几种抗生素对酸樱桃离体培养产生不定芽与再生根的影响

以酸樱桃zy-1无菌苗为试材,分别研究了在离体培养中羧苄青霉素(carbenicillin),头孢唑林钠(cefazolin)、卡那霉素(kanamycin)对zy-1生成不定芽、再生根的影响。结果表明:浓度为40mg/l的卡那霉素是酸樱桃ZY-1遗传转化选择压的最佳浓度,头孢唑林钠为适宜的抑菌性抗生素,且适宜的浓度范围为500mg/l^600mg/l。酸樱桃ZY-1的生根对卡那霉素极其敏感,头孢唑林钠次之,羧苄青霉素最轻。

几种抗生素对大白菜种子发芽及离体子叶再生的影响

培养基中添加不同浓度的卡那霉素、头孢霉素和羧苄青霉素 ,观察抗生素对大白菜基因型GP 11种子发芽以及离体子叶再生的影响。结果表明 :GP 11种子在含有 2 0 0mg/L卡那霉素的MS培养基上发芽生长时 ,幼苗子叶完全黄化 ,侧根数为 0 ;随卡那霉素浓度的增加 ,芽、主根和侧根生长均受到一定程度抑制 ,但发芽率和发芽势不受影响。 4日苗龄的离体子叶在含有 10mg/L卡那霉素并附加一定激素的改良MS培养基生长时 ,基本无绿芽诱出 ,在含 7 5mg/L和 5mg/L卡那霉素的培养基中 ,诱出的绿芽率只有 32 5 %和 4 0 2 % ;在仅含 3mg/L卡那霉素的生根培养基中 ,小苗完全丧失生根能力。在添加浓度高至 4 0 0mg/L的头孢霉素或羧苄青霉素的诱芽培养基中 ,GP 11诱芽率为 0 ,且它们之间差异不明显 ,但在添加头孢霉素或羧苄青霉素的生根培养基中 ,小苗生根依然正常。试验结果表明 ,在农杆菌介导的基因转化中 ,对大白菜转化苗筛选的卡那霉素浓度在 10mg/L左右是适宜的 ,添加的抑菌剂浓度在能控制农杆菌生长的同时 ,尽量降低浓度 ,最好不超过 4 0 0mg/L ;在诱导生根培养基中 ,卡那霉素浓度不宜超过 3mg/L。另外 ,对T0 代转基因种子进行遗传分析时在发芽培养基中添加卡那霉素浓度应该达到2 0 0mg/L。

4种抗生素对菘蓝外植体生长的影响

对抗生素卡拉霉素和潮霉素进行菘蓝外植体抗性浓度筛选,结果表明不同外植体具有不同抗性.子叶芽分化阶段,卡拉霉素和潮霉素筛选浓度范围分别为10～50mg/L和5～30mg/L;下胚轴芽分化阶段的筛选浓度分别为15～50mg/L和10～30mg/L;分化苗生根时筛选浓度分别为30mg/L和20mg/L.芽分化阶段宜使用头孢霉素为抗菌剂,但分化苗生根时宜选用羧苄青霉素.

氨苄青霉素、羧苄青霉素中寡聚物的分离分析

在葡聚糖凝胶ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１０（４０～１２０μｍ）凝胶色谱系统中，用１ｍｏｌ／Ｌ的硫酸胺溶液（ｐＨ７．２）作流动相，实现了对氨苄青霉素、羧苄青霉素高聚物、寡聚物和药物本身的分离，利用ＦＡＢ－ＭＳ、ＨＰＬＣ等分析手段证明，氨苄青霉素、羧苄青霉素中的寡聚物主要为混合二聚体：在氨苄青霉素中主要含开环和闭环二种不同结构的聚合物，在羧苄青霉素中为其Ｄ型和Ｌ型旋光异构体形成的同聚和异聚聚合物。

