Advances in Pharmacological Studies of Calycosin-7-O-β-D-glucoside

The isoflavone compound Calycosin-7-O-β-D-glucoside (CG) is an active monomer component extracted from the dry roots of the leguminous plant Astragalus mongolicus and Astragalus. It is also one of the main active ingredients in the Astragalus that is a commonly used traditional herb. CG has obvious effects of anti-oxidation, anti-virus, inhibition of melanin formation, and immunosuppression. With the advancement of modern technology, it has become a pivotal subject that the adjuvant therapy or even substitute for the synthetic drug of monomer of Chinese herb in medical field. In recent years, with the deepening of research on the mechanism of action of CG, which has been found that its pharmacological effects are very extensive, such as the anti-tumor effect and the effect on cerebrovascular diseases of CG. This review summarizes the pharmacological effects and the latest research progress of CG.

Calycosin-7-O-β-D-glucopyranoside stimulates osteoblast differentiation through regulating the BMP/WNT signaling pathways

The iso fl avone calycosin-7-O-β-D-glucopyranoside(CG) is a principal constituent of Astragalus membranaceus(AR) and has been reported to inhibit osteoclast development in vitro and bone loss in vivo. The aim of this study was to investigate the osteogenic effects of CG and its underlying mechanism in ST2 cells. The results show that exposure of cells to CG in osteogenic differentiation medium increases ALP activity, osteocalcin(Ocal) m RNA expression and the osteoblastic mineralization process. Mechanistically, CG treatment increased the expression of bone morphogenetic protein 2(BMP-2), p-Smad 1/5/8, β-catenin and Runx2, all of which are regulators of the BMP- or wingless-type MMTV integration site family(WNT)/β-catenin-signaling pathways. Moreover, the osteogenic effects of CG were inhibited by Noggin and DKK-1 which are classical inhibitors of the BMP and WNT/β-catenin-signaling pathways, respectively. Taken together, the results indicate that CG promotes the osteoblastic differentiation of ST2 cells through regulating the BMP/WNT signaling pathways. On this basis, CG may be a useful lead compound for improving the treatment of bone-decreasing diseases and enhancing bone regeneration.

高效液相色谱法测定黄芪中毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷的含量

目的:建立黄芪中毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷含量测定的高效液相色谱法,并测定10批不同来源黄芪商品药材中该成分的含量。方法:色谱柱为Polaris C_(18)柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水(30:70),流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为25℃,检测波长为254 nm。结果:毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷在0.010 6～2.12μg呈良好的线性关系,回归方程为Y=3 035.97X-14.85(r=0.999 9),加样回收率平均为95.8％(n=5,RSD=1.3％)。结论:本法简便、快速、灵敏,重现性好。所测10批不同来源黄芪商品药材中毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷含量差异较大。

O2对C4F7N-N2-O2混合气体绝缘和放电分解特性的影响

由于C4F7N兼具优异的绝缘性能和环保特性,因此得到了国内外替代气体领域研究者的广泛关注。为了探究加入O2后对C4F7N二元混合气体绝缘及分解特性的影响情况,在稍不均匀场条件下对含不同含量(即体积分数)O2的C4F7N-N2-O2混合气体的工频击穿特性和绝缘自恢复性能进行了测试,同时基于气相色谱质谱联用仪(GC-MS)分析了击穿后混合气体的分解产物组成及含量。研究发现,在C4F7N-N2混合气体中加入一定含量的O2能够提高混合气体的工频击穿电压且有效改善混合气体自恢复性能;不含O2的C4F7N-N2混合气体在多次放电击穿后电极表面有黑色物质(碳)析出,而少量O2的加入能够抑制固体物质碳析出;另外,O2的加入促进了混合气体的分解,产生了CO2、COF2等特征产物。随着O2含量的进一步提高,混合气体分解产生的CF4含量显著升高,而C2F6、C3F8等产物含量降低。综合来看,实际工程应用中建议在C4F7N-N2-O2混合气体中加入4%~6%的O2,以达到有效抑制固体物质碳析出的同时提升混合气体的绝缘性能。

7B04-O铝合金搅拌摩擦焊接头组织和性能研究

对3 mm厚的7B04-O高强铝合金进行搅拌摩擦焊对接焊接,研究焊接速度、旋转速度对焊缝成形质量的影响,对焊接接头的力学性能和显微组织进行了分析。结果表明：当旋转速度为750 r/min,焊接速度为150~235 mm/min,可获得表面纹理均匀细腻、无变形无飞边、无缺陷的对接接头;焊接接头力学性能优良,抗拉强度达到198 MPa,断后伸长率达到13.2%,拉伸试样断裂在距接头较远的母材位置。焊接接头微观组织分为焊核区、热机影响区、热影响区和母材区。其中,焊核区形成均匀细小的等轴晶粒,热机影响区晶粒沿变形方向被大幅拉长,但晶粒变形没有焊核区剧烈,热影响区形貌与母材保持一致,晶粒仅发生了粗化。

