四逆汤高、中、低剂量(5.6,2.8,1.4 g.kg-1)治疗组,用四逆汤水煎液治疗8 d后,分别检测CaN的活性、心肌钙含量、去磷酸化NFATc蛋白的相对表达。结果:四逆汤水煎液高、中剂量治疗组CaN活性均明显低于模型组(P<0.01)、钙含量明显升高(P<0.01)、大鼠心肌组织中去磷酸化NFATc/β-actin吸光度比值较模型对照组显著降低(P<0.01)。结论:CaN-NFAT3信号转导通路的抑制为四逆汤治疗心力衰竭的关键分子机制。

抗纤益心方对扩张型心肌病大鼠心肌细胞CaN/NFAT3信号转导通路的影响

目的:探讨抗纤益心方对扩张型心肌病(DCM)大鼠心肌细胞CaN/NFAT3信号转导通路的影响。方法:通过饮用呋喃唑酮水溶液诱导DCM大鼠模型,造模10周后将造模成功的大鼠随机分为模型组,抗纤益心方高、低剂量组和卡托普利组,另设正常组。药物干预4周后超声心动图检查各组大鼠心功能,HE染色及电镜观察心肌组织病理学变化;比色法检测心肌组织中CaN含量,ELISA法检测血清中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,Western Blot检测心肌组织中NAFT3蛋白表达情况,Real-time PCR法检测心肌组织中ANP、BNP、NAFT3 mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠心功能显著降低(P<0.01),心肌细胞病理损伤明显,心肌组织中CaN活性及血清中AngⅡ含量显著增加(P<0.01),心肌组织中ANP、BNP、NAFT3 mRNA表达量显著升高(P<0.01);与模型组比较,各药物干预组均可以显著改善心功能(P<0.05,P<0.01),减轻心肌细胞病理损伤,降低心肌组织中CaN活性及血清中AngⅡ含量,降低ANP、BNP、NAFT3 mRNA表达水平(P<0.01,P<0.05),但抗纤益心方低剂量降低血清中AngⅡ含量差异无统计学意义。结论:抗纤益心方可以改善DCM模型大鼠心功能,减轻心肌组织病理损伤,抑制心肌细胞肥大,可能与调节Ca N/NFAT3信号转导通路有关。

去磷酸化NFATc蛋白的相对表达与四逆汤治疗心力衰竭的机制分析

目的:分析Ca2+-钙调神经磷酸酶-活化T细胞核因子(Ca2+/CaN-NFATc)信号转导通路在四逆汤治疗心衰过程中的机制。方法:采用SPF级SD大鼠50只用连续腹腔注射盐酸阿霉素的方法复制大鼠心力衰竭模型,待造模成功后将动物分为空白对照组、模型对照组与四逆汤治疗组(高、中、低剂量组),用四逆汤水煎液治疗8天后,分别检测心肌组织CaN活性、去磷酸化NFATc蛋白的相对表达、钙含量、及IL-2和IL-4的含量。结果:治疗组2.8g/kg组血清CaN活性、去磷酸化NFATc蛋白的相对表达、IL-2、IL-4含量均显著降低,Ca2+含量显著升高(P(0.05)。结论:Ca2+/CaN-NFATc信号转导通路在四逆汤治疗心衰过程中发挥重要的调控作用。