Cand-Tec抗原和GM抗原在早期诊断侵袭性真菌感染中的应用

目的探讨通过测定侵袭性真菌感染病人的Cand-Tec抗原和GM抗原状况,诊断侵袭性真菌感染。方法采用Latex凝集法和ELISA法检测临床确诊为侵袭性真菌感染患者血清Cand-Tec抗原和GM抗原,评价两种抗原在侵袭性真菌感染早期诊断中的价值。结果诊断侵袭性真菌感染患者19例,Cand-Tec抗原阳性16例,阳性率84.2%;GM抗原阳性13例,阳性率68.4%。结论 Cand-Tec抗原和GM抗原可作为诊断侵袭性真菌感染的诊断参考依据。

血清β-D葡聚糖、半乳甘露聚糖、Cand-Tec抗原检测在侵袭性真菌病诊断中的应用价值

目的:探讨血清β-D葡聚糖(βDG)、半乳甘露聚糖(GM)、和Cand-Tec抗原检测在诊断侵袭性真菌病的应用价值。方法:选择收治的疑似侵袭性真菌病住院患者136例作为研究对象,根据相关诊断标准确定是否发生侵袭性真菌病分为感染组82例和未感染组54例,使用Latex凝集法检测血清Cand-Tec抗原,使用ELISA法检测GM抗原,使用酶促反应检测βDG水平,分析三者联合诊断侵袭性真菌病的灵敏度和特异度。结果:感染组患者βDG阳性检出率为52.44%,GM阳性检出率为69.51%,Cand-Tec阳性检出率为80.49%,三者联合检出率为91.46%,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05);三者联合检测时灵敏度、特异度和符合度分别为95.12%,98.78%、92.68%,均明显高于三项指标单独检测值,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:血清βDG、GM抗原和Cand-Tec抗原联合应用能够提高IFD诊断的敏感度、特异度和符合度,均高于单独选择某种试验,在实际工作中建议三者联合使用,同时可结合其他检测方法和技术进行综合诊断进一步提高诊断的准确率。

禽白血病病毒p27抗原ELISA检测试剂盒的比较与评估

为了更好地进行禽白血病监测与净化,研究使用由蛋清、细胞培养物、胎粪等多种样品组成的样品盘对7种禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)p27抗原ELISA检测试剂盒(国产试剂盒DA、DB、DC,进口试剂盒IA、IB、IC、IDEXX)进行比较。结果显示:从分析特性上看,试剂盒分析特异性均较好,未观察到与其他常见禽源病毒的交叉反应;与IDEXX相比,DA、IA的分析敏感性较高,DB、IC其次,DC、IB较低,对于ALV不同亚群,各种试剂盒分析敏感性差异可达2~3个稀释度;从诊断特性上看,与IDEXX相比,DB、DC和IC的诊断敏感性和诊断特异性均高于90%;DA、IA和IB与IDEXX的诊断敏感性和诊断特异性均高于80%;各试剂盒对于不同类型样品(DF-1细胞培养物、蛋清、胎粪)的诊断敏感性和诊断特异性存在差异;从重复性上看,DA和IA的批内变异系数均在15%以内。综上所述,与IDEXX相比,当前国产p27抗原ELISA检测试剂盒DA和DB、进口p27抗原ELISA检测试剂盒IA和IC的各项性能可满足禽白血病净化各阶段对不同类型样品的检测需求。

