高寒草甸圆穗蓼叶解剖结构与草酸钙含量对生境干旱化的响应

为揭示高寒草甸生境干旱化过程中侵入种圆穗蓼(Bistorta macrophylla)的生境适应能力,在滇西北白马雪山高寒草甸选择湿润、半湿润和干旱生境设置样方、采集实验材料。利用单因素方差分析、主成分分析等方法,分析叶片解剖结构和草酸钙含量与土壤水分之间的关系。结果表明:叶片栅栏组织紧密排列为2层,主脉中5~9个维管束呈环形排列,且木质部朝中心方向分布。叶片、上表皮及角质层、下表皮、栅栏组织与海绵组织、主脉与维管束、木质部与韧皮部等结构的厚度以及叶草酸钙含量在生境间差异显著(P<0.01),且干旱生境中数值最大,其中叶片草酸钙含量对植株耐旱能力贡献最大。下表皮角质层厚度、栅海比在生境间的差异不显著。圆穗蓼通过增加保水结构(表皮与角质层)厚度以减少水分蒸发,增加输水结构(维管束、木质部)厚度提高输水效率,增加草酸钙含量增强贮水能力。即采取增强保水和输水结构功能、提高解剖结构与草酸钙含量协同响应等策略抵御生境干旱化。

梯度流体剪应力下破骨前体细胞迁移与胞内钙分布的关联性

目的阐明局部梯度流体剪应力(fluid shear stress,FSS)是否会造成胞内Ca^(2+)浓度梯度的特异性分布,并最终决定细胞的迁移方向。方法利用COMSOL软件对流动腔内FSS分布进行数值模拟。建立FSS作用下破骨前体细胞RAW264.7胞内Ca^(2+)染色方法,并对细胞施加梯度FSS,定量分析胞内Ca^(2+)浓度分布和动态变化以及细胞迁移参数。结果破骨前体细胞更倾向于向低FSS区域迁移,且振荡流会调节细胞内Ca^(2+)沿细胞迁移方向分布,当阻断力敏感阳离子选择性通道、磷脂酶C、内质网钙信号通路和清除细胞外钙后,细胞向低FSS方向的迁移速度显著降低,但是沿液体流动方向的迁移速度显著增强。同时,细胞沿液体流动方向的Ca^(2+)分布显著升高。结论梯度FSS作用下,破骨前体细胞可以感受到这种梯度效应,且胞内Ca^(2+)沿迁移方向的特异性分布,最终导致破骨前体细胞向低FSS区域迁移。研究结果为最终阐明动态外力作用下骨组织重建的细胞和分子机制提供了较为重要的基础数据。

阿魏酸脂质体的制备及其体外抗氧化活性评价

采用醋酸钙梯度法制备阿魏酸脂质体,考察不同因素对包封率的影响。制备的脂质体包封率可达到(80.2±5.2)%,粒径约150 nm。空白脂质体和载药脂质体的zeta电位分别为(13.14±1.67)mV和(4.12±0.05)mV。冷冻蚀刻电镜观察结果为单室脂质体。建立了U937细胞株氧化损伤模型,采用MTT法、荧光显微镜及光学显微镜考察了细胞活度、线粒体膜电位及细胞的形态学变化,评价阿魏酸脂质体对U937细胞株氧化损伤的保护作用。结果表明,阿魏酸脂质体组体外抗氧化活性强于阿魏酸溶液。

醋酸钙梯度法制备阿魏酸脂质体的研究及体外评价

目的采用醋酸钙梯度法制备阿魏酸脂质体,考察其制备工艺及理化性质,进行体外释放度及稳定性评价。方法以包封率为指标,考察阿魏酸脂质体胆固醇含量、脂药比、孵育时间、孵育温度、钙离子浓度等因素对包封率的影响。评价其粒径、Zeta电位、体外释放、稳定性。采用冷冻蚀刻电镜观察其显微结构。结果磷脂-胆固醇比例为0.5,脂药比为26,钙离子浓度120 mol.L-1,孵育条件为37℃,30 min制备的脂质体包封率达80.2%,粒径152 nm。荷电脂质体粒径增加,Zeta电位升高。载药脂质体Zeta电位降低,粒径无变化。体外5 h释放80%。30 d内包封率及粒径均无显著变化。结论通过工艺和处方考察优选出最佳制备条件,制得的阿魏酸脂质体为单室结构,包封率高,稳定性好。

