Calpain10基因多态性与昆明地区人群2型糖尿病相关性研究

目的探讨Calpain10基因多态性与昆明地区人群2型糖尿病遗传易感性的关系。方法采用病例鄄对照研究设计,以聚合酶链式反应鄄等位基因特异性扩增法(PCR鄄ASA),检测Calpain10基因单核苷酸多态性(SNP)43G/A位点和SNP44T/C位点基因型,并进行关联分析。结果对131例2型糖尿病患者和131例正常对照进行了Calpain10基因SNP43和SNP44基因分型,与对照组相比,SNP43的G等位基因频率和SNP44的C等位基因频率在昆明地区2型糖尿病人群中显著升高(分别为93.13%,86.26%,P=0.0097;18.70%,9.92%,P=0.004)。结论Calpain10基因SNP43位点G等位基因和SNP44位点C等位基因可能与昆明地区人群2型糖尿病的发病相关。

Calpain10基因多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的:探讨钙蛋白酶10(Calpain10)基因第3内含子SNP19多态性在湖北汉族人群2型糖尿病发生发展中的作用。方法:采用同胞对(家系内对照)和随机病例-时照两种实验设计,结合聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术分析共403个样本的Calpain10基因第3内含子SNP19多态性,并测定身高、体重、腰围、臀围、血压和空腹血糖等生理指标。结果:两种实验设计中对照组与病例组的基因型和基因频率均无显著差异(p 0．05)。结论:Calpain10基因SNP19多态性在湖北汉族人群2型糖尿病的发生发展中可能不起主要作用。

昆明地区2型糖尿病Calpain10基因与环境危险因素病例对照研究

目的研究Calpain10基因多态性与环境危险因素的交互作用及与2型糖尿病发病的关系。方法选取131例2型糖尿病患者和131例健康对照,进行流行病学调查,检测Calpain10基因SNP43G/A位点和SNP44T/C位点基因型,分析主要环境危险因素和基因的交互作用。结果①与对照组相比,Calpain10基因SNP43GG基因型和SNP44TC基因型在2型糖尿病人群中显著升高(P<0.01)。②Calpain10基因SNP44位点基因变异、超重肥胖、胰岛素抵抗、高血脂、不良生活事件、喜食甜食是2型糖尿病的主要危险因素;体育锻炼、食用植物油和新鲜蔬菜是2型糖尿病的保护因素。③Calpain10基因SNP44T/C多态性与肥胖有明显的协同作用与胰岛素抵抗也存在协同作用。结论Calpain10基因变异与昆明地区人群2型糖尿病遗传易感性有关,其SNP44位点基因变异与肥胖和胰岛素抵抗在2型糖尿病发病中存在明显的协同作用。

Calpain10基因多态性与超重肥胖、胰岛素抵抗的相关性研究

目的:探讨昆明地区2型糖尿病(T2DM)钙蛋白酶10基因(Calpain10基因)的多态性(SNP)与超重肥胖、胰岛素抵抗(IR)的关系.方法:选取昆明市城市社区居民非超重肥胖者111名及超重肥胖者151名.检测空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、C肽(C-P)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).应用聚合酶链式反应双引物等位基因特异性扩增法(PCR-ASA)检测Calpain10基因SNP43位点(G/A)及SNP44位点(T/C)基因型.结果:(1)GG基因型频率随着BMI值的增大呈逐渐增加的趋势,但各组基因型频率间无显著性差异(P>0.05);(2)BMI>28.00组的TC基因型频率显著高于其余各组(P<0.05);(3)GG基因型组中,WHR≥0.90者的FPG、FINS、C-P水平及HOMA-IR均显著高于WHR<0.90者(P<0.05);(4)TT基因型组中,WHR≥0.90者的FPG、FINS、C-P水平及HOMA-IR均显著高于WHR<0.90者(P<0.05).结论:昆明地区人群中Calpain10基因SNP44的多态性与肥胖有关,同为TT基因型者中具有中心性肥胖者存在明显的胰岛素抵抗现象.SNP43的多态性与肥胖无关,但同为SNP43GG基因型者中具有中心性肥胖者存在明显的胰岛素抵抗现象.