前列腺影像报告和数据系统2.1版联合前列腺特异性抗原密度对特异性抗原灰区前列腺临床显著癌的诊断价值

目的基于双中心数据,探讨前列腺影像报告和数据系统2.1版(PI-RADS v2.1)联合前列腺特异性抗原密度(PSAD)在前列腺特异性抗原(PSA)灰区(4~10 ng/ml)患者中对临床显著性前列腺癌(csPCa)的诊断价值。资料与方法回顾性分析2017年1月—2022年5月解放军总医院第一医学中心(中心一)和解放军总医院第六医学中心(中心二)行多参数磁共振成像且具备病理结果的PSA灰区前列腺疾病患者的临床及影像资料。将中心一患者作为训练组(220例),中心二患者作为测试组(50例)。训练组应用Logistic回归确定csPCa的独立预测因素,并分析多参数组合对csPCa的诊断效能,在测试组进行验证。结果训练组csPCa和非csPCa组前列腺体积、PSAD、PI-RADS v2.1评分差异有统计学意义(Z=-6.468、6.589、75.676,P均<0.001);Logistic回归分析显示PI-RADS v2.1评分和PSAD是csPCa的独立危险因素(P均<0.001)。训练组和测试组PI-RADS v2.1+PSAD组成的Logistic回归模型预测PSA灰区csPCa的曲线下面积为0.860(95%CI 0.808~0.903)、0.906(95%CI 0.790~0.970);Logistic回归模型的曲线下面积高于PI-RADS v2.1和PSAD,差异有统计学意义(P均<0.05)。当PI-RADS v2.1评分为低或中危组且PSAD<0.15 ng/ml^(2)时,训练组和测试组的csPCa检出率较低。结论PI-RADS v2.1评分和PSAD是预测PSA灰区csPCa的独立危险因素,两者联合应用对PSA灰区csPCa的诊断效能优于两者单独应用,有助于临床活检决策。

共表达IL-7/CCL19的新抗原反应性T细胞对小鼠肺癌的抗肿瘤研究

背景与目的新抗原反应性T细胞(neoantigen reactive T cell,NRT)具有抑制表达特异性新抗原的肿瘤生长的能力。然而,由于免疫浸润困难和肿瘤微环境的抑制,NRT在实体瘤中的治疗效果有限。本研究针对小鼠肺癌细胞设计出可以同时表达白细胞介素7(interleukin 7,IL-7)和趋化因子19(chemokine C-C motif ligand 19,CCL19)的NRT细胞(7×19 NRT),并对7×19 NRT细胞和常规NRT细胞的抗肿瘤效果差异进行了评估。方法针对小鼠Lewis肺癌细胞(Lewis lung carcinoma,LLC)进行了新一代测序和新抗原预测,制备了RNA疫苗,培养了NRT细胞,构建了编码IL-7和CCL19的逆转录病毒载体,转导NRT细胞并成功表达IL-7和CCL19,成功获得了7×19 NRT,并在小鼠体内外对其抗肿瘤效果进行了评估。结果7×19 NRT细胞通过分泌IL-7和CCL19显著增强T细胞的增殖和侵袭能力,在小鼠肺癌中实现了显著的抑瘤作用,延长了小鼠的生存期。经7×19 NRT治疗后,T细胞浸润肿瘤组织及肿瘤组织坏死显著增加。此外,7×19 NRT治疗与常规NRT治疗均安全。结论通过IL-7和CCL19的表达,NRT细胞的抗实体瘤能力显著增强,这是一种对NRT安全有效的基因修饰。

牛羊布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验的建立与应用

【目的】建立并优化布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验(Native hapten agar gel immuno-diffusion test,NH-AGID),检测临床样品。【方法】建立NH-AGID方法,评价方法特异性、敏感性及重复性;检测免疫地区2287份、非免疫地区252份牛、羊血清。【结果】建立了NH-AGID方法,检测稳定,重复性好,具有较高的特异性;对自然感染阳性动物检测敏感性低于80%,对排菌动物的检测敏感性高于90%,检出布病阳性抗体的阈值高于RBT。免疫地区血清NH抗体平均检出率17.8%,LPS抗体平均检出率52.3%;非免疫地区血清NH抗体平均检出率40.9%,LPS抗体平均检出率54.8%。【结论】应用NH-AGID方法可鉴别区分免疫地区牛、羊布病感染动物和免疫动物。检出NH抗体动物处于布鲁氏菌活动期或排菌期为布病感染动物,应及时剔除出群。

