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蛇床子素抑制LPS诱导的肠上皮细胞株Caco2的炎症反应 被引量:8
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作者 孙武 张欣欣 +1 位作者 周文博 李皓 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第7期814-817,共4页
目的:探讨蛇床子素(osthole)对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肠上皮细胞Caco2中炎症因子表达的影响及机制。方法:培养Caco2细胞,用LPS诱导炎症反应。在LPS刺激前给予细胞不同浓度的蛇床子素处理,通过real-time PCR检测白介素(in... 目的:探讨蛇床子素(osthole)对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肠上皮细胞Caco2中炎症因子表达的影响及机制。方法:培养Caco2细胞,用LPS诱导炎症反应。在LPS刺激前给予细胞不同浓度的蛇床子素处理,通过real-time PCR检测白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α的表达情况。分别用PKA抑制剂H89和KT5720处理细胞,观察cAMP/PKA信号通路对蛇床子素效应的影响;用Western blot检测细胞中p38、Erk和JNK的磷酸化水平。结果:LPS刺激可以显著增加Caco2细胞中炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达。蛇床子素预处理对LPS诱导的炎症反应有明显抑制作用,PKA抑制剂H89和KT5720不能逆转蛇床子素的抑制作用。LPS刺激后,Caco2细胞中p38、Erk和JNK的磷酸化水平明显增加,蛇床子素可部分抑制它们的磷酸化。结论:蛇床子素具有抑制肠上皮细胞株Caco2炎症反应的效应,该效应不依赖于cAMP/PKA,可能与抑制Erk、JNK和p38的磷酸化有关。 展开更多
关键词 蛇床子素 脂多糖 炎症 MAPK caco2细胞
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药物处置的体外模型——Caco2细胞系 被引量:2
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作者 吴笑春 辛华雯 +3 位作者 余爱荣 仲明远 李罄 刘幼英 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期230-232,共3页
口服药物的生物利用度被认为仅与胃肠道吸收和肝脏的首过代谢有关.然而随着对小肠生理功能认识的深化,已经了解小肠在药代动力学过程中不仅专司吸收,还在药物的代谢、转运和消除中发挥着重要作用.
关键词 药物处置 体外模型 caco2细胞系 肠吸收 P—糖蛋白 药物相互作用
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灯盏花素对肝癌细胞HepG2和结肠癌细胞Caco2的体外抗肿瘤活性筛选 被引量:4
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作者 曹昌娥 赖泳 杜一民 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第10期1-5,共5页
目的观察灯盏花素对人肝癌细胞(HepG2)和人结肠癌细胞(Caco2)的体外增殖抑制影响。方法以不同浓度的灯盏花素分别处理HepG2和Caco2细胞24、48和72 h后采用MTT法检测灯盏花素对2种细胞活力的影响,以半数抑制浓度(IC50)及治疗指数(TI)作... 目的观察灯盏花素对人肝癌细胞(HepG2)和人结肠癌细胞(Caco2)的体外增殖抑制影响。方法以不同浓度的灯盏花素分别处理HepG2和Caco2细胞24、48和72 h后采用MTT法检测灯盏花素对2种细胞活力的影响,以半数抑制浓度(IC50)及治疗指数(TI)作为评价其抗肿瘤活性及安全性指标。结果灯盏花素对HepG2表现高浓度抑制作用,浓度为20 000μmol/L时,对HepG2细胞24、48和72 h的抑制率分别为37%、63%和69%;对Caco2细胞呈浓度依赖性,浓度为5 000μmol/L时,对Caco2细胞24、48和72 h的抑制率分别为72%、95%和92%。灯盏花素对HepG2 24h的IC50值为24320.5μmol/L;48h的IC50值为30 667.7μmol/L;72 h的IC50值为15 586.1μmol/L。对Caco2细胞24 h的IC50值为11 417.0μmol/L;48 h的IC50值为832.2μmol/L;72 h的IC50值为1 369.2μmol/L。结论灯盏花素对HepG2和Caco2细胞均有不同程度的抑制作用,对Caco2的抑制效果更明显。 展开更多
关键词 灯盏花素 HepG2细胞 caco2细胞 MTT法 抗肿瘤活性
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信号转导子与转录活化子6(STAT6)在人结肠癌细胞株HT29(STAT6^(high))、Caco2(STAT6^(null))细胞凋亡中的作用 被引量:3
4
作者 秦琴 龙洪清 +2 位作者 彭冰 曹传华 谢丛华 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2011年第5期1-5,共5页
