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Calcofluor White M2R荧光染色法识别家蚕微孢子虫 被引量:14
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作者 刘吉平 曾玲 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1185-1186,共2页
本研究探讨应用荧光染色试剂Calcofluor White M2R染色鉴别家蚕微孢子虫Nosema bombycis。结果表明:在荧光显微镜下可见家蚕微孢子虫孢子被染上强烈的青蓝色荧光,而寄主组织碎片、病毒、细菌等不被染色。该法是一种快速有效鉴别微孢子... 本研究探讨应用荧光染色试剂Calcofluor White M2R染色鉴别家蚕微孢子虫Nosema bombycis。结果表明:在荧光显微镜下可见家蚕微孢子虫孢子被染上强烈的青蓝色荧光,而寄主组织碎片、病毒、细菌等不被染色。该法是一种快速有效鉴别微孢子虫的方法。 展开更多
关键词 家蚕微孢子虫 calcofluor white M2R 荧光染色 识别技术
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焚光染色剂Calcofluor White在活检组织中真菌染色的应用 被引量:25
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作者 杨通 何炼图 +1 位作者 陈涛 谭亚夏 《分子诊断与治疗杂志》 2014年第5期307-311,共5页
目的探讨Calcofluor White(CFW)荧光染色法对病理活检组织中真菌的检测价值。方法采用荧光增白剂CFW作为染色液,对确诊为真菌感染的21例病理活检组织中的真菌进行检测,并以经典的六胺银及PAS染色法为对照。结果荧光镜下,真菌被染成亮蓝... 目的探讨Calcofluor White(CFW)荧光染色法对病理活检组织中真菌的检测价值。方法采用荧光增白剂CFW作为染色液,对确诊为真菌感染的21例病理活检组织中的真菌进行检测,并以经典的六胺银及PAS染色法为对照。结果荧光镜下,真菌被染成亮蓝色,与六胺银及PAS染色符合率达100%。结论 CFW荧光染色法可有效检测出组织中的真菌,值得在真菌病理活检的诊断中推广使用。 展开更多
关键词 活检 真菌 荧光染色 calcofluor white
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Calcofluor White M2R与Sytox Green双重染色法鉴别蜜蜂微孢子虫 被引量:8
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作者 秦浩然 李继莲 +1 位作者 和绍禹 吴杰 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1392-1396,共5页
东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)是一种广泛寄生于东方蜜蜂Apis cerana,西方蜜蜂Apis mellifera和熊蜂Bombus Latreille上的寄生虫,对蜜蜂和熊蜂的危害较大,进而影响养蜂业的发展。本实验采用荧光染色试剂Calcofluor White M2R与核酸... 东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)是一种广泛寄生于东方蜜蜂Apis cerana,西方蜜蜂Apis mellifera和熊蜂Bombus Latreille上的寄生虫,对蜜蜂和熊蜂的危害较大,进而影响养蜂业的发展。本实验采用荧光染色试剂Calcofluor White M2R与核酸染料Sytox Green双重染法来鉴别蜜蜂或熊蜂体内的N.ceranae及孢子的存活状态。结果得出,在荧光显微镜下可见死孢子被染上黄绿色荧光,活的呈现蓝白色荧光,而寄主细胞、细菌、病毒等不被染色。这是一种快速有效鉴别N.ceranae及其死活的方法,从而判定蜜蜂或熊蜂体内的微孢子虫在是否具有侵染活性,对微孢子虫的研究及药物防治具有重要作用。 展开更多
关键词 东方蜜蜂微孢子虫 荧光染色 calcofluor white M2R Sytox Green
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Genome-Wide Profiling Identifies Saccharomyces Cerevisiae Response in PKC-SLT2 Signaling and Glycogen Metabolic Pathways to Antifungal Compound Calcofluor White
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作者 周娟 胡传圣 +3 位作者 李晓林 程酩 郭妍 邵志峰 《Journal of Shanghai Jiaotong university(Science)》 EI 2014年第5期574-579,共6页
