Calbindin-D-28k对MPTP致小鼠黑质凋亡相关蛋白Bax表达的影响

目的探讨在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致小鼠黑质多巴胺(DA)能细胞发生凋亡时,calb ind in-D-28k(CB)抗细胞凋亡的作用机制。方法MPTP连续5天腹腔注射构建中脑黑质DA能细胞损伤的小鼠模型,模型鼠脑黑质致密部立体定位注射携带CB基因的高滴度慢病毒颗粒(CB-H IV-Ⅰ),W estern b lotting方法检测CB的在体过表达以及鼠脑黑质部位凋亡相关蛋白Bax的表达变化。结果与空白对照组(control)和黑质定位注射空病毒颗粒组(H IV-Ⅰ)相比,注射CB-H IV-Ⅰ的实验组的黑质中CB的表达量显著升高(P<0.05),而Bax的表达量明显降低(P<0.05)。结论病毒颗粒CB-H IV-Ⅰ携带的CB基因在黑质细胞中获得了高效的表达;凋亡相关蛋白Bax可能参与了CB对黑质DA能神经细胞的保护作用。

28nm高K金属栅技术平台光阻回刻工艺中提高刻蚀工艺稳定性的方法研究

阐述在28nm高K金属栅(28HKMG)技术平台中解决NMOS/PMOS区域栅极阻挡层高度差的主要方案,是在金属栅极制造工艺前插入光阻回刻系列工艺流程,使NMOS区域与PMOS区域的栅极高度获得一致。但该方案在实际量产中的主要难点是第二道回刻工艺(Etch Back2,即EB2)不稳定,腔体的刻蚀速率与面内分布随着作业时间的增加会出现明显的趋势变化,导致产品端用于表征刻蚀结果的量测参数“牛角高度”(Spacer1二氧化硅保护层高度与栅极高度之间的高度差)在片内具有较高波动性,易造成缺陷,无法安全生产。为此,详细探讨28HKMG平台EB2刻蚀工艺不稳定的原因,并针对实际量产过程中发生的异常,给出切实可行的解决方案,有利于维护腔体微环境稳定,提高产品质量。

电针对大鼠局灶性脑缺血脑内Calbindin-D_(28k)表达的影响

目的 :探讨钙结合蛋白家族成员Calbindin D2 8k与电针抗缺血性脑损伤的关系。方法 :用改良线栓法制备SD大鼠大脑中动脉 (MCA)阻塞 再灌注模型 ,应用TTC及HE组织化学染色观察缺血及电针后梗塞灶的变化 ,并应用免疫组织化学方法对大鼠局灶性脑缺血组织内Calbindin D2 8k免疫阳性细胞的分布及电针对该分布的影响进行观察。结果 :电针可明显改善局灶性脑缺血所造成的神经缺损体征 ;但缺血组及电针组Calbindin D2 8k免疫阳性细胞在梗塞灶中心区几乎检测不出 ,缺血组在半影区与对照组相比表达上调 (P <0 0 5 ) ;电针组Calbindin D2 8k在半影区的表达与缺血组之间差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。结论 :局灶性脑缺血对Calbindin D2 8k在半影区反应性表达增强可能用以缓冲胞内过多的游离钙 ;电针在脑缺血时对神经元具有保护效应 ,但可能并不是通过调整Calbindin D2

含Parvalbum in和Calbind in D-28k样免疫阳性神经元在大鼠三叉神经本体觉中枢通路的分布

本研究应用免疫组织化学技术对Ｐａｒｖａｌｂｕｍ ｉｎ（ＰＶ）和Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ Ｄ２８ｋ（ＣＢ）样免疫阳性神经元在大鼠三叉神经本体觉中枢通路上的分布状况作了普查。结果表明： 这两种钙结合蛋白在该通路上具有下列的分布特点：（１）三叉神经中脑核神经元几乎全部为ＰＶ 样免疫阳性，胞体和突起染色强或中等强度，胞体大（１８～３０ μｍ ），多为假单级神经元，偶见中等大小的多极神经元。（２）在三叉神经脊束核吻侧亚核尾侧段水平的三叉神经脊束核吻侧亚核背内侧部及邻接的网状结构中可看到由ＰＶ 样免疫阳性神经元构成的两团深染区，外侧者大，内侧者小，胞体呈圆形、三角形或不规则形（９～１６ μｍ ）；在此处ＣＢ样免疫阳性细胞亦呈类似分布。（３）“带状区”内ＰＶ 样免疫阳性细胞多为具有短突的多极神经元；在三叉上核尾外侧部，ＰＶ 样神经元分布稀疏，但在感觉主核背内侧部则呈高密度分布；ＡＶＭ 、ＡＤＯ 等两个位于“带状区”腹侧部的新发现的小核团亦可观察到阳性细胞和突起。此“带状区”内ＣＢ样免疫阳性细胞数目较少，分布也稀疏，但胞体较大（１１～１８ μｍ ），呈三角形、圆形或不规则形，轴突上可见少量的串珠状膨体。在ＡＤＯ 中ＣＢ样免疫阳性细胞的分布较Ｐ?