昆明地区人群Calpain10基因SNP44变异与2型糖尿病遗传易感性的关联研究

目的探讨昆明地区人群Calpain10基因SNP44多态性与2型糖尿病遗传易感性的关系.方法采用1∶1病例对照研究方法,选取131例2型糖尿病患者和131例正常对照,以聚合酶链式反应-等位基因特异性扩增法(PCR-ASA),检测Calpain10基因SNP44T/C位点基因型,并进行关联分析.结果与正常对照组相比较,UCSNP44的C等位基因频率和TC基因型频率在2型糖尿病人群中显著升高,分别为18.7%及9.9%(χ2=8.232,P=0.004),37.4%和19.8%(χ2=9.882,P=0.002).结论Calpain10基因的SNP44变异与昆明地区人群2型糖尿病的遗传易感性相关.

Calpain10基因多态性与中国人2型糖尿病遗传易感性的相关性研究

目的 了解 Calpain 10基因对中国汉族人 2型糖尿病遗传易感性的影响。方法 采用病例对照研究方法 ;以聚合酶链式反应 -限制性内切酶长度多态性 (PCR- RFL P)技术 ,对 2 11例 2型糖尿病患者及 12 7例正常对照 Calpain10基因 SNP4 3及 SNP19多态性进行基因分型。结果 同对照组相比 ,SNP4 3的 G等位基因频率在 2型糖尿病人群中显著升高 (91.9% vs 85 .8% ,P=0 .0 1)。但 SNP19位点等位基因频率在上述两组中的频率分布无显著差异。此外 ,本研究还观察到在正常对照组中 ,SNP4 3GG基因型与体重指数和腰 -臀围比值增加相关。结论 Calpain 10基因 SNP4 3位点 G等位基因可直接或与其他糖尿病基因相互作用决定汉族人

白细胞介素10受体A基因突变导致的极早发型炎症性肠病临床特点及基因分析

目的总结白细胞介素10受体A(interleukin 10 receptor A,IL-10RA)基因突变导致的极早发型炎症性肠病(very early onset inflammatory bowel disease,VEO-IBD)患儿临床特点和遗传学特征。方法回顾性分析2007年3月到2019年5月在首都医科大学附属北京儿童医院院消化科住院的慢性腹泻的患儿中,确诊为VEO-IBD的患儿,其中病因为IL-10RA基因突变的患儿15例,对照组为15例非IL-10RA突变所致VEO-IBD患儿,统计分析其临床特点及基因报告。结果IL-10RA基因突变所致的VEO-IBD患儿,克罗恩病(Crohn s disease,CD)11例,溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)4例,临床症状以慢性腹泻(15/15例,100.0%)、便血(15/15例,100.0%)为主,肠外表现依次为口腔黏膜溃疡(6/15例,40.0%)、皮肤红斑(5/15例,33.3%);肛周表现依次为直肠会阴瘘5例(5/15,33.3%),肛瘘4例(4/15,26.7%),肛裂3例(3/15,20.0%),直肠会阴瘘、皮赘并存1例(1/15,6.7%);全身表现为IL-10RA基因突变组营养不良13例(13/15例,86.7%),肛周病变13例(13/15例,86.7%);对照组营养不良6例(6/15例,40.0%),肛周病变5例(5/15例,33.3%),此两项指标与IL-10RA基因突变组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。15例IL-10RA突变患儿中,共检测到9个突变位点,其中c.301c>T(p.R101W)和c.537G>A(p.T179T)为最常见的突变位点。IL-10RA突变导致炎症因子增高,引起肠道炎症反应。凝血酶原时间和部分凝血活酶时间均明显延长。结论IL-10RA基因突变导致的VEO-IBD患儿发病年龄早,除消化道症状外,肠外表现和肛周病变较为常见,结肠镜下病变特点以结肠多发溃疡最常见,其次为炎性息肉。c.301c>T(p.R101W)和c.537G>A(p.T179T)为最常见的基因突变位点。IL-10RA突变导致炎症因子增高,引起肠道炎症反应。