UPLC-ESI-MS法测定贞芪扶正胶囊中毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、红景天苷和黄芪甲苷的含量

建立了超高效液相色谱-电喷雾串联三重四级杆质谱法(UPLC-ESI-MS)同时测定贞芪扶正胶囊中红景天苷、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷和黄芪甲苷含量的方法.采用UPLC-ESI-MS联用法,乙腈和0.3%甲酸水溶液不同比例梯度洗脱,流速0.3 m L/min,12 min内可完成测试,且线性关系良好(r2>0.999).方法简便、准确、可靠、重复性好,可用于贞芪扶正制剂的质量控制.

不同产地黄芪的多指标质量评价研究

目的:对12个不同产地的黄芪样品的质量进行评价。方法:以总多糖、总黄酮、总皂苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、芒柄花苷及黄芪甲苷8个指标对甘肃、山西、内蒙古及宁夏等产地的12个黄芪样品进行多维分析,并考察8个指标的相关性。结果:12个样品中有3个样品的毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量以及8个样品的黄芪甲苷含量不符合《中华人民共和国药典》(2020年版)规定要求。12个不同产地的黄芪样品中总多糖、总黄酮、总皂苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、芒柄花苷及黄芪甲苷等8个指标的含量(mg/g)分别为13.389~68.777、3.132~4.408、6.761~18.284、0.143~0.374、0.023~0.169、0.020~0.119、0.044~0.110、0.051~1.399 mg/g。芒柄花苷含量与毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量呈正相关(r=0.838),芒柄花素含量与毛蕊异黄酮含量呈正相关(r=0.973),黄芪甲苷含量与其他7个指标含量无相关性。结论:不同产地黄芪的化学成分含量差异显著,质量差异明显,选购黄芪药材需注意其直径的大小。

黄芪健骨胶囊质量标准研究

目的建立黄芪健骨胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)法对制剂中黄芪、山茱萸药材进行定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法测定制剂中马钱苷、毛蕊异黄酮苷、柚皮苷的含量,色谱柱为XSelect HSS T_(3)柱(250 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为甲醇-0.3%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为0.8 mL/min,检测波长为240 nm,柱温为25℃,进样量为10μL。结果黄芪、山茱萸的TLC图特征斑点清晰,分离度好,且阴性对照无干扰。马钱苷、毛蕊异黄酮苷、柚皮苷质量浓度分别在21.54~430.80μg/mL(R^(2)=0.9993)、5.02~100.40μg/mL(R^(2)=0.9999)、20.28~405.60μg/mL(R^(2)=0.9997)范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于3.0%;平均加样回收率分别为100.66%,98.58%,100.17%,RSD分别为1.70%,2.36%,1.98%(n=6)。结论该方法操作简便,结果准确,重复性好,可用于黄芪健骨胶囊的质量控制。

HPLC-UV法测定经典名方当归补血汤中5种化学成分含量

本研究旨在建立高效液相色谱-紫外检测法,同时测定当归补血汤中阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮及芒柄花苷的含量。采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇(B):0.4%甲酸水(A)梯度洗脱,检测波长280 nm。阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮和芒柄花苷分别在0.091~1.824、0.015~0.308、0.092~1.848、0.036~0.728、0.082~1.656μg/mL质量范围内线性关系良好,r> 0.999;定量限分别为0.091、0.015、0.092、0.036、0.082μg/mL;检测限分别为0.027、0.005、0.028、0.011、0.025μg/mL。该方法精密度、重复性、稳定性、加样回收试验的RSD均小于5%;回收率分别为99.68%、99.40%、100.24%、101.04%和100.88%。所建立的测定方法操作简单,分析灵敏快速,结果准确,可用于当归补血汤的含量测定及质量控制。

玉屏风方饮片及汤剂中毛蕊异黄酮苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量相关性研究

目的:建立玉屏风汤剂中毛蕊异黄酮苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量测定方法,研究黄芪、防风饮片及玉屏风汤剂中此3种成分的含量相关性。方法:采用HPLC法,色谱柱为Hypersil ODS;流动相为乙腈-水(梯度洗脱);检测波长为254nm;流速为1mL·min-1;柱温为30℃。结果:黄芪中的毛蕊异黄酮苷、防风中的升麻素苷与5-O-甲基维斯阿米醇苷的提取率分别为45.58%~63.35%,45.01%~65.09%,53.62%~87.75%。结论:饮片与汤剂中的含量呈现一定相关性,但不同批次饮片的提取率差异性较大;为玉屏风汤剂物质基础的研究提供了一定的参考。

