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基于TCGA数据库分析CANX在急性髓系白血病中的表达及其临床意义
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作者 李博雅 李彤 +2 位作者 祖向阳 王冲 秦玲 《海南医学院学报》 CAS 2023年第5期374-381,共8页
目的:探索CANX与急性髓系白血病(AML)患者预后及免疫细胞浸润的关系。方法:通过TIMER数据库探索CANX在TCGA肿瘤及正常组织样本中的表达情况。通过R语言发现AML及健康样本间CANX的表达差异。通过Kaplan-Meier法和Log-Rank检验评估CANX表... 目的:探索CANX与急性髓系白血病(AML)患者预后及免疫细胞浸润的关系。方法:通过TIMER数据库探索CANX在TCGA肿瘤及正常组织样本中的表达情况。通过R语言发现AML及健康样本间CANX的表达差异。通过Kaplan-Meier法和Log-Rank检验评估CANX表达与AML患者生存的关系。使用R语言分析CANX表达与患者临床性状、药物敏感性及免疫细胞浸润的相关性。结果:CANX在13种肿瘤及正常组织样本间的差异表达具有统计学意义(P<0.05)。CANX高表达与AML患者预后良好相关(P<0.05)。这在GSE37642数据集中得到验证。CANX表达与患者年龄、生存状态、FAB分期及核型均相关(P<0.05)。CANX高表达、低龄及良好染色体核型均是AML预后良好的独立预测因素(P<0.05)。CANX表达可能影响AML患者对多种药物的敏感性(P<0.05)。且CANX表达与M1巨噬细胞及CD8 T细胞表达正相关。结论:CANX可能作为一种新的潜在生物标志物,未来用于预测患者预后并指导患者精准诊疗。 展开更多
关键词 canx 急性髓系白血病 预后 免疫细胞 生物标志物
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Expression and clinical significance of CANX in acute myeloid leukemia based on TCGA database
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作者 LI Bo-ya LI Tong +2 位作者 ZU Xiang-yang WANG Chong QIN Ling 《Journal of Hainan Medical University》 CAS 2023年第5期53-60,共8页
Objective:To explore relationships between CANX expression,prognosis and immune infiltration of acute myeloid leukemia(AML)patients.Methods:The TIMER database was used to compare the CANX expression among a variety of... Objective:To explore relationships between CANX expression,prognosis and immune infiltration of acute myeloid leukemia(AML)patients.Methods:The TIMER database was used to compare the CANX expression among a variety of TCGA tumor and normal tissue samples.The difference of CANX expression between AML and normal samples was found by R software.The Kaplan-Meier method and Log-Rank test were used to assess the relationship between CANX expression and patient survival.The R software was used to find correlations between CANX expression,clinical characteristics,drug sensitivity,and immune infiltration in AML.Results:The differential expression of CANX in 13 tumor and normal tissue samples were statistically significant(P<0.05).The high CANX expression was associated with a favorable prognosis(P<0.05),which was validated in GSE37642.The expression of CANX was correlated with age,survival status,FAB stage,and karyotype(P<0.05).High CANX expression,low age and favorable karyotype were independent predictors of a favorable prognosis(P<0.05).CANX expression may affect the sensitivity of AML patients to multiple drugs(P<0.05).The expression of CANX was positively correlated with that of M1 macrophages and CD8 T cells.Conclusion:CANX may be used as a novel potential biomarker,and could benefit AML patients by predicting patient prognosis and providing precise treatment indications. 展开更多