IL-1、IL-1β、IL-6、IL-10基因多态性与糖尿病性牙周炎发生的关系分析

目的分析白介素-1(IL-1)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)基因多态性与糖尿病性牙周炎发生的关系。方法选取2021年6月至2022年6月石家庄市第二医院口腔科收治的糖尿病性牙周炎患者60例(观察组)及同期接受口腔检查健康人群60名(对照组)为研究对象,比较两组血清、龈沟液IL-1、IL-1β、IL-6、IL-10表达水平,检测全血DNA中IL-1、IL-1β、IL-6、IL-10基因多态性,分析其与糖尿病性牙周炎易感性的关系。结果观察组血清、龈沟液中IL-1、IL-1β、IL-6、IL-10水平明显高于对照组(t=31.987、28.911、14.201、16.562、21.315、19.146、-45.554、-57.942,P<0.05),各组龈沟液中IL-1、IL-1β、IL-6、IL-10水平明显高于血清中表达,差异有统计学意义(t=-4.080、-10.316、-10.686、10.713;t=-9.567、-6.422、-9.904、3.944,P<0.05)。观察组IL-1基因rs7413228、IL-1β基因rs2356789、IL-6基因rs5357964、IL-10基因rs4543211位点与糖尿病性牙周炎发生相关(P<0.05)。IL-1基因rs7413228位点等位基因T、IL-1β基因rs2356789位点等位基因T、IL-10基因rs4543211位点等位基因G分布频率与糖尿病性牙周炎发生相关(P<0.05)。IL-1基因rs7413228、IL-1β基因rs2356789、IL-6基因rs5357964、IL-10基因rs4543211位点多态性是糖尿病性牙周炎发生的独立影响因素(P<0.05)。结论IL-1、IL-1β、IL-6、IL-10基因多态性与糖尿病性牙周炎易感性相关,临床可通过检验患者基因多态性评估糖尿病性牙周炎发生风险。

鸡HOXC10基因多态性与背羽性状的关联性研究

试验旨在研究HOXC10基因多态性与清远麻鸡背羽性状的关联性,为适宜优质肉鸡的品种选育提供理论资料。试验以208只清远麻鸡作为研究对象,测定其99日龄时背羽的性状指标,包括背羽长度、重量、羽根长度和羽根直径,利用直接测序法检测HOXC基因第二内含子的单核苷酸多态性(SNP)。结果显示:共筛选出6个SNPs,分别为SNP1(g.865129G>C)、SNP2(g.865204G>T)、SNP3(g.865226C>T)、SNP4(g.866122T>A)、SNP5(g.826133A>G)、SNP6(g.866270C>T)。将不同位点SNPs的基因型与背羽性状进行关联分析发现,SNP1与背羽羽根长度极显著相关(P<0.01),SNP2与背羽羽根长度显著相关(P<0.05),SNP3与背羽羽根直径极显著相关(P<0.01)。研究表明,清远麻鸡HOXC10基因的单核苷酸多态性对背羽性状有显著相关性,可作为鸡背羽性状选育的分子标记。