为提升IPTR患者血小板输注后CCI值建立分级规避HLA抗体对应抗原方法及HLAMatchmaker的应用研究

目的:建立分级规避HLA抗体MFI阈值对应抗原方法,联合应用HLAMatchmaker表位计算法,选择供患者表位最小错配评分值,评估两种方法为免疫性血小板输注无效(Immune platelet transfusion refractoriness,IPTR)患者选择HLA相容性血小板供者,在提升血小板输注后校正增加值(CCI)的应用价值。方法:采用SPRCA法完成51例IPTR患者的7807次血小板交叉配型实验,判断其免疫反应阴/阳性结果。采用Luminex单抗原流式微珠法检测患者的HLA-I类抗体,获得不同特异性抗体对应HLA-I类抗原MFI值,并将其分组及分级,强阳性组(MFI>4000,1级)、中阳性组(1000中阳性组>弱阳性组)。强阳性和中阳性组与阴性对照组之间的SPRCA实验免疫反应阳性结果检出数存在统计学差异(P<0.001),弱阳性位组和阴性对照组之间的SPRCA实验免疫反应阳性结果检出数无统计学差异(P>0.05)。设置强阳性组为相应特异性HLA位点对应抗原1级规避阈值,中阳性组为2级规避阈值,弱阳性组为3级规避阈值,在供者血小板紧缺情况下,可以不需要规避弱阳性组。规避1和2级HLA-I类抗体对应供者抗原及选择HLAMatchmaker表位错配评分数≤7血小板供者策略,24 h内CCI值均>4.5×109/L,均可获得临床血小板输注有效。结论:在为IPTR患者选择HLA-I类相容性供者时,分级规避HLA-I类抗体对应供者抗原,综合选择供受者HLAMatchmaker表位错配评分数≤7,经血小板交叉配型实验确认为阴性结果的供者选择策略,对提升IPTR患者血小板计数具有一定实际应用价值。

β-受体激动剂类药物人工抗原合成方法研究进展

开展动物性食品中β-受体激动剂监测,对保障食品安全具有重要意义。免疫分析技术操作快速、灵敏度高、检测成本低,被广泛用于大批量畜禽产品的快速筛查。抗体特性是免疫检测的核心,而人工抗原合成的质量直接影响特异性抗体性能。本文主要综述了碳二亚胺法、活泼酯法、混合酸酐法、重氮化法、戊二醛法等β-受体激动剂类药物人工抗原合成方法,以及紫外光谱法、核磁共振法等人工抗原鉴定方法,以期为免疫分析等相关工作研究提供参考。

乳头溢液肿瘤标记物癌胚抗原、糖类抗原153、糖类抗原125联合检测在乳腺癌诊断中的价值

目的:探讨乳头溢液肿瘤标记物癌胚抗原(Carcinoembryonic Antigen,CEA)、糖类抗原153(Carbohydrate Antigen153,CA153)、糖类抗原125(Carbohydrate Antigen 125,CA125)联合检测在乳腺癌诊断中的临床应用价值。方法:收集92例乳腺浸润性导管癌伴乳头溢液患者(乳腺癌组)、50例乳腺导管增生病变伴有乳头溢液患者(良性对照组)为研究对象;电化学发光法检测两组患者乳头溢液和血清CEA、CA153、CA125水平;以病理诊断为金标准,用四格表法统计分析乳头溢液CEA、CA153、CA125联合检测诊断乳腺癌的价值。结果:乳腺癌组乳头溢液和血清CEA、CA153、CA125水平均明显高于良性对照组,且乳腺癌组中乳头溢液CEA、CA153、CA125水平明显高于血清CEA、CA153、CA125水平(均P<0.01);乳腺癌患者乳头溢液CEA、CA153、CA125表达水平与对应血清CEA、CA153、CA125表达水平呈明显正相关性(r=0.872、0.789、0.843),P<0.01;乳腺癌组乳头溢液CEA、CA153、CA125水平与患者年龄、肿瘤部位无明显相关性(P>0.05),与肿瘤大小、分化程度、临床分期、转移、复发明显相关(P<0.01);肿瘤直径>2 cm、低分化、高分期、转移、复发患者乳头溢液CEA、CA153、CA125水平明显高于肿瘤直径≤2 cm、高中分化、低分期、无转移、无复发患者乳头溢液CEA、CA153、CA125水平;乳头溢液CEA、CA153、CA125三项联合检测诊断乳腺癌的敏感性、准确性、阴性预测值与各单项及血清组合检测比较明显提高(P<0.01),分别为94.57%(87/92)、92.25%(131/142)、89.80%(44/49)。结论:乳头溢液CEA、CA153、CA125联合检测对伴有乳头溢液乳腺癌早期诊断供了新思路,明显提高了乳腺癌诊断价值。