关键词 canx Acute myeloid leukemia PROGNOSIS Immune cell BIOMARKER
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柴胡皂苷D对人乳腺癌MCF-7细胞株迁移、凋亡及Calnexin/Calreticulin循环的影响 被引量:15
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作者 赵炜 刘睿 +2 位作者 修俊青 姜翠红 赵志正 《现代中药研究与实践》 CAS 2018年第6期16-19,共4页
目的探讨柴胡皂苷D对乳腺癌MCF-7细胞株内质网应激(ERS)所致的凋亡及Calnexin/Calreticulin循环的影响。方法将乳腺癌MCF-7细胞分为对照组、低、中、高剂量组;检测各组细胞增殖、迁移及凋亡情况;Western blot检测各组细胞Calnexin、Calr... 目的探讨柴胡皂苷D对乳腺癌MCF-7细胞株内质网应激(ERS)所致的凋亡及Calnexin/Calreticulin循环的影响。方法将乳腺癌MCF-7细胞分为对照组、低、中、高剂量组;检测各组细胞增殖、迁移及凋亡情况;Western blot检测各组细胞Calnexin、Calreticulin、GRP78、CHOP的表达。结果与对照组相比,低、中、高剂量组细胞增殖率、迁移能力降低,细胞凋亡率增加,且细胞中Calnexin、Calreticulin、GRP78、CHOP蛋白表达增高。结论柴胡皂苷D可能通过影响MCF-7细胞Calnexin/Calreticulin循环,加重乳腺癌细胞ERS,引发细胞凋亡,从而降低细胞增殖率及迁移能力。 展开更多
关键词 乳腺癌 柴胡皂苷D calnexin/Calreticulin循环 内质网应激 凋亡
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番茄calnexin基因的克隆及胁迫表达分析 被引量:3
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作者 李明辉 孙颖 +3 位作者 赵春梅 孙爱清 胡小然 刘箭 《武汉植物学研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期100-105,共6页
Calnexin是内质网中重要的类凝集素分子伴侣,其主要作用是辅助糖基化蛋白的折叠和装配,调节内质网中的Ca2+稳态平衡和Ca2+信号传导过程。从番茄(Lycopersicon esculentum)的cDNA文库中克隆到calnexincDNA全序列,将其命名为Lecnx61.0,并... Calnexin是内质网中重要的类凝集素分子伴侣,其主要作用是辅助糖基化蛋白的折叠和装配,调节内质网中的Ca2+稳态平衡和Ca2+信号传导过程。从番茄(Lycopersicon esculentum)的cDNA文库中克隆到calnexincDNA全序列,将其命名为Lecnx61.0,并以其3’端DNA片段为探针对番茄基因组进行Southern分析,结果表明Lecnx61.0在该基因组中仅有一个拷贝;Northern和W estern分析表明,Lecnx61.0的表达还受热激、冷害、盐害和内质网应激诱导剂衣霉素的诱导,但对干旱胁迫没有明显的反应。LeCNX 61.0蛋白对Ca2+亏缺胁迫的响应呈现组织特异性,但高浓度Ca2+并不影响各组织中LeCNX 61.0蛋白的含量,实验结果表明LeCNX 61.0蛋白可能在植物抵抗特定的环境胁迫中发挥作用。 展开更多
关键词 calnexin 分子伴侣 Ca^2+胁迫 环境胁迫
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沉默Calnexin基因表达对胃癌细胞SGC-7901内质网应激凋亡及其信号通路的影响 被引量:2
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作者 张晓海 张洪涛 +1 位作者 胡孝定 钟华 《浙江医学》 CAS 2017年第4期259-262,276,共5页
目的探讨沉默钙连蛋白(Calnexin)基因对胃癌细胞SGC-7901内质网应激凋亡信号通路的影响。方法构建靶向Calnexin基因的慢病毒干扰载体,利用包装细胞293T获得重组慢病毒,转染人胃癌SGC-7901细胞,并分为转染shRNA-Calnexin的实验组,转染sh... 目的探讨沉默钙连蛋白(Calnexin)基因对胃癌细胞SGC-7901内质网应激凋亡信号通路的影响。方法构建靶向Calnexin基因的慢病毒干扰载体,利用包装细胞293T获得重组慢病毒,转染人胃癌SGC-7901细胞,并分为转染shRNA-Calnexin的实验组,转染shRNA空白质粒的空白载体组,并将未转染的SGC-7901细胞作为对照组。应用RT-PCR技术检测靶向沉默Calnexin的表达,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测各组细胞增殖情况;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;Western blot检测GRP94、IRE1、ATF6及CHOP表达水平。结果转染sh RNA沉默Calnexin基因可明显下调Calnexin mRNA的表达,实验组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);MTT法检测实验组细胞转染后细胞增殖能力明显下降(P<0.05);沉默Calnexin基因可提高细胞凋亡率,转染72h后实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);沉默Calnexin基因使胃癌细胞中GRP94、IRE1、ATF6及CHOP蛋白表达水平明显升高(均P<0.05)。结论靶向沉默Calnexin基因抑制人胃癌细胞增殖和促进细胞凋亡可能是通过抑制内质网应激信号通路实现的。 展开更多
关键词 钙连蛋白 SGC-7901细胞 慢病毒 内质网应激 凋亡 胃癌
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人脑胶质瘤中MAGE-D4和CANX mRNA的表达及其相关性分析 被引量:2
