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直肠癌患者的血清C型凝集素受体及其下游效应分子CARD9表达与临床病理特征和预后的关系
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作者 霍成 张孝堂 杨斌健 《国际消化病杂志》 CAS 2024年第2期94-99,137,共7页
目的探究直肠癌患者的血清C型凝集素受体(CLR)及其下游效应分子胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)表达与临床病理特征和预后的关系。方法选择2018年3月至2020年3月国药同煤总医院收治的98例直肠癌患者作为研究对象(设为观察组),另选择45名... 目的探究直肠癌患者的血清C型凝集素受体(CLR)及其下游效应分子胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)表达与临床病理特征和预后的关系。方法选择2018年3月至2020年3月国药同煤总医院收治的98例直肠癌患者作为研究对象(设为观察组),另选择45名同期在该院体检的健康志愿者设为对照组。采用ELISA法检测血清可溶性树突状细胞特异性细胞间黏附分子3结合非整合素(sDC-SIGN)和CARD9表达水平,并分析其与直肠癌患者临床病理特征的关系。采用Pearson相关性分析探讨血清sDC-SIGN与CARD9表达的关系。入组直肠癌患者术后均随访3年,计算3年总生存(OS)率。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,分析血清sDC-SIGN和CARD9表达与直肠癌患者预后的关系。采用多因素Cox回归分析探讨直肠癌患者预后的影响因素。采用ROC曲线分析血清sDC-SIGN和CARD9对直肠癌患者术后生存情况的预测价值。结果与对照组相比,观察组的血清sDC-SIGN表达水平降低,血清CARD9表达水平升高,2组的差异均有统计学意义(P均<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,直肠癌患者的血清sDC-SIGN与CARD9表达呈显著负相关(r=-0.743,P<0.05)。与无淋巴结转移的直肠癌患者相比,有淋巴结转移的患者的血清sDC-SIGN表达水平显著降低,而血清CARD9表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。sDC-SIGN低表达组的3年OS率显著低于sDC-SIGN高表达组,CARD9高表达组的3年OS率显著低于CARD9低表达组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,分化程度、TNM分期、淋巴结转移、血清sDC-SIGN和CARD9均是影响直肠癌患者预后的独立危险因素(P均<0.05)。血清sDC-SIGN和CARD9联合预测直肠癌患者术后3年生存情况的ROC曲线下面积(AUC)为0.896,均大于两者单独预测的AUC(P均<0.05)。结论血清sDC-SIGN和CARD9表达水平均与直肠癌发生密切相关,且血清sDC-SIGN低表达及血清CARD9高表达均提示直肠癌患者术后预后较差,其可能成为直肠癌诊断和预后预测的新血清学标志物。 展开更多
关键词 直肠癌 可溶性树突状细胞特异性细胞间黏附分子3结合非整合素 胱天蛋白酶募集域蛋白9 临床病理特征 预后
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CARD9 PKM2 CMTM6在乳腺癌组织中的表达及相关性研究 被引量:3
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作者 李玲 何霞 +1 位作者 周自城 高晓玉 《河北医学》 CAS 2021年第9期1427-1432,共6页
目的:探究胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)、趋化因子样因子超家族成员6(CMTM6)在乳腺癌组织中的表达及相关性。方法:选取2019年11月至2020年11月我院接诊的79例乳腺癌患者研究对象。免疫组化法检测癌组织、癌旁组... 目的:探究胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)、趋化因子样因子超家族成员6(CMTM6)在乳腺癌组织中的表达及相关性。方法:选取2019年11月至2020年11月我院接诊的79例乳腺癌患者研究对象。免疫组化法检测癌组织、癌旁组织中CARD9、PKM2、CMTM6表达情况,实时荧光定量(RT-PCR)检测癌组织、癌旁组织中CARD9、PKM2、CMTM6表达情况。分析CARD9、PKM2、CMTM6表达与乳腺癌的关系。结果:与癌旁组织相比,癌组织中CARD9、PKM2、CMTM6表达较高(P<0.05)。与高中分化程度、无淋巴结转移、Ⅰ~Ⅱ期乳腺癌患者相比,低分化程度、有淋巴结转移、Ⅲ~Ⅳ期乳腺癌患者CARD9、PKM2、CMTM6表达较高(P<0.05)。CARD9、PKM2、CMTM6之间相关性分析显示CARD9、PKM2之间正相关(r=0.257,P=0.022);CARD9、CMTM6之间正相关(r=0.260,P=0.021);PKM2、CMTM6之间正相关(r=0.254,P=0.024)。与CARD9、PKM2、CMTM6单项相比,三者联合对乳腺癌的预测价值较高,具有统计学差异(P<0.05)。结论:CARD9、PKM2、CMTM6在乳腺癌组织中呈异常高表达且CARD9、PKM2、CMTM6呈线性正相关,与患者分化程度、淋巴结转移、临床分期相关,参与乳腺癌的发生、发展过程,三项联合检测对乳腺癌的预测价值较高。 展开更多
