TACI融合蛋白对免疫球蛋白A肾病大鼠肾脏损害的影响

目的探讨TACI融合蛋白(TACI-Ig)对免疫球蛋白A肾病(IgAN)大鼠肾脏损害的影响。方法将24只SD大鼠随机分为对照组、模型组、TACI-Ig组、药物对照组,每组6只。正常对照组、模型组给予生理盐水,TACI-Ig组给予TACI-Ig(14.36 mg/kg),药物对照组给予醋酸泼尼松(5 mg/kg)。比较各组24 h尿蛋白定量(24h-UP)、血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、低半乳糖基化IgA1(Gd-IgA1)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子κB(NF-κB)蛋白及mRNA水平,并分析TACI-Ig对肾脏损害的影响。结果模型组24h-UP水平显著高于正常对照组,而TACI-Ig组、药物对照组24h-UP水平显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。TACI-Ig组血清Scr水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。TACI-Ig组、药物对照组肾组织系膜区沉积免疫复合体的增加受到明显抑制。模型组大鼠血清Gd-IgA1水平高于正常对照组,而低于TACI-Ig组,差异有统计学意义(P<0.01)。药物对照组血清Gd-IgA1水平低于模型组,而高于TACI-Ig组,差异有统计学意义(P<0.01)。TACI-Ig组TLR4、MyD88、NF-κB蛋白水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。药物对照组TLR4、MyD88蛋白水平高于TACI-Ig组,差异有统计学意义(P<0.05)。TACI-Ig组TLR4、MyD88、NF-κB mRNA水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TACI-Ig对IgAN有较好的治疗作用,可改善IgAN大鼠肾功能,抑制肾小球系膜基质扩张和系膜细胞增殖。

达格列净对射血分数降低的心力衰竭患者的效果观察

目的探讨达格列净对射血分数降低的心力衰竭(HFrEF)患者CXC趋化因子配体16(CXCL16)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及亲环素A(CypA)水平的影响。方法将156例HFrEF患者按照干预治疗方案的不同分为干预组和对照组,每组78例。对照组采用常规标准化药物干预治疗,干预组在对照组基础上加用达格列净治疗。比较2组总有效率;比较2组治疗前后CXCL16、SDF-1、CypA水平的变化;采用Spearman相关系数分析CXCL16、SDF-1、CypA与临床疗效的相关性;比较2组治疗前后N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;比较2组治疗前后心室重塑指标[左室舒张末期内径(LVEDd)、左室收缩末期内径(LVESd)、左心室射血分数(LVEF)]的变化;采用Pearson相关系数分析CXCL16、SDF-1、CypA与心室重塑指标的相关性。结果干预组总有效率为89.74%,高于对照组的73.08%,差异有统计学意义(P<0.05)。2组治疗后CXCL16、CypA水平较治疗前降低,SDF-1水平较治疗前升高,且干预组治疗后CXCL16、CypA水平低于对照组,SDF-1水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关系数分析显示,CXCL16、CypA水平与临床疗效呈显著正相关(P<0.05),SDF-1水平与临床疗效呈显著负相关(P<0.05)。2组治疗后NT-proBNP、hs-CRP、cTnI、TNF-α水平较治疗前降低,且干预组治疗后各指标水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2组治疗后LVEDd、LVESd均较治疗前降低,LVEF较治疗前升高,且干预组治疗后LVEDd低于对照组,LVEF高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关系数分析显示,CXCL16、SDF-1、CypA与LVEF、LVEDd均有显著相关性(P<0.05)。结论达格列净治疗HFrEF患者的疗效较好,可改善CXCL16、SDF-1、CypA及心室重塑指标的水平,提高患者生存质量。

