猪MyoG基因的PCR-RFLP分型及其与生长性能和肌纤维数目的相关性分析

对33头申农号猪MyoG基因进行PCR-RFLP分型,结果发现3种基因型(MM,MN和NN)。M基因频率为51.5%,N基因频率为48.5%。对不同基因型猪初生重和断奶重分析发现,NN型猪初生重显著高于其他基因型猪(P<0.05),但断奶重差异不显著。根据不同基因型共屠宰12头申农号猪,取半腱肌、半膜肌和股二头肌做冰冻切片,HE染色,并计算肌纤维数目,结果表明,不同基因型猪间半腱肌和半膜肌肌纤维密度差异显著(P<0.05),其中NN型肌纤维密度高于其他基因型。

猪CAST基因多态性与肌纤维组织学特性及屠宰性状的相关性分析

采用3种限制性核酸内切酶对45头金皮(金华×皮特兰)F2代猪钙蛋白酶抑制蛋白基因(CAST)的第6外显子和第7外显子之间的片段进行了PCR-RFLP分析,结果显示在第6内含子内均检测到MspⅠ、HinfⅠ和RsaⅠ酶切多态性。根据酶切结果将CAST基因分为3种基因型(AACCEE、BBDDFF、ABCDEF),其基因型频率分别为0.1778,0.2222,0.6000。对背最长肌做连续性石蜡切片,分别采用苏木精-伊红和肌球蛋白重链免疫组织化学方法染色并拍照,ImageJ软件统计肌纤维横截面积、密度、直径及MHCⅠ型肌纤维的比例。采用SPSS程序分析了CAST不同基因型对金皮F2代猪肌纤维组织学特性和屠宰性状的影响。结果表明:BBDDFF基因型个体的肌纤维横截面积和眼肌面积显著地高于ABCDEF基因型个体的肌纤维横截面积和眼肌面积(P<0.05)。

金皮猪肉质相关组织学特征与CAST基因HinfI多态性的关系研究

本实验选择具有优良肉质的本地金华猪与肉质较差的引进品种皮特兰猪杂交所产的金皮F_2代为研究对象,利用PCR-RFLP的方法检测金皮F_2代猪CAST基因型的频率,并以肌球蛋白重链(MHC)免疫组织化学、过碘酸希夫反应和苏木精-伊红等多种组织学方法,研究猪背腰最长肌的肌肉组织学特性。并对其进行图像分析,在此基础上采用SAS分析其相互关系。结果发现,PAS染色后肌纤维可区分为三种类型。PAS阴性(Ⅰ)、PAS反应强阳性(Ⅱ-a)和PAS反应强度中间型(Ⅱ-b)。利用肌球蛋白重链单克隆抗体MHCs和MHCf染色结果表明,金皮F2代杂交猪背腰最长肌MHCs阳性(慢肌)纤维的比例为7.62%,快肌纤维为92.38%。CAST基因的扩增产物具有524bp和632bp两个HinfI多态性片段,定义等位基因为A(114+192+400+632bp),B(114+192+400+524bp)。AA、BB和AB基因型频率分别为0.1795、0.5897和0.2308,A和B的基因型频率分别为0.4743和0.5256。AA、BB和AB单型对眼肌面积,系水率、pH值、导电率等参数均无显著的影响。CAST基因的HinfI多态性对肌纤维的轴比有显著影响,AA单型有产生较多轴比较大(近似椭圆形)肌纤维的倾向,而BB则控制形成更多的轴比更小(近似于圆形)的肌纤维。具有AA单型的个体具有更多的肌间结缔组织,而具有BB单型的个体的肌间结缔组织较少,AB单型的个体介于两者之间。