三黄桃葛胶囊中7种成分含量测定研究

目的 建立测定三黄桃葛胶囊中7种成分含量的方法.方法 采用高效液相色谱法对制剂中葛根素、5种游离蒽醌、毛蕊异黄酮苷进行定量分析.结果 葛根素、毛蕊异黄酮苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的线性范围分别为0.077～1.54 μg（r=0.999 9）,0.057 ～ 1.72 μg（r=0.999 9）,0.016～0.49 μg（r=0.999 9）,0.020 ～0.61 μg（r=0.999 9）,0.018～0.54 μg（r =0.999 9）,0.017 ～0.52 μg（r =0.999 9）,0.023 ～0.70 μg（r=0.999 9）,平均回收率依次为103.00％（RSD=1.37％,n=6）,98.48％（RSD=1.95％,n=6）,102.58％（RSD=1.84％,n=6）,99.04％（RSD=1.81％,n=6）,102.30％（RSD=1.71％,n=6）,99.79％（RSD=1.83％,n=6）,98.76％（RSD=1.75％,n=6）.结论 该方法简便、准确可靠,专属性强,可用于三黄桃葛胶囊的质量控制.

真核细胞表达人骨形态发生蛋白-7的研究进展

针对目前生物系统表达的人骨形态发生蛋白-7(h BMP-7)产量不能满足市场需求量、活性低、成本高的现状,对目前h BMP-7在酵母表达系统、昆虫、哺乳动物组织细胞的表达状况进行综述,分析其各自的优势和局限性,并对h BMP-7真核系统表达进行展望,指出h BMP-7是一种有重要价值的生长因子,具有强烈的骨诱导活性,临床上可用于治疗骨折、骨不愈合,未来的研究重点应是h BMP-7表达量的问题。

UPLC法测定玉屏风颗粒中升麻素苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

目的：建立玉屏风颗粒中升麻素苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量测定方法。方法：超高效液相色谱法，采用ACQUITYHSST3色谱柱（2．1mm×100mm，1．8μm），乙腈-水为流动相梯度洗脱，流量0．45mL-min-1，检测波长为254nm，柱温30℃。结果：升麻素苷进样量在5．30～264．80μg·mL^-1。范围内呈良好的线性关系（r=0．9999），平均回收率为102．41％（n=6）；毛蕊异黄酮葡萄糖苷进样量在2．60～130．00μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系（r=1．0000），平均回收率为102．41％（n=6）；5—0．甲基维斯阿米醇苷进样量在8．26～412．80μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系（r=0．9999），平均回收率为99．50％（n=6）。结果：所建方法分离效果好，专属性强，操作简便，可用于玉屏风颗粒的质量控制。

多指标综合评分法结合正交实验优选黄芪-葛根药对提取工艺

目的 优选黄芪-葛根药对的提取工艺。方法 以提取液中葛根素、大豆苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大豆苷元、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素的含量及出膏率作为评价指标,采用层次分析法确定各评价指标的权重系数并计算综合评分。通过单因素实验考察料液比、提取次数、提取时间对综合评分的影响,确定各因素的水平。采用多指标综合评分法,以上述7个指标的综合评分为指标,设计正交实验优选黄芪-葛根药对的提取工艺参数并进行验证。结果 葛根素、大豆苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大豆苷元、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素的含量及出膏率的权重系数分别为0.304 7、0.065 2、0.185 8、0.185 8、0.107 8、0.107 8、0.042 7。最终优选出的黄芪-葛根药对提取工艺为料液比1∶8(g/mL),加热回流提取3次,每次1 h。验证实验中各评价指标的RSD均小于3.00%(n=3)。结论 本研究优选的黄芪-葛根药对的提取工艺稳定、可行。

益气活血通便方指纹图谱及功效基准物质预测分析

目的:建立益气活血通便方(Yiqi Huoxue Tongbian Recipe,YHTR)指纹图谱检测方法,并结合网络药理学方法对YHTR功效基准物质进行预测分析。方法:建立YHTR的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱,并对共有峰成分进行指认,运用网络药理学方法建立YHTR的成分-靶点-通路网络,利用AutoDock软件进行分子对接,进一步确定YHTR功效性成分选择的合理性。结果:YHTR的指纹图谱共标定14个共有峰,通过对照品指认出绿原酸、松果菊苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素7个色谱峰,10批样品的相似度均≥0.792,YHTR的功效基准物质有效地实现从药材-饮片-复方的传递;利用网络药理学方法对YHTR的7个活性成分进行分析,构建成分-靶点-通路网络,富集通路包括癌症、磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)、脂质与动脉粥样硬化、前列腺癌等信号通路;根据网络药理学和分子对接结果分析,预测绿原酸、松果菊苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素7个成分可通过作用于上述通路起到补血活血、润肠通便的功效。结论:HPLC指纹图谱结合网络药理学方法操作简便、准确度高、稳定性好,可用于YHTR的质量控制,7个化学成分的准确测定也为YHTR功效基准物质的研究提供了依据。