关键词 胱天蛋白酶募集域蛋白9 M2型丙酮酸激酶 趋化因子样因子超家族成员6 乳腺癌
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血尿淀粉酶、CRP、Card9蛋白在AP患者中的变化及其意义 被引量:11
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作者 王长起 李凯 索胜利 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第1期99-102,共4页
目的探讨血尿淀粉酶、C反应蛋白(CRP)、胱天蛋白酶募集域蛋白9(Card9)在急性胰腺炎(AP)患者中的表达及其意义。方法选取本院2014年6月至2016年12月确诊的128例AP患者(AP组)、年龄及性别相匹配的健康自愿者64例(对照组),采用全自动生化... 目的探讨血尿淀粉酶、C反应蛋白(CRP)、胱天蛋白酶募集域蛋白9(Card9)在急性胰腺炎(AP)患者中的表达及其意义。方法选取本院2014年6月至2016年12月确诊的128例AP患者(AP组)、年龄及性别相匹配的健康自愿者64例(对照组),采用全自动生化法检测两组的血尿淀粉酶、血清CRP水平,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测两组外周血单核细胞中Card9蛋白表达水平,并根据AP患者病情分为轻症AP、重症AP进行分层分析。结果AP组患者的血尿淀粉酶、CRP、Card9蛋白水平均显著的高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);重症AP组患者的血尿淀粉酶、CRP、Card9蛋白水平均显著的高于轻症AP组患者,差异具有统计学意义(P<0.05);AP组患者的血尿淀粉酶、CRP、Card9蛋白水平与Ranson评分均呈显著的正相关关系(P<0.05)。结论AP患者血尿淀粉酶、CRP、Card9蛋白水平升高显著,并且与病情的严重程度具有一定的相关性。 展开更多
关键词 淀粉酶 C反应蛋白 胱天蛋白酶募集域蛋白9 急性胰腺炎
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生长抑素对急性胰腺炎患者外周血单核细胞CARD9、BCL-10水平的影响 被引量:7
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作者 刘靓懿 黄强 +3 位作者 宿冬远 刘绍田 张玲 孙祖建 《河北医药》 CAS 2021年第7期1051-1053,1058,共4页
目的分析生长抑素对急性胰腺炎患者外周血单核细胞胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)、B细胞淋巴瘤因子-10(BCL-10)水平的影响。方法124例急性胰腺炎患者依据随机数字表法分为2组,对照组(n=62)行常规治疗方案,研究组(n=62)在常规治疗的基础... 目的分析生长抑素对急性胰腺炎患者外周血单核细胞胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)、B细胞淋巴瘤因子-10(BCL-10)水平的影响。方法124例急性胰腺炎患者依据随机数字表法分为2组,对照组(n=62)行常规治疗方案,研究组(n=62)在常规治疗的基础上使用生长抑素。比较2组外周血单核细胞CARD9、BCL-10水平、炎性因子、胰腺体部血流指标、血清胰腺消化酶水平。结果2组治疗后外周血单核细胞CARD9、BCL-10水平均明显低于治疗前(P<0.05),且研究组外周血单核细胞CARD9、BCL-10水平低于对照组(P<0.05);2组治疗后血肿瘤坏死因子、白介素-6、血白细胞水平均明显低于治疗前(P<0.05),且研究组血肿瘤坏死因子、白细胞介素-6、血白细胞水平低于对照组(P<0.05);2组治疗后血流量、血容量水平均明显高于治疗前(P<0.05),毛细血管表面通透性明显低于治疗前(P<0.05),且研究组血流量、血容量水平高于对照组(P<0.05),毛细血管表面通透性水平低于对照组(P<0.05);2组治疗后胰蛋白酶原2、胰淀粉酶、胰脂肪酶水平均明显低于治疗前(P<0.05),且研究组胰蛋白酶原2、胰淀粉酶、胰脂肪酶水平低于对照组(P<0.05)。结论急性胰腺炎患者在接受常规治疗基础上应用生长抑素,对外周血单核细胞CARD9、BCL-10水平的调节作用较为明显,可有效减轻炎症,改善胰腺血流、消化功能。 展开更多
关键词 生长抑素 急性胰腺炎 外周血单核细胞 胱天蛋白酶募集域蛋白9 B细胞淋巴瘤因子-10
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CARD9突变在真菌感染性疾病中的研究进展 被引量:6
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作者 张逸 王晓雯 李若瑜 《微生物与感染》 2018年第4期233-244,共12页
胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain-containg protein 9,CARD9)属于CARD家族中的一员,存在于脾、肝、胎盘、肺、脑等人体多种组织中,是高度表达于中性粒细胞、巨噬细胞及树突细胞等髓系细胞中的一个重要衔接蛋白。CARD... 胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain-containg protein 9,CARD9)属于CARD家族中的一员,存在于脾、肝、胎盘、肺、脑等人体多种组织中,是高度表达于中性粒细胞、巨噬细胞及树突细胞等髓系细胞中的一个重要衔接蛋白。CARD9可与Bcl-10、黏膜相关淋巴组织淋巴瘤转运蛋白1(mucosaassociated lymphoid tissue lymphoma translocation protein 1,MALT-1)结合并形成CARD9-Bcl-10-MALT-1(CBM)复合体,作为C型凝集素受体(C-type lectin receptor,CLR)等通路的重要媒介,激活核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)等炎症信号通路,在抗真菌免疫中发挥重要作用。迄今为止,全世界已报道14个国家共56例患者发生18种CARD9突变的报道,真菌类型涉及念珠菌、皮肤癣菌、暗色真菌及曲霉等。本文针对CARD9突变在不同真菌感染性疾病中的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 胱天蛋白酶募集域蛋白9 真菌感染 念珠菌 皮肤癣菌 暗色真菌 曲霉
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胱天蛋白酶募集域蛋白9的可溶性表达及纯化
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作者 彭敏 张晨 +3 位作者 王珏 陈浩 孔庆涛 桑红 《中国真菌学杂志》 CSCD 2023年第2期140-145,共6页
目的 制备可溶性TrxA-CARD9蛋白及其临床突变型。方法 将构建好的原核系统表达质粒转化至大肠杆菌感受态细胞后,通过不同诱导条件筛选合适的表达条件。使用精氨酸辅助目的蛋白进行非变性溶解,并通过聚乙烯亚胺和硫酸铵沉淀法去除核酸和... 目的 制备可溶性TrxA-CARD9蛋白及其临床突变型。方法 将构建好的原核系统表达质粒转化至大肠杆菌感受态细胞后,通过不同诱导条件筛选合适的表达条件。使用精氨酸辅助目的蛋白进行非变性溶解,并通过聚乙烯亚胺和硫酸铵沉淀法去除核酸和杂蛋白,最终利用阴离子交换和肝素亲和色谱柱纯化融合蛋白。结果 成功构建表达质粒并纯化融合蛋白,酶切去除TrxA标签后通过质谱鉴定其为可溶性CARD9蛋白。结论 成功实现了全长CARD9序列在原核系统中的高可溶性表达,为研究CARD9蛋白生物结构和功能提供了基础,并为寻找治疗真菌感染的潜在靶点和治疗方法提供新思路。 展开更多
关键词 胱天蛋白酶募集域蛋白 精氨酸 Trx-A标签 蛋白表达 可溶性蛋白
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Dectin-1、CARD9基因在角质形成细胞对红色毛癣菌应答中的作用 被引量:1
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作者 陈佳沁 陈剑 +3 位作者 邓威威 苏真 梁盼盼 湛舒婷 《新医学》 2020年第12期911-914,共4页
目的研究树突状细胞相关性C型凝集素-1(Dectin-1)和胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)基因在角质形成细胞对红色毛癣菌应答中的作用。方法将红色毛癣菌与正常HaCaT细胞、Dectin-1、CARD9基因敲除HaCaT细胞共培养,用ELISA分析其细胞上清液中I... 目的研究树突状细胞相关性C型凝集素-1(Dectin-1)和胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)基因在角质形成细胞对红色毛癣菌应答中的作用。方法将红色毛癣菌与正常HaCaT细胞、Dectin-1、CARD9基因敲除HaCaT细胞共培养,用ELISA分析其细胞上清液中IL-6、IL-8的表达情况。结果Dectin-1基因敲除导致HaCaT细胞IL-6和IL-8基础分泌明显增加,敲除CARD9基因导致HaCaT细胞IL-6基础分泌增加(P<0.05)。在红色毛癣菌的刺激下,和未感染相比,HaCaT细胞分泌的IL-8明显减少(P<0.05);Dectin-1基因敲除的HaCaT细胞则表现为IL-6、IL-8分泌量明显减少(P均<0.05);CARD9基因敲除的HaCaT细胞的IL-6、IL-8分泌则无明显变化(P均>0.05)。结论Dectin-1基因和CARD9基因可能参与了维持表皮免疫稳态,CARD9基因还可能介导了红色毛癣菌引起的免疫应答。 展开更多
关键词 红色毛癣菌 HACAT细胞 树突状细胞相关性C型凝集素-1 胱天蛋白酶募集域蛋白9
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The Role of CARD9 in Metabolic Diseases 被引量:1
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作者 Cheng TIAN Ya-li TUO +2 位作者 Yi LU Chuan-rui XU Ming XIANG 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2020年第2期199-204,共6页