大鼠腰髓内Calbindin D-28K样、SP受体样及Fos阳性神经元向臂旁外侧核的投射

目的 观察大鼠腰髓向臂旁外侧核 (LPB)投射的CalbindinD 2 8K(CB)样阳性神经元与外周伤害性刺激信息传递和SP受体 (SPR)样阳性神经元之间的关系。 方法 四甲基罗达明 (TMR)逆行追踪与CB、SPR或Fos免疫荧光组织化学染色相结合的三标方法 ,在激光共聚焦显微镜下进行观察。 结果 1 将TMR注入一侧LPB后 ,大量的TMR逆标神经元主要见于同侧腰髓背角Ⅰ层、外侧脊核 (LSN)和中央管周围灰质 (X层 )。Ⅱ层内也可见少量散在分布的TMR逆标神经元。 2 CB样阳性神经元主要分布于腰髓背角Ⅰ、Ⅱ层 ,尤其在Ⅱ层内可见大量的CB样阳性细胞呈密集分布。 3 SPR样阳性神经元主要见于腰髓背角Ⅰ层、LSN和X层。Ⅱ层内也可见少量的SPR阳性神经元。 4 5 %福尔马林注入大鼠同侧足底后诱导的Fos阳性神经元主要见于腰髓背角Ⅰ、Ⅱ层、Ⅴ～Ⅶ的外侧部。 5 TMR CB SPR和TMR CB Fos三标神经元均主要分布于背角Ⅰ层 ,Ⅱ层内也有少量的三标神经元。其中位于Ⅰ、Ⅱ内的TMR CB SPR三标神经元数分别各占TMR、CB和SPR单标神经元数的 10 3%、9 8%和 14 6 % ,而TMR CB Fos三标神经元数分别各占TMR、CB和Fos单标神经元数的 11 8%、10 6 %和 15 8%。 结论 腰髓背角Ⅰ、Ⅱ层内 ,传递外周伤害性刺激信息并向LPB投射的部分CB样阳性神?

大鼠三叉神经脊束间质核内接受面口部躯体伤害性信息的calbindinD-28k神经元向孤束核的投射

为探讨三叉神经脊束间质核内的 calbindin D-2 8k神经元是否接受并传递面口部躯体伤害性信息到孤束核 ,本研究应用荧光金逆行束路追踪结合 FOS和 calbindin D-2 8k免疫荧光组织化学技术 ,观察了三叉神经脊束间质核的 calbindin D-2 8k和FOS双重免疫反应阳性的神经元向孤束核的投射。向右侧孤束核内注射荧光金并向右侧上、下唇皮下注射福尔马林 ,发现荧光金逆标细胞和 FOS免疫反应阳性细胞主要分布于注射侧的三叉神经脊束间质核的背侧边缘旁核和三叉旁核 ;大量的 calbindinD-2 8k免疫阳性细胞分布于双侧三叉神经脊束间质核内。此处的大部分荧光金逆标细胞 (约 74.4% )呈 calbindin D-2 8k免疫反应阳性。在此二者的双重阳性细胞中 ,又有一部分 (约 41.0 % )为同时呈 FOS免疫反应阳性的三重阳性神经元。结果提示 ,三叉神经脊束间质核内接受面口部躯体伤害性信息的 calbindin D-2 8k神经元可直接投射至孤束核 ,calbindin D-2

