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大鼠钙结合蛋白S100A9基因克隆、表达及纯化研究
被引量:
1
1
作者
尹磊淼
宋凯
+4 位作者
张庆华
魏颖
王宇
徐玉东
杨永清
《中国医药生物技术》
CSCD
2010年第6期405-409,共5页
目的构建大鼠钙结合蛋白S100A9的原核表达质粒并获得纯化重组蛋白。方法根据大鼠S100A9基因mRNA序列,设计PCR引物,常规扩增后重组连入原核表达载体pET32a,并进行序列测定。利用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)和不同温度诱导表达,聚丙...
目的构建大鼠钙结合蛋白S100A9的原核表达质粒并获得纯化重组蛋白。方法根据大鼠S100A9基因mRNA序列,设计PCR引物,常规扩增后重组连入原核表达载体pET32a,并进行序列测定。利用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)和不同温度诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定结果,并亲和层析纯化重组蛋白。结果 PCR扩增获得的条带与预期的DNA表达片段大小一致,克隆构建了pET-32a-S100A9原核表达载体,测序结果与预期完全一致,经亲和层析纯化获得毫克级纯化重组蛋白,并发现该蛋白在21℃有比较强的表达。结论为进一步探讨S100A9蛋白生物学功能奠定基础。
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关键词
钙结合蛋白质类
遗传载体
基因表达
自身免疫性疾病
下载PDF
职称材料
题名
大鼠钙结合蛋白S100A9基因克隆、表达及纯化研究
被引量:
1
1
作者
尹磊淼
宋凯
张庆华
魏颖
王宇
徐玉东
杨永清
机构
上海中医药大学上海市针灸经络研究所
生物芯片上海国家工程研究中心
出处
《中国医药生物技术》
CSCD
2010年第6期405-409,共5页
基金
国家自然科学基金(81001548
30873299
+4 种基金
30701123)
上海市教委和上海市教育发展基金会"晨光计划"资助项目(10CG45)
上海市卫生局青年基金(2009Y096)
上海高校优秀青年教师科研基金(szy09022)
上海市重点学科建设项目(S30304)
文摘
目的构建大鼠钙结合蛋白S100A9的原核表达质粒并获得纯化重组蛋白。方法根据大鼠S100A9基因mRNA序列,设计PCR引物,常规扩增后重组连入原核表达载体pET32a,并进行序列测定。利用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)和不同温度诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定结果,并亲和层析纯化重组蛋白。结果 PCR扩增获得的条带与预期的DNA表达片段大小一致,克隆构建了pET-32a-S100A9原核表达载体,测序结果与预期完全一致,经亲和层析纯化获得毫克级纯化重组蛋白,并发现该蛋白在21℃有比较强的表达。结论为进一步探讨S100A9蛋白生物学功能奠定基础。
关键词
钙结合蛋白质类
遗传载体
基因表达
自身免疫性疾病
Keywords
calcium-binding proteins genetic vectors protein expression autommune disease
分类号
R341 [医药卫生—基础医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大鼠钙结合蛋白S100A9基因克隆、表达及纯化研究
尹磊淼
宋凯
张庆华
魏颖
王宇
徐玉东
杨永清
《中国医药生物技术》
CSCD
2010
1
下载PDF
职称材料
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