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作者 谢欢 张庆梅 +7 位作者 张鹏博 张沅 农蔚霞 罗彬 葛盈盈 李枫 刘畅 谢小薰 《中国临床新医学》 2022年第2期114-119,共6页
目的探讨人脑胶质瘤中黑色素瘤相关抗原(MAGE)-D4和钙联蛋白(CANX)mRNA的表达水平,分析其相关性及临床意义。方法应用基因表达谱交互式分析(GEPIA)数据库数据[胶质母细胞瘤(GBM)组织163例,低级别胶质瘤(LGG)组织518例,正常脑组织207例]... 目的探讨人脑胶质瘤中黑色素瘤相关抗原(MAGE)-D4和钙联蛋白(CANX)mRNA的表达水平,分析其相关性及临床意义。方法应用基因表达谱交互式分析(GEPIA)数据库数据[胶质母细胞瘤(GBM)组织163例,低级别胶质瘤(LGG)组织518例,正常脑组织207例]分析MAGE-D4和CANX mRNA在人脑胶质瘤组织中的表达情况,并通过逆转录-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法在临床样本(胶质瘤62例,正常脑组织11例)中进一步验证。分析MAGE-D4和CANX mRNA表达水平与胶质瘤患者临床指标的关联性。应用小干扰RNA(siRNA)技术沉默胶质瘤细胞株SF126和U251中MAGE-D4的表达,探讨MAGE-D4与CANX表达的相关性。结果GEPIA数据库数据分析结果显示,GBM和LGG组织的MAGE-D4和CANX mRNA表达水平均高于正常脑组织,差异有统计学意义(P<0.05)。针对临床样本的RT-qPCR检测结果也显示,胶质瘤组织中MAGE-D4和CANX mRNA的表达水平显著高于正常脑组织(P<0.05)。MAGE-D4及CANX mRNA的表达水平与患者年龄、性别、世界卫生组织(WHO)分级、病理类型、卡氏评分(KPS)、肿瘤最长径,以及Ki-67、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、S-100和波形蛋白(vimentin)的表达水平均无关联性(P>0.05)。Pearson相关分析结果显示,临床胶质瘤样本组织中MAGE-D4与CANX mRNA表达水平呈正相关(r=0.916,P=0.000)。细胞实验结果显示,经MAGE-D4 siRNA沉默后,SF126和U251细胞CANX mRNA的表达水平显著下降(P<0.05)。结论人脑胶质瘤中MAGE-D4、CANX高表达,且二者表达水平呈正相关,提示其可能共同参与了胶质瘤的发生、发展,具有成为胶质瘤免疫治疗靶点的应用前景。 展开更多
关键词 胶质瘤 黑色素瘤相关抗原-D4 钙联蛋白 相关性
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人Calnexin基因慢病毒载体及稳定表达Calnexin蛋白的宫颈癌细胞株构建 被引量:1
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作者 李宏帅 王鑫廷 +1 位作者 王媛 杨洁 《山东医药》 CAS 2018年第35期46-49,共4页
目的构建人Calnexin基因慢病毒载体及稳定表达Calnexin蛋白的人宫颈癌Hela细胞株,为进一步探讨Calnexin基因对宫颈癌潜在的调控作用提供细胞模型。方法采用TRIzol提取宫颈癌细胞Hela细胞株总RNA,RT-PCR法逆转录出含有目的基因Calnexin的... 目的构建人Calnexin基因慢病毒载体及稳定表达Calnexin蛋白的人宫颈癌Hela细胞株,为进一步探讨Calnexin基因对宫颈癌潜在的调控作用提供细胞模型。方法采用TRIzol提取宫颈癌细胞Hela细胞株总RNA,RT-PCR法逆转录出含有目的基因Calnexin的cDNA序列;根据Calnexin的cDNA序列,选择EcoR1、Bam H1限制性酶切位点作为目的位点,设计FLAG-Calnexin基因的PCR引物;利用PCR法从Hela细胞cDNA中扩增出FLAG-Calnexin基因片段,连接到慢病毒载体pLVX-IRES-puro中,得到重组慢病毒pLVX-FLAG-Calnexin质粒。将慢病毒包装质粒与pLVX-FLAG-Calnexin重组质粒共转染到人肾上皮293T细胞中,获得携带FLAG-Calnexin基因序列的重组慢病毒。将慢病毒感染Hela细胞24 h,在细胞培养基中加入1.0μg/m L嘌呤霉素,药筛48 h。最后筛选出稳定表达FLAG-Calnexin蛋白的Hela细胞,采用Western blotting法、Real-time PCR法检测该细胞内的Calnexin蛋白及mRNA。结果构建完成的重组质粒经菌落PCR、重组质粒的双酶切、质粒PCR验证后,条带位置对应片段大小与目的基因大小一致,且经质粒测序后与Calnexin基因片段比对一致。经过慢病毒感染、药物筛选后得到的Hela细胞中的Calnexin蛋白及mRNA的相对表达量分别为2.14±0.25、6.15±0.21,高于野生型Hela细胞及转入空载的对照细胞(P均<0.01)。结论成功构建了人Calnexin基因慢病毒载体,同时建立、筛选出了能够稳定表达Calnexin蛋白的Hela细胞株,为进一步探讨Calnexin在宫颈癌发生发展中的作用提供了细胞模型。 展开更多
关键词 calnexin基因 慢病毒载体 宫颈癌细胞 HELA细胞
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甲醛对人肝癌细胞株HepG2内质网应激相关Bip和CANXmRNA及蛋白表达水平的影响 被引量:1
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作者 张超 白剑英 +3 位作者 王东新 闫丹丹 王盼 刘艳飞 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2017年第5期340-345,351,共7页
