14种桉树基因型对叶焦枯病病原菌抗病性研究

由丽赤壳属真菌引起的叶焦枯病是我国桉树人工林重要病害,选育抗病品种是防控该病害的重要途径之一。本研究将引起桉树叶焦枯病的3种丽赤壳属病原菌,通过孢子悬浮液(浓度为5×10^(4) conidia•mL^(‒1))喷雾接种法接种至14个桉树基因型苗木,通过比较感病指数来评估不同桉树基因型的抗病性。结果表明:不同丽赤壳属病原菌物种对同一桉树基因型的致病力存在差异,不同桉树基因型对丽赤壳属病原菌的抗病性差异达显著水平,其中桉树基因型GZ-1的抗病性最强。本研究结果拟为桉树人工林抗病基因型的选择提供一定的理论指导。

桉树焦枯病菌ABC转运蛋白的鉴定与分析

[目的]利用生物信息学方法探讨ABC转运蛋白在焦枯病菌对桉树侵染过程中的解毒作用,为揭示桉树焦枯病致病机制奠定基础。[方法]本文利用BLAST、HMMER、Pfam数据库、TCDB数据库在全基因组内对桉树焦枯病菌的ABC转运蛋白进行鉴定和分类,并通过Prot Camp和IBS分别进行亚细胞定位和结构域图绘制,依据同源性对其功能进行推测分析。[结果]表明:桉树焦枯病菌共有70个ABC转运蛋白,它们分属于8个亚族。71%的转运蛋白位于细胞膜,10%位于液泡,其余部分位于线粒体、过氧化物酶体、内质网等内膜系统上。桉树焦枯病菌ABC转运蛋白包含全分子、四分之三分子、半分子及四分之一分子。根据同源性推测桉树焦枯病菌ABC转运蛋白与MDR、PDR、HMT、MPE、STE、P-FAT等几种转运蛋白具有较高相似性,同时还与核糖体合成、翻译、过氧化物酶体合成的ABC转运蛋白具有较高相似性。[结论]桉树焦枯病菌ABC转运蛋白除作为外排泵转运外源化学物质、疏水性化学分子等物质。还参与细胞代谢、翻译、核糖体的合成、mRNA的输出、β氧化,并通过为辅酶Q的辅助因子增强呼吸代谢等多项生命活动为焦枯病菌的侵染提供能量。

桉树叶片内生真菌多样性及抗桉树焦枯病菌筛选

采用组织分离法从福建省5个地区的桉树叶片中获得87株内生真菌,鉴定为7目及2个未定目,含15属及1个未定属,20种和1个未定种;其中Pseudoplagiostoma eucalypti菌株数量占总数的0.32,为优势种类。龙岩采样点桉树叶片内生真菌辛普森多样性指数为0.92,福州采样点的桉树内生菌香农-威纳指数为2.13,分别高于其它4个地点。经筛选,发现87株内生真菌中,哈茨木霉(Trichoderma harzianum)ND-13的菌丝能够覆盖桉树焦枯病菌(Calonectria pseudoreteaudii)菌落并抑制其生长;显微观察显示,ND-13菌丝缠绕病原菌菌丝;检测发现ND-13不产生几丁质酶,但产生β-葡聚糖酶。研究结果显示桉树叶片内生真菌种类丰富;ND-13具有防治桉树焦枯病的潜力,表明从桉树内生真菌中筛选抗桉树焦枯病菌是可行的。

中国桉树焦枯病病原菌物种多样性及致病力初步分析

为了明确中国桉树焦枯病病原菌的物种多样性、生物学特性和致病力强弱，本试验对在中国报道的桉树焦枯病病原菌进行了形态学比较，β-tubulin、HistoneH3、TEF-1α三段基因系统发育学分析，并测定各病原菌在7个温度下的菌落生长速度，以及对4个桉树无性系（DH32—29、广州1号、广林4号、OC14）离体叶片的致病力大小。结果表明．到目前为止我国桉树焦枯病病原菌分属6个不同的物种，分别是Ca．cerciana、Ca.crousiani、Ca.pauciramoso、Ca.pseudocolhounii、Ca.pseudoreteaudii和Ca.fujianensis。不同病原菌的形态存在一定差异．病原菌分属于不同的系统发育树分枝。被测试病原菌的最适生长温度为20～30℃，在5℃和35℃下均停止生长。被测试的5种桉树焦枯病病原菌在4个桉树无性系上的致病力差异显著，总体致病力强弱顺序为：Ca.cerciana〉Ca.pauciromosa〉Ca．pseudoreteaudii〉Ca．crousiana〉Ca.fujianensis。桉树无性系对不同种桉树焦枯病病原菌的抗性存在显著差异。研究结果显示桉树焦枯病病原菌物种存在多样性，各病原菌的致病性差异显著．有针对性地选择抗特定病原物种的桉树无性系是解决桉树焦枯病危害的一条有效途径。

12种桉树焦枯病病原菌对10种桉树无性系致病性初步分析

为了明确在中国发现的桉树叶片焦枯病病原菌Calonectria spp.对桉树的致病力大小,并测定不同桉树无性系对Calonectria病原菌抗病性的强弱,本试验采用在中国发现的12种Calonectria属(Ca.cerciana、Ca.chinensis、Ca.hongkongensis、Ca.microconidialis、Ca.papillata、Ca.parakyotensis、Ca.pauciramosa、Ca.pentaseptata、Ca.pseudoreteaudii、Ca.seminaria、Ca.terrestris、Ca.tetraramosa)共29株致病菌对10个桉树无性系(DH32-22、DH32-29、EC152、EC153、EC155、G1、K31、OC14、U6、W5)进行了室内离体叶片致病性测定。结果显示:12种被测试Calonectria病原菌均能在不同程度上使10个桉树无性系离体叶片产生病斑;不同种Calnectria病原菌对同一桉树无性系的致病性差异显著,不同桉树无性系对同种Calonectria致病菌的抗病能力也存在显著差异。

6种杀菌剂对不同桉树焦枯病病原菌的室内毒力测定

由丽赤壳属(Calonectria)真菌引起的桉树焦枯病是桉树世界范围内的重要病害之一。为了筛选能有效抑制丽赤壳属病原菌的杀菌剂,本研究采用6种杀菌剂(百菌清、代森锰锌、多菌灵、甲基硫菌灵、嘧菌酯、咪鲜胺)对5种桉树丽赤壳属病原菌(Ca.cerciana、Ca.crousiana、Ca.fujianensis、Ca.pauciramosa、Ca.pseudoreteaudii)通过菌丝生长法测定其室内毒力强弱。结果显示:6种杀菌剂对5种丽赤壳属病原菌均有一定的抑制作用,且差异显著。不同杀菌剂对同一丽赤壳属病原菌的抑制效果差异显著,不同丽赤壳属病原菌对同一杀菌剂的敏感性也存在差异。综合比较分析,咪鲜胺能有效发地抑制本研究中测定的丽赤壳属病原菌菌丝生长。