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Epidemiological Survey on Canine Parvovirus Disease in Taizhou Region,Jiangsu Province,China
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作者 Yuan Weifeng Liu Jing +3 位作者 Zhao Xuegang Lu Jiang Zheng Xiaoliang Zhu Hongfei 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2014年第4期173-174,179,共3页
The canine parvovirus disease is an acute infectious disease caused by canine parvovirus(CPV). It is clinically characterized by severe vomiting,hemorrhagic enteritis,significant reduction in white blood cells and myo... The canine parvovirus disease is an acute infectious disease caused by canine parvovirus(CPV). It is clinically characterized by severe vomiting,hemorrhagic enteritis,significant reduction in white blood cells and myocarditis. The disease with high incidence,highly infectious and high mortality has become one of the serious infectious diseases threatening dog raising industry in China. In this research,260 cases of canine parvovirus case from an Aite Pet Clinic in Taizhou City during January 2010 and March 2011 were analyzed. This study discloses the epidemiology of CPV in Taizhou region of Jiangsu Province,i. e.,the incidence of CPV and canine motility are closely correlated with age,breed,immune inoculation and season. This study provides useful guide for the clinical treatment of CPV in the future. 展开更多
关键词 Taizhou region canine parvovirus disease Epidemiological investigation
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Development of a Polyclonal Antibody-based AC-ELISA and Its Comparison with PCR for Diagnosis of Canine Parvovirus Infection 被引量:4
2
作者 Manoj Kumar Sukdeb Nandi Sunil Chidri 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2010年第5期352-360,共9页
A polyclonal antibody-based antigen-capture ELISA (AC-ELISA) has been developed for detection of Canine parvovirus (CPV) antigens in faecal samples of dogs. The assay uses rabbit anti-CPV polyclonal antibody as th... A polyclonal antibody-based antigen-capture ELISA (AC-ELISA) has been developed for detection of Canine parvovirus (CPV) antigens in faecal samples of dogs. The assay uses rabbit anti-CPV polyclonal antibody as the capture antibody, guinea pig anti-CPV polyclonal antibody as