主动载药法制备双氯芬酸钠脂质体及其体外释放

目的:采用主动载药法制备双氯芬酸钠脂质体,考察包封率的影响因素,并对其体外释放进行评价。方法:利用醋酸钙梯度法制备双氯酚酸钠脂质体,考察不同因素对包封率的影响,并对药物体外释放行为进行研究。结果:脂质体包封率随温度和醋酸钙浓度的升高而增加、随药脂比的增大而降低。与混悬剂相比,其体外释放较完全。结论:醋酸钙梯度法适于制备双氯芬酸钠脂质体,后者的体外释放具有明显缓释特征。

双氯芬酸钠脂质体凝胶的制备及其药动学和刺激性评价

目的制备双氯芬酸钠(DS)脂质体凝胶,考察其肌注后家兔体内的血药浓度经-时过程及对肌肉的刺激性。方法醋酸钙梯度法制备DS脂质体,再以泊洛沙姆407为基质制成脂质体凝胶剂;家兔分别肌注DS溶液、DS凝胶、DS脂质体及DS脂质体凝胶后,HPLC检测血药浓度;并以血浆肌酸激酶(CPK)变化和给药部位的组织病理改变对肌肉刺激性进行评价。结果制得DS脂质体粒径为40.2nm,平均包封率为81.2%;与DS溶液剂相比,肌注DS凝胶、DS脂质体及DS脂质体凝胶后tmax推迟,ρmax降低,MRT,t1/2延长,AUC增加,其中肌注DS脂质体凝胶后的tmax,MRT,t1/2和AUC相应延长了11.76,3.86,3.02和1.40倍,而ρmax仅为溶液组的36.2%,且该制剂能显著降低DS肌注后所致的CPK活性升高和病理性损伤。结论脂质体凝胶制剂是DS肌注给药的优良载体。

醋酸钙梯度法制备维A酸脂质体

目的:评价醋酸钙梯度法制备维A酸脂质体的可行性,并与薄膜法、逆相蒸发法进行质量比较。方法:采用薄膜法、逆相蒸发法和醋酸钙梯度法分别制备维A酸脂质体,用G-50葡聚糖凝胶柱分离,以紫外分光光度法和纳米激光粒度仪分别测定维A酸脂质体的包封率和粒径,以电子显微镜观察维A酸脂质体的形态。结果:以醋酸钙梯度法制备的维A酸脂质体包封率最高,达90.48%;其外观圆整均匀,平均粒径为35.8nm,4℃放置3mo质量稳定。结论:采用醋酸钙梯度法制备维A酸脂质体包封率较高,方法可行。

醋酸钙梯度主动载药法制备芦丁纳米脂质体

目的:采用主动载药法制备芦丁纳米脂质体,提高包封率,增加药物在体外的释放。方法:利用醋酸钙梯度造成主动载药的驱动力,HPLC测定芦丁含量,离心超滤法测定脂质体包封率,激光粒度仪测定粒径分布和电位,考察单因素对包封率及粒径的影响,并进一步研究芦丁纳米脂质体在4℃的稳定性和体外释放。结果:空白脂质体10倍体积的30 g/L蔗糖、透析3次可高效建立醋酸钙梯度,20 g/L PVP作为溶解介质可有效增加芦丁的包封率和稳定性,在最佳制备工艺条件(磷脂浓度40 g/L、磷脂∶胆固醇质量比为5∶1、药脂质量比1∶30、50℃孵育15 min,包封率达80.3%)下成品脂质体平均粒径为185 nm,电位-1.2 m V,28 d稳定性良好,体外释放较完全。结论:醋酸钙梯度主动载药法可制备高包封率、释药较完全的芦丁纳米脂质体。

温梯法生长CaF_2晶体中包裹物的研究

本文对温度梯度法生长的氟化钙(CaF2)晶体中的包裹物进行了研究,用光学显微镜和SEM观察了包裹物的形貌,对晶体中的包裹物和透明部分作了微区EDX成分分析,对包裹物所含的杂质进行了解释,提出了减小或消除包裹物的措施。分析结果表明:包裹物的主要成分是碳和氧,碳来源于石墨坩埚和石墨发热体,而杂质氧则来源于原料中的含氧化合物和生长过程气氛中氧的进入。