目的通过分析信号转导子与转录活化子6(signal transducer and activator of transcription 6,STAT6)活化状态时不同的人结肠癌细胞株HT29(STAT6high)和Caco2(STAT6null)凋亡情况来研究STAT6与细胞凋亡之间的关系,并从分子水平探讨其可... 目的通过分析信号转导子与转录活化子6(signal transducer and activator of transcription 6,STAT6)活化状态时不同的人结肠癌细胞株HT29(STAT6high)和Caco2(STAT6null)凋亡情况来研究STAT6与细胞凋亡之间的关系,并从分子水平探讨其可能的机制。方法采用流式细胞仪检测人结肠癌细胞株HT29(STAT6high)和Caco2(STAT6null)细胞凋亡的情况,比较其差异;同时采用RT-PCR检测人结肠癌细胞株HT29(STAT6high)和Caco2(STAT6null)中凋亡相关基因(Caspase家族蛋白Caspase3 mRNA、Caspase7 mRNA和Bcl-2家族蛋白凋亡抑制蛋白Bcl-2 mRNA、Bcl-xl mRNA、促凋亡蛋白Hrk mRNA)的表达水平,比较其差异。结果人结肠癌细胞株Caco2(STAT6null)细胞早期凋亡率为(13.30±0.73)%,明显高于HT29(STAT6high)的(2.00±0.43)%(P<0.01)。RT-PCR显示,人结肠癌细胞株Caco2(STAT6null)中Caspase3 mRNA和Caspase7 mRNA表达水平均明显高于HT29(STAT6high)(均P<0.01)。人结肠癌细胞株Caco2(STAT6null)中凋亡抑制蛋白Bcl-2 mRNA、Bcl-xl mR-NA、促凋亡蛋白Hrk mRNA表达水平均明显高于HT29(STAT6high)(均P<0.01)。人结肠癌细胞株Caco2(STAT6null)、HT29(STAT6high)中STAT6活性水平与Caspase7、Caspase3、Bcl-2、Bcl-xl、Hrk mRNA表达水平均呈负相关(r=-0.514、-0.562、-0.518、-0.512、-0.426,均P<0.05)。结论 STAT6可能参与结肠癌细胞凋亡,其机制可能与凋亡相关基因的表达有关。 展开更多
关键词 信号转导子与转录活化子6 人结肠癌细胞株HT29(STAT6high) 人结肠癌细胞株caco2(STAT6null) 细胞凋亡 相关基因 凋亡 机制
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不同淋巴组织淋巴细胞培养上清诱导Caco2细胞向微皱褶样细胞转分化 被引量:1
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作者 王丽虹 罗霞 +3 位作者 郑冬生 周联 朱远洪 吴秀 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1311-1315,共5页
目的复制微皱褶(M)样细胞体外诱导模型,从功能和基因水平两方面鉴定M样细胞,同时观察不同淋巴组织活化的淋巴细胞的培养上清对Caco2细胞向M样细胞转化的影响。方法用3μg/m L伴刀豆球蛋白A(Con A)刺激Peyer结(PP)、肠系膜淋巴结(MLN)和... 目的复制微皱褶(M)样细胞体外诱导模型,从功能和基因水平两方面鉴定M样细胞,同时观察不同淋巴组织活化的淋巴细胞的培养上清对Caco2细胞向M样细胞转化的影响。方法用3μg/m L伴刀豆球蛋白A(Con A)刺激Peyer结(PP)、肠系膜淋巴结(MLN)和脾脏(Sp)的淋巴细胞3 d,收集细胞培养上清后,将其并与Caco2细胞共培养。在TranswellTM上室加入微球,收集下室的培养液,流式细胞术分析荧光微球数量;反转录PCR检测M样细胞相关基因CC趋化因子配体20(CCL20)、密封蛋白基因4(CLDN4)、肿瘤坏死因子受体超家族成员9(TNFRSF9)、Ets家族转录因子Spi-B mRNA的水平,观察不同淋巴组织淋巴细胞培养上清对Caco2细胞向M样细胞转化的诱导率的影响。结果与空白对照组相比,PP、MLN和Sp淋巴细胞培养上清诱导后,诱导后的Caco2细胞转运的微球数量和CCL20、CLDN4、TNFRSF9、Spi-B的mRNA水平均显著增加;与未刺激组相比,Con A刺激后,诱导后的Caco2细胞转运的微球数量和CCL20、CLDN4、TNFRSF9、Spi-B的mRNA水平均显著增加。结论 Con A刺激和未刺激的淋巴细胞培养上清,均可以诱导Caco2细胞向M样细胞转分化。 展开更多
关键词 M样细胞 caco2细胞 Peyer结 肠系膜淋巴结 脾脏 基因表达
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Bcl-2短发夹状RNA对BEL-7402、Caco2细胞的生长抑制作用 被引量:1
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作者 何冬梅 张洹 刘革修 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期995-997,共3页
目的:研究Bcl-2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列的表达载体对肝癌细胞系BEL-7402和结肠癌细胞系Caco2生长的抑制作用。方法:将Bcl-2 shRNA序列克隆到携带绿色荧光蛋白基因的质粒Pgenesil-1载体,采用脂质体介导的转染方法将构... 目的:研究Bcl-2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列的表达载体对肝癌细胞系BEL-7402和结肠癌细胞系Caco2生长的抑制作用。方法:将Bcl-2 shRNA序列克隆到携带绿色荧光蛋白基因的质粒Pgenesil-1载体,采用脂质体介导的转染方法将构建的Bcl-2shRNA表达质粒转入BEL-7402、Caco2细胞,同时设立阴性shRNA组、空载体组、脂质体组、空白组作为对照。通过倒置荧光显微镜和流式细胞仪观察细胞的转染效率,Western印迹法检测Bcl-2蛋白表达水平,MTT法测定细胞增殖情况。结果:Bcl-2 shRNA转染组、阴性shRNA组、空载体组的转染效率无显著差异。转染Bcl-2 shRNA后BEL-7402、Caco2细胞Bcl-2蛋白表达水平与转染阴性shRNA、空载体组、脂质体组和空白组相比均显著降低(P<0.05),且Bcl-2 shRNA抑制Caco2细胞Bcl-2蛋白表达比BEL-7402细胞更为明显(P<0.05)。MTT测定显示转染Bcl-2 shRNA载体入BEL-7402、Caco2细胞在729、6 h细胞生长明显受到抑制,分别与转染阴性shRNA、空载体组、脂质体组和空白组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:Bcl-2 shRNA可特异性地抑制BEL-7402、Caco2细胞生长。 展开更多