Caspase recruitment domain containing protein 9(CARD9)is an adaptor protein that plays a critical role in pattern recognition receptors(PRRs)-mediated activation of NF-kB and mitogen-activated protein kinase(MAPK).Thi... Caspase recruitment domain containing protein 9(CARD9)is an adaptor protein that plays a critical role in pattern recognition receptors(PRRs)-mediated activation of NF-kB and mitogen-activated protein kinase(MAPK).This elicits initiation of the pro・inflammatory cytokines and leads to inflammatory responses,which has been recognized as a critical contributor to chronic inflammation.Current researches demonstrate that CARD9 is strongly associated with metabolic diseases,such as obesity,insulin resistance,atherosclerosis and so on.In this review,we summarize CARD9 signaling pathway and the role of CARD9 in metabolic diseases. 展开更多
关键词 caspase recruitment domain containing protein 9 pattern recognition receptors metabolic diseases
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CARD9蛋白与乳腺癌患者特征及癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响
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作者 镇耀兰 《医学分子生物学杂志》 CAS 2021年第5期386-391,共6页
目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain containing protein 9,CARD9)与乳腺癌患者临床特征关系及对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、侵袭的影响。方法选取2018年1月至2019年9月咸宁市中心医院保存的乳腺癌标本90... 目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain containing protein 9,CARD9)与乳腺癌患者临床特征关系及对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、侵袭的影响。方法选取2018年1月至2019年9月咸宁市中心医院保存的乳腺癌标本90例,同时选取癌旁组织作为对照,采用Western印迹检测CARD9蛋白表达,组间差异比较采用t检验;选取人类乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞,分为对照组、空白转染组和阳性转染组,其中空白转染组转染空白质粒,阳性转染组转染CARD9表达质粒,采用CCK8试验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell试验检测细胞侵袭,组间差异比较采用F检验。结果乳腺癌组织CARD9蛋白相对表达量为(1.03±0.22),明显高于癌旁组织(P<0.05);肿瘤直径>5 cm、TNM分期Ⅲ期、ER表达阳性组织CARD9蛋白相对表达量分别为(1.12±0.20)、(1.27±0.21)和(1.12±0.19),明显高于肿瘤直径≤5 cm、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、ER表达阴性组织(P<0.05);阳性转染组细胞培养24、48和72 h时A值分别为(0.487±0.102)、(0.702±0.107)和(0.972±0.106),明显高于对照组和空白转染组(P<0.05);阳性转染组、空白转染组和对照组细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05);阳性转染组细胞侵袭数为(101.2±11.4)个,明显多于空白转染组和对照组(P<0.05)。结论乳腺癌组织CARD9蛋白表达上调,与肿瘤直径、TNM分期及ER表达有一定关系;CARD9表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及侵袭能力有一定影响,对细胞凋亡无明显影响。 展开更多
关键词 胱天蛋白酶募集域蛋白9 乳腺癌 临床病理特征 MDA-MB-231细胞 增殖 凋亡 侵袭
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动态观察胱天蛋白酶募集域蛋白9在心肌梗死后表达的基础研究 被引量:3
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作者 贾之祥 王颖 +1 位作者 王绿娅 杜杰 《心肺血管病杂志》 CAS 2012年第2期196-199,共4页
