Carba NP及mCIM试验在检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的临床应用价值

目的 探讨Carba NP试验与改良碳青霉烯类失活法(modified carbapenem inactivation method, mCIM)试验检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的临床价值。方法 选取2021年3月—2022年6月如东县中医院临床分离的60株碳青霉烯类药物肠杆菌科细菌(carbapenem resistant enterobacteriaceae, CRE),分别对细菌进行Carba NP试验和mCIM试验检测,以碳青霉烯酶耐药基因聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测结果为金标准,计算两项试验的检测效能。结果 基于金标准,Carba NP试验检测肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的灵敏度与特异度分别为90.00%、93.33%,mCIM试验检测肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的灵敏度与特异度分别为93.33%、100.00%,两种检测方法诊断灵敏度与特异度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Carba NP试验与mCIM试验均是检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的有效可行方法。

NG-Test CARBA 5在血培养肠杆菌科细菌碳青霉烯酶检测中的优势及其检测效能

目的探讨NG-Test CARBA 5在血培养肠杆菌科细菌碳青霉烯酶含量检测的应用价值。方法收集我院临床标本中分离培养的已知基因型别的62株肠杆菌目细菌,包含耐碳青霉烯肠杆菌科细菌38株和对碳青霉烯敏感的肠杆菌科细菌24株,分别采用NG-Test CARBA 5试剂盒、Carba NP和mCIM试验检测待测菌株的主要碳青霉烯酶,并采用PCR法对碳青霉烯酶基因表型进行测序确认和Kappa一致性检验;再从38株耐碳青霉烯菌株中随机取出20株菌株进行模拟血培养,并对其进行NG-Test CARBA 5试剂盒、Carba NP法和mCIM法检测和Kappa一致性检验分析。结果38株耐碳青霉烯肠杆菌科细菌菌株的耐药药物均为美罗培南和/或亚胺培南,PCR扩增测序结果表明,分别有33株菌株携带有耐药基因,5株菌株未携带常见耐药基因。NG-Test CARBA 515 min内检测到KPC、NDM、IMP、KPC+NDM以及NDM+IMP的敏感度和特异度均为100%。Carba NP法和mCIM法的敏感度分别为93.94%、96.97%,特异度分别为80.00%、100.00%,与基因测序结果一致性Kappa值分别为0.857、0.902(P<0.05)。20株耐碳青霉烯肠杆菌科细菌模拟血培养,大肠杆菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌分别有6株、5株、4株、5株,NG-Test CARBA 5敏感度和特异度均为100.0%,与基因测序结果一致性Kappa值为1.000;Carba NP法和mCIM法的敏感度分别为87.50%、93.75%,特异度均为100%,与基因测序结果一致性Kappa值分别为0.812、0.898(P<0.05)。结论NG-Test CARBA 5检测过程简单、高效,检测结果准确度高,大大简化了临床上检测碳青霉烯酶的复杂流程,有助于增强院内感染控制和及时指导临床治疗。

Carba NP试验及Carba NP-direct试验检测产碳青霉烯酶肠杆菌的临床意义

目的:评价Carba NP试验及Carba NP-direct试验对碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌碳青霉烯酶检测的临床价值。方法:收集南京医科大学附属无锡市第二人民医院2013年1月至2015年12月临床分离的各种标本耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌科细菌112株,同时选取碳青霉烯敏感的菌株100株作为对照组。所有菌株进行碳青霉烯酶耐药基因PCR检测、改良Hodge试验(MHT试验)、Carba NP试验(CNPt)以及Carba NP-direct(CNPt-d)试验检测。结果:碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌共112株,92株携带blaKPC-2;8株携带blaNDM-1;1株携带blaVIM-2;1株携带blaIMP-4;10株不携带碳青霉烯酶基因;未检测到携带D组碳青霉烯酶基因的肠杆菌科细菌。以PCR检测的结果为标准,Carba NP试验、Carba NP-direct试验诊断菌株是否产碳青霉烯酶的敏感性和特异性均100%;改良Hodge试验诊断菌株是否产碳青霉烯酶敏感性为96%,特异性为98%。Carba NP试验及Carba NP-direct试验均在2 h内完成检测。结论:Carba NP试验和Carba NP-direct试验均能快速、准确筛查出产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌。Carba NP-direct试验相比Carba NP试验成本低、反应快、结果更明确,可作为表型确认实验和耐药监测的手段。