关键词 BCL-2 SHRNA RNAI BEL-7402细胞 caco2细胞
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LPA对人结肠腺癌Caco2细胞SLC26A3表达的影响
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作者 胡慧 王艳 +4 位作者 杨奉天 龚先锋 张洋 徐丽红 郑勇 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第5期-,共6页
为探讨溶血磷脂酸(LPA)对溶质载体26 A3(solute carrier 26 A3′SLC26A3或DRA)在Caco2细胞中细胞内定位及蛋白表达的影响。采用构建pIRES2-ZsGreen1-SLC26A3质粒,转染Caco2细胞,G418筛选获稳转pIRES2-ZsGreen1-SLC26A3 Caco2细胞。设立... 为探讨溶血磷脂酸(LPA)对溶质载体26 A3(solute carrier 26 A3′SLC26A3或DRA)在Caco2细胞中细胞内定位及蛋白表达的影响。采用构建pIRES2-ZsGreen1-SLC26A3质粒,转染Caco2细胞,G418筛选获稳转pIRES2-ZsGreen1-SLC26A3 Caco2细胞。设立未处理的Caco2细胞组(Caco2组)、转染空质粒的Caco2组(NP-Caco2组)、转染SLC26A3质粒的Caco2组(SLC26A3-Caco2组)、LPA处理的转染空质粒的Caco2组(LPA+NP-Caco2组)和LPA处理的转染SLC26A3质粒的Caco2组(LPA+SLC26A3-Caco2组),以LPA与Caco2细胞共孵育12 h为观察时间点(LPA浓度为100μmoL/L),利用细胞免疫荧光实验观察Caco2细胞中SLC26A3的定位分布,Western blot法检测Caco2细胞中SLC26A3蛋白的表达。结果显示,细胞免疫荧光实验观察结果显示LPA+SLC26A3-Caco2组SLC26A3细胞膜定位较SLC26A3-Caco2组的略有增加;Western blot检测结果显示LPA+NP-Caco2组的糖基化SLC26A3蛋白表达量较Caco2组与NP-Caco2组的均增加,有统计学意义(相对β-actin的表达量,LPA+NP-Caco2组vs.Caco2组:0.83±0.446 vs.0.14±0.050,P=0.018;LPA+NP-Caco2组vs.Np-Caco2组:0.83±0.446 vs.0.29±0.032,P=-0.044)。由此可知,LPA可促进SLC26A3在Caco2细胞的细胞膜定位和蛋白表达,从而为LPA作为治疗结肠炎相关性腹泻的候选药物提供更多理论依据。 展开更多
关键词 溶血磷脂酸 溶质载体26 A3 caco2
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N-myc downstream regulated gene 1 inhibition of tumor progression in Caco2 cells 被引量:1
8
作者 Yi-Xiao He Hong Shen +5 位作者 Yu-Zhu Ji Hai-Rong Hua Yu Zhu Xiang-Fei Zeng Fang Wang Kai-Xin Wang 《World Journal of Gastrointestinal Oncology》 SCIE 2022年第12期2313-2328,共16页
BACKGROUND Invasion and migration are the irreversible stages of colorectal cancer(CRC).The key is to find a sensitive,reliable molecular marker that can predict the migration of CRC at an early stage.N-myc downstream... BACKGROUND Invasion and migration are the irreversible stages of colorectal cancer(CRC).The key is to find a sensitive,reliable molecular marker that can predict the migration of CRC at an early stage.N-myc downstream regulated gene 1(NDRG1)is a multifunctional gene that has been tentatively reported to have a strong relationship with tumor invasion and migration,however the current molecular role of NDRG1 in CRC remains unknown.AIM To explore the role of NDRG1 in the development of CRC.METHODS NDRG1 stably over-expressed Caco2 cell line was established by lentiviral infection and NDRG1 knock-out Caco2 cell line was established by CRISPR/Cas9.Furthermore,the mRNA and protein levels of NDRG1 in Caco2 cells after NDRG1 