tracing antibody and anti-guinea pig HRPO conjugate as the detection system. The optimum dilution of the capture antibody and the tracing antibody capable of detecting the CPV-2 antigens was found to be 1:1 600 and 1:400, respectively, in the check-board titration. In this study, a total of 152 samples (129 faecal samples and 23 cell culture supernatant) were tested both by AC-ELISA and by polymerase chain reaction (PCR). Of the samples tested, 69 and 78 samples were found positive by AC-ELISA and PCR, respectively. The AC-ELISA had relative sensitivity, relative specificity and accuracy of 88.4%, 100.0% and 91.4% respectively. The analytical sensitivity of AC-ELISA was estimated to be 102.8 TCID50/mL whereas PCR sensitivity was 100.8 TCIDs0/mL. The AC-ELISA is a simple, quick and reliable method for screening large numbers of faecal samples of dogs suspected of CPV infection. 展开更多
关键词 canine parvovirus (cpv Polyclonal antibody Antigen-capture ELISA(AC-ELISA)
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犬细小病毒CPV-BJ03/17株分离鉴定及VP2基因遗传进化分析 被引量:8
3
作者 王洋 胡博 +4 位作者 鲁荣光 吕爽 赵辉 廉士珍 闫喜军 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第7期1933-1941,共9页
为了研究当前犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)国内流行株的遗传变异情况,试验从北京某宠物基地采集疑似CPV感染死亡犬的肠道组织,无菌处理病料后,用F81细胞进行病毒培养,通过电镜形态学观察、血清学、分子生物学和攻毒试验进行鉴定... 为了研究当前犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)国内流行株的遗传变异情况,试验从北京某宠物基地采集疑似CPV感染死亡犬的肠道组织,无菌处理病料后,用F81细胞进行病毒培养,通过电镜形态学观察、血清学、分子生物学和攻毒试验进行鉴定。结果表明,病毒在F81细胞上出现明显的细胞病变(CPE),电镜观察可见直径20nm左右的病毒粒子,血凝效价1∶256,PCR鉴定在570bp处有特异性条带,证明分离出1株CPV,命名为CPV-BJ03/17。全基因组测序分析表明,病毒基因组全长4 620bp,提交GenBank,登录号为:MF134808;该毒株与广东(SC02/2011)、深圳(CPV-s5)和甘肃(CPV-LZ1)等地的分离株亲缘关系较近,核苷酸同源性均为99.7%。VP2氨基酸序列分析表明,CPV-BJ03/17分离株确定为New CPV-2a亚型,主要氨基酸位点与近期分离株BJ15-1等相比无明显变化。动物回归试验表明,CPV-BJ03/17为CPV强毒株。本研究分离出1株CPV强毒株,通过比较CPV的流行情况和遗传变异规律,为CPV的疾病治疗及疫苗研究提供参考。 展开更多
关键词 犬细小病毒(cpv) 分离鉴定 序列分析
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进出口动物产品中ADV和CPV复合PCR方法的建立和应用
4
作者 杜雄伟 李叶 《大连民族学院学报》 CAS 2013年第3期251-253,共3页
针对ADV和CPV基因序列保守区域设计两对引物,建立了ADV和CPV复合PCR方法,并对进出口动物样品进行了检测。结果表明,该方法特异性和敏感性良好,非常适宜临床样品的大量筛选检测,为建立特异、敏感、快速的水貂阿留申病和犬细小病毒病检测... 针对ADV和CPV基因序列保守区域设计两对引物,建立了ADV和CPV复合PCR方法,并对进出口动物样品进行了检测。结果表明,该方法特异性和敏感性良好,非常适宜临床样品的大量筛选检测,为建立特异、敏感、快速的水貂阿留申病和犬细小病毒病检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 水貂阿留申病毒(ADV) 犬细小病毒(cpv) 复合PCR