猪细小病毒4型单克隆抗体制备及抗原表位鉴定

为了制备猪细小病毒(PPV)4型Cap蛋白单克隆抗体(mAb)并鉴定其抗原表位,试验采用原核表达的Cap重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)、血凝抑制(HI)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛选阳性克隆,最终获得2E7、4D6和5C9这3株特异性杂交瘤细胞株;然后用mAb对Cap蛋白多肽进行ELISA检测,鉴定分析其抗原表位。结果显示:4D6和5C9 mAb识别表位为线性表位,分别为387RRQDN^(391)和578QRKE^(581),而2E7 mAb识别的表位为构象表位;通过对Cap蛋白3D结构定位分析,387RRQDN^(391)和578QRKE^(581)抗原表位位于蛋白表面,且在PPV4亚型中高度保守,而与猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)和猪博卡病毒(PBoV)基因序列同源性低。本研究为PPV4诊断试剂的开发和新型疫苗的研制提供了参考。

鼠疫耶尔森菌低钙应答V抗原人源单克隆抗体筛选与鉴定

目的筛选抗低钙应答V抗原(LcrV)的人源单克隆抗体,分析抗体基因特点,检测抗体与抗原结合的特异性、亲和力及功能。方法使用PCR方法从鼠疫疫苗临床试验志愿者外周血细胞cDNA扩增抗体轻、重链可变区基因片段,构建ScFv噬菌体抗体文库。用LcrV对文库进行富集筛选,将获得的抗体基因表达成人IgG1后,测定抗体与LcrV抗原结合的特异性、亲和力、免疫调节功能以及保护能力。结果成功构建了鼠疫耶尔森菌人源ScFv抗体文库,库容量为7.54×10^(8)。抗体文库经LcrV筛选后获得了3株抗LcrV抗体,命名为RV-B4、RV-D1和RV-E8。3株抗体重链为VH1-46和VH3-30,轻链分别为VL1-51、VK3-20和VK1-39。3株抗体经ELISA及Western blot验证均与LcrV特异性结合,其与V抗原结合的解离常数(KD)分别为2.1 nmol/L、1.24 nmol/L和42 nmol/L。RV-D1体外降低人THP-1分泌TNF-α,动物攻毒试验中未发现抗LcrV抗体的保护效果。结论从鼠疫疫苗免疫人群获得了靶向低钙应答V抗原的人源抗体,以结合抗体为主,不能有效阻断病菌感染。所获得的单抗为鼠疫免疫基础研究、鼠疫诊断应用提供了候选材料。

糖类抗原125阴性卵巢癌患者血清人附睾蛋白4、癌胚抗原、神经元特异性烯醇化酶表达水平及与患者预后的关系

目的探讨糖类抗原125(CA125)阴性卵巢癌患者血清人附睾蛋白4(HE4)、癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达水平及与患者预后的关系。方法选取107例CA125阴性卵巢癌患者作为观察组,81例良性卵巢肿瘤患者作为对照组。比较两组患者HE4、CEA、NSE表达水平;采用多因素Logistic回归模型分析CA125阴性卵巢癌患者预后的影响因素。结果观察组患者血清HE4、CEA、NSE水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。预后良好与预后不良患者分化程度、临床分期及HE4、CEA、NSE水平比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,HE4、CEA、NSE高表达均为CA125阴性卵巢癌患者预后不良的危险因素(P﹤0.05)。结论与良性卵巢肿瘤患者相比,HE4、CEA、NSE在CA125阴性卵巢癌患者中呈高表达,HE4、CEA、NSE表达水平能影响CA125阴性卵巢癌患者的预后,三者水平越低,患者预后越好。