目的:探讨心肌梗死后小鼠胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain-containingprotein 9,CARD9)的表达及其与炎症的关系。方法:选择野生型小鼠和CARD9敲除小鼠各26只,分为野生型对照组、野生型心肌梗死组、CARD9敲除对照组和C... 目的:探讨心肌梗死后小鼠胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain-containingprotein 9,CARD9)的表达及其与炎症的关系。方法:选择野生型小鼠和CARD9敲除小鼠各26只,分为野生型对照组、野生型心肌梗死组、CARD9敲除对照组和CARD9敲除心肌梗死组共4组,每组13只。心肌梗死模型组是通过结扎冠状动脉前降支复制心肌梗死模型,而对照组仅穿线不结扎。于模型复制后第1天,从每组随机抽取3只小鼠处死并行氯化三苯四氮唑(TTC)染色,观察模型是否复制成功;于第3天和第28天,每组分别随机各抽取3只小鼠,处死后取心肌组织行石蜡切片,苏木素伊红(HE)染色和免疫组化染色观察炎症细胞浸润,免疫组化染色和蛋白定量观察CARD9表达。结果:TTC证实心肌梗死模型复制成功;免疫组化染色和蛋白印迹证实,与野生型对照组比较,野生型心肌梗死组3d及28d时梗死区域CARD9表达均增高(P<0.05)与野生型心肌梗死组比较,3 d时CARD9敲除组心肌梗死组巨噬细胞浸润增加(P<0.05)。结论:心肌梗死后CARD9表达上调,而CARD9敲除炎症细胞浸润增加,提示CARD9参与心肌梗死并对早期炎症可能有一定抑制作用。 展开更多
关键词 心肌梗死 炎症 胱天蛋白酶募集域蛋白9
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胱天蛋白酶募集域蛋白9在中重度缺血性脑卒中发病早期阶段的作用 被引量:5
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作者 黄坚友 黄亮 +3 位作者 丁建文 曹春水 熊华威 李洋 《中国急救医学》 CAS CSCD 2021年第4期319-323,共5页
目的观察胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)在急性中重度缺血性脑卒中发病早期阶段的作用,探讨脑卒中炎症的发病机制。方法入选36例美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分> 5分的急性中度及以上缺血性脑卒中患者为病例组;入选20例年龄... 目的观察胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)在急性中重度缺血性脑卒中发病早期阶段的作用,探讨脑卒中炎症的发病机制。方法入选36例美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分> 5分的急性中度及以上缺血性脑卒中患者为病例组;入选20例年龄、高血压、糖尿病等基础病与病例组差异无统计学意义的志愿者作为对照组。采集病例组发病第1、3、7天及对照组第1天外周血单个核细胞(PBMC)。Western blot检测CARD9表达水平及核转录因子-κB(NF-κB)活性(p-p65/p65水平);RT-PCR检测炎症因子肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6) mRNA的表达水平;病例组第1、3、7天使用NIHSS评分评估脑缺血损伤程度。结果 Western blot结果表明,入院第1、3、7天时,病例组CARD9表达及NF-κB活性与对照组比较显著升高(CARD9:1.17±0.14、1.08±0.15、0.97±0.16 vs. 0.34±0.02,NF-κB:1.78±0.06、1.70±0.07、1.46±0.04 vs. 1.21±0.12,P均<0.05);RT-PCR结果表明,入院第1、3、7天时,病例组TNF-αmRNA表达与对照组比较显著升高(5.34±0.14、4.57±0.15、3.58±0.19 vs. 1.00±0.08,P均<0.01),病例组IL-1βmRNA表达与对照组比较显著升高(6.49±0.12、4.85±0.23、3.38±0.31 vs. 1.00±0.11,P均<0.01),病例组IL-6 mRNA表达与对照组比较显著升高(10.29±0.55、7.32±0.44、4.56±0.33 vs. 1.00±0.07,P均<0.01)。Pearson相关分析表明,脑卒中患者PBMC中NF-κB活化、TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA及NIHSS评分与CARD9表达呈正相关(r值分别为0.971、0.974、0.970、0.982、0.891,P均<0.01)。结论 CARD9在早期中重度缺血性脑卒中患者PBMC中的表达增高,可能通过NF-κB信号通路介导缺血性脑损伤炎症反应。 展开更多
关键词 胱天蛋白酶募集域蛋白9(card9) 核转录因子-κB(NF-κB) 炎症因子 急性缺血性脑卒中(AIS) 外周血单个核细胞(PBMC)
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胱天蛋白酶募集域蛋白9?麦芽糖结合蛋白融合蛋白的原核表达及纯化 被引量:3
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作者 邓东灵 孔庆涛 +5 位作者 胡青原 刘海波 魏天彪 黄善青 陈浩 桑红 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第3期241-247,共7页