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运用ELISA快速检测CPV抗体方法的建立与均衡性的研究 I.间接ELISA快速检测CPV抗体方法的建立
5
作者 吴石金 周建群 《畜禽业》 2001年第3期20-21,共2页
用蔗糖密度梯度离心和凝胶层析纯化犬细小病毒(CPV)作抗原,建立了检测CPV抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA),其特异性和稳定性良好,结果判定精确明显,易于把握。
关键词 犬细小病毒 酶联免疫吸附试验 抗体检测 特异性 稳定性
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1例犬细小病毒病的诊治
6
作者 彭羽 洪晗 《现代畜牧兽医》 2024年第11期54-56,共3页
一出现便血症状的患犬综合临床症状以及血常规、C反应蛋白检查、犬细小病毒(CPV)试纸、PCR检查的结果进行诊断,确诊为出血性肠炎型犬细小病毒病。遵循控制感染、对症治疗(补液、止吐、止泻等)、干扰病毒复制、营养支持等治疗原则,患犬经... 一出现便血症状的患犬综合临床症状以及血常规、C反应蛋白检查、犬细小病毒(CPV)试纸、PCR检查的结果进行诊断,确诊为出血性肠炎型犬细小病毒病。遵循控制感染、对症治疗(补液、止吐、止泻等)、干扰病毒复制、营养支持等治疗原则,患犬经过7 d的治疗,最终恢复健康出院,后期复查各项指标均正常。 展开更多
关键词 犬细小病毒 犬细小病毒病 宠物临床诊疗
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红景天苷对犬细小病毒体外复制的抑制效应分析
7
作者 张美雯 王成龙 +3 位作者 刘玉贞 赵育桐 朱记平 李毅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期5738-5750,共13页
旨在分析红景天苷(salidroside,SAL)对犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)的抑制作用及其机制。对病毒感染过程的3个节点(吸附、侵入、复制)分别添加SAL进行孵育,检测细胞中病毒滴度,评价SAL对病毒的抑制作用;TUNEL(Terminal deoxynucle... 旨在分析红景天苷(salidroside,SAL)对犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)的抑制作用及其机制。对病毒感染过程的3个节点(吸附、侵入、复制)分别添加SAL进行孵育,检测细胞中病毒滴度,评价SAL对病毒的抑制作用;TUNEL(Terminal deoxynucleotidyl Transferase dUTP Nick End Labeling)试验分析细胞凋亡;实时荧光定量PCR和Western blot分别检测细胞凋亡相关蛋白和炎症因子的mRNA或蛋白表达,分析和初步验证SAL抑制病毒复制的机制。结果显示,SAL可显著抑制CPV复制,但对CPV的吸附及侵入过程没有显著影响。SAL可抑制CPV诱导的细胞凋亡,且显著抑制了caspase 8及tBID的蛋白表达。进一步研究发现,CPV可诱导IL-1β及相关炎症因子上调表达,而SAL孵育病毒感染的细胞后部分炎症因子下调表达。Caspase 1、NLRP3的激活与IL-1β密切相关,病毒感染细胞后添加SAL进行孵育可抑制caspase 1的激活,而对NLRP3无显著作用。应用siRNA-caspase 8下调细胞中caspase 8的表达再孵育病毒,结果显示,细胞中IL-1β表达被抑制,与SAL的作用效果一致,表明SAL主要通过抑制caspase 8信号通路活化从而抑制炎症因子的表达。综上所述,SAL可有效抑制CPV的复制,其通过调控caspase 8信号通路抑制了CPV诱导的细胞凋亡,且抑制了部分炎症因子的表达。本研究为有效治疗CPV提供了新的途径和方法。 展开更多
关键词 犬细小病毒(cpv) 红景天苷 细胞凋亡 细胞因子
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犬细小病毒病的诊断及治疗
8
作者 于志海 刘雪芹 +4 位作者 辛萍萍 张风荣 李梅清 刘晓臣 宋之波 《动物医学进展》 北大核心 2024年第10期123-125,共3页
犬细小病毒病(Canine parvovirus disease,CPV)是犬的一种烈性传染病。该病传染性强,不同季节、不同品种及各年龄段的犬均可发病,如不及时治疗,常会导致病犬死亡。作者对前来医院就诊的2例肠炎型和心肌炎型犬细小病毒病例进行基本的临... 犬细小病毒病(Canine parvovirus disease,CPV)是犬的一种烈性传染病。该病传染性强,不同季节、不同品种及各年龄段的犬均可发病,如不及时治疗,常会导致病犬死亡。作者对前来医院就诊的2例肠炎型和心肌炎型犬细小病毒病例进行基本的临床检查、血常规检查以及胶体金快速诊断卡检查进行诊断,使用特异性治疗法、支持疗法、对症治疗等对患病犬进行治疗。最终肠炎型病例痊愈,心肌炎型病例死亡。结果可为不同型犬细小病毒临床病例的诊治提供参考。 展开更多