Fungal infection remains a major problem worldwide, yet treatment options are limited owing to the lack of effective drugs, the significant toxicity of available compounds, and the emergence of drug resistance. The lo... Fungal infection remains a major problem worldwide, yet treatment options are limited owing to the lack of effective drugs, the significant toxicity of available compounds, and the emergence of drug resistance. The low toxicity of calcofluor white(CFW) is an attractive antifungal compound for its known inhibitive effects on trichophyton rubrum and candida albicans growth. However, the efficacy of CFW is limited in most cases. In order to search for effective means to improve its efficacy, using saccharomyces cerevisiae as a model, we have used microarrays to examine the cell's response when treated with CFW on the genome scale. We found that both the PKC-SLT2(i.e, protein kinase C-mitogen activated protein kinase) and the glycogen metabolic pathways are activated upon CFW treatment. These results suggest that the key components in these pathways could be targeted by other drugs to counter the cell's compensative response, thus to further substantiate the inhibitive effect of CFW on fungal growth, which may lead to treatment regimens with improved efficacy of this compound in clinical applications. 展开更多
关键词 saccharomyces cerevisiae ANTIFUNGAL calcofluor white gene expression signaling pathway
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Primary study on Nosema bombycis Infecting the Insect of Drosophila 被引量:3
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作者 张小燕 蔡红英 +2 位作者 周兴建 肖宇 黄蕾 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2009年第4期164-166,共3页
[ Objective ] The aim of this study was to investigate the infectivity of Nosema bombycis to drosophila, which offered a new vision for systematical studies on the infection mechanism of Nosema bombycis, and also prov... [ Objective ] The aim of this study was to investigate the infectivity of Nosema bombycis to drosophila, which offered a new vision for systematical studies on the infection mechanism of Nosema bombycis, and also provided reference for the bio-control effect of Nosema bombycis. [ Method ] Nosema bombycis was used to feed wild type and mutant