柯乐猪KRT10基因多态性及其与繁殖性状的关联分析

【目的】研究角蛋白10(keratin 10,KRT10)基因多态性对柯乐猪繁殖性状的影响,以提高柯乐猪的繁殖力。【方法】以255头柯乐猪为研究对象,采用PCR产物测序、DANMAN序列比对软件及人工校对相结合的方法鉴定KRT10基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)位点,利用SHEsis在线软件分析SNP位点的群体遗传特性,通过RNAfold在线工具对SNP位点进行生物信息学分析,使用SPSS 22.0软件中的一般线性模型分析KRT10基因SNP位点与柯乐猪繁殖性状的关联性。【结果】在柯乐猪KRT10基因中共鉴定到3个SNPs位点:第4内含子的g.21643703 C>T和g.21643714 G>A;第5外显子的g.21643741 G>A。g.21643741 G>A突变导致密码子由AAG突变为AAA,编码氨基酸均为赖氨酸(K),为同义突变,引起编码的mRNA二级结构发生改变。3个SNPs位点均检测到3种基因型,g.21643703 C>T和g.21643741 G>A属于中度多态位点(0.25A)属于低度多态位点(PIC<0.25)。g.21643703 C>T和g.21643741 G>A位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),g.21643714 G>A位点显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05);3个SNPs位点间均不存在强连锁不平衡。KRT10基因3个SNPs位点共产生4种单倍型和10种双倍型。关联分析结果表明,g.21643703 C>T位点对柯乐猪初生窝重、断奶仔数和断奶窝重的影响均达到显著水平(P<0.05);g.21643714 G>A位点对柯乐猪总产仔数和断奶窝重的影响均达到显著水平(P<0.05);g.21643741 G>A位点对柯乐猪总产仔数、产活仔数、断奶仔数和断奶窝重的影响均达到显著水平(P<0.05)。双倍型H3H3对柯乐猪总产仔数、产活仔数、断奶仔数和断奶窝重的影响最明显。【结论】KRT10基因中存在的3个SNPs位点对柯乐猪繁殖性状有显著影响,其中H3H3为有利双倍型,可作为柯乐猪繁殖性状选择的遗传标记。

2型糖尿病家系Calpain10基因多态性的研究

目的 研究中国北方 2型糖尿病家系的Calpain10基因多态性 ,探讨其与 2型糖尿病发病的关系。方法 应用聚合酶链式反应 限制性内切酶长度多态性 (PCR RFLP)技术 ,对来自于 2 18个2型糖尿病家系中的 80 1个家系成员 ,2 11例无家族史的 2型糖尿病患者及 12 7例正常对照的Calpain10基因SNP4 3(G/A)及SNP19(1/2 )位点进行基因分型。结果 (1)SNP4 3位点G等位基因频率在无家族史的 2型糖尿病人群 (组 1)为 91 9% ,在 2型糖尿病家系先证者人群 (组 2 )为 92 7%、经连锁分析证实有连锁的 2型糖尿病家系先证者人群 (组 3)为 95 3% ,均高于正常对照组的 85 8%。统计学检验结果分别为 χ2 =6 39,df =1,P =0 0 11;χ2 =8 4 37,df=1,P <0 0 1;χ2 =16 4 9,df =1,P <0 0 1。但SNP19位点等位基因频率差异无显著意义。 (2 )Logistic回归分析 ,经性别、年龄和体重指数调整 ,提示SNP4 3G/G基因型与 2型糖尿病相关。 1、2、3病例组与对照组的回归分析结果分别为OR=1 78,P =0 0 4 5 ;OR =2 5 3,P =0 0 0 8;OR =4 32 ,P =0 0 0 0。结论 Calpain 10基因SNP4 3位点与 2型糖尿病相关 ,Calpain10基因可能为中国人 2型糖尿病的相关基因。

甘蔗ScPR10基因的克隆及其响应赤条病菌侵染的表达特征分析

PR10是一种病程相关蛋白(pathogenesis-related protein,PR),在植物生长发育、应激生物和非生物胁迫时发挥重要作用。本研究利用RT-PCR技术从甘蔗赤条病抗病品种新台糖22号和感病品种闽糖11-610叶片克隆获得ScPR10基因,并利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、转录组和蛋白质组分析,研究在接种燕麦食酸菌燕麦亚种(Acidovorax avenae subsp.avenae,Aaa)之后这2个品种ScPR10基因的转录和蛋白表达模式。序列分析显示,本研究克隆获得2个ScPR10基因,编码187个氨基酸,比其他植物PR10蛋白多了27个氨基酸,含有保守结构域P-loop和Bet v 1;与已报道的甘蔗、高粱和斑茅的PR10亲缘关系较近。在Aaa胁迫下,RT-qPCR分析表明抗病、感病品种ScPR10基因的表达量均显著上调,尤其在接种24 h时,表达量最高,分别为对照的27.2倍和39.7倍;转录组数据分析结果显示,该基因表达水平在抗病、感病品种上均显著提高,尤其在接种72 h时,表达量最高,log2 FC值为5.3~5.4。蛋白互作预测发现,ScPR10与植物PDR型ABCG转运蛋白(Cluster-13677.282407)、蛋白激酶(Cluster-13677.166559)之间存在互作关系。蛋白质组数据分析显示,在Aaa接种24 h时,抗病、感病品种ScPR10均为上调表达,log2FC值为1.65~1.69;与ScPR10互作的PDR型ABCG转运蛋白成员的表达量在抗病、感病品种上有不同程度提高;蛋白激酶表达量在感病品种上有显著提高,但是,在抗病品种上表达量没有显著变化。本研究结果表明,ScPR10可能与PDR型ABCG转运蛋白正向协同参与甘蔗寄主应答Aaa病菌侵染的防御响应。

