油茶抗炭疽病菌Colletotrichum camelliae机制的研究——Ⅰ.油茶皂甙在抗炭疽病中的作用

在油茶的各种次生物质成分中油茶皂甙对炭疽病菌的毒害作用最强,但发生毒害作用的浓度要高达200～400μg/ml。皂甙经水解产生皂甙元后对炭疽病菌的毒害作用大大增强,0.05mM皂甙元可使炭疽病菌渗漏氨基酸量比0.05 mM皂甙增加16.86倍。菌丝体向外大量渗漏氨基酸导致病原菌细胞死亡,油茶皂甙元是抑制油茶炭疽病菌的主要物质。体外试验证明,油茶皂甙在β-糖苷酶作用下转变为油茶皂甙元。推测植物体内的β-糖苷酶进行酶促反应,产生油茶皂甙元这一代谢过程在油茶抗炭疽病机制中将起重要作用。

Effects of the <i>Camellia oleifera </i>Shell Substrate on the Yield and Nutritional Composition of <i>Pleurotus geesteranus</i>

Pleurotus geesteranus was cultivated on the substrates blended with different ratios of treated and untreated Camellia oleifera shells using cottonseed hull as the control substrate. The mycelial growth rate, yield, nutritional composition, ash and heavy metals of the Pleurotus geesteranus cultivated on these substrates were compared. The results suggest that the Camellia oleifera shell in substrate can accelerate the mycelial growth and increase the yield, nutrients and the contents of protein, ash, crude fiber and amino acid of Pleurotus geesteranus. It was found that the contents of tannin and saponin in Camellia oleifera shell affected the mycelial growth rate. The optimal C/N of the substrate for the growth of Pleurotus geesteranus was determined to be 27 ± 0.7. The C/N ratios higher than 30 reduced the protein, fat and soluble sugar contents of the cultivated Pleurotus geesteranus. The contents of heavy metals including Hg, As, Cd and Pb were found in Pleurotus geesteranus cultivated on the substrates containing Camellia oleifera shell complex.

油茶籽粕发酵菌株的筛选鉴定及发酵产物特性分析

油茶行业的迅速发展导致油茶籽粕废弃物的大量产生,其落后的处理方式造成了严重的资源浪费,制约了我国油茶行业的可持续发展。油茶籽粕中富含有机质,利用微生物发酵法降解其中的纤维素、木质素及茶皂素等生物大分子来制备有机肥是实现油茶籽粕合理资源化利用的有效途径。通过筛选获得3株针对油茶籽粕中纤维素和木质素的高效降解菌,包括1株真菌X1-1,属于Pleurostomarichardsiae,以及2株细菌M4-2和M5-2,分别为蒙氏假单胞菌(Pseudomonas monteilii)和类芽孢杆菌(Paenibacillus sp)属,可有效降低发酵产物中茶皂素的含量,实现油茶籽粕的无害化处理。实验结果显示,经菌株X1-1、M4-2和M5-2发酵处理28 d后,油茶籽粕中纤维素含量的降解率分别为29.74%、19.65%和13.19%,木质素含量的降解率分别为12.84%、17.85%和26.39%,茶皂素含量的降解率分别为34.06%、45.05%和46.15%;且发酵后的油茶籽粕腐熟度、有机质含量和养分含量等指标均符合有机肥标准。研究结果拓展了油茶籽粕的资源化利用途径,同时为木质素和纤维素的高效降解提供了良好的菌种资源。

响应面分析法优化油茶饼粕中茶皂素的提取工艺

试验以油茶饼粕为原料,采用内部沸腾法提取茶皂素。以提高油茶饼粕中茶皂素的提取率为优化目标,通过单因素试验并结合Plackett-Burman(PB)试验,得到3个对茶皂素提取率有显著影响的关键因素:解吸剂浓度、解吸剂用量及提取时间。依据Box-Behnken(BBD)中心组合设计原理,分析和评价3个主要因素对茶皂素提取率的影响。结果显示,解吸剂乙醇浓度为85%、解吸剂用量为25 mL、解吸时间为30 min、提取剂液料比为10 mL/g、提取时间为15 min、提取温度为90℃时,茶皂素的理论提取率可达到15.19%。在最佳工艺条件下进行验证试验,茶皂素的实际提取率为15.11%,与模型预测理论值的相对误差为-0.53%。研究表明,试验提取工艺切实可行,可为油茶饼粕的综合开发利用提供参考。