钙离子信号调节亲环素配体研究进展

钙离子信号调节亲环素配体(CAML)作为亲环素B的结合蛋白于1994年被首次发现,尽管其具体作用机制目前还不十分清楚,但许多研究已证实其在T细胞受体及钙离子信号转导、细胞凋亡、免疫调节以及病毒感染等方面具有重要作用.目前已经报道与其相互作用的蛋白主要有:跨膜激活剂及钙调亲环素配体相互作用分子(transmembrane activator and CAML interactor,TACI)、EGF受体,血管紧张素ⅡⅠ型受体相关蛋白(AT1 receptor-associated protein,ATRAP)、人立早基因(immediate early geneX-1,IEX-1)、淋巴细胞特异蛋白质酪氨酸激酶(p56Lck)、常染色体隐性遗传性多囊肾疾病的相关基因PKHD1编码的蛋白fibrocystin,以及霍普金氏肉瘤相关疱疹病毒K7蛋白(KSHV)等.本文就CAML相关研究进展作简要综述.

OX40-OX40L轴对动脉粥样硬化小鼠淋巴细胞活性氧和亲环素A表达的调控作用

目的探讨OX40-OX40L相互作用对C57BL/6J小鼠活性氧(ROS)水平及亲环素A(CyPA)表达的影响。方法采用C57BL/6J小鼠颈动脉硅胶圈置入法快速建立动脉粥样硬化斑块模型,免疫组织化学法检测颈动脉粥样硬化(As)斑块内CyPA的表达;小鼠淋巴细胞表达CyPA采用Western Blot检测;采用流式细胞术检测CD4、OX40及细胞内ROS水平。结果 C57BL/6J小鼠形成As斑块后,淋巴细胞表达OX40较非As小鼠明显增加,同时发现As小鼠淋巴细胞内ROS水平和CyPA表达水平显著增加;体外应用anti-OX40特异性刺激OX40-OX40L轴后,淋巴细胞表达OX40及ROS水平显著上调,anti-OX40L特异性阻断OX40-OX40L后,淋巴细胞OX40表达减少,细胞分泌ROS水平较刺激组降低(P<0.05);体外培养淋巴细胞6 h,刺激组分泌的CyPA水平明显高于抑制组(P<0.001)。结论 OX40-OX40L相互作用能调控动脉粥样硬化小鼠活性氧水平及亲环素A表达。

钙离子调节亲环素配体及其不同剪接体的克隆及生物信息学分析

目的:克隆钙离子调节亲环素配体(CAML)及其不同剪接体,并应用生物信息学进行分析。方法:以Jurkat、HepG2细胞提取的cDNA为模板,PCR扩增CAML基因,选用pGEM-T-easy载体进行TA克隆,利用VectorNTI9.0软件与CAML基因所在染色体进行比对分析,并对CAML全长基因进行生物信息学分析。结果:CAML基因克隆成功,并证实CAML基因在细胞中存在3种剪接体,分别为缺失全长CAML cDNA序列中634~698、173~633和173~698 bp的CAML序列,大小分别为825、429和363 bp。这些剪接体的组成中均包含了CAML与其他蛋白相互结合的亲水的N末端,以及CAML发挥调节钙离子内流作用所必需的第2、3跨膜结构域,说明这些剪接体均具有发挥CAML基本功能的可能。结论:成功克隆了CAML基因,并首次证实CAML基因在细胞中存在不同剪接体。

胃癌组织中增殖诱导配体及受体mRNAs表达的病理意义

目的:研究增殖诱导配体(APRIL)及其受体B细胞成熟抗原(BCMA)和穿膜蛋白活化物(TACI)mRNA在胃癌组织中的表达,探讨其临床病理意义。方法:收集30例胃癌及相应癌旁正常胃组织,应用RT-PCR检测APRIL及其受体mRNA在胃癌及癌旁胃组织中的表达。结果:胃癌组织APRILmRNA阳性率(26/30,86.7%)明显高于癌旁胃正常组织(12/30,40.0%)(P<0.01),在肠型胃癌中的表达高于弥漫型(P<0.05),与年龄、性别、病灶大小、临床病理分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移等因素无关。而APRIL受体mRNA在胃癌和癌旁胃组织中表达无差异,且与年龄、性别、病灶大小、临床病理分型和分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移等因素无关。结论:APRILmRNA异常表达与肠型胃癌的发生有关,检测其表达水平有助于胃癌的早期诊断。