超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱法同时检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷、甘草酸铵的含量

建立了一种超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱同时检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷和甘草酸铵含量的方法。采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱质谱,Hypersil Gold C_(18)型色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速0.4 mL/min,柱温40℃,进样量1μL;采用电喷雾离子源,正离子模式下,在质荷比100~1500范围内全扫描,通过提取待测成分的精确质量数进行定量。结果表明,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷、甘草酸铵线性范围分别为0.0891~1.4250μg/mL、0.0984~12.6000μg/mL、7.4250~29.7000μg/mL(r≥0.9993),检测限分别为5.57、4.10、5.80 ng/mL,定量限分别为22.26、12.30、23.20 ng/mL,精密度、重复性及样品稳定性(24 h)良好,加样回收率91%~105%(δ_(RSD)≤5.0%,n=6)。本方法简便快捷、特异性强、灵敏度高,可同时检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷、甘草酸铵的含量。

HPLC法同时测定宫血停颗粒中六种成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定宫血停颗粒中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、异阿魏酸、特女贞苷、柚皮苷、新橙皮苷的含量。方法:采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.5%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,柱温35℃,流速1 mL·min^(-1),检测波长为225 nm。结果:6种成分在标准曲线范围内线性关系良好(r>0.999),平均回收率均大于95%(n=6)。结论:该方法简便、准确、快速,稳定性和重现性良好,为宫血停颗粒质量标准的提高提供了实验依据。

不同来源黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的定量分析

目的:建立黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定方法,并对不同来源的药材进行分析,为黄芪质量标准的制定提供依据。方法:采用HPLC-DAD法建立黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定方法,通过对来源于我国8个省59批黄芪药材的分析,阐明产地、生长方式、生长年限等对黄芪中异黄酮类成分的影响。结果:不同产地、生长方式及生长年限的黄芪药材,其毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量差异较大。从产地分析,以山西、内蒙古和陕西等道地产地含量较高;从生长方式分析,以半野生含量较高;从生长年限分析,年限越短,含量越高。结论:本研究建立的毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定方法简便、准确、重现性好,可用于黄芪药材中异黄酮类成分的质量控制。

HPLC-MS测定黄芪药材中3种成分的含量

Aim To determine calycosin-7-O-β-D-glucoside,astragaloside IV and formononetin in Radix Astragali and other relative samples by HPLC-MS.Methods HPLC was carried out with Agilent 1100LC/MSD,equipped with Agilent Zorbax SB C18 column（250 mm×4.6 mm ID,5 μm） and mass spectrum detector.The mobile phase（CH3CN-H2O） was eluted in gradient mode.Results The calibration curves of calycosin-7-O-β-D-glucoside,astragaloside IV and formononetin were linear in the range of 0.031.21 μg·mL-1,0.35-13.86 μg·mL-1 and 0.38-15.22 μg·mL-1,respectively.These recoveries of samples were from 95% to 105% with RSD less than 1.5%.Conclusion The method was employed to analyse 25 samples of Radix Astragali and other relative samples,including Radix Astragali slice,Radix Astragali Preparata,Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz,Astragalus ernestii Comb.The contents of three constituents vary greatly because of the species, place of collection and season of harvesting.This method could apply to evaluate the quality of Radix Astragali and it is simple,sensitive and reliable.

高效液相色谱法测定黄芪中毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的含量

目的：采用高效液相色谱法测定膜英黄芪Astragalus membranaceus（Fisch．）Bge．中毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的含量。方法：依利特Hypersil ODS 2色谱柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相：A相为乙腈-甲醇（体积分数9：1），B相为水，梯度洗脱；流速：1．0ml／min；检测波长：260nm；柱温：室温；进样量：20μl。黄芪药材以甲醇超声提取2次，每次20min。结果：毛蕊异黄酮苷和芒柄花素色谱峰的理论塔板数分别为50134和25258。回归方程分别为Y=58924 X-12352，r=0．9999和Y=9237 X-124447，r=0．9999，线性范围分别为2．022～101．1μg／ml和38．04～1522μg／ml。方法学考察结果表明，毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的日内和日间RSD均〈2．0％，最低检测限分别为0．2022μg／ml和1．522μg／ml，加样回收率结果分别为98．34％，RSD=1．33％（n=3）和98．84％，RSD=0．12％（n=3）。测定了10批次黄芪药材的毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的含量。结论：该方法稳定简便，结果可靠，能够用于黄芪药材中毛蕊异黄酮苷和芒柄花素含量测定的研究。