目的:研究甲醛(FA)染毒是否会诱导人肝癌细胞株Hep G2内质网应激相关基因Bip和CANX m RNA和蛋白表达水平的改变,引起内质网应激反应。方法:用Hoechst 33258进行核染色,以观察不同浓度(0、0.02、0.1、0.5、2.5、12.5 mmol/L)FA分别染毒... 目的:研究甲醛(FA)染毒是否会诱导人肝癌细胞株Hep G2内质网应激相关基因Bip和CANX m RNA和蛋白表达水平的改变,引起内质网应激反应。方法:用Hoechst 33258进行核染色,以观察不同浓度(0、0.02、0.1、0.5、2.5、12.5 mmol/L)FA分别染毒肝细胞株24和48 h后的细胞核形态学变化。再分别用0.004、0.02、0.1 mmol/L的FA处理人肝癌细胞株Hep G2细胞24 h和48 h后,采用荧光定量PCR(q PCR)和Western blot检测内质网应激相关基因免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)及钙连蛋白(CANX)m RNA和蛋白的表达水平。结果:Hoechst 33258染色结果表明,染毒24和48 h后,0.5、2.5、12.5 mmol/L FA组出现大量核呈固缩状态或颗粒状荧光死亡细胞,阴性对照组和0.1 mmol/L及以下剂量组细胞核荧光染色较浅,细胞核未固缩,故后续试验采用0.1 mmol/L及以下剂量。经0.004、0.02和0.1 mmol/L FA处理细胞24和48 h后,q PCR检测结果显示,甲醛各剂量染毒组Bip和CANX的m RNA表达量与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。Western blot结果表明,染毒24 h,不同剂量甲醛处理组与阴性对照组相比,Bip和CANX蛋白表达量均无显著差异(P>0.05);染毒48 h,与阴性对照组相比,各FA处理组Bip蛋白表达量升高,0.02和0.1 mmol/L FA处理组CANX蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:甲醛染毒可诱导Hep G2细胞内质网应激相关蛋白Bip和CANX表达水平升高,引起肝细胞发生内质网应激反应。 展开更多
关键词 甲醛 内质网应激 肝细胞 免疫球蛋白重链结合蛋白 钙连蛋白
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沉默calnexin对舌鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响 被引量:1
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作者 钟齐健 金婷婷 +2 位作者 彭毓 陈伟雄 李劲松 《口腔疾病防治》 2021年第8期535-540,共6页
目的探讨沉默内质网应激相关蛋白calnexin对舌鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法将calnexin siRNA转染到舌鳞状细胞癌细胞SCC9和SCC25中,采用qRTPCR检测calnexin表达情况;Western blot实验进一步验证calnexin siRNA沉默效果... 目的探讨沉默内质网应激相关蛋白calnexin对舌鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法将calnexin siRNA转染到舌鳞状细胞癌细胞SCC9和SCC25中,采用qRTPCR检测calnexin表达情况;Western blot实验进一步验证calnexin siRNA沉默效果。通过CCK8实验检测沉默calnexin对舌鳞状细胞癌细胞增殖的影响;运用Transwell法检测沉默calnexin对细胞侵袭和迁移能力的影响。结果qRTPCR显示calnexin siRNA能够有效沉默calnexin的表达;Western blot实验进一步证实calnexin siRNA对calnexin的沉默效果。CCK8实验显示沉默calnexin表达的第4天,第5天能够抑制舌鳞状细胞癌细胞的增殖,差异有统计学意义(P<0.01);Transwell实验提示沉默calnexin的表达能够抑制舌鳞状细胞癌细胞的侵袭和迁移(P<0.001)。结论沉默calnexin可抑制舌鳞状细胞癌细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 内质网应激 calnexin 舌鳞状细胞癌 SCC9细胞株 SCC25细胞株 增殖 侵袭 迁移 SIRNA 治疗靶点
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The CanX-7 Nanosatellite ADS-B Mission: A Preliminary Assessment 被引量:2
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作者 Ron Vincent Richard Van Der Pryt 《Positioning》 2017年第1期1-11,共11页
The development of space-based Automatic Dependent Surveillance-Broadcast (ADS-B) will allow surveillance of aircraft in areas not covered by radar or ground-based ADS-B systems. In September 2016, the Canadian Advanc... The development of space-based Automatic Dependent Surveillance-Broadcast (ADS-B) will allow surveillance of aircraft in areas not covered by radar or ground-based ADS-B systems. In September 2016, the Canadian Advanced Nanospace eXperiment-7 (CanX-7) satellite was launched into a 690 km sun synchronous orbit with an ADS-B receiver payload. The first phase of ADS-B data collection took place over the