目的胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)可激活核因子?κB(NF?κB)、丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)等通路参与免疫,但其作用机制至今尚未阐明。为进行相关体外实验,构建CARD9?麦芽糖结合蛋白(MBP)融合蛋白的原核表达载体,并对融合蛋白进行表达... 目的胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)可激活核因子?κB(NF?κB)、丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)等通路参与免疫,但其作用机制至今尚未阐明。为进行相关体外实验,构建CARD9?麦芽糖结合蛋白(MBP)融合蛋白的原核表达载体,并对融合蛋白进行表达鉴定及纯化。方法利用PCR技术分别扩增CARD9和MBP基因的编码序列,将两者正确插入pET?30a(+)载体中得到重组质粒,后转化至大肠埃希菌DH5α感受态细胞中,并进行PCR和酶切鉴定以及基因测序。将正确的重组质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,筛选不同条件进行IPTG诱导表达,通过SDS?PAGE电泳检测目的蛋白质的相对分子质量。通过MBP麦芽糖层析柱和分子筛层析柱对CARD9?MBP融合蛋白进行纯化,用HRV3C蛋白酶酶切去除MBP标签后进行MALDI?TOF质谱鉴定。结果成功构建CARD9?MBP融合蛋白的原核表达载体,PCR和酶切鉴定为阳性且基因测序结果与目的序列一致。SDS?PAGE电泳显示,在大肠埃希菌BL21(DE3)中成功诱导表达出相对分子质量约为105 000的目的蛋白。通过MBP麦芽糖层析柱的初步纯化后,可得到相对较纯的融合目的蛋白,经HRV3C蛋白酶酶切去除MBP标签后行MALDI?TOF质谱鉴定其确为CARD9蛋白。后期通过分子筛层析柱进一步纯化得到了更纯的CARD9?MBP融合蛋白。结论成功构建了重组CARD9?MBP融合蛋白的原核表达载体,并进行了大量可溶性表达。通过MBP麦芽糖层析柱和分子筛层析柱的纯化,可得到较纯的目的蛋白。 展开更多
关键词 胱天蛋白酶募集域蛋白9 原核表达 MBP麦芽糖层析柱 分子筛层析
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胱天蛋白酶募集域蛋白9在非感染性炎症疾病中的研究进展 被引量:2
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作者 丁建文 黄亮 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期736-740,共5页
胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)是一种重要的衔接蛋白,通过蛋白-蛋白的相互作用,调节细胞内信号传递。近年来研究发现,CARD9在感染性疾病中发挥重要作用,在非感染性炎症疾病中亦明显表达,其可能参与非感染性炎症疾病的发生、发展... 胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)是一种重要的衔接蛋白,通过蛋白-蛋白的相互作用,调节细胞内信号传递。近年来研究发现,CARD9在感染性疾病中发挥重要作用,在非感染性炎症疾病中亦明显表达,其可能参与非感染性炎症疾病的发生、发展,在其发病机制中发挥调控作用。本文简要介绍CARD9的结构及其与机体炎症信号通路的关联,重点就CARD9在心血管系统、消化系统及自身免疫系统等非感染性炎症疾病中的作用及机制的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 胱天蛋白酶募集域蛋白9(card9) 非感染性炎症疾病 信号通路
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胱天蛋白酶募集域蛋白9在乳腺癌患者组织及癌旁组织中的表达与其相关生物学行为的关联性分析
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作者 马洪林 尹婷婷 +1 位作者 张莉伟 郑会爽 《国际医药卫生导报》 2020年第18期2734-2736,共3页
目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)在乳腺癌患者组织、癌旁组织中的表达与其相关生物学行为的关联性。方法选取2018年5月至2019年12月本院乳腺癌患者104例为研究对象,手术治疗时均取乳腺癌组织及配对癌旁组织(距肿瘤边缘>5 cm处)... 目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)在乳腺癌患者组织、癌旁组织中的表达与其相关生物学行为的关联性。方法选取2018年5月至2019年12月本院乳腺癌患者104例为研究对象,手术治疗时均取乳腺癌组织及配对癌旁组织(距肿瘤边缘>5 cm处),分别采用免疫组化法检测乳腺癌组织及癌旁组织CARD9表达水平,并对比不同生物学行为乳腺癌CARD9阳性表达率。结果乳腺癌组织CARD9阳性表达率为70.19%,高于癌旁组织29.81%,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤直径≥5 cm、雌激素受体(ER)阳性者CARD9阳性表达率分别为81.25%、81.54%,均高于肿瘤直径<5 cm、ER阴性者33.33%、51.28%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论CARD9在乳腺癌中呈异常高表达,能特异性促进乳腺癌细胞增殖,临床有望将调控CARD9表达作为治疗乳腺癌的新靶点。 展开更多
关键词 胱天蛋白酶募集域蛋白9 乳腺癌 癌旁组织 生物学行为
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CARD9基因敲除对C57BL/6小鼠激素抵抗型哮喘模型气道炎症的影响
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作者 葛翔挺 王美燕 +3 位作者 郑锐 张宁杰 张亚利 戴元荣 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期746-751,共6页