drosophila, and the morphological observation of Nosema bombycis in drosophila body fluid was also analyzed by calcofluor white M2R fluorescent staining. [ Result] Nosema bombycis could infect drosophila, and the number of Nosema bombycis in the infected mutant drosophila was higher than that in wild type drosophila. [ Conclusion ] Nosema bombycis can infect drosophila, which provides primary reference for studies on the infectivity of Nosema bombycis to other hosts and also lays a foundation for further study on the infection mechanism of Nosema bombycis. 展开更多
关键词 Nosema bombycis DROSOPHILA INFECTION calcofluor white M2R staining
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KOH湿片镜检法与CFW荧光染色法诊断真菌性角膜炎的效果比较 被引量:12
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作者 张伟宏 王丽娅 +2 位作者 韩雷 孙声桃 吴细丕 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2010年第2期193-195,共3页
目的:探求早期、快速和准确诊断真菌性角膜炎的实验室方法。方法:对58例真菌培养阳性的真菌性角膜炎患者的角膜刮片进行涂片镜检,同一涂片先行KOH湿片镜检,然后行Calcofluor White(CFW)荧光染色镜检。以真菌培养阳性为诊断真菌性角膜炎... 目的:探求早期、快速和准确诊断真菌性角膜炎的实验室方法。方法:对58例真菌培养阳性的真菌性角膜炎患者的角膜刮片进行涂片镜检,同一涂片先行KOH湿片镜检,然后行Calcofluor White(CFW)荧光染色镜检。以真菌培养阳性为诊断真菌性角膜炎的金标准,对检查结果进行对比分析。结果:同一涂片KOH湿片阳性率为81.0%(47/58),而CFW荧光染色阳性率为96.6%(56/58),2者共阳性47例,共阴性2例,CFW荧光染色阳性率高于KOH湿片镜检法(χ2=7.11,P<0.001)。结论:角膜刮片CFW荧光染色镜检诊断真菌性角膜炎优于KOH湿片镜检。 展开更多
关键词 真菌性角膜炎 角膜刮片 KOH湿片镜检法 CFW荧光染色法
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微拟球藻原生质体制备与再生 被引量:3
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作者 马晓磊 张琳 +2 位作者 杨官品 朱葆华 潘克厚 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期19-23,共5页
综合考虑酶混合液处理时间和初始细胞密度两个因素,选取终浓度为4%半纤维素酶和2%崩溃酶的酶混合液对一株海洋经济微藻——微拟球藻(Nannochloropsis oculata)进行原生质体的制备与再生,Calcofluor White染料染色可在荧光显微镜下观察... 综合考虑酶混合液处理时间和初始细胞密度两个因素,选取终浓度为4%半纤维素酶和2%崩溃酶的酶混合液对一株海洋经济微藻——微拟球藻(Nannochloropsis oculata)进行原生质体的制备与再生,Calcofluor White染料染色可在荧光显微镜下观察到完整的原生质体细胞。实验结果表明:同一初始密度藻细胞酶处理1~3 h制备率较高;酶处理相同时间较高初始密度(2×107~3×107cells/mL)的藻细胞制备率较高,并且原生质体在再生培养基上可再生,生长趋势与野生型细胞一致。考虑到酶处理时间过长或者密度过大会对原生质体的再生产生影响,本实验选择最适酶处理时间为1h,初始细胞密度为2×107cells/mL。 展开更多
关键词 微拟球藻(Nannochloropsis oculata) 原生质体 再生 calcofluor white STAINING
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应用荧光染色法检测寄主昆虫体表病原真菌孢子及其附着孢 被引量:5
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作者 曹月青 朱祥先 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期91-92,共2页