黑色素瘤个体化治疗策略:基于新抗原的特异性免疫治疗

免疫检查点抑制剂显著改善黑色素瘤患者预后,但原发及继发性耐药使治疗进入瓶颈期。T细胞受体与肿瘤抗原的结合是免疫治疗发挥作用的关键。肿瘤新抗原(neoantigen)由肿瘤特异性蛋白编码突变产生,在肿瘤细胞中特异表达,在正常组织不表达,不受中枢免疫耐受影响,是免疫治疗的理想靶点。靶向肿瘤新抗原的疫苗、过继性细胞回输及抗体药物等能有效加强和扩大肿瘤特异性免疫反应,促进T细胞识别并清除肿瘤,突破当前治疗瓶颈。本文就黑色素瘤新抗原的个性化治疗现状、最新进展、临床困境及未来发展方向进行讨论分析。

脓毒症合并2型糖尿病患者单核细胞人白细胞DR抗原的表达水平分析

目的观察2型糖尿病(T2DM)对脓毒症患者外周血单核细胞表面人白细胞DR抗原(HLA-DR)表达水平的影响。方法选取首都医科大学附属北京朝阳医院2021年3月至2022年2月收治的65例脓毒症合并T2DM(脓毒症合并T2DM组)、67例脓毒症未合并T2DM(脓毒症组)、60例T2DM患者(T2DM组)作为研究对象,以45例同期本院健康体检志愿者作为健康对照组。收集受试者性别、年龄、既往史、糖化血红蛋白(HbAlc)、入院时血糖、白细胞计数(WBC)淋巴细胞计数(LYM)超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、主要感染部位,入院24h内进行序贯器官衰竭评分(SOFA)。采用流式细胞术检测外周血HLA-DR+CD14^(+)细胞表达百分比及平均荧光强度(MFI);并随访28d,观察T2DM对脓毒症患者28d预后的影响,比较不同预后患者HLA-DR^(+)CD14^(+)水平的差异。结果T2DM组HLA-DR^(+)CD14^(+)细胞表达百分比和MFI均明显低于健康对照组[HLA-DR^(+)CD14^(+)细胞表达百分比:87.72%(76.18%,93.64%)比94.86%(92.91%,95.70%),HLA-DR^(+)CD14^(+)MFI:10.80(8.45,14.45)比12.40(1.45,15.28)],脓毒症合并T2DM组和脓毒症组HLA-DRCD14^(+)细胞表达百分比和MFI均较健康对照组及T2DM组进一步降低[HLA-DR^(+)CD14^(+)细胞表达百分比:70.78%(42.22%,84.73%)、68.95%(44.95%,87.00%)比94.86%(92.91%,95.70%)、87.72%(76.18%,93.64%),HLA-DR^(+)CD14^(+)MFI:5.50(3.81,9.20)、5.29(3.35,9.59)比12.40(1.45,15.28)、10.80(8.45,14.45),均P<0.05]。脓毒症组和毒症合并T2DM组两组HLA-DR^(+)CD14^(+)细胞表达百分比和MFI、SOFA评分、28d病死率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。脓毒症组和脓毒症合并T2DM组死亡者的年龄明显大于生存者[岁:脓毒症组为68(60,74)比61(52,69),脓毒症合并T2DM组为66(64,73)比60(53,68),均P<0.05],SOFA评分明显高于生存者[分:脓毒症组为14(11,16)比8(5,11),脓毒症合并T2DM组为12(9,16)比8(6,11),均P<0.05],死亡组的HLA-DR^(+)CD14^(+)百分比和HLA-DR^(+)CD14^(+)MFI均明显低于生存组[HLA-DR^(+)CD14^(+)细胞表达百分比:脓毒症组为44.94%(28.01%,64.45%)比77.14%(47.41%,88.35%),脓毒症合并T2DM组为40.68%(34.83%,66.64%)比73.46%(58.44%,85.31%);HLA-DR^(+)CD14^(+)MFI:脓毒症组为3.92(2.30,5.44)比7.07(3.39,10.55),脓毒症合并T2DM组为3.90(3.34,6.04)比6.81(4.41,9.32),均P<0.05]。相关性分析显示:T2DM组、脓毒症组和脓毒症合并T2DM组HLA-DR^(+)CD14^(+)细胞表达百分比与hs-CRP均呈负相关(r值分别为-0.448、-0.628、-0.457,均P<0.001),MFI与hs-CRP亦呈负相关(r值分别为-0.289、-0.540、-0.323,均P<0.05)。脓毒症组和脓毒症合并T2DM组的HLA-DR^(+)CD14^(+)百分比与SOFA评分均呈负相关(r值分别为-0.520、-0.558,均P<0.001),MFI与SOFA评分也均呈负相关(r值分别为-0.327、-0.482,均P<0.01)。结论仑HLA-DR^(+)CD14^(+)水平在T2DM和脓毒症时均下降,但当脓毒症合并T2DM时,HLA-DR+CD14^(+)水平未发现进一步下降。

