不同倍性云南山茶染色体核型分析

【目的】采用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)对不同倍性云南山茶进行倍性鉴定,并通过采用常规压片法对其结果进行验证及核型分析,研究其染色体特性及进化程度。【方法】以不同倍性云南山茶叶片为实验材料采用流式细胞术对其进行倍性鉴定,及采用不同倍性云南山茶根尖为实验材料,采用常规压片法进行核型分析。【结果】1)流式细胞术结果显示G0/G1期荧光强度峰值比值分别为二倍体对照组的1.94、2.78,不同倍性云南山茶细胞核DNA含量差异显著,3种倍性云南山茶随着倍性水平的增加,其细胞核DNA相对含量也成倍增加。2)二倍体云南山茶染色体数目为30条,基数为15,核型公式为2n=2x=30=22m(2sat)+8sm,在第2和13对染色体短臂上附有随体,核型不对称系数为60.56%,属于2A型,四倍体云南山茶染色体数目为60条,基数为15,核型公式为2n=4x=60=44m(2sat)+14sm+2st,在第12对染色体短臂上附有随体,核型不对称系数为61.38%,属于2B型,六倍体云南山茶染色体数目为90条,基数为15,核型公式为2n=6x=90=66m+24sm,核型不对称系数为61.47%,属于2B型。3种倍性云南山茶核型不对称系数为60.56%~61.47%,【结论】流式细胞仪结果证明其3种云南山茶倍性分别为二倍体、四倍体、六倍体。进化趋势分析推测进化水平从高到低排序为:六倍体、四倍体、二倍体。其中二倍体云南山茶进化程度较低,六倍体云南山茶最为进化。

山茶属的细胞地理学研究

本文收集整理了山茶属的细胞学资料，以细胞地理学的方法探讨该属的起源和演化。在山茶属１４组１１９种植物中有１０组６２种已具染色体数目的报道，５４种已知核型，分别占总数的５２％和４５％。山茶属植物具有稳定的基数（ｘ＝１５）和多变的倍性（２ｘ→８ｘ）。每一个组都有二倍体或全为二倍体；多倍体主要出现在Ｓｅｃｔ．Ｃａｍｅｌｉａ、Ｓｅｃｔ．Ｐａｒａｃａｍｅｌｉａ和Ｓｅｃｔ．Ｔｈｅｏｐｓｉｓ之中，大多分布在山茶属分布区的西部、北部和西北部，呈现出北多南少的趋势。山茶属的核型遵守Ｓｔｅｂｂｉｎｓ的从对称向不对称演化的规律，分布中心靠南的组比靠北的组拥有更对称的核型，表明山茶属从南向北进化和扩散。在已具核型资料的组中，Ｓｅｃｔ．Ａｒｃｈｅｃａｍｅｌｉａ最原始，Ｓｅｃｔ．Ｃａｍｅｌｉａ最进化，包括Ｃ．ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ的Ｓｅｃｔ．Ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅａ不可能是山茶属最原始的类群。我们认为山茶属很可能起源于中南半岛，主要向北扩散和进化，在现今的分布中心发生了快速的分化。

山茶属山茶组的细胞地理学研究

本文总结了山茶组植物的细胞学资料，结合形态和地理学特征讨论了该组植物扩散及分化的规律。山茶组植物具有相同的染色体基数（ｘ＝１５），变化较大的倍性（２ｘ，４ｘ，６ｘ，８ｘ）。其中子房无毛的种类除Ｃ．ｃｈｅｋｉａｎｇｏｌｅｏｓａＨｕ，Ｃ．ｊａｐｏｎｉａｃａＬ．的个别居群外都是二倍体；多倍体主要出现在苞、萼、花后脱落，子房被毛的种类中，分布于南岭以西至西南地区，南岭及南岭以东、以南地区未发现多倍体。山茶组植物的核型进化有明显的方向性，核型的不对称性从低向高演化；南岭及附近地区的类群核型不对称性较低，而远离这一地区的类群核型不对称性较高。作者认为南岭及附近地区是山茶组植物的分布中心和分化中心；云贵高原及其邻近地区是它的次生分化中心，在这一地区杂交和多倍化是物种形成和分化的重要途径。

普通油茶染色体制片技术优化及核型分析

【目的】染色体是种内品种变异的遗传物质基础,明确普通油茶主栽品种染色体倍性及核型特征,可为育种和栽培中品种配置提供依据。【方法】以普通油茶3个主栽品种(‘华硕’、‘华鑫’、‘华金’)的扦插苗和实生苗根尖为试材,对油茶染色体制片技术实验进行优化,对3个品种进行核型分析。【结果】①改良的去壁低渗火焰干燥法更适合普通油茶染色体制片,根尖以0.002 mol/L 8-羟基喹啉预处理5~6 h,1.75%纤维素酶和1.75%果胶酶酶解120 min,蒸馏水后低渗30 min,制片效果最佳。②3个品种扦插苗染色体数目均为2n=6x=90,为六倍体,而3个品种的实生苗染色体数目为90、87、85和75等。③对扦插苗根尖细胞中期分裂相进行核型分析可知,‘华硕’、‘华鑫’核型都为2A,‘华金’核型为2B,核型公式分别为2n=90=63m(3SAT)+27sm(‘华硕’)、2n=90=58m(SAT)+32sm(‘华鑫’)、2n=90=64m+26sm(SAT)(‘华金’),核型不对称系数分别是6173%(‘华硕’)、61.13%(‘华鑫’)、61.44%(‘华金’)。【结论】优化的去壁低渗火焰干燥法更适合于普通油茶染色体制片,‘华硕’、‘华鑫’、‘华金’均为六倍体,而其实生后代会发生倍性分离。本研究为进一步开展普通油茶的倍性与核型研究奠定了基础。