油茶皂素-油茶籽油-番茄红素乳液体系储藏及氧化稳定性研究

番茄红素是一种天然色素和抗氧化剂,含有多个共轭双键,具有多种有益的生物活性。本研究采用高压均质的方法,分别以油茶皂素和吐温80为乳化剂制备了2种不同的番茄红素乳液。研究了不同乳化剂对乳液储藏过程中物理稳定性、番茄红素保留率以及油脂氧化的影响。结果表明,储存28 d后乳液的ζ-电位虽然显著降低但仍保持在30 mV以上。在50℃储存14 d后,吐温80稳定的乳液的POV值从初始的4.30 mmol/kg增加到8.98 mmol/kg,而CS乳液仅增加了1.70 mmol/kg。油茶皂素作为乳化剂能有效改善乳液在储存过程中的氧化稳定性,延缓油脂氧化的进程,降低氧化产物的生成。

油茶果壳中齐墩果烷三萜皂苷抗炎活性及作用机制研究

该研究以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞RAW 264.7细胞为炎症模型,采用Griess实验、酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、Western blotting和免疫荧光等技术,评价油茶果壳3-O-β-D-葡萄糖苷(1″→6′)α-L-鼠李糖基27-羟基齐墩果酸-28-O-β-D-葡萄糖苷(3-O-β-D-glucopyranosyl(1″→6′)α-L-rhamnosyl 27-hydroxy oleanolic acid-28-O-β-D-glucopyranoside,OA)的抗炎活性。实验设置对照组、LPS组和OA组(5、10、20和40μmol/L)。结果显示,不同浓度OA处理对脂多糖诱导的一氧化氮(nitric oxide,NO)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)分泌具有一定的抑制活性,当浓度为20或40μmol/L时,OA对脂多糖诱导的炎症小体nod样受体家族,含pyrin结构域3(NOD-like receptor family,pyrin domain containing 3,NLRP3)和半胱天冬酶1(cysteine aspartate protease 1,Caspase 1)蛋白表达的抑制活性较好;当药物处理1 h和6 h时,OA显著下调了胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)和p38蛋白(p38 protein,p38)磷酸化水平,当药物处理2 h时,OA对p38和Jun氨基端激酶(Jun N-terminal kinase,JNK)磷酸化水平具有抑制活性;而且药物处理6 h时,不同浓度OA对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)核转位具有明显的阻滞作用。这些结果揭示了OA的抗炎活性,为针对性开发油茶果壳资源和以OA为基础的活性产品提供了科学依据。

生物信号采集系统结合人工辅助观察评价油茶皂素镇咳作用的量效关系研究

目的建立生物信号采集系统结合人工肉眼辅助观察评价油茶皂素的镇咳作用的量效关系。方法采用生物信号采集系统,利用呼吸波振幅变化率结合人工肉眼辅助观察,评价油茶皂素剂量变化对豚鼠咳嗽次数、咳嗽潜伏期的影响,并经多元线性回归得出油茶皂素镇咳量效关系方程。结果与正常呼吸波比,首次咳嗽波平均振幅变化率为2335%,末次为125%;油茶皂素75、100、175、200 mg/kg等剂量均可明显减少豚鼠咳嗽次数(P<0.05),回归方程为y=54.4576-0.2693x+0.0011x^(2);75,100、125、175、225 mg/kg等剂量均能明显延长豚鼠咳嗽潜伏期(P<0.05),回归方程为y=27.1679-0.4169x+0.0014x^(2)。结论生物信号采集系统结合人工肉眼辅助观察能客观评价油茶皂素镇咳量效关系,实验表明油茶皂素用药剂量与镇咳效应之间呈非线性关系。

混菌发酵对油茶粕中茶皂素表面活性指标和抗氧化活性的影响

采用水提、醇提、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,LP)发酵、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei,LC)发酵和混菌(LP+LC,1∶1)发酵提取油茶粕中的茶皂素,对比分析提取液中的主要成分差异,并对水提、醇提、混菌发酵茶皂素提取物的表面活性指标和抗氧化性能进行测定。结果表明,混菌发酵液中茶皂素含量为(21.86±0.39)mg/mL,显著高于水提液、醇提液和单菌发酵液(P<0.05),各提取液中多糖、多酚、黄酮、蛋白质含量具有较大差异。相比于水提和醇提茶皂素,混菌发酵提取茶皂素样品具有更高的纯度(75.2%)和提取率(14.12%),其水溶液具有更低的表面张力(39.2 mN/m)、更优异的起泡性(128%)和稳泡性能(96.9%)。混菌发酵茶皂素对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基的清除能力优于水提茶皂素,低于醇提茶皂素。对于羟自由基清除能力和还原力而言,发酵茶皂素优于另外两者,在4 mg/mL质量浓度下与抗坏血酸的测试结果相当。该研究为微生物发酵法应用于茶皂素的工业化提取提供了理论依据。