关键词 犬细小病毒病 肠炎型 心肌炎型 诊断 治疗
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犬细小病毒悬浮培养工艺研究
9
作者 李凤艳 陈生雷 +3 位作者 刘艳霞 刘梦成 姜斌 舒秀伟 《现代畜牧兽医》 2024年第3期29-31,共3页
研究旨在证明犬细小病毒(CPV)悬浮培养的可能性,提高CPV P6株抗原的病毒含量,降低转瓶生产不同批次间疫苗质量差异,生产质量稳定的疫苗产品。试验利用大孔的纤维编织物BioNOCⅡ型微载体所提供的巨大表面积,实现Vero细胞高密度培养,建立... 研究旨在证明犬细小病毒(CPV)悬浮培养的可能性,提高CPV P6株抗原的病毒含量,降低转瓶生产不同批次间疫苗质量差异,生产质量稳定的疫苗产品。试验利用大孔的纤维编织物BioNOCⅡ型微载体所提供的巨大表面积,实现Vero细胞高密度培养,建立了Tide-cell生物反应器大规模培养CPV P6株抗原制备工艺。结果显示:生物反应器Tide-cell载体罐内接入1.0×10^(10)个F81种子细胞,在优化的参数条件下培养,用RPMI 1640培养液经过96 h培养,细胞总数为1.0×10^(11)个;在葡萄糖消耗量约为5 g/(L·h)时,按照病毒感染复数(MOI)=0.02将生产种毒CPV P6株接入Tide-cell微载体细胞培养瓶内,补加含8%血清的RPMI 1640病毒维持液至50 L,调整pH值为7.2~7.3,培养48 h收获,病毒含量至少为10^(7.43)TCID^(50)/mL。 展开更多
关键词 生物反应器 犬细小病毒 cpv P6株 微载体 疫苗
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犬细小病毒病的研究进展 被引量:51
10
作者 宋桂强 龙贵伟 +5 位作者 廖金 聂福平 于福先 邱薇 李作生 范泉水 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第3期98-100,共3页
随着人民生活水平的提高,养犬、猫者日益增多,犬的疾病逐渐被人们所重视,对犬的各种疾病的研究也在不断深入。作者从病原学、流行病学、生物学特性、诊断方法及治疗等角度对犬细小病毒病的病原学研究进行综述。
关键词 犬细小病毒 病原学 流行病学 生物学特性 诊断方法
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犬细小病毒病免疫胶体金诊断技术的研究 被引量:39
11
作者 王中力 宋晓晖 +1 位作者 陈西召 陈国胜 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期62-66,共5页
建立一种简便、快速、准确检测犬细小病毒(CPV)的胶体金免疫层析法(GICA)。采用柠檬酸三钠法制备胶体金颗粒,标记纯化的CPV单克隆抗体,在玻璃纤维素膜上喷加纯化的CPV多克隆抗体,制成诊断CPV抗原的快速诊断试纸条。用本试验研制的CPV试... 建立一种简便、快速、准确检测犬细小病毒(CPV)的胶体金免疫层析法(GICA)。采用柠檬酸三钠法制备胶体金颗粒,标记纯化的CPV单克隆抗体,在玻璃纤维素膜上喷加纯化的CPV多克隆抗体,制成诊断CPV抗原的快速诊断试纸条。用本试验研制的CPV试纸条检测收集到的120份犬粪便样品,其结果与HA结果相比对,HA效价在1∶40以上,试纸条均能检测到为阳性。CPV试纸条与犬瘟热病毒及犬传染性肝炎病毒无交叉反应。且试纸条保存6个月后,其检测结果重复性为100%。试验证明,本研究建立的GICA是一种快速、灵敏、特异的抗原检测方法,可在临床上广泛应用,也可用于CPV的流行病学调查。 展开更多
关键词 免疫层析方法 胶体金 犬细小病毒 试纸条 抗原检测
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表达犬细小病毒VP2蛋白重组犬2型腺病毒的构建及鉴定 被引量:9
12
作者 谢之景 夏咸柱 +3 位作者 扈荣良 杨松涛 邹啸环 黄耕 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期214-219,共6页