North Atlantic between 4 and 31 October. A preliminary assessment of the data indicates that the average ADS-B signal strength is close to the calculated receiver detection threshold of D94.5 ± 0.5 dBm. The pattern of received ADS-B reception appears to be consistent with a signal propagation model developed for the CanX-7 mission. Future work includes the comparison of coincidental flight plan data for the operations area and an analysis of the payload antenna pattern. 展开更多
关键词 ADS-B SPACE-BASED ADS-B canx-7 Air TRAFFIC Control
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The CanX-7 ADS-B Mission: Signal Propagation Assessment 被引量:1
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作者 Ron Vincent Kelly Freitag 《Positioning》 2019年第1期1-15,共15页
The CanX-7 Automatic Dependent Surveillance-Broadcast (ADS-B) nanosatellite mission collected more than four million ADS-B messages between October 2016 and April 2017. An analysis of data collected over the north Atl... The CanX-7 Automatic Dependent Surveillance-Broadcast (ADS-B) nanosatellite mission collected more than four million ADS-B messages between October 2016 and April 2017. An analysis of data collected over the north Atlantic Ocean from 05 to 28 Oct included 20,707 position messages in which the angle from satellite nadir to aircraft was determined. The proximity of the received signal strength to the noise floor of the sensor allowed for an analysis of optimal aircraft-satellite orientation for ADS-B transmission detection. The results showed a significant disparity between descending and ascending passes of the satellite. For descending passes, the average nadir angle was 50.1°?with 90% of the contacts greater than 40°. The ascending passes had an average nadir angle of 31.6°?with only 24.8% of the contacts exceeding 40°. The evidence suggests that the satellite magnetic torquer may not have been fully aligned with the north magnetic pole as the satellite moved northward, resulting in ascending pass nadir angles that were not reflective of the full range of values. Further analysis of the descending passes showed agreement with an ADS-B signal propagation model with peak reception at nadir angles of 51°?± 8°. For space-based ADS-B operations, the results support the replacement of the current aircraft upper quarter-wave monopole to an antenna that will transmit more energy directly above the airframe. 展开更多
关键词 ADS-B SPACE-BASED ADS-B canx-7 AIR TRAFFIC Control
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钙联蛋白调控内质网应激诱导的细胞凋亡 被引量:7
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作者 李爱玲 修瑞娟 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第3期335-338,共4页
内质网应激(ERS)可诱导多种细胞凋亡,与疾病发生发展密切相关。钙联蛋白(CNX)是内质网中重要的类凝集素分子伴侣,通过参与未折叠蛋白反应募集凋亡相关因子、激活IRE1-JNK激酶等途径,调控ERS诱导的凋亡。本文就其研究现状进行阐述。