大鼠三叉神经脊束间质核接受内脏和躯体伤害性信息的calbindin D-28k神经元向臂旁核的投射

应用荧光金 (FG)逆行束路追踪结合Fos和calbindinD 2 8k(CB)免疫荧光组织化学三重标记法 ,观察了大鼠三叉神经脊束间质核 (INV)接受口面部皮肤和上消化道伤害性信息的CB神经元向臂旁核 (PB)的投射。结果显示 ,口周刺激组FG逆标细胞和Fos免疫反应阳性细胞主要分布于注射和刺激同侧INV的背侧边缘旁核 (PaMd)和三叉旁核 (PaV) ;大量的CB免疫阳性细胞分布于双侧INV。同侧INV内FG逆标细胞中有 77 3 %呈CB免疫反应阳性 ,40 7%呈Fos免疫反应阳性。在FG和CB双标记的神经元中 ,又有一部分 (约 3 8 5 % )为FG/CB/Fos三标细胞。上消化道刺激组的FG逆标细胞、CB免疫阳性细胞和FG/CB双标细胞的数量和分布与口周刺激组相似 ,但Fos免疫阳性细胞分布于双侧的INV。在同侧INV ,FG/Fos双标细胞占FG逆标细胞总数的 41 9% ,FG/CB/Fos三标细胞占FG/CB双标细胞的 5 2 0 %。以上结果提示 ,INV直接投射到PB的CB神经元接受口面部皮肤和上消化道的伤害性信息 。

钙结合蛋白d28k基因在鸡子宫中表达变化的研究

[目的]研究鸡子宫中钙结合蛋白d28k基因的变化规律。[方法]采集不同产蛋阶段蛋鸡的子宫组织,利用RT-PCR方法检测钙结合蛋白d28k mRNA在子宫的表达情况。[结果]蛋进入子宫前2、1 h检测到钙结合蛋白d28k的表达,随着蛋壳的形成和钙化程度的加速,蛋进入子宫后5、15 h钙结合蛋白d28k的表达量逐渐增加,在蛋进入子宫后15 h达到最高水平,在产蛋后1、2 h没有检测到该基因的表达。[结论]钙结合蛋白d28k是影响蛋壳钙化的重要基因。

钙结合蛋白Calbindin-d28k在雌(女)性生殖中的作用

钙结合蛋白Calbindin-d28k(CaBP-d28k)是一种维生素D依赖性钙结合蛋白,参与了多种生殖事件。本文综述了CaBP-d28k的结构特点,在雌(女)性生殖系统的表达、作用及其调节。

抗Gly m Bd 28K单克隆抗体的制备及其免疫学特性

利用Gly m Bd 28K天然蛋白免疫BALB/c雌性小鼠,取小鼠脾脏细胞与杂交瘤细胞融合,筛选出2株能稳定分泌抗Gly m Bd 28K单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E3和2F4。体内诱生腹水法大量制备单克隆抗体,经纯化后,得到2株均为Ig G1型的单克隆抗体m Ab1E3和m Ab2F4。间接ELISA方法测得m Ab1E3的效价达到1∶4.10×10~5,对Gly m Bd 28K蛋白的半数抑制率(IC_(50))为23.99μg·L^(-1),与花生蛋白、核桃蛋白等的交叉反应率均低于0.1%。该单克隆抗体的制备为Gly m Bd 28K致敏蛋白的检测以及抗原表位的鉴定奠定了基础。

钙结合蛋白Calbindin-D28K在人健康和龋坏牙齿中免疫定位

目的 :探讨Calbindin -D2 8K(CaB)在牙髓损伤修复过程中的作用。方法 :用免疫组化ABC法观察CaB在健康和龋坏人恒牙牙髓中的表达 ,并用图像分析系统进行半定量分析。结果 :CaB在正常和龋病牙髓中成牙本质细胞、前期牙本质、血管内皮细胞及神经纤维中均有表达。在中龋和深龋组部分牙髓细胞CaB弱阳性表达。中龋组成牙本质细胞数目增多 ,胞浆、胞突及部分胞核强阳性。深龋组前期牙本质层变薄 ,成牙本质细胞空泡变性 ,见单层扁平的成牙本质样细胞 ,胞浆及核染色强阳性。成牙本质细胞浆中CaB含量在中、深龋组明显增加。血管内皮细胞中三组间CaB含量无显著性差异。结论

钙结合蛋白calbindin-D28k在人输卵管组织的表达(英文)