新型冠状病毒E蛋白的结构特征及抗原表位分析

目的 基于生物信息学分析新型冠状病毒E蛋白的结构特征,并筛选出潜在的B细胞、T细胞抗原表位。方法 通过多种生物信息软件分析SARS-CoV-2 E蛋白的一级结构、跨膜区域、二级结构,B细胞表位、T细胞相关表位并计算其人口覆盖率。结果 SARS-CoV-2 E蛋白含有75个氨基酸残基,脂溶性高,是疏水性蛋白,存在一个跨膜结构区域12-34aa,二级结构主要以α螺旋和无规则卷曲为主。筛选出一个可能的B细胞抗原表位,并发现与MHC Ⅰ类和MHC Ⅱ类结合的10种肽是疫苗设计的有希望的候选者,这些候选表位可分别覆盖世界88.5%和99.99%的人群。结论 通过生物信息学分析了新型冠状病毒E蛋白的结构特征;筛选出潜在的B细胞、T细胞抗原表位,其中多个T细胞表位人群覆盖率较高,有希望成为疫苗候选表位。

Myc诱导的核抗原通过调控蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/信号通路促进急性髓细胞性白血病细胞增殖

目的探讨Myc诱导的核抗原(Myc induced nuclear antigen,MINA)在急性髓细胞性白血病(AML)中的表达及其对HL-60细胞的增殖影响及其分子机制。方法研究时间为2021年5月至2023年1月。AML数据集来自癌症基因组图谱(TCGA)。通过TCGA数据库下载AML的临床信息和MINA的表达水平。构建MINA基因的过表达慢病毒载体,通过慢病毒感染,建立稳定MINA基因过表达的人原髓细胞白血病细胞(HL-60)细胞系,通过细胞计数法检测其对细胞增殖的影响;蛋白质印迹法检测MINA对HL-60细胞蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)磷酸化的影响。TCGA数据库分析MINA与mTOR在AML中表达的相关性。结果分析TCGA数据库,结果显示MINA mRNA在AML中表达16.25±0.58明显高于健康对照者10.20±0.29,MINA的表达水平与AML病人预后密切相关,相对于低表达者,高表达MINA的AML癌病人预后较差(HR=2.30,P=0.003)。成功构建稳定MINA高表达的HL-60细胞系,过表达MINA促进HL-60细胞增殖,第6天细胞数过表达组明显高于对照组(P<0.01);过表达MINA可明显增加Akt和mTOR的磷酸化水平,Akt抑制剂哌立福新(Perifosine)可逆转过表达MINA导致的HL-60细胞增殖。MINA与mTOR的表达水平在AML中具有明显的正相关性(r=0.36,P<0.01)。结论MINA在AML病人中高表达,高表达MINA的AML病人预后较差,MINA可能通过调控Akt/mTOR通路促进AML细胞增殖。

抗原修复时间对不同克隆号P40免疫组化染色结果的影响

目的:探讨抗原修复时间对不同克隆号的P40免疫组化染色结果的影响。方法:选择本科室P40免疫组化染色异常的胸水细胞沉渣包埋蜡块,3μm连续切片4张,按抗原修复时间不同分为两组(A组抗原修复40 min,B组抗原修复80 min),每组两张切片分别滴加C3B4和MXR010两种不同克隆号的P40抗体,进行免疫组化染色对比实验。结果:A组的C3B4出现胞浆胞膜中度非特异染色,而MXR010没有出现非特异染色。B组的C3B4出现胞浆胞膜高度非特异染色,而MXR010出现胞浆胞膜轻度非特异染色。同一克隆号,A组和B组相比,随着抗原修复时间的延长,MXR010从无非特异染色变为轻度非特异染色,而C3B4从中度非特异染色加重为高度非特异染色。结论:抗原修复时间对不同克隆号的P40免疫组化染色结果会产生影响,随着抗原修复时间的延长,越容易出现非特异染色。选择适当的抗原修复时间和特异性好的抗体,可以减少免疫组化的非特异染色。