TLR10基因多态性与HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者PEG-IFNα治疗临床转归的相关性分析

目的:探讨分析TLR10基因多态性与HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者聚乙二醇化干扰素α(PEG-IFNα)治疗临床归转的相关性。方法:选取2019年8月至2020年8月收治的92例HBeAg阳性CHB患者,均予以PEG-IFNα进行治疗,6个月后根据HBeAg、HBeAb情况将患者分为应答组44例和非应答组48例。提取全血基因组DNA,测定TLR10基因多态性点位(RS10004195位点和RS11096957位点),分析其不同点位基因型和等位基因分布与乙型肝炎病毒感染的关系,进而探讨TLR10基因多态性与临床转归的相关性。结果:TLR10基因RS10004195位点基因型中,应答组AA+AT型基因分布频率为77.27%显著高于非应答组的52.08%,A等位基因频率65.91%显著高于非应答组的41.67%,差异有统计学意义(P<0.05);TLR10基因RS11096957位点基因型中,应答组AC+AA型基因分布频率为70.45%,与非应答组的62.50%差异无统计学意义(P>0.05),应答组A等位基因频率为61.36%显著高于非应答组的39.58%,差异有统计学意义(P<0.05);TLR10基因RS10004195位点中,A型基因、A等位基因频率和RS11096957位点中A等位基因频率是HBeAg阳性CHB患者PEG-IFNα治疗临床转归的独立危险因素(OR>1,P<0.05)。结论:TLR10基因RS10004195位点A型基因携带、A等位基因频率,RS11096957位点A等位基因频率是HBeAg阳性CHB患者PEG-IFNα治疗临床转归的独立危险因素,对CHB患者治疗应答反应具有较好评估作用,可为临床治疗提供指导依据。

Calpain10基因多态性与维吾尔族2型糖尿病患者亲级关系的研究

目的分析Calpain10基因UCSNP43和UCSNP44位点多态性与新疆维吾尔族2型糖尿病家系中不同亲级的相关性。方法以新疆62个维吾尔族2型糖尿病核心家系为样本，采用PPAP（population and pedigree analysis programs）统计软件和Penrose法来研究其遗传方式；将75个新疆维吾尔族2型糖尿病家系一级亲和二级亲成员481人做两组比较分析，采用基因芯片方法检测UCSNP43和UCSNP44位点多态性，应用SPSS13．0统计软件分析Calpain10基因多态性是否在2型糖尿病家系不同亲级关系存在差异。结果（1）2型糖尿病家系一级亲的遗传度为0．578，二级亲的遗传度为0．032；（2）一级和二级亲属之间Calpain10基因UCSNP43、UCSNP44基因型和等位基因频率分布差异均无统计学意义（P〈0．05）；（3）Calpain10基因UCSNP43位点AA基因型携带者体重指数、空腹胰岛素水平较GG和GA基因型携带者高（P〈0．05或P〈0．01）。结论新疆维吾尔族2型糖尿病的遗传度随着亲缘系数的降低而减小；UCSNP43位点AA基因携带者胰岛素抵抗程度较GG和AG型携带者高。