油茶中皂苷化合物及其促肠道健康作用研究进展

综述了油茶中皂苷化合物的生物合成、种类和含量变化,分析讨论了皂苷化合物改变肠道菌群组成、改善肠道屏障和增强肠道免等促肠道健康功效。

油茶中三萜皂苷及其生物活性研究进展

油茶(Camellia oleifera Abel.)是我国特有的木本油料作物,也是世界四大木本油料树种之一,被誉为“东方油橄榄”。油茶中主要含有三萜类、酚类、黄酮类和甾醇类等生物活性物质,其中三萜皂苷是油茶中最主要的生物活性成分,在体内、体外具有广泛的生理作用,是一种潜在的食品功能成分。油茶中三萜皂苷因皂苷母核上苷元取代基团、糖体及有机酸种类以及连接方式的不同而种类众多。由于生物合成代谢和生理活性变化,油茶中三萜皂苷的总含量受到油茶品种、植物部位、成熟度和贮藏时间等因素影响。本文综述了油茶籽、根、茎、花、叶等部位及油茶籽加工副产物果壳、饼、粕等不同来源的三萜皂苷种类和含量,分析和讨论了油茶中三萜皂苷抗癌、抗氧化、抗微生物、杀虫、溶血鱼毒、抗炎、神经保护、心血管保护、降血糖和降血脂等生物活性及其分子机制,以更好地了解油茶中三萜皂苷的潜在健康功效,为基于油茶三萜皂苷的功能食品开发和油茶资源的综合利用提供理论基础。

油茶饼粕中高纯度茶皂素的绿色提取

针对油茶饼粕中茶皂素得率低、色泽深、工艺复杂等问题,选用索氏提取、超声辅助醇提、大孔树脂柱色谱、醇沉、重结晶等方法,研究了提取温度、提取方法、分离用填料和层析条件、溶剂和沉淀条件、结晶条件等因素对茶皂素提取的影响,形成了从油茶饼粕中获取高纯度茶皂素的绿色经济可持续工艺路线。结果表明,茶皂素的最佳提取纯化工艺为室温下80%的乙醇浸提饼粕,浸取液经冷冻处理,除去油脂层后,通过大孔树脂HP-20纯化,收集80%乙醇/水馏分段,浓缩后低温结晶析出,冻干后即得到高纯度、无色素的茶皂素。

油茶储藏蛋白提取过程组分迁移对其功能特性的影响

本研究以我国特色木本油料油茶储藏蛋白提取为对象,采用组学分析、分子对接等技术,研究提取过程中皂素伴随、组分迁移和相互作用对蛋白质组成与功能性质的影响。结果表明,碱法提取油茶储藏蛋白的最佳工艺条件为料液比1∶10(g/mL)、提取pH 8.0,该条件下提取率达75.8%,皂素/蛋白比值为2.60。11S球蛋白在pH 4.5时先沉淀,皂素/蛋白比值为0.36;清蛋白约占总储藏蛋白69%,提取过程与皂素共存,其皂素/蛋白比值为3.73。油茶储藏蛋白中清蛋白与球蛋白的起泡性均大于200%,乳化活性指数为16.7 m^(2)/g,皂素与蛋白质的相互作用能显著提升乳化稳定性。本研究可为特色油料蛋白质高值化利用与功能配料开发提供理论参考。

油茶总皂苷提取工艺优化

以乙醇为浸提剂 ,系统考察了乙醇浓度、料液比、浸提时间和浸提温度对油茶皂苷浸提率的影响。选用L16(4 5)正交表 ,正交实验得出最佳浸提条件为 :浸提温度 6 0℃、乙醇浓度 6 5 %、料液比 1∶15 (w/v)、浸提时间 1.5hr。在此条件下油茶皂苷的浸提得率为 19.15 %。

皂荚皂苷与茶皂苷抗菌活性研究

采用培养基连续稀释法测定了皂荚皂苷和茶皂苷的抗菌性能。实验结果表明，皂荚皂苷在较低的质量浓度（16～64g/L）下对细菌的生长能起到一定的抑制作用；对酵母菌抑制力相对较强。且抑菌活性与质量浓度呈正相关，其最低抗菌浓度（MIC）值为32g／L；对黑曲霉抑制作用则很弱，高浓度也很难起到杀灭效果。茶皂苷在质量浓度为16g/L的时候对啤酒酵母菌有杀灭作用，而对其他细菌和霉菌的抗菌效果则与皂荚皂苷相近。本实验结果经过进一步安全性评价后有望将皂荚皂苷的抗菌性作为天然抗菌添加剂运用到食品等工业中。