改良快速Carba NP试验检测碳青霉烯酶的应用价值

目的探讨改良快速Carba NP试验用于检测碳青霉烯酶的可行性,并对比分析其与Carba NP试验的差异。方法选取264株革兰阴性杆菌,其中耐药菌株164株,敏感菌株100株。分别采用Carba NP试验、改良快速Carba NP试验检测碳青霉烯酶表型,并以PCR检测结果为参比,评价上述检测方法的差异。结果 164株耐药菌株中,耐药基因阳性144株;100株敏感菌株耐药基因均为阴性。164株耐药菌株中Carba NP试验阳性135株;改良快速Carba NP试验阳性130株。100株敏感菌株中,2种方法均为阴性。与PCR检测结果相比,Carba NP试验的敏感性和特异性分别为91.7%(132/144)和97.5%(117/120),Kappa值0.886;改良快速Carba NP试验敏感性和特异性分别为89.6%(129/144)和99.2%(119/120),Kappa值0.879。Carba NP试验与改良快速Carba NP试验的阳性检出率差异无统计学意义(χ~2=1.45,P>0.05)。结论改良快速Carba NP试验与PCR方法一致性高,较Carba NP试验更为快速、廉价,适用于流行病学调查和院内感染的早期监测。

Carba NP直接纸片法检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的应用评估

目的:评估Carba NP直接纸片法快速检测肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶菌株的实用价值。方法:收集2015年4月至2016年12月来自各类标本的肠杆菌科细菌212株,其中122株试验菌,90株对照菌分别进行Carba NP试验和Carba NP直接纸片法检测,同时将耐药基因的普通PCR的检测结果作为金标准。结果:在122株细菌中,KPC-2耐药基因阳性菌株为112株;NDM-1基因阳性菌株为8株;2株未检出耐药基因;未发现携带D组OX A-4 8基因的实验菌。与PCR结果相比,Car ba NP试验与Carba NP直接纸片法对于所测菌株的碳青霉烯酶的敏感性高达98%,特异性高达100%;Carba NP试验在60 min内完成检测,而Carba NP直接纸片法最快可以在5 min内完成检测。结论:相对于Carba NP试验,Carba NP直接纸片法无需昂贵的蛋白抽提液,试剂成本价廉,操作简便,可以有效协助临床抗感染治疗。

Carba NP试验检测碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的临床应用

目的探讨Carba NP试验检测碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的临床应用。方法收集碳青霉烯类抗生素耐药的51株肠杆菌科细菌,K-B法药敏试验检测常规药物敏感性,E-test法检测试验菌株对碳青霉烯类抗生素的最低抑菌浓度(MIC)值;分别用改良Hodge、Carba NPⅠ试验筛选碳青霉烯酶表型;然后用Carba NPⅡ试验进行碳青霉烯酶表型分类,E-test法测定金属酶,用PCR检测耐药基因。结果 41株Carba NPⅠ试验阳性且经Carba NPⅡ试验证实为产B类金属酶菌株,PCR均证实携带NDM-1基因型。结论 Carba NP试验方便快捷、结果易于判断,与耐药基因检测符合程度高,适合实验室常规开展。

改良Carba Np试验和mCIM/eCIM快速鉴定产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌表型的临床应用

目的评估改良Carba Np试验与碳青霉烯灭活试验(mCIM)/乙二胺四乙酸碳青霉烯灭活试验(eCIM)在检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶表型中的应用价值。方法收集136株肠杆菌科细菌临床分离株,其中耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)86株,碳青霉烯敏感株50株。分别采用改良Carba Np试验、mCIM/eCIM进行检测,并进行表型分析和分类,以聚合酶链反应(PCR)碳青霉烯酶基因鉴定结果为标准,评价2种改良方法检测结果的差异。结果86株CER中,耐药基因阳性81株;50株敏感菌株均未检出耐药基因。改良Carba NP试验阳性82株,mCIM/eCIM阳性78株。以PCR结果为标准,改良Carba NP试验和mCIM/eCIM检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的敏感性、特异性分别为96.3%、92.7%和92.6%、94.5%,Kappa值分别为0.935和0.917。改良Carba NP试验丝氨酸碳青霉烯酶检出率为97.7%,金属碳青霉烯酶检出率为100.0%。mCIM/eCIM检测金属碳青霉烯酶的敏感性为91.2%、特异性为90.4%。改良Carba NP试验与mCIM/eCIM碳青霉烯酶阳性检出率差异无统计学意义(χ^(2)=1.65,P>0.05)。结论改良Carba NP试验可快速、准确地鉴定CRE表型;mCIM/eCIM操作简便、干扰因素少。2种改良方法可以优势互补,有较大的临床应用价值。