跨膜激活剂及钙调亲环素配体相互作用分子对系统性红斑狼疮作用的研究进展

跨膜激活剂及钙调亲环素配体相互作用分子(TACI)对B淋巴细胞的稳态和自身免疫起负调控作用。敲除TACI基因的小鼠出现狼疮样自身免疫性疾病,同时TACI-Fc可影响B细胞的增生和存活,抑制抗体的产生,现已作为一种生物制剂用于治疗SLE,所以对TACI的研究及其在临床上的应用越来越受关注。本文就目前对TACI生物学作用及其应用于SLE的治疗研究进行综述。

OX40-OX40L相互作用对小鼠平滑肌细胞亲环素A表达的影响

目的观察OX40-OX40配体(OX40L)相互作用对小鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)亲环素A(CyPA)表达的影响。方法小鼠VSMC采用组织块贴壁法原代培养;应用实时荧光定量PCR和流式细胞术检测OX40L mRNA和蛋白表达水平;细胞内、外CyPA水平分别采用实时荧光定量PCR及Western blot方法检测。结果肿瘤坏死因子α+脂多糖联合处理小鼠VSMC,细胞OX40L mRNA和蛋白表达呈时间依赖性,mRNA表达在24 h(5.967±0.252比1.000±0.000,P<0.05)达到高峰,蛋白表达在36 h(61.900±2.551比20.967±0.451,P<0.05)增加最显著;可溶性OX40处理VSMC后,CyPA mRNA表达呈时间依赖性并在90 min达到高峰(1.799±0.098比1.000±0.000,P<0.05),2 h后细胞培养上清中可检测到高水平的CyPA(1.119±0.059比0.281±0.038,P<0.05),而细胞内CyPA表达较对照组无明显差异;抗OX40L预处理细胞可显著抑制可溶性OX40诱导的CyPA mRNA(1.105±0.091比1.799±0.098,P<0.05)及蛋白(0.635±0.040比1.119±0.059,P<0.05)表达。结论 OX40-OX40L相互作用可影响VSMC CyPA的分泌。

心力衰竭炎症标志物研究进展

心力衰竭涉及了多种病理生理学的相互作用机制,包括炎症、神经激素系统的激活、氧化应激以及核转录因子-κB系统等。近年来,随着对心力衰竭的发病机制不断深入研究,发现一些新型的心力衰竭炎症标志物,如趋化因子配体-16、基质细胞衍生因子-1、稳态性趋化因子21、亲环素A及高迁移率族蛋白B1与心力衰竭密切相关,并对心力衰竭的诊断、预测以及预后具有重要临床价值,现将围绕上述炎症标志物研究进展做一综述。

亲环素配体研究进展

综述近年来亲环素配体在构效关系研究、合成及应用方面的进展,展望了今后的研究动向。亲环素是一类具有肽基脯氨酸顺反异构酶活性的免疫亲和素,广泛分布于各种组织细胞内。它参与脯氨酸肽键的顺反异构化、线粒体膜通透性转变、细胞内及细胞间信号传导等多种生理活动。亲环素配体是与亲环素有一定结合能力的化合物。目前研究的亲环素配体主要是具有免疫抑制或细胞保护作用的抑制剂。