油茶皂素提取纯化及含量检测研究综述

本文综述了油茶皂素的性质、提取精制及油茶皂素定量方法的研究,并总结了当前茶皂素研究中最值得进一步研究的问题。

皂荚皂素和油茶皂素表面活性研究

系统研究了皂荚皂素和油茶皂素的表面活性和泡沫性能,以及温度、盐度、水硬度、pH值等因素对皂素水溶液表面张力的影响。结果表明,皂荚皂素和油茶皂素水溶液临界胶束浓度(CMC)值(20℃)分别为0.1和1.5g/L,最低表面张力(γCMC)(20℃)分别为43.292和43.531mN/m,皂荚皂素表面活性高于油茶皂素。质量浓度2.5g/L的皂素水溶液,油茶皂素泡沫高度比皂荚皂素高25mm,油茶皂素起泡性能和稳泡性能均比皂荚皂素稍强。温度升高,油茶皂素和皂荚皂素的γCMC均呈现明显下降趋势,而CMC值基本不变;pH值偏低或偏高时,皂素的CMC值略有降低;皂荚皂素和油茶皂素均有较好的耐盐和抗硬水能力。

茶籽多糖及茶皂素对肉鸡生长性能和肠道微生物的影响

试验旨在研究2种主要水溶性茶籽提取物茶籽多糖和茶皂素对良凤花肉鸡生产性能和肠道微生物菌群的影响。试验选用1日龄健康良凤花肉鸡800羽,随机分为4组,每组4个重复。抗生素组饲喂基础日粮添加5mg/kg恩拉霉素,试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别在基础日粮中添加茶籽多糖300mg/kg、茶皂素500mg/kg和茶籽多糖300mg/kg+茶皂素500mg/kg。结果表明:肉鸡日粮中添加水溶性茶籽提取物,在试验第3阶段试验Ⅰ、Ⅲ组平均日采食量显著高于抗生素组和试验Ⅱ组(P<0.05);日粮添加茶籽多糖和茶皂素均有利于肉鸡盲肠中乳酸杆菌的增殖(P<0.05),添加茶皂素能够降低盲肠大肠杆菌的数量(P>0.05)。

絮凝-沉淀法制备油茶皂素工艺研究

以水酶法制取油茶籽油后的水相为原料,采用絮凝-沉淀法提取其中的油茶皂素。单因素实验得出适宜的絮凝条件为:1%的壳聚糖溶液加入量为水相体积的16%,此时油茶皂素的损失率为22.24%。应用正交实验确定沉淀-转化的最佳工艺为:在絮凝离心分离后的水溶液中,加入质量3%的氧化钙,在20℃下沉淀6 h,离心后,加入转化剂碳酸氢铵(加入量为2.5倍的氧化钙量),40℃下释放0.5 h,最终得到纯度为80.25%的油茶皂素。此法在提高产品纯度的同时,浓缩了油茶皂素水溶液,降低了能耗。

AB-8大孔树脂纯化油茶皂素工艺的研究

采用AB-8大孔树脂对油茶皂素进行分离纯化,并优化其分离纯化条件。静态吸附动力学研究和解吸试验结果表明:AB-8大孔树脂属于快速吸附型树脂,解吸率较高,适用于油茶皂素分离纯化;AB-8树脂动态吸附和洗脱试验结果表明最优分离纯化条件为:上样流速为2.6 BV/h,以80%乙醇作为洗脱剂,洗脱流速为2 BV/h,洗脱液用量2 BV基本能将油茶皂素洗脱下来,纯化后油茶皂素的纯度为88.5%,回收率为83.7%。

CO_2超临界萃取油茶皂苷的研究

研究了CO2 超临界流体萃取油茶皂苷的工艺 ,确定最佳萃取条件为 ,压力 2 5MPa、温度 5 0℃、体积分数6 5 %乙醇为夹带剂 ,CO2 流量 2 5～ 30L/h ,萃取时间 3h。在最佳萃取条件下油茶皂苷的收率为 15 2 3% ,纯度78 6 5 %。与乙醇浸提法相比较 ,超临界萃取皂苷的纯度比乙醇浸提法高 5 4 % ,且工艺简单。