关键词 内质网应激 钙联蛋白 细胞凋亡
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沉默钙连蛋白对人肾母细胞瘤细胞凋亡及内质网应激、JNK信号通路的影响 被引量:3
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作者 孙为增 林国雄 林海 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第40期22-25,共4页
目的探讨沉默钙连蛋白(Calnexin)对肾母细胞瘤细胞凋亡及内质网应激、JNK信号通路的影响。方法将肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞分为对照组、空载体组、实验组。对照组正常培养不转染。空载体组转染空白质粒,实验组转染Calnexin shRNA。转染24 ... 目的探讨沉默钙连蛋白(Calnexin)对肾母细胞瘤细胞凋亡及内质网应激、JNK信号通路的影响。方法将肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞分为对照组、空载体组、实验组。对照组正常培养不转染。空载体组转染空白质粒,实验组转染Calnexin shRNA。转染24 h后全部更换为正常培养液继续培养48 h。采用实时荧光定量PCR法检测各组Calnexin mRNA表达,TUNEL法检测细胞凋亡指数(AI),Western blotting法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、需肌醇酶1(IRE1)、肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)、凋亡信号调节激酶1(ASK1)、磷酸化凋亡信号调节激酶1(p-ASK1)、c-Jun N末端激酶(JNK)及磷酸化c-Jun N末端激酶(p-JNK)蛋白相对表达量。结果 Calnexin mRNA相对表达量:实验组、空载体组、对照组分别为0.28±0.01、1.01±0.06、1.00±0.08;实验组低于空载体组和对照组(P<0.05),但空载体组与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。AI:实验组、空载体组、对照组分别为32.86±3.72、5.46±0.68、5.26±0.17;实验组高于空载体组和对照组(P<0.05),但空载体组与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。GRP78、IRE1、TRAF2、ASK1、p-ASK1、JNK及p-JNK蛋白相对表达量:实验组高于空载体组和对照组(P均<0.05),但空载体组与对照组比较无统计学差异(P均>0.05)。结论沉默Calnexin可引发内质网应激并激活JNK细胞凋亡通路,进而促进肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞凋亡。 展开更多
关键词 肾母细胞瘤 钙连蛋白 细胞凋亡 内质网应激 JNK信号通路
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缺氧对脑脊液-视神经屏障中脑膜上皮细胞内质网和线粒体膜电位的影响 被引量:3
14
作者 辛晓蓉 巩天祥 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第11期1009-1012,共4页
目的探讨脑膜上皮细胞(meningothelial cells,MECs)参与视神经疾病的发病机理,研究缺氧对MECs功能变化的影响。方法将培养的MECs分别在体积分数21%O2(对照组)和体积分数1%O2(缺氧组)环境下孵育1 d和2 d,采用酶联免疫吸附实验测定和比较M... 目的探讨脑膜上皮细胞(meningothelial cells,MECs)参与视神经疾病的发病机理,研究缺氧对MECs功能变化的影响。方法将培养的MECs分别在体积分数21%O2(对照组)和体积分数1%O2(缺氧组)环境下孵育1 d和2 d,采用酶联免疫吸附实验测定和比较MECs的总抗氧化能力(total anti-oxidative capacity,T-AOC);采用MitoTracker Red检测和比较MECs在正常氧和缺氧环境下作用2 d的线粒体膜电位的变化;通过测定钙联蛋白的荧光染色,以评价MECs暴露于氧化应激环境后对内质网功能的影响。结果与对照组相比,缺氧组的氧化应激能力降低,结果显示T-AOC下降。对照组和缺氧组细胞分别培养1 d后,细胞中T-AOC分别为(0.012 4+0.001 1)U·L-1和(0.011 9+0.009 0)U·L-1,差异无统计学意义(t=0.915、P=0.382)。分别培养2 d后,缺氧组细胞中T-AOC(0.010 7+0.008 3)U·L-1低于对照组(0.012 9+0.008 7)U·L-1,差异有统计学意义(t=4.616、P=0.001)。不同氧环境作用于细胞2 d后,采用共焦显微镜荧光探针方法分析作用于对照组和缺氧组的MECs线粒体膜电位的变化,结果发现缺氧组细胞荧光强度与对照组相比明显减低;同时通过荧光显微镜观察发现,缺氧组MECs钙联蛋白绿色荧光强度较对照组明显增强。结论缺氧通过影响MECs内质网及线粒体功能而影响其氧化应激能力。 展开更多
关键词 缺氧 脑膜上皮细胞 内质网 线粒体膜电位 钙联蛋白 脑脊液-视神经屏障
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通过对免疫共沉淀技术的优化验证蛋白质弱相互作用 被引量:3
15
作者 冯晓琴 徐峰 +1 位作者 王嵬 刘利新 《中国科学院研究生院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期18-23,共6页