尾叶桉U6遗传转化再生体系的建立

以桉树品种尾叶桉U6叶盘为外植体,选用MS培养基为基本培养基,附加激素6-BA,IAA,IBA,NAA,通过研究不同激素浓度组合对外植体愈伤诱导及不定芽分化的影响,建立了较好的遗传转化再生体系。结果表明,尾叶桉U6叶盘最适分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 1 mg/L+IAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂粉5 g/L;小苗的最佳生根培养基为MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂粉5 g/L。40 mg/L卡那霉素可以抑制叶盘的分化;20 mg/L卡那霉素可以抑制再生植株的生根。2种抑菌抗生素中,头孢霉素对叶片再生影响较大;而250 mg/L的羧苄青霉素能有效地抑制农杆菌菌株EHA105的生长,却对尾叶桉叶盘的芽分化影响不大,为适宜的抑菌抗生素。3种农杆菌LBA4404,EHA105,GV3101的菌液浸染桉树叶盘,统计其愈伤组织GUS染色率,以EHA105对外植体的浸染能力最强,达83.3%。

抗生素在甘蓝类蔬菜小孢子胚胎发生中的双重作用

为克服甘蓝类蔬菜游离小孢子培养中的细菌污染,以1个青花菜纯合系和2个结球甘蓝纯合系为试验材料,研究培养基中分别添加2种抗生素——头孢噻胯和羧苄青霉素对小孢子培养中细菌污染、胚胎发生和胚植株再生的影响。结果表明,2种抗生素的添加(25、50、100、200 mg·L^(-1))能够显著降低小孢子培养中的细菌污染;50 mg·L^(-1)头孢噻胯和羧苄青霉素的添加显著促进了结球甘蓝、青花菜胚胎发生和植株再生频率;抗生素处理高于50 mg·L^(-1)时,小孢子死亡率升高,同时小孢子的发育受到抑制。本研究报道了抗生素在小孢子培养中的双重作用,尤其是对于胚胎发生的促进作用,这对加快单倍体育种进程具有重要意义。

抗生素对油葵不定芽产生率的影响

研究了卡那霉素和羧苄青霉素对油葵不定芽的诱导及生长的影响。在以卡那霉素为抗性选择标记时，对油葵不定芽起完全抑制作用的Km临界浓度在75～100mg／L；在以羧苄青霉素为抑菌剂用于油葵遗传转化试验时，其浓度为300mg／L时即可有效抑制农杆菌的生长，同时又不会对不定芽的诱导及生长产生明显的伤害作用。试验结果表明，卡那霉素及羧苄青霉素均可作为油葵转化植株的有效筛选、抑菌剂。

羧苄青霉素对几种浆果分化及生长的影响研究

研究了羧苄青霉素对蓝莓、树莓及蔓越莓3种浆果不同外植体的再生、生长的影响及对农杆菌的抑制作用。结果表明：在分化阶段蓝莓与树莓羧苄青霉素浓度应在200-300 mg/kg,而且继代时间应在7 d,而蔓越莓可以采用400 mg/kg,继代时间可在7-14 d;在生根阶段3种植物羧苄青霉素浓度应在200 mg/kg以下。

El Tor 型霍乱弧菌L型诱导及其意义的探讨

本文报道儿种体内外因素可诱导 El Tor 型霍乱弧菌产生 L 型。羧苄青霉素纸片法和倾注平板法可诱导 El Tor 型霍乱弧菌产生长丝体、圆球体和巨形体。El Tor 型霍乱弧菌分型噬菌体可诱导产生长丝体。El Tor 型霍乱弧菌陈旧肉汤培养物中可出现许多圆球体样物。上述因素诱导的 L 型均不稳定,很容易回复为原菌。作者还用鳝鱼和鲫鱼的胆汁诱导 El Tor 型霍乱弧菌形成稳定 L 型,并对 EL Tor 型霍乱弧菌 L 型的流行病学意义及其与霍乱弧菌越冬的关系进行了讨论。