采用蝗虫翅膀作为侵染组织,探讨了荧光染色剂Calcofluor White M2R在观测寄主体表绿僵菌孢子及其附着孢形成中的应用。结果表明,在荧光显微镜下,清晰可见蝗虫翅膀上发蓝色荧光的绿僵菌孢子、芽管及附着孢,而蝗虫翅膀未被染色,避免了干... 采用蝗虫翅膀作为侵染组织,探讨了荧光染色剂Calcofluor White M2R在观测寄主体表绿僵菌孢子及其附着孢形成中的应用。结果表明,在荧光显微镜下,清晰可见蝗虫翅膀上发蓝色荧光的绿僵菌孢子、芽管及附着孢,而蝗虫翅膀未被染色,避免了干扰观察目标物。该方法可以准确观察病原真菌孢子在昆虫体表组织的萌发及附着孢形成。 展开更多
关键词 昆虫病原真菌 绿僵菌 附着孢 calcofluor white M2R 荧光染色
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小鼠巨噬细胞吞噬马尔尼菲青霉酵母相细胞的实验观察 被引量:3
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作者 冯佩英 黄怀球 +6 位作者 张静 张晓辉 孙九峰 谢治 鲁莎 鲁长明 席丽艳 《中国真菌学杂志》 2010年第6期332-335,共4页
目的探讨小鼠腹腔巨噬细胞对马尔尼菲青霉酵母相细胞的影响,为研究抗马尔尼菲青霉的免疫机制提供一定的实验依据。方法将马尔尼菲青霉酵母相细胞与小鼠腹腔巨噬细胞在体内和体外两种方式下进行共培养,分别于60min、120min、240min和360... 目的探讨小鼠腹腔巨噬细胞对马尔尼菲青霉酵母相细胞的影响,为研究抗马尔尼菲青霉的免疫机制提供一定的实验依据。方法将马尔尼菲青霉酵母相细胞与小鼠腹腔巨噬细胞在体内和体外两种方式下进行共培养,分别于60min、120min、240min和360min后进行菌落形成单位(CFU)计数,统计分析体内组与体外组CFU数结果的差异性。利用钙荧光白染色巨噬细胞胞内的马尔尼菲青霉酵母相细胞,荧光显微镜下观察细胞形态特征的变化。结果经体内和体外两种方式共培养,两组之间的CFU计数差异无统计学意义,但两组内不同时间点的CFU计数差异存在统计学意义。荧光显微镜下可见巨噬细胞内的酵母细胞被钙荧光白染上淡蓝色荧光。结论小鼠腹腔巨噬细胞在体内、外对马尔尼菲青霉酵母相细胞不起明显的杀灭或溶解作用,其最大的吞噬时间为共培养240min。钙荧光白染色可快速有效的区分巨噬细胞与真菌,是一种良好的检测真菌方法。 展开更多
关键词 巨噬细胞 马尔尼菲青霉 菌落形成单位 钙荧光白染色
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酵母SOD1基因缺失突变体应答真菌细胞壁抑制剂CFW的转录组学分析 被引量:1
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作者 张小华 刘向勇 +2 位作者 卞伟华 徐岩艳 许聪 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2016年第1期76-79,共4页
以酿酒酵母为研究材料,采用酵母全基因组表达谱芯片,分析超氧化物歧化酶SOD1基因缺失(sod1Δ)对酵母细胞应答真菌细胞壁抑制剂钙荧光白(CFW)全基因组转录表达谱的影响,为揭示植物病原真菌细胞壁调控机制以及植物抗真菌基因工程改造提供... 以酿酒酵母为研究材料,采用酵母全基因组表达谱芯片,分析超氧化物歧化酶SOD1基因缺失(sod1Δ)对酵母细胞应答真菌细胞壁抑制剂钙荧光白(CFW)全基因组转录表达谱的影响,为揭示植物病原真菌细胞壁调控机制以及植物抗真菌基因工程改造提供新的理论基础。结果表明:CFW(10μg/m L)处理1 h后,与野生型酵母细胞相比,sod1Δ酵母细胞中211个基因发生了显著差异表达(97个基因表达上调、114个基因表达下调)。随机选取5个差异表达基因采用定量PCR验证,结果与芯片分析结果一致。差异表达基因功能主要涉及细胞壁、细胞代谢、蛋白质合成、细胞防御以及大量功能未知蛋白。以上结果表明,SOD1基因缺失可显著改变酵母细胞应答真菌细胞壁抑制剂CFW胁迫的全基因组转录表达谱。 展开更多
关键词 真菌细胞壁抑制剂 钙荧光白 酿酒酵母 DNA芯片 细胞壁 超氧化物歧化酶
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家蚕微孢子虫转宿主果蝇的研究初探 被引量:1
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作者 张小燕 蔡红英 +2 位作者 周兴建 肖宇 黄蕾 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第23期10907-10908,11011,共3页
[目的]研究家蚕微孢子虫对果蝇的侵染性,为系统研究家蚕微孢子虫侵染机制提供新视野,也为探索微孢子虫的生物防治效果提供参考。[方法]用家蚕微孢子添食野生型和突变型果蝇,并用Calcofluor White M2R荧光染色法进行果蝇体液内的家蚕微... [目的]研究家蚕微孢子虫对果蝇的侵染性,为系统研究家蚕微孢子虫侵染机制提供新视野,也为探索微孢子虫的生物防治效果提供参考。[方法]用家蚕微孢子添食野生型和突变型果蝇,并用Calcofluor White M2R荧光染色法进行果蝇体液内的家蚕微孢子虫形态观察。[结果]结果表明,家蚕微孢子虫在转宿主情况下能够侵染果蝇,且被感染的突变型果蝇体内家蚕微孢子虫的数量多于野生型果蝇。[结论]家蚕微孢子虫能侵染果蝇,该研究结果为研究家蚕微孢子虫侵染其他宿主提供了初步参考,为进一步了解和认识家蚕微孢子虫侵染机制奠定了基础。 展开更多