采用单因子法对影响免疫共沉淀结果的各因素进行优化.以hCLP46(humanCAP10-like protein46)蛋白和内质网分子伴侣calnexin为例,对相互作用开展研究.通过对细胞裂解液各组分浓度、抗体用量、hCLP46的蛋白量和交联剂DSP因素的优化,验证了h... 采用单因子法对影响免疫共沉淀结果的各因素进行优化.以hCLP46(humanCAP10-like protein46)蛋白和内质网分子伴侣calnexin为例,对相互作用开展研究.通过对细胞裂解液各组分浓度、抗体用量、hCLP46的蛋白量和交联剂DSP因素的优化,验证了hCLP46(human CAP10-like protein46)蛋白和内质网分子伴侣calnexin间的弱相互作用.研究结果为探讨蛋白质之间弱相互作用提供一定的参考价值. 展开更多
关键词 免疫共沉淀 hCLP46 calnexin 影响因素 蛋白质相互作用
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蛋白酶体抑制剂ALLN对HERG-A561V蛋白转运异常的影响
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作者 郑梅霞 廉姜芳 《现代实用医学》 2019年第5期604-606,709,共3页
目的研究蛋白酶体抑制剂ALLN对hERG-A561V突变蛋白转运异常的影响,并观察分子伴侣Calnexin(CNX)/Calreticulin(CRT)在此过程中的作用。方法瞬时转染pcDNA3-WT-hERG、pc DNA3-A561V-hERG、pc DNA3-WT/A561V-hERG、pc DNA3-L539fs/47-hERG... 目的研究蛋白酶体抑制剂ALLN对hERG-A561V突变蛋白转运异常的影响,并观察分子伴侣Calnexin(CNX)/Calreticulin(CRT)在此过程中的作用。方法瞬时转染pcDNA3-WT-hERG、pc DNA3-A561V-hERG、pc DNA3-WT/A561V-hERG、pc DNA3-L539fs/47-hERG、pcDNA3-WT/L539fs/47-hERG致HEK-293T细胞分别构建野生、突变和杂合型细胞模型;蛋白酶体抑制剂ALLN以10 mol/L的浓度孵育各组细胞模型24 h;运用免疫荧光检测ALLN干预前后h ERG蛋白在细胞内的分布情况,免疫共沉淀检测ALLN干预前后hERG蛋白与Calnexin/Calreticulin的结合情况。结果通过免疫荧光实验发现ALLN干预h ERG-A561V突变及杂合细胞模型后,胞浆及细胞膜均可见h ERG表达较干预前增加,而干预野生型h ERG和hERG-L539fs/47细胞24 h后,h ERG蛋白分布无明显变化。通过免疫共沉淀实验,发现相较野生型h ERG,分子伴侣Calnexin/Calreticulin与h ERG-A561V结合明显增多;ALLN干预各组模型24 h后Calnexin/Calreticulin表达增多,且h ERG-A561V突变及杂合组细胞模型h ERG蛋白与Calnexin/Calreticulin结合,相较野生hERG及h ERG-L539fs/47组明显增多。结论ALLN纠正了h ERG-A561V突变蛋白的转运障碍,临床有潜在治疗因基因突变致蛋白转运异常所致长QT综合征的可能性,且内质网分子伴侣Calnexin/Calreticulin可能在其中发挥重要作用。 展开更多
关键词 蛋白酶体抑制剂 ALLN hERG-A561V 蛋白质转运异常 分子伴侣calnexin/Calreticulin
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水分胁迫下枣裂果的全长转录组分析 被引量:3
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作者 魏薇 贾彦丽 +1 位作者 吴硕 智福军 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2020年第S01期63-71,共9页
为了从转录本水平阐明水分胁迫下的枣裂果的分子机制,以5 a生金丝新4号品种为试验材料进行50 h的喷淋,模拟水分胁迫,处理结束后对喷淋前后的样品在ONT平台进行3代全长转录组测序。6个样品共获得13368条转录本序列,APA事件中鉴定到9178个... 为了从转录本水平阐明水分胁迫下的枣裂果的分子机制,以5 a生金丝新4号品种为试验材料进行50 h的喷淋,模拟水分胁迫,处理结束后对喷淋前后的样品在ONT平台进行3代全长转录组测序。6个样品共获得13368条转录本序列,APA事件中鉴定到9178个PolyA位点,并找到78个显著富集的PolyA信号(PAS)motif,预测到7321个SSR和114个lncRNA;对照组和处理组分别鉴定到239,189个可变剪接事件;差异分析共得到248个差异转录本,参与的主要转录本包括钙网蛋白、钙联蛋白、热激蛋白、微管蛋白、果糖激酶等。GO富集显示,差异转录本主要参与了翻译、有丝分裂、冷适应等生物学过程,相应地细胞组分为细胞质和核糖体,富集的分子功能为核糖体成分、木葡糖基转移酶活性等;通过KEGG富集分析发现,上调表达的转录本主要参与了内质网蛋白加工、吞噬体、氨基糖与核糖代谢以及淀粉和蔗糖代谢通路;下调转录本主要参与了内质网蛋白加工、氮代谢和光合作用-天线蛋白通路等过程。差异转录本编码的蛋白之间存在复杂的互作网络。水分胁迫下的裂果机制可能包括可变剪接事件的减少、钙网蛋白和钙调蛋白对钙离子的调节、持续喷淋后冷应激造成热激蛋白上调及细胞壁组分合成相关基因的上调等。 展开更多
关键词 裂果 水分胁迫 全长转录组 钙网蛋白 热激蛋白
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植物钙联蛋白与钙网蛋白的研究进展 被引量:4
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作者 孙旭红 周焕斌 +1 位作者 王道文 张坤普 《中国农学通报》 2018年第9期48-52,共5页
钙联蛋白与钙网蛋白是真核生物中重要的功能蛋白,其功能在哺乳动物中的研究已较为深入,但在植物中缺乏系统的遗传研究。本研究通过对比动植物钙联蛋白与钙网蛋白的异同,归纳了植物钙联蛋白与钙网蛋白的结构与生物学功能;总结了植物钙联... 钙联蛋白与钙网蛋白是真核生物中重要的功能蛋白,其功能在哺乳动物中的研究已较为深入,但在植物中缺乏系统的遗传研究。本研究通过对比动植物钙联蛋白与钙网蛋白的异同,归纳了植物钙联蛋白与钙网蛋白的结构与生物学功能;总结了植物钙联蛋白与钙网蛋白的研究现状;结合前人的研究结果及最新生物技术的应用,对今后植物钙联蛋白与钙网蛋白的相关研究做出展望。 展开更多