γ-氨基丁酸脂质体制备工艺的研究

采用醋酸钙梯度法制备γ-氨基丁酸脂质体,利用Berthelot分光光度法来检测γ-氨基丁酸(GABA)含量,通过正交实验确定优化的制备工艺条件为:药脂比为1∶20,卵磷脂与胆固醇的质量比为4∶1,醋酸钙浓度为0.12mol/L,孵育温度为50℃。所制备的脂质体平均包封率为91.4%。

CaF_2晶体的生长与光学性能

采用导向温度梯度法(TGT)生长CaF2晶体,建立了生长炉内的垂直温度梯度场。研究表明影响晶体质量及光学性能的主要因素包括坩埚材料、温度场、生长程序及原料纯度等。从大量的实验中总结出TGT法生长高质量CaF2晶体的生长条件如下:石墨坩埚;轴向梯度≤2℃/mm;生长降温速率1.5～2.5℃/h;冷却速率≤40℃/h。

流动注射pH梯度技术－分光光度法同时测定钙镁的研究

本文以偶氮氯膦Ⅲ为显色剂，利用流动注射ｐＨ梯度技术测定ｐＨ直约为２和７处配合物的吸光度。由前看测定钙，后者测定钙镁的总量，建立了同时测定钙、镁的流动注射分析法。对不同比例的钙、镁合成样品（ｃａ∶Ｍｇ＝１∶１０～１０∶１），测定的回收率在９４％～１０５％之间。应用于自来水中钙、镁的同时测定，结果与ＡＡＳ法一致。

采用改进的温梯法生长氟化钙晶体

对现有的晶体生长温梯法进行改进,将炉内温场分为坩埚底部温度高于坩埚顶部温度的化料区和坩埚底部温度低于坩埚顶部温度的温梯生长区两部分。通过对坩埚相对于温场位置的控制,获得适宜进行熔体均一化和晶体生长条件。生长了尺寸为φ135mm×150mm氟化钙(CaF2)晶体,生长的CaF2晶体质量较好,位错密度<330/mm2,从190nm到9000nm透过良好,紫外200nm处和红外9μm处透过率可达80%以上。

温度梯度法生长氟化钙晶体

用温度梯度法成功生长了直径75mm、完整、透明的氟化钙晶体,对晶体进行了TG-DTA测试分析,确定了其熔点为1413.5℃,并测试了晶体从190nm的紫外波段到40000nm的红外波段的透过率,发现从中紫外波段到红外波段氟化钙晶体的透过率已经能满足各种应用的要求,但在远紫外波段和真空紫外波段(246nm以下)氟化钙晶体的透过率需要进一步提高。

氢氧化钙根管消毒效果的PCR-DGGE初步研究

目的探讨氢氧化钙根管内封药对慢性根尖周炎根管内细菌的作用。方法采集5例慢性根尖周炎患者感染根管3个阶段的细菌样本,分别为治疗前、氢氧化钙封药2周、取出氢氧化钙封入无菌干棉球2周。采用PCR-DGGE技术检测根管内细菌变化,并对其中3例进行克隆测序分析。结果 5例样本共检测出41条谱带,其中治疗前均有条带,条带数3～7条,平均为5.4条;氢氧化钙封药2周均无条带;取出氢氧化钙封入无菌干棉球2周,3例有条带,条带数为4～7条,平均为5.1条;另2例5条带。将33条带进行纯化、克隆、测序分析,平均每条带含2.2种细菌;共得到30种不同菌属,分别属于不同菌门,12种属于厚壁菌门(占40%),其他细菌属于拟杆菌门(5种,16.7%),放线菌门(4种,13.3%),变形菌门(3种,10%),脱铁菌门(2种,6.67%)梭杆菌门(1种),螺旋体门(1种),2种未知菌属。其中包含9种未培养出的细菌。结论氢氧化钙作为感染根管消毒药物,能使细菌量急剧减少,但不能杀灭所有细菌,若根管不能及时封闭,残留细菌仍可能会继续增殖。