关键词 家蚕微孢子虫 果蝇 侵染 calcofluor white M2R染色
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植物原生质体再生细胞壁研究进展 被引量:1
12
作者 杨颖 康兰 +2 位作者 耿新 陈玉珍 卢存福 《中国农学通报》 2021年第4期25-30,共6页
原生质体作为单细胞且具有全能性,为研究植物细胞壁生物合成提供了独特的视角和模型。原生质体细胞壁再生过程复杂,涉及诸多细胞信号转导通路,应用普通的研究方法难以全面解析整个再生壁过程的分子网络。为充分了解植物原生质体再生壁... 原生质体作为单细胞且具有全能性,为研究植物细胞壁生物合成提供了独特的视角和模型。原生质体细胞壁再生过程复杂,涉及诸多细胞信号转导通路,应用普通的研究方法难以全面解析整个再生壁过程的分子网络。为充分了解植物原生质体再生壁内在特性,推动植物原生质体再生壁的分子机理进一步完善,笔者从原生质体再生细胞壁培养、细胞壁再生的细胞生物学证据、结合诸多组学技术研究细胞壁再生分子机理3个方面进行系统分析和归纳总结。分析了不同植物原生质体培养的主要影响因素如植物材料限制、培养基及培养方式的差异;归纳了2种常用染料应用于原生质体再生壁可视化研究的进展;总结了转录组、蛋白组及更为精细的核蛋白组及磷蛋白组技术在揭示细胞壁再生分子网络机理方面的应用和意义,并提出了对原生质体细胞壁再生机理深入研究的展望。 展开更多
关键词 原生质体 细胞壁再生 组织培养 卡式白染料 分子机理
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钙荧光白和荧光刀豆蛋白A标记的白念珠菌生长活性和粘附能力
13
作者 张静 吴晓雁 +2 位作者 黄家敏 陆春 黄怀球 《中山大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期358-363,共6页
【目的】探讨钙荧光白和荧光刀豆蛋白A标记白念珠菌后对其生长活性和粘附能力的影响,以明确在念珠菌和宿主细胞相互作用研究中钙荧光白和荧光刀豆蛋白A是否适用于活念珠菌的标记。【方法】分别使用钙荧光白和结合Alexa fluor 488的刀豆... 【目的】探讨钙荧光白和荧光刀豆蛋白A标记白念珠菌后对其生长活性和粘附能力的影响,以明确在念珠菌和宿主细胞相互作用研究中钙荧光白和荧光刀豆蛋白A是否适用于活念珠菌的标记。【方法】分别使用钙荧光白和结合Alexa fluor 488的刀豆蛋白A标记20株白念珠菌,将标记荧光的白念珠菌酵母细胞接种至酵母提取物蛋白胨葡萄糖培养基,通过菌落计数法检测荧光标记的白念珠菌的生长活性。将荧光标记的白念珠菌酵母细胞分别与巨噬细胞和肠上皮细胞共培养,使用荧光显微镜检测白念珠菌的粘附能力。【结果】钙荧光白组和荧光刀豆蛋白A组白念珠菌的菌落数目和未标记的对照组相比,均无统计学差异(P=0.942,P=0.885);钙荧光白组和荧光刀豆蛋白A组的白念珠菌在巨噬细胞上的粘附数目均比对照组少(P=0.000,P=0.000);钙荧光白组和荧光刀豆蛋白A组的白念珠菌在肠上皮细胞上的粘附数目也均比对照组组少(P=0.000,P=0.000)。对照组组白念珠菌与细胞共培养半小时后可长出菌丝,而钙荧光白标记的白念珠菌与细胞共培养半小时后未长出菌丝。【结论】钙荧光白和荧光刀豆蛋白A标记白念珠菌后不影响其生长活性,可显著降低其粘附巨噬细胞和肠上皮细胞的能力。钙荧光白染色影响白念珠菌的出芽过程。钙荧光白和荧光刀豆蛋白A不适用活念珠菌的标记。 展开更多
关键词 白念珠菌 钙荧光白 刀豆蛋白A 巨噬细胞 肠上皮细胞
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利用卡氏白和尼罗红染色观察稻瘟病菌有性世代的结构 被引量:4
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作者 顾卓侃 李玲 +6 位作者 王教瑜 柴荣耀 王艳丽 张震 毛雪琴 邱海萍 孙国昌 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期668-672,共5页
稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)是异宗配合的子囊菌,但至目前,关于其有性世代产生过程和结构的研究相对较少。本研究利用两个稻瘟病菌菌株Guy-11与2539在多种培养基上进行杂交试验,观察有性世代产生情况。结果表明,两菌株在所有参试培养... 稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)是异宗配合的子囊菌,但至目前,关于其有性世代产生过程和结构的研究相对较少。本研究利用两个稻瘟病菌菌株Guy-11与2539在多种培养基上进行杂交试验,观察有性世代产生情况。结果表明,两菌株在所有参试培养基上杂交后均能产生子囊壳,但子囊壳的数量、产生速度和成熟度各不相同,以燕麦培养基为最佳。为了进一步观察有性世代的结构,我们采用卡氏白和尼罗红对子囊和子囊孢子进行染色和荧光观察。荧光显微镜下,子囊和子囊孢子的细胞壁均能被卡氏白染成清晰的亮蓝色,细胞结构清晰可辨。成熟的子囊壳内可产生大量的子囊,子囊中含有8个子囊孢子,子囊孢子通常含有4个细胞。同时,子囊孢子能够被尼罗红染成橘红色,表明子囊孢子中储藏大量的脂肪类物质。本研究提供了一种有效的观察稻瘟病菌有性世代结构的荧光染色方法,为后续的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 有性生殖 卡氏白 尼罗红
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真菌荧光染色在侵袭性真菌病中的应用价值 被引量:2
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作者 张澍雅 陈众博 +6 位作者 虞亦鸣 庄起东 於学婵 陈辉 李安琪 邓在春 郑琳 《中国现代医生》 2022年第35期69-72,85,共5页
目的评估真菌荧光染色在侵袭性真菌病诊断中的临床价值。方法选取2018年1月至2021年12月宁波大学医学院附属医院呼吸与危重症科收治的高度怀疑侵袭性肺部真菌感染的住院患者资料170例,回顾性分析患者肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage ... 目的评估真菌荧光染色在侵袭性真菌病诊断中的临床价值。方法选取2018年1月至2021年12月宁波大学医学院附属医院呼吸与危重症科收治的高度怀疑侵袭性肺部真菌感染的住院患者资料170例,回顾性分析患者肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)经真菌荧光染色、氢氧化钾湿片法、革兰染色的检测结果,分别计算3种方法的检出率和阳性率;回顾性分析血清(1,3)-β-D葡聚糖检测(G试验)、肺泡灌洗液半乳甘露聚糖(galactomannan,GM)试验和肺泡灌洗液隐球菌荚膜多糖抗原检测的敏感度、特异性、阳性和阴性预测值,并与真菌荧光染色进行对比。结果170例患者中,90例被临床诊断为侵袭性肺部真菌感染,80例为非侵袭性肺部真菌感染。真菌荧光染色的检出率和阳性率均高于氢氧化钾湿片法和革兰染色;其中有136例患者同时进行了肺泡灌洗液真菌荧光染色和血清G试验,敏感度分别为51.5%、14.7%,特异性分别为88.2%、92.6%;66例患者同时进行了肺泡灌洗液真菌荧光染色和GM试验,敏感度分别为64.1%、38.5%,特异性分别为85.2%、59.3%;76例患者同时进行了肺泡灌洗液真菌荧光染色和隐球菌荚膜多糖抗原检测,敏感度分别为27.9%、81.4%,特异性分别为97.0%、97.0%。结论真菌荧光染色在侵袭性真菌病的诊断中具有重要的临床价值。 展开更多
关键词 荧光染色 侵袭性真菌病 侵袭性肺部真菌感染 诊断
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聚丙烯酰胺凝胶电泳配合荧光增白剂显色检测木霉几丁质酶同工酶谱 被引量:1
16
作者 夏洪志 杨合同 黄玉杰 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期61-65,共5页
为提高木霉几丁质酶检测方法的准确性和灵敏度,建立一种快速检测几丁质酶同工酶的方法。采用活性凝胶电泳、变性凝胶电泳、原位显色凝胶电泳结合荧光增白剂(Calcofluor white M2R)显色从绿色木霉LTR-2发酵产物中检测几丁质酶同工酶。活... 为提高木霉几丁质酶检测方法的准确性和灵敏度,建立一种快速检测几丁质酶同工酶的方法。采用活性凝胶电泳、变性凝胶电泳、原位显色凝胶电泳结合荧光增白剂(Calcofluor white M2R)显色从绿色木霉LTR-2发酵产物中检测几丁质酶同工酶。活性凝胶电泳在粗酶液浓缩5倍时显示两条活性谱带,变性凝胶电泳在浓缩10倍时显示一条活性谱带,原位显色凝胶电泳在浓缩20倍时显示两条不清晰的活性谱带,SDS-PAGE显示这两条活性谱带的分子量分别为65kDa和42kDa。结果表明活性聚丙烯酰胺凝胶电泳和Calcofluor white M2R显色相结合的方法在几丁质酶上样量为0.47U时具有较好的分辨能力,是检测木霉几丁质酶同工酶的有效的方法。 展开更多
关键词 木霉 几丁质酶 聚丙烯酰胺凝胶电泳 荧光增白剂
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CFW荧光染色法检测疑似真菌感染的临床应用评价 被引量:15
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作者 何文婧 高志琴 +4 位作者 陈健 任弘谨 杨虹 蔡晴 杨连娟 《检验医学》 CAS 2018年第4期331-334,共4页