目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)在C57BL/6小鼠激素抵抗型哮喘气道损伤和炎症中的作用。方法采用随机数字表法,将6~8周龄无特定病原体(SPF)级C57BL/6雌性小鼠分为A组(对照组)、B组(模型组)和C组(地塞米松治疗组),每组6只,B组及C... 目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)在C57BL/6小鼠激素抵抗型哮喘气道损伤和炎症中的作用。方法采用随机数字表法,将6~8周龄无特定病原体(SPF)级C57BL/6雌性小鼠分为A组(对照组)、B组(模型组)和C组(地塞米松治疗组),每组6只,B组及C组利用卵清白蛋白(OVA)/完全弗氏佐剂(CFA)腹部皮下注射,OVA雾化激发构建小鼠模型,C组每次致敏前30 min给予地塞米松,末次激发24 h后检测其病理变化及支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数,进行肺组织炎症浸润情况评分,Western blot检测造模前后CARD9蛋白的变化;然后将雌性6~8周龄C57BL/6野生型小鼠12只和CARD9基因敲除型小鼠12只分为4组,每组6只,其中D组为野生型对照组,E组为野生型模型组,F组为CARD9基因敲除对照组,G组为CARD9基因敲除模型组,造模如上述对照组和模型组。苏木精-伊红染色观察肺组织病理变化,ELISA法检测BALF中白细胞介素(IL)-4、IL-5和IL-17,RT-PCR法检测CXC趋化因子配体10(CXCL-10)和IL-17 mRNA水平。结果B组炎症浸润评分[(3.33±0.82)比(0.67±0.52)分]和BALF总细胞计数[(10.13±4.83)×10^(5)个/ml比(3.76±0.84)×10^(5)个/ml]均高于A组(均P<0.05);C组炎症浸润评分[(2.83±0.75)分]和BALF总细胞计数[(9.80±3.19)×10^(5)个/ml]与B组差异无统计学意义(P>0.05);B组CARD9蛋白表达高于A组(0.245±0.090比0.047±0.014,P=0.004);肺组织病理结果显示,与E组及F组相比,G组的肺组织炎症细胞浸润及组织结构破坏程度加重。与E组及F组相比,G组炎症细胞总数、中性粒细胞数量和嗜酸粒细胞数量均升高(均P<0.05);IL-4、IL-5及IL-17表达水平均升高(均P<0.05);支气管肺组织中IL-17及CXCL-10 mRNA表达水平亦均升高(均P<0.05)。结论CARD9基因的缺失可能通过升高IL-17及CXCL-10等中性粒细胞趋化因子,增加中性粒细胞的浸润,从而加重C57BL/6小鼠激素抵抗型哮喘。 展开更多
关键词 哮喘 胱天蛋白酶募集域蛋白9 激素抵抗型哮喘 气道炎症
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重症急性胰腺炎大鼠CARD9的早期表达及柴芩承气汤的干预研究 被引量:2
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作者 门昌君 张平平 +2 位作者 刘钰 张国梁 王东强 《重庆医学》 CAS 2021年第3期361-366,共6页
目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠中的早期表达,并探讨柴芩承气汤对其的调控机制。方法将SD大鼠分为假手术组(SHAM组)、SAP组和柴芩承气汤组(CQCQD组),每组20只。检测血清淀粉酶(AMY)、肿瘤坏死因子-α(T... 目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠中的早期表达,并探讨柴芩承气汤对其的调控机制。方法将SD大鼠分为假手术组(SHAM组)、SAP组和柴芩承气汤组(CQCQD组),每组20只。检测血清淀粉酶(AMY)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β水平及CARD9 mRNA表达;术后3、6、12 h分批处死大鼠,开腹观察胰腺组织的病理学变化;采用Western blot法检测3、6、12 h各组胰腺组织中CARD9蛋白磷酸化水平。结果SAP组AMP、TNF-α、IL-1β、CARD9 mRNA水平随造模时间延长而逐渐升高。与SHAM组比较,SAP组炎性因子水平明显升高(P<0.05);同时间点CQCQD组AMP、TNF-α、IL-1β、CARD9 mRNA水平较SAP组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。3、6、12 h CQCQD组蛋白磷酸化水平较SAP组明显下降,较SHAM组有所升高(P<0.05)。CARD9 mRNA表达的曲线下面积(AUC)为0.923,灵敏度和特异度分别为89.9%、94.8%,有较高的诊断准确性。结论柴芩承气汤可降低血清CARD9 mRNA水平,从而减轻SAP时胰腺的炎症损伤。 展开更多
关键词 胰腺炎 急性坏死性 大鼠 Sprague-Dawley 胱天蛋白酶募集域蛋白9 肿瘤坏死因子α 白细胞介素1Β 柴芩承气汤
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血清LXA4、Card9、PTX-3水平在重症急性胰腺炎患者中的变化及对并发MODS预测价值 被引量:4
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作者 樊洁 李冬 《热带医学杂志》 CAS 2021年第9期1184-1187,F0003,共5页