妊娠糖尿病Calpain10基因表达与其单倍型组合的研究

目的:对广东汉族妊娠糖尿病(GDM)患者进行钙蛋白酶10(Calpain10)基因单核苷酸多态性(SNP-43、-19、-63),及其胎盘组织Calpain10基因产物的检测,探讨Calpain10基因易感单倍型组合GDM罹患率增高的可能相关机制。方法:选择60例正常孕妇(NGT)和60例GDM患者,PCR-RFLP法检测Calpain10基因SNP-43、-19、-63位点,统计并分析其易感单倍型组合。RT-PCR法检测研究对象剖宫产后胎盘组织中Calpain10mRNA的表达,分析其与Calpain10基因易感单倍型组合的相关性。结果:①Calpain10基因单倍型组合112/112(SNP-43、-19、-63)的广东汉族孕妇有较高的GDM罹患率(χ2=4.324,P=0.037)。②与其他单倍型组合个体相比较,112/112个体胎盘组织(t=2.135,P=0.035)中Calpain10 mRNA表达明显下降。③112/112个体孕期体重指数变化(t=2.153,P=0.033)及胰岛素抵抗水平(t=2.189,P=0.031)明显增加。结论:Calpain10基因单倍型组合为112/112的妇女有较高的GDM发患率,这可能与通过增加孕期体重以及胎盘组织Calpain10表达减少,进而增加胰岛素抵抗水平相关。

湖北汉族人2型糖尿病与Calpain10基因多态性的相关研究

目的探讨Calpain 10基因对湖北汉族人2型糖尿病遗传易感性的影响。方法采用病例对照研究,以聚合酶链式反应联合限制性内切酶的多态性(PCR-RFLP)分子生物学技术,选择262例2型糖尿病患者作为试验组和262例血糖正常者为对照组,对其Calpain10基因上的SNP43及SNP19位点多态性进行分析。结果在2型糖尿病人群中,SNP43的G等位基因频率,与对照组相比(93.8%比79.97%),差异有统计学意义(P<0.05)。而SNP19位点等位基因频率在2组中的频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。此外,在本研究对照组中,SNP43 GG基因型与体质量指数和腰-臀围比值增加相关。结论 SNP43位点等位基因G在Calpain 10基因中可直接或与其他糖尿病基因相互作用决定湖北汉族人2型糖尿病的遗传易感性。

Calpain10基因在脂肪及胎盘组织中的表达与妊娠糖尿病的相关研究

目的检测钙蛋白酶10(Calpain10)mRNA在妊娠糖尿病患者脂肪及胎盘组织中的表达,以探求Calpain10在妊娠糖尿病发病机制中的意义。方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测正常妊娠(60例),妊娠糖尿病患者(60例)剖宫产后脂肪及胎盘中Calpain10基因在转录水平的表达。结果妊娠糖尿病组脂肪组织中Calpain10mRNA表达量较正常妊娠组显著下降(P<0.01),并与妊娠糖尿病胰岛素抵抗指标相关(P<0.01);而胎盘组织中Calpain10mRNA表达则无差异。结论脂肪组织Calpain10表达的减少可能是GDM患者胰岛素抵抗的重要原因。胎盘Calpain10的表达与GDM及其胰岛素抵抗的关系不明显。

Calpain-10基因SNP43单核苷酸多态性与2型糖尿病的相关性研究

采用错配聚合酶链反应技术,对128例2型糖尿病患者(T2DM组)和102例健康者(对照组)的Cal-pain-10基因SNP43单核苷酸多态性进行基因分型,并测定其体质量指数(BM I)、腰围/臀围、空腹血糖、甘油三酯和胆固醇。结果显示,两组Calpain-10基因SNP43等位基因G、A频率无统计学差异(P>0.05);两组Calpain-10基因SNP43多态性中,GG型与GA+AA型基因者的上述指标比较均无统计学差异(P均>0.05);对照组基因GA+AA型者的甘油三酯较GG型者高(P<0.05)。认为Calpain-10基因SNP43单核苷酸多态性可能与T2DM的遗传易感性无相关性。