CarbaNP试验在产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌检测价值的meta分析

目的:系统评价Carba NP试验对产碳青霉烯酶菌株的诊断价值。方法:检索Pub Med数据库、E M B A S E数据库、C o c h r a n e图书馆、维普中文科技期刊数据库、中国知网、万方数据库、中国生物医学文献数据库(CBM),并辅以文献追溯、手工检索,检索时间为2001年1月1日至2016年6月3 0日。严格按照纳入和排除标准进行文献筛选。参照诊断准确性研究质量评价工具(Q u a l i t y A ssessment of Diagnostic Accurac y Studies 2,QUADA S-2)对纳入文献进行质量评价。应用STATA1 4.0软件进行数据提取及质量评价、统计和数据分析,绘制森林图分析结果,用漏斗图和D e e k检验评价纳入文献的发表偏倚情况。结果:纳入的29项研究的合并敏感性和特异性分别是0.97(95%CI:0.93~0.98)和1.0(95%CI:1.0~1.0),说明敏感性及特异性较高。经异质性分析检验,敏感性和特异性的I2分别是96.49(95%CI:95.79~97.18)和69.88(95%CI:58.69~81.08),说明纳入数据存在异质性。结论:Carba NP试验对于产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌(Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的检测具有很高的敏感性和特异性。

西司他汀在肠杆菌科细菌Carba NP试验中的影响评价

目的评估西司他汀对肠杆菌科细菌Carba NP试验的影响。方法选取无锡市第二人民医院、无锡市第四人民医院2016年1-12月肠杆菌科细菌非重复菌株163株,分别以亚胺培南标准品、亚胺培南/西司他汀为底物进行Carba NP试验。结果按照美国临床实验室标准化协会标准选取碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌83株,以亚胺培南标准品、亚胺培南/西司他汀分别为底物检测时Carba NP试验诊断产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌的敏感度、特异度均为100%;二者所有试验均在1h内完成检测。结论以亚胺培南标准品、亚胺培南/西司他汀为底物时Carba NP试验均能快速、准确筛查出产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌,以亚胺培南/西司他汀为底物时成本低,西司他汀对Carba NP试验无影响。

改良Carba Np试验快速检测血培养肠杆菌目细菌碳青霉烯耐药表型

目的探讨改良Carba Np试验快速检测血培养肠杆菌目细菌碳青霉烯类耐药表型的应用价值。方法选取2022年邢台市第三医院从临床血培养标本分离的163株耐碳青霉烯肠杆菌目细菌菌株,分别采用改良Carba Np试验、mCIM/eCIM对菌株进行表型检测,以PCR碳青霉烯酶表型鉴定结果为金标准,比较两种改良方法的检测结果。结果163株耐碳青霉烯肠杆菌目细菌有8个菌种,其中肺炎克雷伯菌数量最多,共134株(82.21%);其次是大肠埃希菌17株(10.41%)。科室来源中ICU居首位,72株(44.17%);其次为外科20株(12.27%)。药敏试验提示氨苄青霉素、头孢唑肟、头孢曲松、亚胺培南、厄他培南耐药率100%,头孢他啶、阿奇霉素、环丙沙星、左氧氟沙星耐药率高于90%,检测的16种抗菌药物中仅阿米卡星耐药率低于50%。表型检测结果显示,Carba Np试验阳性161株,阳性率98.77%;mCIM/eCIM试验阳性154株,阳性率94.47%;肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌表型试验阴性。134株肺炎克雷伯菌中101株携带blaKPC-2,3株携带blaNDM,2株携带blaIMP,28株基因检测阴性;17株大肠埃希菌中5株携带blaKPC-2,9株携带blaNDM。以PCR结果为标准,改良Carba Np试验、mCIM/eCIM试验在耐碳青霉烯肠杆菌中均具有较高的灵敏度与特异性,两种方法的灵敏度与特异性差异无统计学意义(P>0.05)。结论改良Carba Np试验能快速鉴定碳青霉烯耐药肠杆菌目细菌菌株,具有较好的临床应用价值。