人类白细胞抗原-G在妇科相关疾病诊治中的研究进展

人类白细胞抗原-G(HLA-G)是一种非经典的主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(MHCⅠ),与特异性免疫细胞相互作用,诱导母胎免疫耐受,以保护妊娠。HLA-G也是肿瘤细胞逃避免疫监测产生免疫耐受的重要标志物,其在包括子宫内膜异位症、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌等在内的各种妇科疾病中都有表达并且与疾病预后存在相关性。因此,回顾既往HLA-G在妇科疾病中的研究,为阐明某些妇科疾病发生发展的具体分子机制奠定理论基础,也为今后妇科疾病的诊断及治疗提供参考。

肿瘤抗原肽的HLA限制性确认和诱导反应性T细胞杀瘤能力评估

目的了解肿瘤抗原肽的HLA限制性以及其诱导的T细胞能否杀伤肿瘤细胞,探索无关供者来源细胞用于过继性抗肿瘤T细胞治疗。方法使用16个肿瘤抗原肽诱导18名无关供者外周血单个核细胞(PBMC)分化为反应性T细胞,并分析HLA型别;利用NetMHC数据库预测肽和HLA分子亲和力;选择HLA-A2限制性的肿瘤抗原肽诱导第二组17名无关供者的PBMC进行杀瘤实验,反应性T细胞作为效应细胞,T2细胞及肿瘤抗原肽同源的肿瘤细胞作为靶细胞,测量LDH(乳酸脱氢酶)释放量或者RTCA(实时无标记细胞分析仪)检测效应细胞杀瘤效率,比较HLA-A2+和A2-T细胞杀瘤效率。结果筛出和HLA-A2具有高亲和力的肿瘤抗原肽LM7,可诱导5/11 HLA-A2+为反应性T细胞,其中HLA-A2+纯合子则为3/3,而HLA-A2-者则为2/7。LM7诱导反应性T细胞杀伤肿瘤百分比A2+组明显强于A2-组(60.72±11.28 vs 47.2±4.46,P=0.03)。结论本研究显示NetMHC预测对于纯合子样品更有帮助,肿瘤抗原肽LM7具有HLA-A2限制性,可诱导部分HLAA2+PBMC分化为反应性T细胞,可杀伤肿瘤,应对供者进行HLA筛选并分析其细胞功能,其诱导的反应性T细胞可作为过继性T细胞抗肿瘤治疗的细胞来源。

磁共振联合前列腺特异性抗原评估前列腺癌术后复发的价值

目的分析磁共振(MRI)多参数成像联合血清前列腺特异性抗原(PSA)对前列腺癌根治术后局部复发的诊断价值。方法回顾性收集2018年1月至2022年12月于四川省中西医结合医院行前列腺癌根治术的243例患者临床资料,根据术后1年是否发生局部复发,将其分为局部复发组(n=22)和未复发组(n=221)。记录磁共振弥散成像(DWI)评分、动态对比增强MRI(DCE-MRI)评分及总风险评分,比较两组临床资料、表观扩散系数(ADC)值、DWI评分、DCE-MRI评分、总风险评分及血清PSA水平差异,使用受试者工作特征(ROC)曲线分析ADC值、总风险评分、血清PSA对前列腺癌根治术后局部复发的诊断价值。结果两组年龄、术前前列腺体积、体重指数及吸烟史比较,差异无统计学意义(P>0.05)。复发组临床分期、血清PSA水平及Gleason、DWI、DCE-MRI、总风险评分均高于未复发组(P<0.05),ADC值低于未复发组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,ADC值、总风险评分及血清PSA对前列腺癌根治术后局部复发均具有较高的诊断价值(AUC=0.742、0.965、0.940,P<0.05)。结论基于DCE-MRI和DWI的总风险评分与血清PSA水平对前列腺癌根治术后局部复发诊断均有利,二者联合诊断应用价值较高。