VEGF、RANTES、sflt-1及MCP-1在子宫内膜异位症合并代谢综合征的表达及意义

目的 探究血管内皮生长因子（VEGF）、T细胞表达和分泌的调节性激活因子（RANTES）、血管内皮生长因子可溶性受体（sflt-1）及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）在子宫内膜异位症合并代谢综合征的表达及意义。方法 选取2012年1月至2015年4月期间内在江汉大学附属医院妇产科接受治疗的子宫内膜异位症合并代谢综合征240例患者作为研究组,同时选择输卵管系膜囊肿、卵巢良性肿瘤或是宫颈病变患者210例作为对照组。研究组患者根据病变部位、大小以及病灶粘连程度,分为Ⅰ~Ⅳ期,Ⅰ~Ⅱ期患者130例,Ⅲ~Ⅳ期患者110例。采用ELISA对患者血清及腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表达表达水平进行检测,对比不同组别患者各项指标。结果 研究组患者血清及腹腔液内VEGF、sflt-1、MCP-1和RANTES表达水平均高于对照组,组间数据差异有统计学意义（血清：t值分别为119.385、32.115、13.521、104.776,腹腔液内：t值分别为94.576、42.023、14.762、35.738,均P=0.000〈0.05）;在Ⅰ-Ⅱ期组与Ⅲ-Ⅳ期组指标对比中,前者VEGF、sflt-1和R A NTES指标在血清和腹腔液中表达水平均低于后者,数据有显著统计学差异（血清：t值分别为78.152、6.151、49.337,腹腔液内：t值分别为73.424、8.424、23.385,均P=0.000〈0.05）;但MCP-1数据比较无统计学意义（P〉0.05）。结论 在子宫内膜异位症合并代谢综合征与检测指标包括sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES的表达水平存在密切关系,表明上述因子与疾病发生发展机制存在关联,因此可以在临床上将上述指标作为子宫内膜异位症合并代谢综合征的辅助检测生化指标。

Ca2＋／CaN-NFATc信号通路在哮喘大鼠淋巴细胞增殖和活化中的作用

目的探讨Ca2＋／CaN-NFATc信号通路在哮喘大鼠淋巴细胞活化、增殖中的作用。方法哮喘组和CsA（cyclospoin A，CaN的抑制物，环孢菌素A）干预组大鼠以卵蛋白溶液致敏及激发，对照组以生理盐水致敏及激发，无菌分离脾淋巴细胞，加PHA—P（终浓度为5μg／ml）培养24h，CsA干预组同时加入CsA稀释液（终浓度为1．0μg／ml）。检测淋巴细胞内[Ca2＋]i浓度、CaN活性、去磷酸化NFATc蛋白和CyclinE蛋白的表达、细胞周期各时相分布及上清液中IL-4和IL-2的水平。结果与对照组相比，哮喘组淋巴细胞Ca2＋／CaN-NFATc的活性[（81．21±14．39）V8（63．66±9．02）]增加（P〈0．05）；CyclinE蛋白的表达量[（0．9327±0．0370）VS（0．8374±0．0637）]增加（P〈0．01），处于G0／G1期的淋巴细胞比例[（89．3300±3．3850）VS（94．1260±1．4389）]减少，s期[（7．8600±2．8241）VS（4．0270±1．8650）]及S＋G2／M期比例[（10．6700±3．3850）V8（5．8740±1．4389）]增加（P均〈0．01））；上清液中IL4水平[（1．55±0．19）pg／ml vs（0．99±0．12）pg／m1]及IL-4／IL-2比值[（0．81±0．12）vs（0．49±0．49）]增加（P均〈0．01）。CsA可使哮喘大鼠淋巴细胞Ca2＋／CaN—NFATc的活性（47．19±7．16）下降（P〈0．05）；CyclinE蛋白的表达量（0．6840±0．0485）减少（P〈0．01），使处于S期（4．8600±1．9595）和S＋G2／M期（7．9900±1．9405）的淋巴细胞比例减少，G0／G1期比例（92．2100±1．9267）增加（P均〈0．01），细胞增殖受到抑制；使上清液中IL-4（0．47±0．09）pg／ml水平减少（P〈0．01），IL-4／IL-2比值下降（0．78±0．20）；淋巴细胞Ca2＋／CaN-NFATc的活性与IL4的水平及CyclinE蛋白的表达量均呈正相关（r=0．711，P〈0．01和r=0．749，P〈0．01）。结论哮喘大鼠淋巴细胞Ca2＋／CaN-NFATc的活性增加；其活性的增加可通过促进IL4的产生和分泌，导致Th1／Th2的失衡，也可通过促进Cyclin E蛋白的表达而引起淋巴细胞的增殖。

L-型钙通道在NFAT1调节兔膝骨关节炎软骨细胞基质代谢中的作用

[目的]探讨L-型电压依赖性钙通道在NFAT1调节软骨细胞基质代谢中的作用。[方法]Hulth法制作兔骨关节炎(KOA)模型。使用q RT-PCR法观察对照组和KOA组兔软骨细胞5种NFAT亚型的m RNA表达情况,然后使用L-型钙通道阻断剂硝苯地平,检测软骨细胞NFAT各亚型和基质代谢各标记物的改变,以及膜片钳技术观察KOA细胞膜电位的变化。[结果]与对照组相比,KOA组软骨细胞5种NFAT的m RNA表达变化并不一致。KOA组软骨细胞NFAT1明显升高,是对照组的2.42倍(P<0.01),NFAT2显著降低,是对照组的0.34倍(P<0.01),而NFAT3、NFAT4和NFAT5的m RNA表达没有改变。与单纯DMSO培养基对照组相比,10μmol/L硝苯地平对KOA软骨细胞的活力没有影响,但完全阻断了KOA软骨细胞Cav1的m RNA表达,增加了软骨细胞内基质成分II型胶原(7.46倍,P<0.01)、聚集蛋白聚糖(4.98倍,P<0.05)和转化生长因子-β的m RNA表达(4.37倍,P<0.01),降低了分解酶基质金属蛋白酶-1(0.17倍,P<0.01),含血小板反应蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4(ADAMTS)(0.29倍,P<0.01)和ADAMTS-5的表达(0.10倍,P<0.01),与对照组的差异均具有统计学意义。同时,硝苯地平显著降低了NFAT1的表达,是对照组的0.20倍(P<0.05),但对NFAT2的m RNA表达没有影响。此外,硝苯地平使KOA组细胞膜电位显著增加(P<0.01)。[结论]L-型钙通道通过上调NFAT1.的m RNA表达参与调控KOA软骨细胞基质代谢。