CarO蛋白与鲍曼不动杆菌耐环丙沙星的相关性研究

目的研究CarO蛋白与鲍曼不动杆菌耐环丙沙星的相关性。方法收集长沙地区四家医院的鲍曼不动杆菌56株进行药敏实验、对临床敏感株进行环丙沙星体外诱导耐药实验、PCR扩增CarO基因并测序、实时荧光定量PCR比较临床敏感株和耐药株的CarO基因表达情况。结果所收集的临床鲍曼不动杆菌对环丙沙星的耐药率达85.7%,临床敏感株被诱导成耐环丙沙星菌株后,其CarO基因序列发生了改变,且CarO基因表达量明显降低。结论 CarO蛋白表达下降与鲍曼不动杆菌耐环丙沙星有一定的相关性。

泛耐药鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶及膜孔蛋白编码基因与ISaba1-OXA23连锁检测

目的了解一组泛耐药鲍氏不动杆菌中β-内酰胺类药物耐药机制。方法收集南通大学附属医院2011年1-4月临床标本中分离的泛耐药鲍氏不动杆菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析A、B、C、D 4类共33种β-内酰胺酶编码基因、膜孔蛋白carO编码基因、插入序列ISaba1与β-内酰胺酶OXA-23基因(ISaba1-OXA-23)连锁检测。结果 20株鲍氏不动杆菌均检出TEM-1、ADC-30、OXA-23等3种β-内酰胺酶基因,检出率均为100.0%,carO基因均存在有义突变,插入序列ISaba1与β-内酰胺酶OXA-23基因(ISaba1-OXA-23)连锁检测均为阳性。结论该组鲍氏不动杆菌耐β-内酰胺类药物与产TEM-1、ADC-30、OXA-23等3种β-内酰胺酶、膜孔蛋白CarO编码基因存在有义突变、插入序列ISaba1与β-内酰胺酶OXA-23基因(ISaba1-OXA-23)连锁检测阳性相关。

鲍曼不动杆菌中CarO表达、序列突变与亚胺培南敏感性关系的研究

目的研究外膜蛋白CarO的表达、序列突变与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的关系。方法收集鲍曼不动杆菌8株,E-test鉴定亚胺培南敏感性;用脉冲场凝胶电泳(PFGE)鉴定菌株同源性;PCR法检验CarO基因,并进行序列分析;Real time PCR法检验CarO mRNA的表达;SDS电泳法比较CarO蛋白的表达。结果本实验发现4株耐药菌株CarO序列同源性高;所有菌株中均存在CarO基因,但亚胺培南敏感及耐药菌株基因序列相似性仅87%,敏感菌株与耐药菌株均有CarO mRNA基因表达,且两者表达水平差异无统计学意义;SDS电泳也发现其基因序列不同者CarO蛋白分子量不同。结论 CarO基因序列改变可能与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的变化有关。

多药耐药鲍氏不动杆菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药机制的研究

目的了解临床分离的多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRAB)对β-内酰胺类抗菌药物的耐药机制。方法从2009年4-8月中山大学附属第三医院住院患者中分离出20株MDRAB,用K-B法测定鲍氏不动杆菌对13种抗菌药物的敏感性,采用PCR及序列分析的方法分析28种β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白carO基因。结果检测TEM、OXA-23群、ADC等3种β-内酰胺酶基因呈阳性,阳性率分别为100.0%、65.0%、100.0%;其余均阴性,膜孔蛋白carO基因检测均阳性。结论 MDRAB对多种β-内酰胺类抗菌药物耐药主要与产OXA-23群碳青霉烯和ADC型AmpC酶相关;产OXA-23型碳青霉烯酶是导致MDRAB对碳青霉烯类耐药的重要原因,与产金属β-内酰胺酶和膜孔蛋白缺失无关。

产新德里金属β-内酰胺酶泛耐药鲍氏不动杆菌相关耐药机制与同源性分析

目的了解产新德里金属β-内酰胺酶(NDM)泛耐药鲍氏不动杆菌相关耐药机制及同源性,为临床泛耐药鲍氏不动杆菌(PDRAB)感染治疗提供参考依据。方法收集2011年3月-2014年4月从临床感染标本检出PDRAB 427株,重新传种、采用VITEK-2Compact型全自动微生物进行菌株的鉴定;对16株产NDM PDRAB进行改良Hodge试验及亚胺培南-乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验;PCR扩增blaNDM、blaKPC、blaIMP、blaOXA-40、blaDHA、blaGES、blaRMTB、膜孔蛋白(carO)基因并测序,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析blaNDM阳性菌株carO表达量;肠杆菌科基因间重复一致序列(ERIC)-PCR分析blaNDM阳性菌株基因同源性。结果 16株产NDM-ABA改良Hodge试验和亚胺培南-EDTA协同试验,均为阳性;在427株PDRAB中,16株携带blaNDM,1株携带blaGES,2株携带blaDHA,1株携带blaRMTB,未检测出blaKPC、blaIMP、blaOXA-40,产NDMAB中有7株carO基因缺失,缺失率为43.75%;SDS-PAGE结果显示,部分产NDMAB的CarO缺失;ERIC-PCR分型显示,16株产NDMAB主要可分成6个谱型,B型11株;A、C、D、E、F各1株。结论 PDRAB耐药机制可能与携带blaNDM和膜孔蛋白CarO缺失或改变联合作用有关。