over-expression and knockout were detected by real-time polymerase chain reaction and western blot.The cell proliferation rate was measured by the cell counting kit-8 method;cell cycle and apoptosis were detected by flow cytometry;invasion and migration ability were detected by the 24-transwell method.RESULTS NDRG1 over-expression inhibited Caco2 proliferation and the cell cycle could be arrested at the G1/S phase when NDRG1 was over-expressed,while the number of cells in the G2 phase was significantly increased when NDRG1 was knocked out.This suggests that NDRG1 inhibited the proliferation of Caco2 cells by arresting the cell cycle in the G1/S phase.Our data also demonstrated that NDRG1 promotes early cell apoptosis.Invasion and migration of cells were extensively inhibited when NDRG1 was over-expressed.CONCLUSION NDRG1 inhibits tumor progression in Caco2 cells which may represent a potential novel therapeutic strategy for the treatment of CRC. 展开更多
关键词 N-myc downstream regulated gene 1 caco2 Colorectal cancer Tumor progression CRISPR/Cas9 Lentivirus infection
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干扰素诱导跨膜蛋白3基因敲除Caco2细胞株的构建及其对水泡性口炎病毒复制的影响
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作者 庞照霞 郝鹏飞 +3 位作者 屈巧巧 李乐天 李昌 金宁一 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期476-482,共7页
通过CRISPR/Cas9系统,旨在构建干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)基因敲除的人结直肠腺癌细胞Caco2,并探究IFITM3基因敲除对水泡性口炎病毒(VSV)复制的影响。针对人IFITM3基因靶向设计sgRNA,合成后连接至pLentiv2载体中获得重组质粒,经测序... 通过CRISPR/Cas9系统,旨在构建干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)基因敲除的人结直肠腺癌细胞Caco2,并探究IFITM3基因敲除对水泡性口炎病毒(VSV)复制的影响。针对人IFITM3基因靶向设计sgRNA,合成后连接至pLentiv2载体中获得重组质粒,经测序后将正确连接sgRNA的重组质粒及辅助质粒psPAX2、pMD2.G共转染293T细胞进行慢病毒包装并感染Caco2细胞,然后进行嘌呤霉素加压筛选,利用有限稀释法获取IFITM3基因敲除单克隆细胞。利用DNA测序和Western blot对所获得单细胞克隆进行鉴定,鉴定正确的细胞命名为Caco2-△IFITM3。用表达绿色荧光蛋白的VSV(VSV-EGFP)感染Caco2-△IFITM3细胞,通过荧光显微镜观察IFITM3敲除对VSV复制的影响。基因组DNA测序结果表明,在IFITM3基因开放阅读框产生了碱基缺失,细胞中IFITM3蛋白表达消失,但细胞活性未受明显影响。病毒感染试验可观察到Caco2-△IFITM3细胞感染比例显著高于Caco2细胞,表明敲除IFITM3使其抗病毒功能减弱。本研究通过CRISPR/Cas9技术成功构建了基于肠道细胞敲除IFITM3基因的Caco2单细胞克隆,验证了IFITM3敲除对细胞抗VSV感染的影响,为进一步深入研究IFITM3与肠道病毒的互作及其功能奠定基础。 展开更多
关键词 干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3) CRISPR/Cas9 caco2细胞 水泡性口炎病毒(VSV)
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低锌浓度培养基对Caco2细胞二价金属离子转运体mRNA表达的影响 被引量:1
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作者 沈慧 秦海宏 +1 位作者 王福俤 郭俊生 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期55-57,共3页
关键词 MRNA表达 二价金属离子 caco2细胞 锌浓度 转运体 培养基 DMT1 微量营养素 脑组织 锌吸收
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NDRG1基因在亚洲人与高加索人大肠癌细胞株中恶性行为的比较
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作者 朱宇 王开昕 +2 位作者 华海蓉 王芳 叶宏 《世界肿瘤研究》 CAS 2024年第2期97-107,共11页
