Caprin-1表达对肝癌术后早期复发及预后的价值

目的分析肝癌患者在肝癌切除术后Caprin-1表达对术后早期复发及预后的作用。方法选择2013年1月至2015年5月在我院行肝癌切除术的肝癌患者共60例,免疫蛋白印迹分析其肝癌组织和癌旁组织中Caprin-1的表达,Kaplan-Meier、多因素Logistic回归分析Caprin-1与术后早期复发的关系。结果肝癌组织中Caprin-1的表达明显高于癌旁组织(P<0.05)。多因素Logistic回归分析表明Caprin-1高表达是肝癌切除术后早期复发的独立危险因素。KaplanMeier分析显示Caprin-1低表达患者生存率明显高于高表达者(P=0.0495)。结论 Caprin-1表达可用于预测肝癌切除术后患者早期复发情况。

上调细胞周期相关蛋白-1的表达对脑胶质瘤U251细胞的增殖和迁移能力的影响

目的细胞周期相关蛋白-1(Caprin-1)与肿瘤的发展进程及药物耐受密切相关。文中旨在探讨Caprin-1在脑胶质瘤临床标本中的表达情况及其对脑胶质瘤细胞系生物学特性的影响。方法选取湖北医药学院附属十堰市太和医院神经外科2015年12月至2017年4月手术切除的29份脑胶质瘤肿瘤组织和2份因外伤死亡尸检的正常脑组织标本。以U251细胞作为实验对象,构建Caprin-1高表达的U251细胞稳转株。实验分为3组:空白对照组(无转染的野生型U251细胞)、阴性对照组(转染p EGFP-C1质粒的U251细胞)、实验组(转染p EGFP-C1-Caprin-1质粒的U251细胞)。RT-PCR和Western blot分别检测3组细胞Caprin-1 mRNA和蛋白的表达水平,检测其增殖能力变化及划痕实验和Transwell小室迁移实验检测其迁移能力的变化。结果正常脑组织Caprin-1表达量(65.04±1.07)低于WHOⅡ、WHOⅢ、WHOⅣ胶质瘤的表达量(145.9±22.0、444.4±110.0、1661.0±54.5),WHOⅡ、WHOⅢ、WHOⅣCaprin-1表达量依次升高,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组Caprin-1 mRNA、Caprin-1蛋白表达[(1.70±0.19)、(1.07±0.09)]明显高于空白对照组[(0.89±0.10)、(0.52±0.04)]、阴性对照组[(0.98±0.08)、(0.58±0.03)],差异有统计学意义(P<0.05)。实验组A值(2.55±0.14)明显高于空白对照组(1.40±0.06)和阴性对照组(1.35±0.04),差异有统计学意义(P<0.001)。实验组在每个视野下迁移的细胞数[(526.00±42.19)个]明显多于空白对照组和阴性对照组[(289.00±29.24)、(279.00±32.48)个],差异有统计学意义(P<0.001)。实验组中Cyclin D1和AKT磷酸化水平表达量明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.000)。结论 Caprin-1在胶质瘤标本中的表达量随肿瘤组织的恶性程度增加而增高,且上调U251细胞Caprin-1的表达则其增殖和迁移能力提高,为胶质瘤的基因靶向治疗及评估胶质瘤的预后提供理论依据。

超声微泡介导Caprin⁃1⁃KO转染对人肝癌HepG2细胞增殖、周期及cyclinD1、cyclinD2表达的影响

目的构建筛选最优Caprin⁃1敲除质粒并探讨超声微泡介导其转染对人肝癌HepG2细胞中cyclinD1、cyclinD2的表达及细胞增殖、周期的影响。方法构建Caprin⁃1敲除质粒KO⁃1、KO⁃2,测序鉴定重组质粒,将目的质粒转染入人肝癌HepG2细胞,超声转染条件利用前期研究成果,免疫印迹法(WB)筛选最优质粒,实时荧光定量PCR(qPCR)检测抑制Caprin⁃1表达后cyclinD1及cyclinD2表达情况,细胞增殖实验(CCK⁃8法)及流式细胞术(FCM)检测抑制Caprin⁃1表达对细胞增殖与周期的影响。结果设计Caprin⁃1敲除质粒Caprin⁃1⁃KO⁃1、Caprin⁃1⁃KO⁃2引物序列,提取质粒经过电泳及测序,鉴定质粒构建成功。转染目的质粒后,KO⁃2组Caprin⁃1表达显著降低,与阴性对照组(NC)、KO⁃1组比较,差异有统计学意义(P<0.05);且抑制Caprin⁃1表达明显抑制HepG2细胞的增殖,阻滞了细胞周期,cyclinD1,cyclinD2表达均明显下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论超声微泡介导Caprin⁃1⁃KO转染人肝癌HepG2细胞,Caprin⁃1⁃KO对人肝癌HepG2细胞增殖有抑制作用并使细胞周期发生阻滞,cyclinD1及cyclinD2表达下降,为进一步研究Caprin⁃1在肝癌发病机理中的作用提供思路。

山羊疱疹病毒Ⅰ型的分离鉴定与致病性

为了查明引起2013—2014年江苏多地育肥羊出现呼吸道症状为主的疾病的病因,通过采集发病羊场鼻拭子,采用细胞接毒分离培养、病毒蚀斑纯化、病毒形态结构观察和病毒核酸鉴定,分离到一株山羊疱疹病毒Ⅰ型(caprine herpesvirus 1,CpHV-1),命名为JSHA1405;并对其进行了致病性试验。分离鉴定结果表明:病料接种MDBK细胞后,盲传至第3代时产生明显细胞病变;电镜下可见直径约100nm有囊膜的病毒粒子;gB全基因测序表明其为CpHV-1,序列比对显示JSHA1405株与CpHV-1瑞士分离毒E/CH株相似性最高,为99.2%。致病性试验表明,JSHA1405分离株可导致山羊发热持续一周以上,体温最高可达41.8℃。山羊感染后临床症状明显,表现为精神沉郁、流浆液性或脓性鼻涕,可通过鼻腔/粪便排毒。山羊感染后第7天出现中和抗体,第28天达到最高。这是国内首次报道CpHV-1的分离鉴定及致病性,分离毒JSHA1405具有较强的致病性,为CpHV-1病原学及防控技术研究提供依据与参考。

山羊疱疹病毒1型的研究进展

山羊疱疹病毒1型(Caprine herpesvirus-1,CpHV-1)属于α疱疹病毒亚科成员,它与山羊的多种感染有关。感染该病毒后,1~2周龄山羊表现为严重的消化道症状、全身性疾病和新生羊死亡,成年山羊表现为呼吸系统、生殖系统(流产和繁殖能力受害)症状。CpHV-1疾病在美国、加拿大、澳大利亚、新西兰、法国、意大利等国家已有报道,在地中海地区国家呈高度流行,我国在2018下半年也报道了此病的存在,对我国养羊业存在着健康威胁。本文从病原学、流行病学、病原诊断、以及疫苗研究等方面对CpHV-1进行综述,为今后该疾病的诊断和预防提供科学依据。