改良Hodge试验、CNPt及mCIM筛选肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶的价值

目的探讨改良Hodge试验(MHT)、Carba NP试验(CNPt)及改良碳青霉烯酶灭活试验(mCIM)检测肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶的价值。方法收集某院2016年12月—2017年11月临床分离的117株肺炎克雷伯菌,所有菌株进行药敏试验,其中碳青霉烯类耐药57株,敏感60株。以PCR法检测碳青霉烯酶基因为标准,评价3种方法检测肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶的价值。结果 57株对碳青霉烯耐药的菌株中,PCR阳性40株,包括39株KPC,1株NDM-1,未检出其他耐药基因。MHT、CNPt、mCIM阳性率分别为87.7%(50/57)、89.5%(51/57)、91.2%(52/57)。60株敏感菌PCR均未检出碳青霉烯酶基因,3种表型筛选试验结果均为阴性。以PCR为金标准,MHT、CNPt、mCIM灵敏度分别为97.5%(39/40)、100%(40/40)和100%(40/40),特异度分别为85.7%(66/77)、85.7%(66/77)和84.4%(65/77)。结论 CNPt是一种可靠的表型筛选方法,可用于流行病学和医院感染的监测。mCIM操作简单,结果判断明确,更适合临床微生物实验室常规开展。

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子流行病学研究

目的分析武汉两所医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)临床分离株产碳青霉烯酶的情况,以及分子流行病学特征。方法收集武汉两所医院2018年1-10月临床分离的42株非重复CRKP,采用CarbaNP试验方法对菌株产碳青霉烯酶情况进行初筛,聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶基因携带情况,采用质粒接合试验分析耐药基因的水平转移情况,应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行亲缘关系分析。结果42株CRKP菌株中14株CarbaNP试验阳性,其中有10株扩增出NDM-1基因,3株扩增出KPC-2基因。共13株CRKP碳青霉烯基因检测阳性,其中12株质粒接合试验成功。PFGE分析结果显示,携带NDM-1基因的CRKP菌株共分成6型,无明显优势型;携带KPC-2基因的CRKP菌株为同一型别。结论检出产NDM-1和KPC-2的CRKP菌株,质粒接合试验提示质粒介导的水平传播在碳青霉烯酶基因的播散过程中可能起重要作用。

改良Hodge与Carba NP和mCIM试验快速检测产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的方法学比较

目的比较改良Hodge试验、Carba NP试验及碳青霉烯灭活试验(mCIM试验)对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌快速表型筛选的能力。方法以PCR扩增肺炎克雷伯菌中携带的碳青霉烯酶相关耐药基因为金标准,比较改良Hodge试验、Carba NP试验及mCIM试验对202株碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌试验菌的筛选能力。结果 202株试验菌经PCR扩增120株耐药基因阳性,产物测序得知75株只携带bla_(KPC-2)基因,20株同时携带bla_(KPC-2)和bla_(VIM-2)基因,19株同时携带bla_(KPC-2)和bla_(IMP-4)基因,3株只携带blaIMP-4基因,2株只携带bla_(VIM-2)基因,1株只携带bla_(NDM-1)基因;120株产碳青霉烯酶试验组菌株对亚胺培南、厄他培南及头孢菌素类抗菌药物的耐药率均为100.00%,对替加环素和多黏菌素B敏感。82株非产碳青霉烯酶的对照菌株对亚胺培南、厄他培南均敏感,对头孢曲松的耐药率为100.00%。以PCR结果为金标准,试验菌通过改良Hodge试验检测的灵敏度为92.50%,特异性为97.56%;Carba NP试验检测的灵敏度为94.17%,特异性为98.78%;mCIM试验检测的灵敏度为98.33%,特异性为100.00%。与PCR结果相比,改良Hodge试验的一致率为94.55%,Kappa值为0.8885;Carba NP试验的一致率为96.04%,Kappa值为0.9188;mCIM试验的一致率为99.01%,Kappa值为0.9796。结论 Carba NP试验和mCIM试验在快速检测产碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌较改良Hodge试验具有更高的敏感性和特异性,并且操作简便,适合在临床微生物学实验室、医院感染控制室及疾病预防控制系统各单位普及应用。