微小RNA-144对人结肠癌细胞株增殖、侵袭迁移影响及其与同源盒基因A10结合力

目的 观察微小RNA-144(miR-144)对人结肠癌细胞株增殖、迁移、侵袭的影响及其与同源盒基因A10(homeobox gene A10,HOXA10)的结合力。方法 (1)人结肠癌细胞株HCT116、SW480、CL-11和永生化正常人结肠上皮细胞株FHC中miR-144及HOXA10 mRNA检测:采用实时荧光定量PCR法检测HCT116、SW480、CL-11及FHC中miR-144与HOXA10 mRNA,观察人结肠癌细胞和人结肠上皮细胞miR-144、HOXA10 mRNA表达变化,选择miR-144相对表达量最低HCT116细胞为后续研究对象。(2)miR-144对人结肠癌细胞株增殖、侵袭及迁移的影响观察:取对数生长期HCT116细胞分为3组,1组细胞顺序转染miR-144模拟物(miR-144 mimics)和HOXA10过表达质粒pcDNA3.1-HOXA10,2组细胞转染miR-144 mimics,3组细胞转染空白质粒。转染24 h时测算各组细胞增殖活性、观察各组细胞的侵袭及迁移情况、检测各组细胞miR-144及HOXA10蛋白。(3)HCT116细胞中miR-144与HOXA10的结合力观察:取对数生长期HCT116细胞分为4组:A组先后转染野生型HOXA10荧光素酶报告基因质粒(HOXA10-WT)、miR-144mimics,B组先后转染HOXA10-WT、空白对照NC-mimics,C组先后转染突变型HOXA10-MUT、miR-144 mimics,D组先后转染HOXA10-MUT、NC-mimics,转染24 h时采用双荧光素酶检测试剂测算各组细胞的相对荧光素酶活性(代表HOXA10、miR-144的靶向结合力)。结果 与FHC细胞比较,HCT116、SW480、CL-11细胞miR-144相对表达量低,HOXA10 mRNA相对表达量高(P均<0.05)。与3组比较,2组细胞miR-144相对表达量高(P<0.05),培养24、48、72 h时细胞OD值均降低,迁移及侵袭穿膜细胞数少,HOXA10蛋白相对表达量低(P均<0.05);与2组比较,1组细胞HOXA10蛋白相对表达量高,培养24、48、72 h时细胞的OD值均高,迁移及侵袭穿膜细胞数多。与B组比较,A组HCT116细胞的相对荧光素酶活性低(P<0.05)。结论 miR-144可抑制结肠癌细胞的增殖、侵袭及迁移,同时抑制细胞HOXA10蛋白表达。HCT116细胞中miR-144与HOXA10靶向结合力较高,miR-144可能通过抑制HOXA10蛋白表达,进一步抑制结肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭。

Calpain-10基因多态性与2型糖尿病遗传易感性的关联性研究

目的 探讨Calpain 10基因 (CAPN 10 )单核苷酸多态性SNP4 3、SNP19与 2型糖尿病 (T2DM )遗传易感性的关系。方法 采用病例 -对照研究方法 ,以聚合酶链式反应限制性内切酶长度多态性 (PCR RFLP)技术 ,对 12 0例随机 2型糖尿病患者和 132例无亲缘关系并且无糖尿病家族史的健康对照者的CAPN 10基因SNP4 3,SNP19多态性进行基因分型 ,同时对两组人群口服 75克葡萄糖后 0、12 0分钟分别测定其血清中葡萄糖 (BG)、胰岛素 (INS)、C肽(C P)含量 ,及空腹总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)和糖基化血红蛋白 (HbA1c)。结果 ①与对照组相比 ,2型糖尿病患者中CAPN 10基因SNP4 3的G等位基因频率显著升高 (分别为 92 %和 84 % ,P <0 .0 1)。CAPN 10基因SNP4 3基因多态性两组的GG基因型与腰臀比增加有关 ;②CAPN 10基因SNP19等位基因频率在两组中分布差异无统计学意义 ;③ 2型糖尿病组各项生化指标 (除外胰岛素、C肽、高密度脂蛋白胆固醇 )均高于健康对照组。结论 CAPN 10基因SNP4 3基因多态性GG基因型直接或间接与 2型糖尿病的遗传易感性相关。