本研究旨在探讨育龄妇女输卵管中钙结合蛋白calbindin-D28k(CaBP-D28k)的表达和变化。33例月经规律、有正常生育史的育龄妇女,因子宫肌瘤、子宫腺肌症行子宫切除术(一并切除输卵管),输卵管取材均包括峡部、壶腹部和伞部,按月经周期分为增生早期组6例,增生中期组5例、增生晚期组5例,分泌早期组7例,分泌中期组5例和分泌晚期组5例。采用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应法检测CaBP-D28k在人输卵管组织中的表达。结果显示,人输卵管组织中存在CaBP-D28k蛋白及mRNA表达。CaBP-D28k蛋白表达于输卵管上皮细胞的胞浆中,在月经周期同一时期,输卵管峡部、壶腹部、伞部的表达无明显差别(P>0.05)。在月经周期中,CaBP-D28k蛋白表达在增生早、中期最低,而在增生晚期和分泌早期明显增高(P<0.05),分泌中、晚期显著下降(P<0.05)。CaBP-D28k蛋白阳性表达分布在月经周期中出现再分布,在增生早、中期呈灶状或片状弥散分布在胞浆中,增生晚期和分泌早、中期CaBP-D28k蛋白呈聚集的颗粒状集中在细胞顶部,至分泌晚期则仍呈灶状或弥散状分布;CaBP-D28kmRNA表达也随月经周期发生变化,在增生晚期和分泌早期明显增高(P<0.05)。结果表明,人输卵管组织中存在CaBP-D28k蛋白及mRNA表达,且具有周期性变化。

十钒酸盐K_6V_(10)O_(28)·9H_2O的合成与结构

本文报道了十钒酸盐Ｋ６Ｖ１０Ｏ２８·９Ｈ２Ｏ的合成及单晶结构分析结果。晶体属单斜晶系，Ｐ２１／ｎ群，ａ＝１．０５３１（８）ｎｍ，ｂ＝１．７４２３（５）ｎｍ，ｃ＝１．８３６（１）ｎｍ，β＝９３．２６（６）°，μ＝３４．２４ｃｍ－１，Ｚ＝４。结构由直接法解出，全矩阵最小二乘法修正至Ｒ＝０．０４８。十钒酸盐结构单元是由１０个ＶＯ６变形八面体构成的Ｖ１０Ｏ２８６－簇阴离子，簇阴离子间排列阳离子Ｋ＋和水分子。

Calbindin－D28k mRNA在大鼠三叉神经节和背根节初级传入神经元中的表达

用原位杂交组织化学技术，用同位素标记的寡核苷酸探针，对Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８ｋｍＲＮＡ在大鼠三叉神经节和背根节初级传入神经元中的表达进行了观察．结果发现：在大鼠三叉神经节中，约１６．１％的神经元为ＣａｌｂｉｎｄｉｎＤ２８ｋ阳性神经元，而在背根神经节中，阳性神经元占节细胞总数的２０．６％．这两个神经节中的阳性神经元主要集中在大型细胞（８．１％和１２．３％）及小型细胞（４．２％和６．８％）．从而提示Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８ｋ可作为上述两种神经细胞的标志物，在此类初级传入神经元的某些生理功能中可能有重要作用．

4E-BP1、p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中作用的实验研究

目的:探讨真核起始因子4E(eIF-4E)结合蛋白1(4E-BP1)、核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中的作用。方法:体外培养人胃癌MKN-28、N-87细胞,给予RAD001干预后通过细胞计数、流式细胞术、Western-blot检测肿瘤细胞生长、细胞周期分布及p70S6k、4E-BP1蛋白表达及磷酸化情况。结果:细胞计数结果显示RAD001作用于胃癌细胞株MKN-28,N-8724h即开始出现对细胞生长的抑制作用,随着作用时间延长至48、72h,抑制作用逐渐增强。流式细胞术结果显示RAD001作用24h后MKN-28、N-87细胞株细胞周期发生改变,停滞在G0～G1期细胞比例增加,在实验中显示细胞系N87对于RAD001作用相对敏感。Western-blot结果显示RAD001作用24h后MKN-28、N-87的4E-BP1和p70S6K表达下降,同时去磷酸化。结论:RAD001是通过抑制mTOR的活性,进而阻断4E-BP1及p70S6K的磷酸化和蛋白质翻译进而调节着细胞周期以发挥抑制胃癌细胞生长的作用。