Carba NP试验及CIM试验检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的性能评估

目的评估Carba NP试验(CNPt)及碳青霉烯类失活(CIM)试验在碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌中检测碳青霉烯酶的性能及临床价值。方法收集南京医科大学附属无锡市第二人民医院2014—2015年临床分离的各种标本碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌菌株92株,同时选取碳青霉烯敏感的菌株90株作为对照组。所有菌株进行碳青霉烯酶耐药基因PCR检测、碳青霉烯类失活(CIM)试验、CNPt、改良Hodge试验(MHT)检测。结果 92株碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌包括产碳青霉烯酶肠杆菌87株及非产碳青霉烯酶肠杆菌5株;87株产酶株中79株产A组酶;8株产B组酶,未检测到D组的碳青霉烯酶。CNPt与CIM试验诊断菌株是否产碳青霉烯酶的敏感性和特异性均为100%;MHT实验诊断菌株是否产碳青霉烯酶敏感性为96.5%,特异性为98.9%。结论 CNPt及CIM试验能快速、准确筛查出临床分离鉴定的产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌,在常规的微生物实验室有发展前景,可作为表型确认试验和耐药监测的手段。

Carba NP试验检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌和鲍氏不动杆菌的应用价值研究

目的评价Carba NP试验用于产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌和鲍氏不动杆菌的应用价值。方法将2014年-2015年临床分离的耐碳青霉烯类抗菌素肠杆菌科细菌39株和鲍氏不动杆菌37株,采用Carba NP试验检测碳青霉烯酶;并采用PCR方法检测碳青霉烯酶相关基因,评价该试验的灵敏度和特异性。结果 26株肠杆菌科细菌PCR检出碳青霉烯酶相关基因,Carba NP试验检测肠杆菌科的敏感性、特异性、阳性预测值与阴性预测值分别为96.1%、94.8%、92.5%和97.3%;21株鲍氏不动杆菌PCR检出碳青霉烯酶相关基因,Carba NP试验检测鲍氏不动杆菌的敏感性、特异性、阳性预测值与阴性预测值分别为4.7%、100.0%、100.0%和45.9%。结论Carba NP试验能快速检出携带KPC、NDM-1、IMP-1和VIM-2基因肠杆菌科细菌的碳青霉烯酶,未能检出携带OXA-23基因的鲍氏不动杆菌的碳青霉烯酶。

Carba NP实验用于筛查肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶基因的临床评价

目的评价Carba NP实验在肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(Klebsiella pneumonia carbapenemases,KPC)基因检测中的临床价值。方法采用Carba NP实验对269株产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌进行初步筛查,采用PCR扩增其基因,并进行测序。结果 269株肺炎克雷伯菌中对氨苄西林、阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶的耐药率均>85%,对哌拉西林/他唑巴坦、头孢唑林耐药率<10%;269株肺炎克雷伯菌中,16株对碳青霉烯类抗生素的敏感性降低,Carba NP实验筛查均为阳性,经PCR证实13株细菌均携带KPC基因。结论 Carba NP实验能快速、准确筛查出临床分离鉴定的产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌,可为医院感染监测和临床合理用药提供实验室依据。

探讨两种实验方法在检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌中的临床应用

目的评价改良Hodge试验(MHT)及Carba NP试验(CNPt)在检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌中的临床应用价值,以确立最佳的筛选方法。方法收集该院2014年3月—2016年3月经法国生物梅里埃vitek2 compact全自动药敏鉴定系统所鉴定的对碳青霉烯类抗生素耐药的肠杆菌科细菌80株。用荧光定量PCR检测其碳青霉烯酶基因blaKPC、blaNDM、blaOXA-48、blaIMP、blaVIM、blaSME;再用MHT及CNPt对所收集的细菌进行碳青霉烯酶检测。结果 MHT检出阳性菌株51株,CNPt检出阳性菌株72株,分别与PCR结果进行比较,CNPt与耐药基因检测结果符合率更高。结论 CNPt可代替MHT作为检测碳青霉烯酶的筛选方法,应用于临床。

肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶的检测及基因型分析

目的分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药情况,检测常见的碳青霉烯酶的发生情况及基因型别,为临床治疗该类菌提供依据。方法采用VITEK-2型全自动微生物检测系统进行细菌鉴定和药敏试验;改良Hodge试验(MHT)、Carba NP试验和改良碳青霉烯灭活试验(m CIM)对碳青霉烯酶进行表型检测,EDTA协同试验检测金属酶;并采用聚合酶链反应(PCR)方法检测KPC碳青霉烯酶耐药基因,以及ERIC-PCR对耐药株的同源性分析。结果药敏试验显示25株CRKP仅对复方新诺明和米诺环素敏感率较高; MHT试验、Carba NP试验和m CIM试验结果一致,24株(96%) CRKP产碳青酶烯酶,1株CRKP未检出碳青霉烯酶,协同试验未检测出B类碳青霉烯酶(金属酶); 25株CRKP中有23株检测出bla KPC-2基因; ERIC-PCR分型可分为8型,其中Ⅱ型为主要的流行株,共14株,Ⅰ型3株,Ⅲ型和Ⅶ型各2株,Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅷ型各1株。结论 CRKP多药耐药情况严重,其碳青霉烯酶以产KPC-2型为主;改良Hodge试验、Carba NP试验和m CIM试验结果与PCR法有高度的一致性,且快速、简单,为临床提供了可靠的筛选方法。

产KPC肺炎克雷伯菌检测方法构建与耐药机制

目的探讨产肺炎克雷伯型碳青霉烯酶(KPC)肺炎克雷伯菌检测方法以及肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制、可能的治疗药物。方法选取K-B法证实的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌36株纳入本研究,使用改良Hodge试验、Carba NP试验对菌株进行验证,随后采用PCR扩增、产物琼脂糖凝胶电泳实验,并对电泳阳性条带进行基因测序鉴定。结果 K-B法药敏试验显示36株耐碳氢烯类肺炎克雷伯菌,随后行Hodge验证,33株(91.7%)是产KPC肺炎克雷伯菌,对碳氢烯类耐药而对替加环素及米诺环素仍然敏感。对Hodge试验阳性33株再行Carba NP试验确证,其中27株(87.9%)阳性,6株(12.1%)阴性;对Hodge试验阳性33株行PCR扩增及电泳实验,共有27株出现目标条带(340bp)提示阳性,与Carba NP试验结果相一致。对出现目标条带的27株肺炎克雷伯菌再进行KPC-2耐药基因PCR扩增产物测序,均为KPC-2型耐药基因。结论 K-B法药敏试验加随后改良Hodge试验验证对于筛查、发现KPC肺炎克雷伯菌具有较高的符合度,为发现KPC肺炎克雷伯菌有效筛查方法。K-B法药敏试验证实对KPC肺炎克雷伯菌,替加环素等可能是有效治疗的药物之一。Hodge试验检测的KPC肺炎克雷伯菌,存在12.1%(6/33)的假阳性率。Carba NP试验及PCR扩增检测一致性好,具有确证产KPC肺炎克雷伯菌作用。随后的测序研究结果表明检测出的KPC肺炎克雷伯菌均为KPC-2,该型是引起肺炎克雷伯菌对碳青酶烯酶耐药的主要机制。

Triton X-100对Hodge和Carba NP试验检测产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌复合群效能的影响

目的探索快速、准确、简单、经济的表型检测方法,为产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌复合群流行病学调查及临床诊疗提供更好的手段和依据。方法纳入四川大学华西医院分离的110株鲍曼不动杆菌复合群,以多重PCR扩增结果为金标准,比较Hodge试验、Carba NP试验与加入Triton X-100后改良的Triton Hodge试验及Carba NP-direct试验在检测鲍曼不动杆菌复合群是否产碳青霉烯酶中的敏感度、特异度及阳性效果。结果Hodge试验在检测产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌复合群中敏感度和特异度分别为71.1%、100%,高于Carba NP试验(35.0%、86.7%,P<0.05)。加了Triton X-100试剂后改良试验的敏感度和阳性效果明显增高,Triton Hodge试验敏感度由71.1%提高到98.8%,Carba NP-direct试验敏感度由35.0%提高到85.5%,差异有统计学意义(P<0.001),但特异性差异无统计学意义(P>0.05)。结论改良后的Triton Hodge试验及Carba NP-direct试验在检测产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌复合群中具有更高的敏感性及阳性检测判断效果,特异度不变,因此更适用于临床常规操作。