目的:NDRG1在大肠癌中的作用至今仍存在争议,是否与种族有关未见报导,本研究旨在分析NDRG1基因在亚洲人与高加索人大肠癌细胞株中的作用。方法:利用细胞计数法测定细胞生长速度;通过RT-qPCR在mRNA水平比较NDRG1在亚洲人和高加索人大肠... 目的:NDRG1在大肠癌中的作用至今仍存在争议,是否与种族有关未见报导,本研究旨在分析NDRG1基因在亚洲人与高加索人大肠癌细胞株中的作用。方法:利用细胞计数法测定细胞生长速度;通过RT-qPCR在mRNA水平比较NDRG1在亚洲人和高加索人大肠癌细胞中的表达;24-Transwell法检测亚洲人和高加索人大肠癌细胞侵袭和迁移能力;流式细胞术检测亚洲人和高加索人大肠癌细胞的大小、细胞周期、DNA含量及NDRG1蛋白含量等;裸鼠背侧皮下移植检测细胞的增殖速度。结果:1) Caco2细胞的体外增殖速度比SNU-C1细胞快,且差异有统计学意义(P P > 0.05),而48 h和72 h两个时间点两组细胞之间差异有统计学意义(P = 0.006, P = 0.000)。4) Caco2组除24 h组迁移能力比SNU-C1组低之外,48 h和72 h两个时间点迁移能力均高于SNU-C1组,且两组细胞之间差异有统计学意义(P = 0.038, P = 0.045, P = 0.012)。5) 经FSC分析发现Caco2平均体积明显大于SNU-C1,从SSC分析得到SNU-C1细胞表面的皱折度、细胞内亚细胞器、颗粒的数目等均大于Caco2。6) 两种细胞的细胞周期各间期之间差异无统计学意义(P > 0.05)。7) 两株细胞NDRG1蛋白含量为Caco2细胞平均值36.3,SNU-C1细胞平均值86.5。8) 两株细胞NDRG1的DNA含量为Caco2细胞平均值45,SNU-C1细胞平均值50.2。9) 裸鼠背侧皮下移植后Caco2细胞增殖速度快于SNU-C1细胞的,但差异无统计学意义(P > 0.05)。结论:在高加索人大肠癌细胞株Caco2与亚洲人大肠癌细胞株SNU-C1中NDRG1的mRNA水平存在差异,且在体外侵袭与迁移中的作用也存在差异。 展开更多
关键词 大肠癌 caco2 SNU-C1 NDRG1 侵袭 迁移
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Determination of the Bioaccessibility of Cadmium in Golden Thread by Physiologically Based Extraction Test Digestion Using the in vitro/Caco2 Cell Model and Subsequent Risk Assessment 被引量:1
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作者 Tian-Tian Zuo Fei-Ya Luo +6 位作者 Hong-Yu Jin Shu-Xia Xing Bo Li Kun-Zi Yu Shuai Kang Lei Sun Shuang-Cheng Ma 《World Journal of Traditional Chinese Medicine》 2021年第2期240-245,共6页
Background:The ingestion of golden thread contaminated with heavy metals through the food chain leads to detrimental effects to human health.During digestion,not all of the heavy metals could be released to the gastro... Background:The ingestion of golden thread contaminated with heavy metals through the food chain leads to detrimental effects to human health.During digestion,not all of the heavy metals could be released to the gastrointestinal tract and readily to be absorbed by human body.Thus,bioaccessibility is an important issue in health risk assessments.Aims and Objectives:The aims and objectives of this study were to investigate the bioaccessibility of Cd in golden thread and assess the associated health risks based on the exposure to bioaccessible Cd.Materials and Methods:Inductively coupled plasma mass spectrometry(ICP-MS)has been applied to determine the Cd content in golden thread.Physiologically based extraction test(PBET)digestion was performed in the in vitro/Caco2 cell model to investigate the bioaccessibility of Cd in golden thread.Furthermore,the target hazard quotient(THQ)was used to assess the risks of the total and the bioaccessible content of Cd in golden thread.Results:The results revealed that the total Cd content in six batches of golden thread