钙结合蛋白Calbindin-D28K在人牙胚发育过程中的表达

目的 :研究人牙胚不同发育时期Calbindin -D2 8K(CaB)的表达 ,以期分析CaB在人牙体硬组织形成过程中的作用 ,为探明人牙齿矿化过程中经细胞钙转导机制提供实验依据。方法 :免疫组化ABC染色。结果 :人牙胚蕾、帽状期成釉器无CaB的表达 ;钟状早期成釉器的内釉细胞及部分牙乳头表面处于分化状态的细胞弱阳性染色 ;钟状晚期成釉器的成釉细胞、成牙本质细胞及部分胞核呈现强阳性染色。结论 :CaB参与了人釉质及牙本质的形成过程 ,并且在人牙胚发育过程中的CaB表达具有时间特异性及细胞特异性。

CaBP-D28k在蛋鸡生殖器官中的表达及其与蛋品质性状的关联分析

研究采用荧光定量PCR技术对Ca BP-D28k在蛋鸡生殖器官中的表达量进行分析,并利用SSCP技术寻找Ca BP-D28k的SNPs位点,继而与蛋品质性状进行关联分析。结果表明:1 Ca BP-D28k在各部位的表达情况为:输卵管子宫部>输卵管伞部>卵巢>输卵管膨大部>输卵管峡部。以卵巢为参照基准1,输卵管子宫部Ca BP-D28k表达量约为其73倍,差异极显著(P<0.01),输卵管峡部、膨大部与卵巢Ca BP-D28k表达量差异显著(P<0.05)。2 Ca BP-D28k第三外显子存在A5115G的突变位点,共检测到3种基因型(AA、AG和GG)。AG型蛋壳强度极显著高于AA和GG型(P<0.01),GG型哈氏单位与AA和AG型存在显著差异(P<0.05)。结果表明,Ca BP-D28k在蛋鸡生殖器官中有相对量的差异,并与蛋壳形成过程中钙离子的转运有密切联系;AG型为调控蛋壳强度和哈氏单位的优势基因型,研究结果为SNPs辅助选择育种提供了理论基础。

帕金森病小鼠相关脑区内钙结合蛋白D28kmRNA的表达

目的 研究钙结合蛋白 D2 8k(Ca BP)在帕金森病(PD)发病机制中的作用 .方法 将 1-甲基 - 4-苯基 - 1,2 ,3,6 -四氢吡啶 (MPTP)按 30 mg·kg- 1剂量腹腔注射给 C5 7BL 小鼠 ,建立 PD鼠模型 .用反转录 PCR及原位分子杂交方法检测 PD鼠和正常鼠脑内 Ca BP m RNA的表达变化 .结果 与正常鼠对比 ,Ca BP m RNA在 PD鼠的海马、纹状体、黑质等脑区的表达水平明显下调 .结论 Ca BP可能通过对特定脑区神经元的保护作用来抵御

CD3+CD28抗体组诱导CD3AK细胞对肿瘤细胞杀伤效果的实验观察

CD3AK细胞是用于恶性肿瘤过继性免疫治疗的效应细胞之一,一般情况下即使小剂量的CD3抗体在白细胞介素-2（IL-2）的协同下也可诱导出具有杀伤活性的CD3AK细胞[1]。T细胞介导的细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的主要机制,随着对抗原的识别和递呈、T细胞激活等免疫应答机制认识的不断深入,发现有效的抗肿瘤免疫反应必须在共刺激信号的参与下,将肿瘤抗原多肽递呈给T细胞而激发T细胞的免疫应答[2]。

鸡D28k钙结合蛋白cDNA的克隆与序列分析

根据已发表的鸡D28k钙结合蛋白(CaBP-D28k)基因序列设计合成1对引物,利用RT-PCR技术从新扬州鸡小肠组织RNA中扩增出鸡CaBP-D28kcDNA,并克隆至pGEM-T中,经PCR、Xho 和BamH 双酶切鉴定测序后,用DNAStar软件对克隆出的cDNA进行同源性分析。结果表明:新扬州鸡CaBP-D28k基因片断长为18.5kb,与Gen-Bank中的CaBP-D28k基因具有高度的同源性(99.2%),在开发阅读框内仅有一个碱基的差别,中间没有出现缺失和插入,证明所得到的是鸡CaBP-D28kcDNA。