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用蛋白质工程的方法改良枯草杆菌蛋白酶E(Subtilisin E)的抗氧化性
被引量:
5
1
作者
王培之
王贤舜
+1 位作者
孔丽云
李党生
《生物化学杂志》
CSCD
1992年第5期541-546,共6页
以含有蛋白酶E基因(aprE)的单链M13mp18-aprE DNA为模板,合成的寡核苷酸5′-3′为诱变引物,用缺口双链法对aprE进行Met-222-Ala点突变。经菌落印迹杂交筛选,选出阳性噬斑。用SaⅡ酶解M13mp18-aprE得到aprE,将它和pPZW103重组,转化中性...
以含有蛋白酶E基因(aprE)的单链M13mp18-aprE DNA为模板,合成的寡核苷酸5′-3′为诱变引物,用缺口双链法对aprE进行Met-222-Ala点突变。经菌落印迹杂交筛选,选出阳性噬斑。用SaⅡ酶解M13mp18-aprE得到aprE,将它和pPZW103重组,转化中性、碱性蛋白酶缺失宿主菌DB104。经含卡那霉素和脱脂奶粉板筛选和比较aprE限制性内切酶NcoⅠ和SacⅡ水解电泳图谱分析,完成构建一个分泌抗氧化的枯草杆菌蛋白酶E的工程菌PW8888。
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关键词
蛋白酶
e
抗氧化性
枯草杆菌
下载PDF
职称材料
题名
用蛋白质工程的方法改良枯草杆菌蛋白酶E(Subtilisin E)的抗氧化性
被引量:
5
1
作者
王培之
王贤舜
孔丽云
李党生
机构
中国科技大学生物系
出处
《生物化学杂志》
CSCD
1992年第5期541-546,共6页
文摘
以含有蛋白酶E基因(aprE)的单链M13mp18-aprE DNA为模板,合成的寡核苷酸5′-3′为诱变引物,用缺口双链法对aprE进行Met-222-Ala点突变。经菌落印迹杂交筛选,选出阳性噬斑。用SaⅡ酶解M13mp18-aprE得到aprE,将它和pPZW103重组,转化中性、碱性蛋白酶缺失宿主菌DB104。经含卡那霉素和脱脂奶粉板筛选和比较aprE限制性内切酶NcoⅠ和SacⅡ水解电泳图谱分析,完成构建一个分泌抗氧化的枯草杆菌蛋白酶E的工程菌PW8888。
关键词
蛋白酶
e
抗氧化性
枯草杆菌
Keywords
subtilisin
e
apr
e
Mutag
e
nic Prim
e
r
capped duplex antioxidation of subtilisin e
分类号
Q550.2 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
用蛋白质工程的方法改良枯草杆菌蛋白酶E(Subtilisin E)的抗氧化性
王培之
王贤舜
孔丽云
李党生
《生物化学杂志》
CSCD
1992
5
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