籼稻品种93-11遗传转化中抗生素适宜剂量的筛选

为优化农杆菌介导转化体系,研究了两种常用抑菌剂头孢霉素(cef)和羧苄青霉素(cb)的抑菌效果和对籼稻品种93-11成熟胚培养的影响,并进一步研究选择剂潮霉素(hyg)对愈伤诱导、分化和种子萌发生根的影响,确定其作为选择剂的有效浓度.对cb和cef共设置12种质量浓度处理,各处理都能完全抑制农杆菌的生长,同时对愈伤的诱导和生长没有不良影响,但是有些处理使愈伤的分化率下降.150、250 mg.L-1cb的单独作用,400、500 mg.L-1cef的单独作用,以及cb为100mg.L-1时,300、400、500 mg.L-1cef的3种互作处理都不影响愈伤的分化率;但cef高达600 mg.L-1时明显降低愈伤的分化率,达极显著水平,使分化率降到7%;cb为50 mg.L-1时,350、450、550 mg.L-1cef的3种互作处理都极显著地降低愈伤的分化率,表明高浓度的cef以及添加小量cb的处理与cef之间的互作对分化率的影响十分显著.两种抑菌剂单独使用(400-500 mg.L-1cef,150-250 mg.L-1cb)即有效抑制转化和培养过程中农杆菌的繁殖,同时不影响愈伤的生长和分化.对hyg的研究表明,愈伤诱导和分化对hyg最为敏感,5 mg.L-1的剂量足以使出愈率为0,使愈伤的分化率为0;hyg对愈伤的致死剂量为40 mg.L-1;hyg对种子萌发生根的致死剂量为25 mg.L-1.因此,在愈伤分化阶段不宜加入选择剂;在抗性愈伤组织筛选阶段加入hyg的适宜质量浓度要大于40 mg.L-1;利用愈伤诱导和种子萌发生根对hyg的敏感性,可用于转基因种子的筛选,筛选质量浓度分别要大于5和25 mg.L-1.

抗生素在结核病番茄疫苗研究中的应用

目的探索卡那霉素（Km）、羧苄青霉素（Carb）和头孢霉素（Cef）在结核病番茄疫苗研究中的应用。方法取未转化番茄子叶进行卡那霉素和羧苄青霉素敏感性实验，未转化不定芽进行羧苄青霉素和头孢霉素敏感性实验。转化后的子叶经10．0mg／L卡那霉素筛选后再生的抗性芽，经过第二次筛选再生根。结果卡那霉素抑制番茄子叶再生，随着培养基中卡那霉素浓度升高，子叶再生愈伤组织和芽的时间延长，数量减少。当卡那霉素达到10．0mg／L完全抑制子叶再生。以10．0mg／L卡那霉素筛选转化后的子叶，30％形成愈伤组织，13％分化出不定芽。不定芽在10．0mg／L卡那霉素培养基中进行生根筛选，只有少数不定芽萌发出根，生根时间延长，根数减少。两次筛选需要大约2月时间。0～500．0mtg／L羧苄青霉素对子叶再生没有影响，可素促进生根，但根粗、短。500．0mtg／L头孢霉素促进根生长，根长、细。结论卡那霉素选择压以10．0mg／L为宜。不定芽分化阶段宜用500．0mg／L羧苄青霉素，生根阶段宜用500．0mg／L头孢霉素。针对子叶再生愈伤组织和不对芽再生根两次筛选，敏感、快速，节约筛选时间。

两种抗菌药物治疗儿童支气管肺炎的最小成本分析

目的:对阿洛西林钠组(A组)与羧苄西林钠(B组)治疗儿童支气管肺炎的药物经济学分析,为临床提供用药参考方案。方法:采用回顾性研究,分析A组与B组治疗儿童支气管肺炎的方案进行最小成本分析。结果:两组治疗儿童支气管肺炎的总有效率分别为97.06%和95.65%,效果差异无显著性(x2=0.627P>0.05);两组治疗成本分别为3013.88元和3813.67元,有显著性的差异(t=2.17P<0.05)。结论:阿洛西林钠治疗儿童支气管肺炎比羧苄西林钠经济,符合药物经济学原则。

国产头孢三嗪与三种抗生素联用对革兰氏阴性菌的体外抗菌作用

国产头孢三嗪分别与丁胺卡那霉素、庆大霉素和羧苄青霉素联用对临床分离的5种38株革兰氏阴性菌的体外抗菌作用。结果表明:头孢三嗪与上述三种抗生素联用对所试菌株有协同作用,无拮抗作用发生。其中头孢三嗪与丁胺卡那霉素联用,72％的菌株呈现有协同作用;与庆大霉素联用,66％菌株呈现协同作用;与羧苄青霉素联用,76％菌株呈现协同作用。

不同温度诱导细菌L型的实验观察

目的：观察不同温度诱导细菌形成Ｌ型。方法：抗生素纸片诱导。以苯唑青霉素（每片４０μｇ）、羧苄青霉素（每片５００μｇ）在３７℃、３２℃及２８℃分别诱导金黄色葡萄球菌和福氏痢疾杆菌Ｌ型。结果：三种不同温度诱导细菌形成Ｌ型，其菌落特征、形态及染色性等均无差别。结论：抗生素诱导Ｌ型除３７℃外，３２℃和２８℃均可形成。为探讨Ｌ型可在自然界产生和存在是否与某些传染病流行和传播有关提供依据。