阴极旋转电沉积生物陶瓷涂层的工艺研究

采用一种电化学沉积磷酸钙生物陶瓷涂层的新方法———阴极旋转电沉积工艺。通过测定涂层的XRD、界面结合强度、SEM观察表面与断面,研究了工艺的沉积特性及机理。在该工艺中,作为金属基体的阴极始终处于旋转状态,制备出比普通电沉积工艺更致密、均匀、尺寸更小的磷酸钙生物活性涂层,通过控制旋转速度制备出内部致密、外部多孔的梯度涂层,经后处理转化为羟基磷灰石涂层。通过控制旋转速度获得的梯度涂层,界面结合强度优于普通电沉积生物涂层。模拟体液浸泡后,在涂层表面先析出纳米粒子,之后成长为针状、网状,最后连接成一层。阴级旋转电沉积生物陶瓷梯度涂层具有较高的抗溶解性和生物活性。

盐酸法舒地尔脂质体的制备

目的:制备盐酸法舒地尔脂质体,探讨制备盐酸法舒地尔脂质体的最优处方及最佳制备工艺。方法:采用醋酸钙梯度法制备盐酸法舒地尔脂质体。以包封率为考察指标,在单因素实验基础上,通过正交试验优化最优处方及最佳制备工艺,采用紫外分光光度法对盐酸法舒地尔脂质体包封率进行测定。结果:最终确定制备盐酸法舒地尔脂质体的最优处方及最佳制备工艺为药脂比1:20、孵育时间1.5h、醋酸钙浓度100mmol/L、孵育温度45℃,所制备的盐酸法舒地尔脂质体包封率达80.94%。结论:醋酸钙梯度法制备盐酸法舒地尔脂质体方法可行,所制得载药脂质体包封率达到制剂学要求,且重现性好。

钛合金表面高频感应热梯度新方法制备生物活性钙磷涂层探索

探索了一种新的生物活性钙磷陶瓷制备工艺,即将导电基体置于钙磷溶液中,通过高频感应的方式加热钛合金基体,同时通过设计相应的装置使钛合金附近区域形成温度梯度。这一温度梯度由钛合金基体表面向外逐渐降低,使基体表面形成了有利于钙磷沉积的热力学条件,从而使钙磷生物陶瓷能够在基体表面生长并形成涂层。初步研究结果证实,该工艺可在钛合金上制备出生物活性五水磷酸八钙涂层。

高效液相梯度洗脱法测定阿托伐他汀钙片有关物质

目的建立测定阿托伐他汀钙片有关物质的高效液相色谱法。方法采用梯度洗脱方法,色谱柱为Apollo C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以流动相A醋酸铵缓冲液[称取醋酸铵1.54 g,置1 000 mL水中,用冰醋酸调节pH至(4.50±0.05)]-乙腈(70∶30),流动相B乙腈进行梯度洗脱,流速:1.1 mL·min-1,检测波长:244 nm,柱温:40℃,进样量:20μL。对照杂质对照品对照法和不加校正因子的主成分自身对照法检查。结果阿托伐他汀主峰与各杂质峰均能良好分离。杂质A、B、C、D、H和I分别在0.190 4～9.519 8,0.203 2～10.160 0,0.191 2～9.560 0,0.208 0～10.400 0,0.198 8～9.940 0,0.205 2～10.260 0μg.mL-1范围内具有良好的线性关系。平均回收率分别为100.24%,99.73%,94.47%,92.17%,103.76%,101.23%。结论该方法快速,结果准确可靠,可用于阿托伐他汀钙片的有关物质检查。

海藻酸钙微胶珠的载药性能优化

利用高压静电法制备了海藻酸钙微胶珠,以牛血红蛋白作为模型药物,考察了牛血红蛋白(Hb)的稳定性、制备条件对微胶珠载药的影响。结果表明:Hb在10℃下能稳定存在,1.8%(w/v)Na-Alg与4.5%(w/v)CaCl2制备的微胶珠载药量较大,真空干燥的微胶珠彼此粘连破坏严重,冷冻干燥则表面出现明显的内陷,乙醇梯度洗脱-真空干燥球形度较好。水凝胶态的微胶珠载药后球形度完好,是理想的载药方式,24h时载药量达28.4%,为干燥后的2～3倍。