ranged from 3.203 to 5.723 mg/kg.After uptake by Caco2 cells,the bioaccessibility of Cd ranged from 42.36%to 59.73%.The results of the risk assessment indicated that prior to uptake by Caco2 cells,the THQ values of Cd for all batches of golden thread were greater than 1.However,after uptake by Caco2 cells,the THQ values of Cd in all samples were less than 1,thus suggesting that the risks were at a safe level.Conclusion:This study was the first to perform health risk assessment with bioaccessible heavy metals present in traditional Chinese medicine by PBET digestion using an in vitro/Caco2 cell model,thus enabling us to obtain more accurate and objective results while allowing us to avoid unnecessary government intervention and to establish more reasonable limit standards for heavy metals. 展开更多
关键词 BIOACCESSIBILITY CADMIUM golden thread physiologically based extraction test digestion in vitro/caco2 cell model risk assessment
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CBX2蛋白在大肠癌中的表达及对CACO2细胞增殖、转移的作用机制 被引量:1
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作者 王维 雷艳荣 郑雅梅 《中国煤炭工业医学杂志》 2019年第5期518-522,共5页
目的探究色素框同源蛋白2(chromobox protein homolog,CBX2)蛋白在大肠癌中的表达水平及对CACO2细胞增殖与转移的作用机制。方法对85例大肠癌患者及癌旁正常组织中的CBX2蛋白水平进行检测,并设置CACO2癌细胞组,CACO2-mimics组以及CACO2-... 目的探究色素框同源蛋白2(chromobox protein homolog,CBX2)蛋白在大肠癌中的表达水平及对CACO2细胞增殖与转移的作用机制。方法对85例大肠癌患者及癌旁正常组织中的CBX2蛋白水平进行检测,并设置CACO2癌细胞组,CACO2-mimics组以及CACO2-inhibitor组,对各组细胞OD值、存活率水平、单克隆形成数目、细胞穿膜数、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein-9,MMP-9)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1,cyc D1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平进行分析。结果大肠癌组CBX2蛋白水平显著高于癌旁正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。CBX2-mimics组OD值、存活率水平、克隆形成数目、细胞穿膜数、CBX2 mRNA、MMP-9、cyc D1、VEGF显著高于CBX2癌细胞组及CBX2-inhibitor组,差异有统计学意义(P<0.05),CBX2-inhibitor组OD值、存活率水平、克隆形成数目、细胞穿膜数、CBX2 mRNA、MMP-9、cyc D1、VEGF显著低于CBX2癌细胞组,差异有统计学意义(P<0.05);CBX2 mRNA与MMP-9、CycD1、VEGF蛋白呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大肠癌组织中CBX2蛋白表达水平升高,且CBX2高表达能促进CACO2细胞增殖、转移,其机制与CBX2诱导CACO2细胞高表达MMP-9、CycD1、VEGF有关。 展开更多
关键词 CBX2蛋白 大肠癌 caco2 增殖 转移
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丁酸对TNFα所致肠上皮屏障损伤的保护作用
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作者 刘路琼 陈通 +3 位作者 张永进 谢振荣 何成禄 黄永坤 《昆明医科大学学报》 CAS 2023年第10期10-17,共8页
目的探讨丁酸对TNFα所致肠上皮屏障损伤的保护作用。方法用CCK-8细胞活力检测探索TNFα对Caco2发挥损伤作用的最佳浓度和时间,并以此为基础探索在TNFα发挥损伤作用最佳作用时间附近丁酸对Caco2细胞的保护情况,随后探索TNFα和丁酸共... 目的探讨丁酸对TNFα所致肠上皮屏障损伤的保护作用。方法用CCK-8细胞活力检测探索TNFα对Caco2发挥损伤作用的最佳浓度和时间,并以此为基础探索在TNFα发挥损伤作用最佳作用时间附近丁酸对Caco2细胞的保护情况,随后探索TNFα和丁酸共同作用于Caco2细胞时的最佳时间和浓度,并检测Caco2细胞单层上皮屏障的FITC-dextran渗透率,紧密连接ZO-1和Occludin的mRNA表达情况及免疫荧光观察TNFα和丁酸共同作用后细胞的生长情况及ZO-1和Occludin在Caco2中的表达和分布。结果100 ng/mL的TNFα刺激48 h能明显降低Caco2的细胞存活率(P<0.0001);丁酸作用于Caco2细胞48 h,0.2 mM/L的丁酸能明显提高Caco2的细胞存活率(P<0.0001)。当TNFα和丁酸共同作用时,与TNFα干预组相比,丁酸可以明显降低TNFα所致的肠上皮单层屏障的FITC-dextran渗透率(P<0.0001),提高ZO-1(P<0.01)和Occludin(P<0.01)的表达及稳定其在Caco2细胞中的分布。结论丁酸可以减轻TNFα所致的肠上皮屏障损伤,为进一步明确丁酸在溃疡性结肠炎治疗中作用机制提供实验基础。 展开更多