目的探讨荧光染色剂Calcofluor White(CFW)在真菌感染诊断中的临床应用价值,并与传统KOH湿片镜检法及真菌培养法进行比较,寻找更有效的真菌检测方法。方法选取临床155例疑似真菌感染的患者,采用KOH湿片镜检法、CFW荧光染色法和真菌培养... 目的探讨荧光染色剂Calcofluor White(CFW)在真菌感染诊断中的临床应用价值,并与传统KOH湿片镜检法及真菌培养法进行比较,寻找更有效的真菌检测方法。方法选取临床155例疑似真菌感染的患者,采用KOH湿片镜检法、CFW荧光染色法和真菌培养法进行检测。结果 CFW荧光染色法阳性率(85.8%)最高,KOH湿片镜检法阳性率(76.1%)次之,二者差异有统计学意义(χ2=14.45,P<0.05),真菌培养法阳性率(71.0%)最低。结论 CFW荧光染色法可显著提高真菌检测的阳性率,是一种有效的真菌检测方法。 展开更多
关键词 荧光染色剂calcofluor white KOH 真菌培养
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鸡白色念珠菌五种染色方法的比较研究 被引量:1
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作者 闫金坤 刘建钗 +4 位作者 刘彦威 马邯生 黄小龙 沈洁 贾苗苗 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期905-910,共6页
为建立鸡白色念珠菌的最佳染色方法,探讨了苏木精-伊红(HE)染色、过碘酸雪夫氏(PAS)染色、Grocott六胺银(GMS)染色、CalcofluorWhite(CFW)荧光染色和CFW+HE复染共5种染色方法对鸡嗉囊白色念珠菌感染的染色效果。结果显示,HE染色组织结... 为建立鸡白色念珠菌的最佳染色方法,探讨了苏木精-伊红(HE)染色、过碘酸雪夫氏(PAS)染色、Grocott六胺银(GMS)染色、CalcofluorWhite(CFW)荧光染色和CFW+HE复染共5种染色方法对鸡嗉囊白色念珠菌感染的染色效果。结果显示,HE染色组织结构清楚,但菌丝和孢子结构不十分清晰;PAS染色和GMS染色菌丝和孢子结构清晰,但步骤较多,且耗时长;CFW荧光染色简单、特异,菌丝、孢子结构清晰,但组织结构不清晰;CFW荧光染色后、再用HE复染能清晰显示菌丝孢子结构及病料组织结构,是较理想的鸡嗉囊白色念珠菌的染色方法。 展开更多
关键词 白色念珠菌 苏木精-伊红染色 Grocott六胺银染色 过碘酸雪夫氏染色 calcofluor white荧光染色
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利用荧光蛋白标记研究稻瘟病菌有性世代的细胞结构 被引量:9
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作者 郭晓宇 李玲 +8 位作者 董波 王教瑜 柴荣耀 张震 毛雪琴 邱海萍 郝中娜 王艳丽 孙国昌 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第7期1138-1145,共8页
稻瘟病是水稻最重要的病害之一,同时稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)是植物病原真菌研究的模式生物。稻瘟病菌是异宗配合的子囊菌,但其有性世代的细胞学过程、形态结构、分子机制以及对病菌变异的贡献研究都较少,也缺乏必要的研究手段。... 稻瘟病是水稻最重要的病害之一,同时稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)是植物病原真菌研究的模式生物。稻瘟病菌是异宗配合的子囊菌,但其有性世代的细胞学过程、形态结构、分子机制以及对病菌变异的贡献研究都较少,也缺乏必要的研究手段。该文利用荧光蛋白标记结合荧光染色的方法对稻瘟病菌有性世代结构进行了标记和显微观察,以期为稻瘟病菌有性生殖过程和机制研究提供方法与借鉴。将绿色荧光蛋白GFP和红色荧光蛋白m Cherry分别导入两个相对交配型的稻瘟病菌菌株Guy11(MAT1-2)和70-15(MAT1-1),各转化子及野生型按交配型组合对峙培养,观察有性世代结构中的荧光表达情况。结果表明,组蛋白H3启动子、核糖体蛋白RP27启动子和疏水蛋白MPG1启动子均可在稻瘟病菌有性孢子形成过程中高丰度表达。进一步利用这三种启动子和两种荧光蛋白对稻瘟病菌有性孢子的细胞器(细胞核、过氧化物酶体)进行标记和观察,结果表明,融合组蛋白H2B的m Cherry及融合核定位信号(NLS)的GFP均能有效标记子囊孢子细胞的细胞核,荧光集中而明亮;带有过氧化物酶体定位信号1(PTS1)的GFP可以有效地标记子囊孢子中的过氧化物酶体,每个细胞中均有数量不等的过氧化物酶体,表明子囊孢子中需要过氧化物酶体参与生化代谢。该文还利用脂肪染色剂尼罗红、BODIPY和细胞壁染色剂卡氏白结合荧光蛋白标记对子囊和子囊孢子进行组合染色。结果显示,尼罗红、BODIPY、卡氏白染色剂互不干扰,可以与不同颜色的荧光蛋白相互组合,从而更加清晰地标记子囊和子囊孢子的结构、细胞器和储藏物质。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 有性世代 荧光蛋白 BODIPY 尼罗红 卡氏白
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