对CAV-2的E3区的Ssp I片段进行缺失构建了E3区缺失载体pVAXΔE3,然后将CPV VP2表达盒连接到pVAXΔE3的E3区缺失处,构建了CPV VP2表达盒的转移载体pΔECPV-VP2,用SalI+NruI分别对pPoly2-CAV2和pΔECPV-VP2进行双酶切,分别进行琼脂糖凝胶... 对CAV-2的E3区的Ssp I片段进行缺失构建了E3区缺失载体pVAXΔE3,然后将CPV VP2表达盒连接到pVAXΔE3的E3区缺失处,构建了CPV VP2表达盒的转移载体pΔECPV-VP2,用SalI+NruI分别对pPoly2-CAV2和pΔECPV-VP2进行双酶切,分别进行琼脂糖凝胶电泳回收目的片段,将含CPV VP2表达盒的SalI+NruI片段定向克隆入pPoly2-CAV-2载体,获得了含CPV VP2表达盒重组CAV-2基因组的质粒pCAV-2/CPV-VP2。用AscI+ClaI对pCAV-2/CPV-VP2进行双酶切,释放CAV-2/CPV-VP2重组基因组,将CAV-2/CPV-VP2基因组与去除SalI+NruI片段的CAV-2基因组的两个片段混合,利用脂质体介导共转染DK细胞,出现病变,获得重组病毒CAV-2/CPV。并且,从形态学、基因组水平、目的基因的转录及重组病毒的生长特征等方面进行了鉴定。结果证明,CAV-2/CPV具有典型的CAV-2形态特征,CAV-2/CPV在繁殖的过程中没有对CPV VP2表达盒片段进行缺失或重排,并且能够转录CPV VP2的mRNA。CAV-2/CPV的繁殖速度比野生型CAV-2的繁殖速度慢。 展开更多
关键词 犬细小病毒 VP2基因 犬腺病毒
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犬腺病毒、犬细小病毒联合PCR方法的建立与应用 被引量:8
13
作者 王雷 夏咸柱 +4 位作者 卫广森 扈荣良 刘维全 邹啸环 黄耕 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期262-266,共5页
根据GenBank报道的犬腺病毒(CAV)和犬细小病毒(CPV)序列,设计两对联合PCR引物,其中一对为CAV-1和CAV-2通用引物,另一对为CPV引物。在建立单项PCR基础上,通过优化Mg2+离子浓度和循环参数等反应条件建立联合PCR,确定联合PCR条件为:96℃180... 根据GenBank报道的犬腺病毒(CAV)和犬细小病毒(CPV)序列,设计两对联合PCR引物,其中一对为CAV-1和CAV-2通用引物,另一对为CPV引物。在建立单项PCR基础上,通过优化Mg2+离子浓度和循环参数等反应条件建立联合PCR,确定联合PCR条件为:96℃180s,96℃30s,56℃30s,72℃80s,30个循环。联合PCR结果显示:CAV-1扩增片段大小为497bp,CAV-2为1019bp,CPV为719bp;细胞和其它相关病毒对照均无扩增带。上述PCR产物经用限制性内切酶酶切和克隆测序,结果均与相应病毒的应有条带和序列相同。敏感性比较试验结果表明,联合PCR比用细胞培养分离病毒敏感。将联合PCR应用于15份CAV和CPV细胞培养物,5份CAV-1、1份CAV-2和3份CPV人工感染犬病料以及30份临床病料检测,并与电镜负染、HA/HI及病毒分离等方法的结果进行比较,结果显示,联合PCR的检出率和病毒分离结果一致,高于电镜负染和HA/HI试验。以上结果说明:CAV-1/CAV-2和CPV联合PCR不仅具有很好的特异性和敏感性,而且可以在短时间内(2 5h~3h)同时鉴定出上述三种病毒,因此具有良好的实验室诊断和临床应用价值。 展开更多
关键词 犬腺病毒 犬细小病毒 联合PCR方法 实验室诊断
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犬细小病毒病流行病学调查 被引量:36
14
作者 刘静 赵学刚 +2 位作者 陆江 郑晓亮 袁维峰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第3期199-201,共3页
犬细小病毒感染是由犬细小病毒引起的一种急性、热性、传染性疾病,临床上以出血性肠炎或心肌炎为主要特征。本研究对泰州某宠物门诊2010年1月-2011年3月期间接诊的260例犬细小病例进行了分析研究,旨在了解泰州地区犬细小病毒病发病率、... 犬细小病毒感染是由犬细小病毒引起的一种急性、热性、传染性疾病,临床上以出血性肠炎或心肌炎为主要特征。本研究对泰州某宠物门诊2010年1月-2011年3月期间接诊的260例犬细小病例进行了分析研究,旨在了解泰州地区犬细小病毒病发病率、死亡率与犬年龄、品种、免疫接种、季节等因素之间的关系,并总结防控犬细小病毒病最有效的方法。结果表明,犬细小病毒病发病率及死亡率与犬的年龄、品种、免疫接种、季节有很大的相关性,依此提出了防制对策,以期为防制犬细小病毒病提供参考。 展开更多
关键词 泰州地区 犬细小病毒病 流行病学调查
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Real-time PCR和PCR方法快速检测犬细小病毒 被引量:7
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作者 熊炜 李健 +5 位作者 邱璐 高莉华 蒋静 李春阳 黄忠荣 胡永强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期36-40,共5页
为适应出入境口岸对进出境宠物快速检疫的需要,本研究在建立PCR方法检测犬细小病毒(CPV)的基础上,进一步采用Taqman探针技术建立了快速检测CPV的Real-time PCR方法。通过灵敏度对比试验,证实Real-time PCR方法比PCR方法检测灵敏度显著... 为适应出入境口岸对进出境宠物快速检疫的需要,本研究在建立PCR方法检测犬细小病毒(CPV)的基础上,进一步采用Taqman探针技术建立了快速检测CPV的Real-time PCR方法。通过灵敏度对比试验,证实Real-time PCR方法比PCR方法检测灵敏度显著提高。通过对大量不同采样部位样品的检测证实,本研究建立的Real-time PCR和PCR方法具有较高的可靠性,并可显著提高CPV的阳性检出率。 展开更多