关键词 caco2细胞 溃疡性结肠炎 TNFΑ 丁酸 ZO-1 OCCLUDIN
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钩藤碱治疗炎症性肠炎可行性及机制研究
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作者 刘宇 程路峰 +5 位作者 武洋 李梦佳 阿米尔·泽布 古丽若依·帕尔哈提 陈佳琪 毛旭文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1929-1937,共9页
目的应用网络药理学结合体内、外实验,探究钩藤碱治疗炎症性肠炎(inflammatory bowel disease,IBD)的可行性及机制。方法运用数据库获取钩藤碱-IBD交集靶点并进行GO和KEGG富集分析。通过分子对接筛选关键靶蛋白的结合情况。体内实验利... 目的应用网络药理学结合体内、外实验,探究钩藤碱治疗炎症性肠炎(inflammatory bowel disease,IBD)的可行性及机制。方法运用数据库获取钩藤碱-IBD交集靶点并进行GO和KEGG富集分析。通过分子对接筛选关键靶蛋白的结合情况。体内实验利用葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠IBD模型,钩藤碱干预7 d,观察各组小鼠体征并进行疾病活动指数(DAI)评分;ELISA法检测小鼠结肠组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、髓过氧化物酶(MPO)等炎症因子水平;检测各组小鼠肠道通透性。体外实验构建DSS诱导Caco2细胞炎症模型,明确钩藤碱对关键靶点的调控作用。结果共筛选到70个钩藤碱-IBD交集靶点,富集分析发现其与炎症反应过程、PI3K-Akt、Hippo信号通路相关;分子对接结果表明,钩藤碱与JAK2和JAK1结合最稳定。体内实验结果表明,与模型组比较,钩藤碱组体重、结肠长度及重量明显升高(P<0.05);DAI评分、结肠组织中IL-1β、MPO等炎症因子水平以及肠通透性明显降低(P<0.01)。体外实验结果表明,与模型组相比,钩藤碱组明显促进Caco2细胞增殖(P<0.05);同时显著降低细胞的TNF-α、IL-6及NO水平(P<0.05);Western blot结果表明,钩藤碱可以降低关键蛋白JAK2和JAK1的表达(P<0.05)。结论钩藤碱可能通过抑制JAK2和JAK1蛋白表达,减轻机体炎症反应,从而发挥治疗IBD的作用。 展开更多
关键词 钩藤碱 炎症性肠炎 网络药理学 分子对接 caco2细胞 酪氨酸蛋白激酶
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羊栖菜多酚的制备及抗氧化活性研究
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作者 王艳英 田周萍 +2 位作者 康臆玲 陈慧斌 黄鹭强 《福建师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第3期63-69,77,共8页
以羊栖菜为原料,考察3种不同方法和不同料液比对羊栖菜多酚浸出率的影响,对多酚进行提取纯化,探讨抗氧化活性能力,并通过过氧化氢诱导的Caco⁃2细胞炎症模型来探究多酚的抗炎作用.结果显示,获得最优的羊栖菜多酚浸提工艺条件为:乙醇体积... 以羊栖菜为原料,考察3种不同方法和不同料液比对羊栖菜多酚浸出率的影响,对多酚进行提取纯化,探讨抗氧化活性能力,并通过过氧化氢诱导的Caco⁃2细胞炎症模型来探究多酚的抗炎作用.结果显示,获得最优的羊栖菜多酚浸提工艺条件为:乙醇体积分数40%,浸提时间60 min,料液比1∶30,浸提温度为70℃,超声输出功率为200 W,浸出率达(7.650±0.934)%.在此条件下多酚质量浓度可达29.94 mg·mL^(-1),纯度达(21.45±0.56)%;在细胞炎症模型中,纯多酚可以显著降低细胞上清液中抗氧化防御酶的含量,能有效保护过氧化氢诱导的Caco⁃2细胞的氧化损伤. 展开更多
关键词 羊栖菜 多酚 制备 抗氧化 Caco⁃2细胞
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黄连素对P-糖蛋白底物在Caco-2和L-MDR1细胞跨膜转运的影响 被引量:16
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作者 辛华雯 吴笑春 +2 位作者 李罄 余爱荣 Ulrich Klotz 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期799-803,共5页
目的研究黄连素(berberine,Ber)对P-糖蛋白底物环孢素(cyclosporine A,CsA)和地高辛在Caco-2和L-MDR1细胞跨膜转运的影响。方法以Caco-2、L-MDR1细胞为模型,在50μmol·L-1~5mmol·L-1Ber作用后,测定地高辛和CsA跨膜转运的转... 目的研究黄连素(berberine,Ber)对P-糖蛋白底物环孢素(cyclosporine A,CsA)和地高辛在Caco-2和L-MDR1细胞跨膜转运的影响。方法以Caco-2、L-MDR1细胞为模型,在50μmol·L-1~5mmol·L-1Ber作用后,测定地高辛和CsA跨膜转运的转运率和表观渗透系数。结果Ber在50μmol·L-1~5mmol·L-1范围内可剂量依赖性地降低地高辛在Caco-2和L-MDR1细胞单层底端(B侧)至顶端(A侧)的转运。对于CsA在Caco-2细胞的转运,50μmol·L-1~5mmol·L-1的Ber不但剂量依赖性地降低CsA从B→A方向的转运,而且也明显增加其在A→B方向的转运。在Caco-2和L-MDR1细胞,Ber抑制地高辛B→A方向转运的IC50值分别为1.44mmol·L-1和1.24mmol·L-1。Ber抑制CsA在Caco-2细胞转运的IC50值为607μmol·L-1。结论Ber和CsA相互作用的机制可能涉及P-gp功能的抑制和饱和。 展开更多