农杆菌介导的香榧幼胚遗传转化体系

【目的】以香榧Torreya grandis‘Merrillii’幼胚为受体材料,开展农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的遗传转化研究,揭示影响香榧遗传转化的关键因素,以建立农杆菌介导的香榧幼胚遗传转化体系。【方法】以香榧种子突破种鳞后第8周至第11周的幼胚作为转基因受体材料,比较受体胚龄、农杆菌菌液浓度、侵染时间、抗生素质量浓度对遗传转化效率的影响,并采用潮霉素、绿色荧光蛋白GFP表达及GFP基因聚合酶链式反应对遗传转化香榧幼胚培养物进行阳性筛选。【结果】随着胚龄的增加,香榧幼胚抗逆性增强,污染率降低,成活率提高,第10周和第11周幼胚成活率分别为52.1%和52.3%。农杆菌菌液浓度和侵染时间均对香榧幼胚的污染率、成活率、愈伤组织诱导率以及体胚发生率具有显著影响(P<0.05)。菌液吸光度[D(600)]为0.5时,香榧幼胚愈伤组织诱导率和体胚发生率最高,分别为17.9%和17.3%;侵染时间为10 min时,愈伤组织诱导率和体胚发生率为最高,分别达17.5%和17.1%。羧苄青霉素对于受体材料的农杆菌脱除具有显著影响(P<0.05),当羧苄青霉素质量浓度为300 mg·L^(-1)时,成活率、愈伤组织诱导率和体胚发生率均最高,分别为60.5%、15.8%和17.5%。潮霉素对于香榧幼胚培养物的阳性筛选具有良好的效果,当潮霉素质量浓度为100 mg·L^(-1)时,成活率为30.5%。【结论】不同胚龄香榧幼胚遗传转化效果不同,突破种鳞后第10周香榧幼胚遗传转化效果良好;当农杆菌菌液D(600)为0.5,侵染时间为10 min时,转化效果最佳;300 mg·L^(-1)为羧苄青霉素脱除农杆菌的最佳质量浓度;100 mg·L^(-1)是潮霉素阳性香榧幼胚筛选的最佳质量浓度。图3表5参37。

头孢青霉素和羧苄青霉素对大豆子叶节茎再生的影响

试验通过向茎诱导培养基和茎伸长培养基中添加不同浓度的头孢青霉素(Cef)和羧苄青霉素(Cb)来研究二者对大豆子叶节茎再生潜在的影响。一定浓度的Cef或Cb对大豆子叶节部位茎的再生有促进或抑制作用。不同基因型大豆的最适Cef或Cb添加浓度不同。培养基中添加100 mg.L-1 Cef或120 mg.L-1 Cb能显著提高垦农18号(K18)子叶节部位丛生芽的诱导及可伸长茎的生成和伸长;150 mg.L-1 Cef对垦农4号(K4)子叶节部位茎的再生有显著的促进作用1,20 mg.L-1 Cb和200 mg.L-1 Cb分别显著提高K4丛生芽的再生和随后可伸长茎的生成及伸长。经121℃高压灭菌处理的Cef和Cb对大豆子叶节部位丛生芽的诱导和可伸长茎的生成及伸长有显著的抑制作用。

贡菊再生体系建立及羧苄青霉素浓度筛选

以贡菊试管苗叶片为外植体,研究了影响不定芽分化和生根的因素,旨在建立贡菊高效的再生体系,同时探究了羧苄青霉素浓度对叶片不定芽分化的影响,为贡菊育种奠定基础。结果表明:在MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.6 mg/L的培养基中,贡菊试管苗叶龄为25 d的叶片中愈伤组织诱导和不定芽分化率达到最高(88.4%),每个叶盘平均分化4.6个不定芽。当MS培养基中的IBA浓度为0.25 mg/L时,最适合贡菊试管苗根的生长,根长为4.5 cm,根数达15条,同时地上部茎叶生长也较好。低于250 mg/L的羧苄青霉素不影响不定芽愈伤组织中的诱导,但浓度高于500 mg/L时,抑制不定芽的分化。