关键词 犬细小病毒 Real—time PCR TAQMAN探针 PCR 犬病
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应用聚合酶链式反应检测犬细小病毒 被引量:10
16
作者 董江丽 李武 +1 位作者 额日贺 张鹤龄 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2000年第3期289-292,共4页
将具有犬细小病毒病典型临床症状的病犬肠溶物经 SDS-酚裂解法提取总 DNA,并以此 DNA为模板 ,通过人工合成的两条 2 0 mer引物进行 PCR扩增 ,该对引物扩增的片段为犬细小病毒结构蛋白 VP2 基因中间 1 /3区段 ,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳鉴... 将具有犬细小病毒病典型临床症状的病犬肠溶物经 SDS-酚裂解法提取总 DNA,并以此 DNA为模板 ,通过人工合成的两条 2 0 mer引物进行 PCR扩增 ,该对引物扩增的片段为犬细小病毒结构蛋白 VP2 基因中间 1 /3区段 ,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定 .试验结果表明 :用 PCR扩增检测犬细小病毒具有良好的特异性 ,应用该方法检测的 2 7份病犬肠溶物样品均获得了预计长度的 DNA片段 ( 53 1 bp) ,而健康犬的肠溶物样品 PCR结果为阴性 .该方法的检测灵敏度很高 ,最高可将提取的总 DNA样品稀释 1 0 6倍 ,即可以检测到 1 .3 7pg总 DNA样品中所含的病毒 DNA.由于该方法直接利用病犬肠溶物提取总 DNA,检测方法快速、简便 ,结果可靠 ,可在 2 4 h内获得满意结果 。 展开更多
关键词 犬细小病毒 聚合酶链式反应 肠溶物 检测 cpv
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犬细小病毒VP2蛋白的原核表达与纯化 被引量:8
17
作者 龙丹丹 嵇辛勤 +5 位作者 段志强 阮涌 陈强 雷云 万彪 胡焱 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第3期643-649,共7页
为了研究犬细小病毒(canine parovirus,CPV)VP2蛋白的结构和功能,本试验对CPV VP2蛋白进行表达和纯化。采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法,将CPVVP2基因插入原核表达载体pET-32a(+)中构建重组原核表达载体pET-VP2,转化至大肠杆菌BL21(DE3... 为了研究犬细小病毒(canine parovirus,CPV)VP2蛋白的结构和功能,本试验对CPV VP2蛋白进行表达和纯化。采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法,将CPVVP2基因插入原核表达载体pET-32a(+)中构建重组原核表达载体pET-VP2,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,在不同IPTG浓度、诱导温度和诱导时间条件下进行原核表达,确定最佳诱导条件。最佳条件下的诱导产物经超声破碎离心后,利用镍柱对重组蛋白进行纯化并用SDS-PAGE和Western blotting进行双重鉴定。结果显示,重组质粒pET-VP2经双酶切鉴定分别获得大小为5 900bp左右的载体条带和1 755bp左右的目的基因条带,成功构建了pET-VP2重组质粒;重组VP2蛋白的分子质量约为64ku,与预期大小一致,且在37℃、1.0mmol/L IPTG、诱导5h条件下表达量最高,条带最亮;蛋白超声破碎后经SDS-PAGE发现,只在沉淀中出现了目的条带,而上清中并未出现相应条带,说明重组蛋白均以包涵体的形式存在;纯化后获得的重组蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting双重鉴定,均在64ku处出现条带,说明纯化后的蛋白为重组蛋白pET-VP2。本试验通过对CPV VP2蛋白的原核表达及纯化成功获得了大量纯度较高的CPV VP2蛋白,为今后制备CPV VP2蛋白多克隆抗体及进一步研究该蛋白在对治疗犬细小病毒病中的临床应用价值提供了基础理论依据。 展开更多
关键词 犬细小病毒(cpv) VP2基因 原核表达 纯化
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犬细小病毒病诊断与防治情况调查 被引量:11
18
作者 陈琛 邬静 +3 位作者 张海亮 韩水仲 田泽华 张小莺 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第8期1926-1928,共3页