关键词 黄连素 环孢素A P-糖蛋白 caco2细胞
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纳米钙基CO_2吸附剂反应吸附与分解动力学 被引量:11
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作者 师琦 吴素芳 +1 位作者 蒋明哲 李清辉 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第3期641-648,共8页
采用TGA测定纳米钙基CO2吸附剂在500~650℃温度范围内,CO2分压0.015~0.025 MPa氮气气氛中的吸附反应动力学。针对纳米钙基CO2吸附剂吸附CO2反应特征,提出以两倍最大吸附速率对应的时间点前后分别为快速反应段与慢速反应段。分别采用Bo... 采用TGA测定纳米钙基CO2吸附剂在500~650℃温度范围内,CO2分压0.015~0.025 MPa氮气气氛中的吸附反应动力学。针对纳米钙基CO2吸附剂吸附CO2反应特征,提出以两倍最大吸附速率对应的时间点前后分别为快速反应段与慢速反应段。分别采用Boltzmann方程与Avrami-Erofeev方程拟合快速反应段与慢速反应段吸附反应动力学方程,得到纳米钙基CO2吸附剂在快速反应段与慢速反应段的活化能分别为27.52、70.25kJ.mol-1。吸附率拟合与实验值平均相对误差分别为10.29%、4.17%。研究测试了纳米钙基CO2吸附剂在650~800℃温度范围内,N2,0.02、0.04 MPa CO2分压氮气气氛中的分解反应动力学。忽略反应过程中传热、传质影响,采用收缩核模型,分别求得吸附剂在N2,0.02、0.04 MPa CO2分压氮气气氛中的活化能为141.9、34.7、113.2 kJ.mol-1。碳酸钙分解率与实验值比较平均相对误差分别小于5.66%、7.82%、5.01%。 展开更多
关键词 氧化钙 CO2吸附剂 纳米caco2 吸附动力学 分解动力学
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黄芪多糖对大肠埃希菌侵入肠上皮细胞的保护研究 被引量:7
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作者 欧德渊 高铭宇 +1 位作者 刘世会 刘若余 《动物医学进展》 CSCD 2006年第8期85-87,共3页
采用CaCo2细胞单层肠上皮系统感染模型,将5×10-5mmol/L,1×10-4mmol/L和2×10-4mmol/L 3种不同浓度的黄芪多糖及不含黄芪多糖DMEM细胞培养液分别加入已平铺于培养板的CaCo2细胞单层系统中与定量的大肠埃希菌混合培养,观察... 采用CaCo2细胞单层肠上皮系统感染模型,将5×10-5mmol/L,1×10-4mmol/L和2×10-4mmol/L 3种不同浓度的黄芪多糖及不含黄芪多糖DMEM细胞培养液分别加入已平铺于培养板的CaCo2细胞单层系统中与定量的大肠埃希菌混合培养,观察侵入细胞的大肠埃希菌量。结果黄芪多糖浓度为5×10-5,1×10-4mmol/L和2×10-4mmol/L,处理的CaCo2细胞液的细菌培养数量分别为252.5个±54.5个,240.8个±44.2个和292.7个±71.3个,而对照组为598.8个±114.8个,显示黄芪多糖能显著减少大肠埃希菌进入上皮细胞的数量,增强肠黏膜的屏障功能。 展开更多
关键词 黄芪多糖 caco2 细菌移位
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组织胺对肠粘膜屏障功能的调节作用研究 被引量:8
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作者 陈晓理 黄兴兰 《华西医科大学学报》 CSCD 2000年第1期46-48,共3页
为探讨组织胺对肠粘膜屏障功能的调节作用 ,采用 Ca Co2细胞单层肠上皮系统 -感染模型 ,将 1×1 0 - 6 mmol/L、1× 1 0 - 7m mol/L 和 1× 1 0 - 8mmol/L 三种不同浓度的组织胺 DMEM细胞培养液分别加入已形成类似肠上皮的 ... 为探讨组织胺对肠粘膜屏障功能的调节作用 ,采用 Ca Co2细胞单层肠上皮系统 -感染模型 ,将 1×1 0 - 6 mmol/L、1× 1 0 - 7m mol/L 和 1× 1 0 - 8mmol/L 三种不同浓度的组织胺 DMEM细胞培养液分别加入已形成类似肠上皮的 Ca Co2细胞单层系统中 ,和定量的大肠杆菌混合培养。观察侵入细胞的大肠杆菌量 ,并用同样的方法测试组织胺调节作用的时间效应。结果 :经浓度为 1× 1 0 - 6 mm ol/L、1× 1 0 - 7m mol/L和 1× 1 0 - 8mmol/L组织胺液处理过的 Ca Co2细胞液的细菌培养结果分别为 5 2 .5、30 .3和 91 .3个 ,而对照组为 5 36 .2个 ,显示不同浓度的组织胺均能明显减少大肠杆菌进入上皮的数量 (P<0 .0 5 )。观察不同的作用时间段发现 :对照组及组织胺 - DMEM培养0 .5、1 .0、2 .0、4.0和 1 8.0小时后的细菌入侵数分别为 1 0 1 .5、1 35 .5、6 4.0、2 9.5、35 .5和 2 2 .5 5个 ,说明组织胺的作用有其时相性。上述实验结果表明 ,组织胺能增强肠粘膜的屏障功能 。 展开更多
关键词 caco2细胞 肠粘膜 细菌移位 组织胺
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