关键词 钙联蛋白 钙网蛋白 生长发育 抗逆性 高等植物
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Exendin-4对人脐静脉内皮细胞内质网应激损伤的拮抗作用 被引量:1
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作者 胡小春 刘浩宇 +2 位作者 覃数 张冬颖 刘剑 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第17期1827-1830,共4页
目的研究exendin-4(Ex-4)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)内质网应激相关凋亡的拮抗作用。方法 RPMI1640培养基培养HUVECs,待细胞长到培养瓶底部80%左右后,分4组干预细胞,每组8瓶,共32瓶。实验分组... 目的研究exendin-4(Ex-4)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)内质网应激相关凋亡的拮抗作用。方法 RPMI1640培养基培养HUVECs,待细胞长到培养瓶底部80%左右后,分4组干预细胞,每组8瓶,共32瓶。实验分组:①正常对照组(n=8):不做任何处理;②Ex-4组(n=8):(Ex-4,8μg/mL,45 min);③EPBS组(n=8):(EPBS,100μL/mL,30 min);④双药组(n=8):Ex-4预处理(8μg/mL,45 min),后加EPBS(100μL/mL,30 min)。免疫荧光法检测确认HUVECs上存在胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R);内源性过氧化氢酶抑制物(endogenous peroxidase blocking solution;EPBS)诱导HUVECs的凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡率变化;加入Ex-4预处理后,观察EPBS诱导HUVECs凋亡率的变化。Western blot检测细胞Calnexin、(C/EBP homologous protein,CHOP)和Bax表达情况,探讨内质网应激相关凋亡的机制。结果①HUVECs上有GLP-1受体表达;②与正常对照组相比,EPBS组HUVECs的凋亡率显著增加[(52.27±3.66)%vs(7.25±0.62)%,P<0.01)];与EPBS组比较,Ex-4的预处理可明显降低EPBS诱导的HUVECs凋亡[(37.77±2.86)%vs(52.27±3.66)%,P<0.01)]。与正常对照组相比,EPBS能增加Calnexin[(1.76±0.16)vs(1.00±0.05),P<0.01]、CHOP[(4.58±0.32)vs(1.00±0.12),P<0.01]和Bax[(2.25±0.10)vs(1.00±0.06),P<0.01]的表达;与EPBS组比较,Ex-4的预处理可显著降低Calnexin[(0.42±0.05)vs(1.76±0.16),P<0.01]、CHOP[(0.64±0.10)vs(1.65±0.12),P<0.01]和Bax[(1.48±0.08)vs(2.25±0.10),P<0.01)]的表达。结论 Ex-4对EPBS诱导的HUVECs凋亡有明显抑制作用,其抑制作用可能与EX-4减少内质网应激相关蛋白Calnexin、CHOP和Bax相关。 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞 内质网应激 钙联蛋白 艾塞那肽 细胞凋亡
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CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白与钙联蛋白在内侧颞叶癫痫模型小鼠海马中的表达 被引量:1
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作者 沙志强 沙龙泽 许琪 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期265-270,共6页
目的观察CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及钙联蛋白(CNX)在内侧颞叶癫痫小鼠海马区域中表达的时间和空间分布。方法采用海人酸(KA)诱导内侧颞叶癫痫小鼠模型,免疫印迹和免疫荧光技术检测CHOP和CNX在急性期(12、24 h)小鼠海马CA3区... 目的观察CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及钙联蛋白(CNX)在内侧颞叶癫痫小鼠海马区域中表达的时间和空间分布。方法采用海人酸(KA)诱导内侧颞叶癫痫小鼠模型,免疫印迹和免疫荧光技术检测CHOP和CNX在急性期(12、24 h)小鼠海马CA3区的表达量及分布差异,并与注射PBS的正常小鼠进行对照。结果免疫印迹检测结果显示,KA注射后12 h小鼠海马中的CHOP(F=1.136,P=0.4069)和CNX表达量(F=2.378,P=0.2087)与对照组差异没有统计学意义,KA注射后24 h注射侧海马中的CHOP(F=8.510,P=0.0362)和CNX表达量(F=6.968,P=0.0497)明显高于对照组。免疫荧光结果显示,KA注射后12 h CHOP的表达主要集中于CA3区,注射后24 h在CA1和CA3区表达水平均升高;KA注射后24 h CHOP蛋白(F=24.480,P=0.0057)和CNX蛋白(F=7.149,P=0.0478)的表达量显著高于对照组。结论伴随着癫痫发作的产生,CHOP蛋白表达量上升,提示神经元内质网应激水平不断增加,可能需要更多CNX作为分子伴侣帮助更多未折叠蛋白完成折叠过程。 展开更多
关键词 内侧颞叶癫痫 内质网应激 CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白 钙联蛋白
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