为了解我国犬细小病毒病的流行病学、防疫、诊断、治疗现状及存在问题,为该病的诊断、治疗及新药开发奠定基础,笔者于2008年12月分别对北京、西安、郑州、天津、汉中5个城市共30家动物医院开展问卷调查,统计结果表明,2006~2008年细小... 为了解我国犬细小病毒病的流行病学、防疫、诊断、治疗现状及存在问题,为该病的诊断、治疗及新药开发奠定基础,笔者于2008年12月分别对北京、西安、郑州、天津、汉中5个城市共30家动物医院开展问卷调查,统计结果表明,2006~2008年细小病毒病犬占治疗病犬总数的比例分别为15.64%、19.37%和20.51%,呈逐年上升趋势;病犬中接种过细小病毒疫苗的犬约占32.00%,且未接种的多为幼犬;在受调查的动物医院中,93.33%的医院使用进口疫苗,33.33%的医院使用国产疫苗;使用犬细小病毒检测试纸检测的医院占96.67%,其中所使用全部是韩国进口试纸;治愈时间平均为5.5d,治疗中多配合使用犬细小病毒单克隆抗体,使用率达90.00%,其费用占总治疗费用的42.70%,单抗产品已成为犬细小病毒病诊治的主要来源。我国还缺乏犬细小病毒病的临床数据,对该病的诊治还有很多方面需要进行深入研究,国产诊治药物亟待开发。 展开更多
关键词 犬细小病毒 调查 宠物犬
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3种犬细小病毒感染诊断方法比较 被引量:19
19
作者 宋永奇 李玉燕 +4 位作者 吕艳丽 韩博 李伊立 贾君影 付丽娟 《畜牧与兽医》 北大核心 2008年第6期31-35,共5页
本研究应用犬细小病毒抗原快速检测试剂盒、血凝/血凝抑制试验和PCR方法对120份具有腹泻/呕吐症状的患犬粪便样本进行了犬细小病毒检测。结果显示,3种方法检测阳性份数分别为60,49,68。犬细小病毒抗原快速检测试剂盒与血凝/血凝抑制(HA/... 本研究应用犬细小病毒抗原快速检测试剂盒、血凝/血凝抑制试验和PCR方法对120份具有腹泻/呕吐症状的患犬粪便样本进行了犬细小病毒检测。结果显示,3种方法检测阳性份数分别为60,49,68。犬细小病毒抗原快速检测试剂盒与血凝/血凝抑制(HA/HI)试验相比较,敏感性、特异性及总符合率分别为100.0%,84.5%,90.8%;与PCR法相比较,敏感性、特异性及总符合率分别为85.3%,96.2%,90.0%。从试验结果看,HA/HI法具有较高的特异性,但敏感性较低;PCR具有高度敏感性和特异性,但不适合临床推广;细小病毒抗原快速检测试剂盒,在正确操作下结果可靠,是临床诊断犬细小病毒感染的首选方法。 展开更多
关键词 犬细小病毒抗原快速检测试剂盒 PCR 血凝/血凝抑制(HA/HI)试验 犬细小病毒(cpv)
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成都地区犬细小病毒VP2基因克隆分析及基因型鉴定 被引量:5
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作者 杨晓农 张焕容 +9 位作者 杨发龙 于学辉 龙虎 刘群 陈世界 严玉宝 余华 王成东 项振义 王斌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第9期105-110,共6页
根据GenBank中犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)VP2基因序列设计合成两对特异性引物1F/1R和2F/2R,从疑似CPV感染病犬的粪便病料中提取DNA作为模板,分段扩增涵盖VP2基因的两个片段,大小分别为1325和758bp,并进行克隆、测序,通过拼接得... 根据GenBank中犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)VP2基因序列设计合成两对特异性引物1F/1R和2F/2R,从疑似CPV感染病犬的粪便病料中提取DNA作为模板,分段扩增涵盖VP2基因的两个片段,大小分别为1325和758bp,并进行克隆、测序,通过拼接得到11条长度为1755bp的VP2基因完整序列。核苷酸同源性分析表明,扩增得到的11个完整VP2基因序列与GenBank中发布的21株国内外参考毒株比较,核苷酸同源性为96.2%~99.8%。采用DNAStar软件分析,预测VP2蛋白可能成为B细胞表位的区段位于Met1-Val38、Met73-Val82、Met96-Ala103、Lys151-Thr170、Gly235-Phe243、Leu294-Phe303、Ala359-Thr399、Ile469-His483、Ala503-Arg520、Lys570-Tyr584。将扩增获得的VP2基因编码的氨基酸序列与CPV参考毒株进行比较,第426位和第555位氨基酸残基分别为Asp和Val,鉴定出本试验得到的CPV基因型均为2a型,初步证实成都地区仍以CPV-2a为主要流行毒株。 展开更多
关键词 犬细小病毒(cpv) VP2基因 克隆 基因型
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