丙型肝炎病毒非结构蛋白4A与钙离子信号调节亲环素配体的相互作用

目的应用酵母双杂交技术及免疫共沉淀技术证实HCV非结构蛋白4A(HCV NS4A)与钙离子信号调节亲环素配体(CAML)的相互作用。方法对CAML编码基因进行克隆,并构建其酵母表达载体.在酵母细胞中与HCV NS4A进行回交验证后,构建HCV NS4A及CAML真核表达载体,转染293细胞,行免疫共沉淀实验及Western印迹检测。结果成功克隆CAML基因,并构建CAML的酵母表达载体,在酵母细胞中回交验证HCV NS4A与CAML的相互作用,构建HCV NS4A及CAML的真核细胞表达载体,并利用免疫共沉淀技术验证了两者的相互作用。结论CAML与HCV NS4A的相互作用可能对HCV感染细胞的钙离子浓度、细胞凋亡等生物过程产生影响,从而在HCV感染慢性化过程中发挥作用。

HCV NS4A与钙离子信号调节亲环素配体相互作用位点的确定

目的明确丙型肝炎病毒非结构蛋白4A(HCVNS4A)与钙离子信号调节亲环素配体(CAML)相互结合的具体位点。方法构建CAML不同剪接体及缺失突变体的酵母表达载体,转化入酵母Y187菌株,分别与转化了HCVNS4A的酵母AH109菌株进行配合,在含X-α-gal的酵母四缺培养基上培养观察。结果转化了CAML不同剪接体及CAML缺失突变体pGADT7/CAML-1-211,pGADT7/CAML-1-57的酵母Y187菌株与转化了HCVNS4A的酵母AH109菌株配合后在四缺培养基上均有菌落生长,并且菌落呈现蓝色。转化了CAML缺失突变体pGADT7/CAML-58-211,pGADT7/CAML-234-296的酵母Y187菌株与转化了HCVNS4A的酵母AH109菌株配合后在四缺培养基上未见菌落生长。结论HCVNS4A与CAML的相互结合位点位于CAML的N-末端1～57位氨基酸残基,CAML不同剪接体与HCVNS4A均可以相互结合。

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞增殖诱导配体及其受体的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）中增殖诱导配体（APRIL）及其受体B细胞成熟抗原（BCMA）、跨膜激活剂及钙调亲环素配体相互作用分子（TACI）mRNA的表达和意义。方法 应用实时定量聚合酶链反应（real—time PCR）技术，检测66例SLE患者及25名正常人PBMC中APRIL及其受体mRNA的表达，采用2-AACT对目标基因的表达量进行评估。结果 SLE活动组和缓解组的APRIL mRNA、BCMA mRNA和TACI mRNA的表达水平均明显高于正常对照组（均P〈0．01）；且SLE活动组的APRILmRNA和TACImRNA的表达水平显著高于SLE缓解组（分别P〈0．01，P〈0．05），BCMA mRNA的表达在SLE活动组与缓解组之间比较差异无统计学意义；此外，APRILmRNA和TACImRNA在SLE肾损组的表达显著高于非肾损组（均P〈0．01）。结论 SLE患者PBMC中APRIL及其受体的表达水平增高，可能在SLE发病机制中发挥重要作用。

B淋巴细胞活化因子抗体在自身免疫性疾病治疗中的研究进展

近几十年来,自身免疫性疾病的治疗已从使用激素和常规免疫抑制药物转向使用生物制剂。B淋巴细胞的增殖及成熟对自身免疫性疾病的发病起到至关重要的作用。其中,肿瘤坏死因子超家族B淋巴细胞活化因子(B cell activating factor,BAFF)及其受体通过调控信号通路介导B淋巴细胞存活,因此BAFF及其受体是自身免疫性疾病的重要治疗靶点。文中阐述了BAFF及其受体在人体免疫系统中的作用机制,同时介绍了BAFF通路的过度活化如何促进系统性红斑狼疮、干燥综合征和类风湿关节炎等自身免疫疾病发展的最新观点。针对以上3种疾病,文中以3种主要的靶向BAFF抗体药物Belimumab、Tabalumab和Atacicept为例,介绍和讨论了其最新的临床试验及临床应用现状。最后提出靶向BAFF通路开发新型治疗自身免疫性疾病的方案和策略。