目的探讨血清脂氧素A4(LXA4)、胱天蛋白酶募集域蛋白9(Card9)、穿透素3(PTX-3)表达水平在重症急性胰腺炎(SAP)患者中的变化及对并发多器官功能障碍综合征(MODS)的预测价值。方法选取2018年1月-2020年10月陕西省商洛职业技术学院附属医... 目的探讨血清脂氧素A4(LXA4)、胱天蛋白酶募集域蛋白9(Card9)、穿透素3(PTX-3)表达水平在重症急性胰腺炎(SAP)患者中的变化及对并发多器官功能障碍综合征(MODS)的预测价值。方法选取2018年1月-2020年10月陕西省商洛职业技术学院附属医院和兵器工业五二一医院收治的99例急性胰腺炎患者,根据严重程度分为非重症组(n=60)和重症组(SAP组)(n=39),比较两组血清LXA4、Card9、PTX-3水平,Pearson相关性分析血清LXA4、Card9、PTX-3水平与SAP患者临床资料的相关性;根据SAP患者是否并发MODS分为MODS组(n=28)和非MODS组(n=11),受试者工作特征(ROC)曲线分析LXA4、Card9、PTX-3对于SAP患者并发MODS的预测价值。结果非重症组与重症组患者性别、年龄、白细胞计数、血钙、病因比较差异无统计学意义(P>0.05);重症组C反应蛋白(CRP)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、急性生理学与慢性健康状况评分(APACHEⅡ)、Ranson评分均显著高于非重症组,急性胰腺炎严重程度床边指数评分(BISAP)显著低于非重症组,差异有统计学意义(P<0.05)。重症组血清PTX-3及Card9相对表达水平显著高于非重症组,LXA4水平明显低于非重症组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清LXA4、Card9、PTX-3分别与APACHEⅡ、BISAP、Ranson评分、CRP存在显著相关性(P<0.05),与其他指标无显著相关性(P>0.05)。血清LXA4、Card9、PTX-3及三者联合用于诊断SAP患者并发MODS的ROC曲线下面积分别为0.713(95%CI:0.622~0.803)、0.877(95%CI:0.820~0.935)、0.850(95%CI:0.777~0.924)、0.936(95%CI:0.897~0.974)。结论血清LXA4、Card9、PTX-3水平在SAP患者病情评估及预测SAP并发MODS中具有较好的临床价值。 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎 多器官功能障碍综合征 脂氧素A4 胱天蛋白酶募集域蛋白9 穿透素3
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CARD9基因多态性在克罗恩病发病机制中的研究进展 被引量:1
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作者 唐琴 王玉芳 《中华炎性肠病杂志(中英文)》 2020年第4期337-340,共4页
胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain protein 9,CARD9)是细胞内信号转导的重要衔接蛋白,是非特异性免疫和炎症反应中的关键调节器,并参与抗真菌的免疫反应。近年来发现CARD9基因多态性与克罗恩病(CD)的发病具有相关性。... 胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain protein 9,CARD9)是细胞内信号转导的重要衔接蛋白,是非特异性免疫和炎症反应中的关键调节器,并参与抗真菌的免疫反应。近年来发现CARD9基因多态性与克罗恩病(CD)的发病具有相关性。本文就CARD9在CD发病机制中的作用做一综述,为相关研究提供新思路。 展开更多
关键词 克罗恩病 胱天蛋白酶募集域蛋白9 基因多态性 发病机制
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胱天蛋白酶募集域蛋白9基因多态性与急性胰腺炎易感性的相关性研究 被引量:2
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作者 王静 任大宾 杨志文 《中华胰腺病杂志》 CAS 2021年第3期195-200,共6页
目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(Card 9)基因多态性与AP患病风险的相关性。方法收集2019年6月至2020年2月间上海市松江区中心医院收治的70例AP患者的临床资料,同时选取70例健康体检者作为对照组。采用TaqMan探针法检测所有受试者Card 9... 目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(Card 9)基因多态性与AP患病风险的相关性。方法收集2019年6月至2020年2月间上海市松江区中心医院收治的70例AP患者的临床资料,同时选取70例健康体检者作为对照组。采用TaqMan探针法检测所有受试者Card 9基因rs10870077 C>G、rs4077515 A>G、rs10781499 A>G、rs141992399 C>G、rs139265120 A>G突变。应用实时荧光定量PCR检测血清Card 9 mRNA表达,电化学发光法分别检测血清IL-6、降钙素原水平,散色比浊法检测CRP水平。结果AP患者Card 9基因rs10870077 C>G突变(CG基因型)占比显著高于对照组(50.0%比31.4%),差异有统计学意义(P<0.05)。rs4077515AG、rs10781499AG基因型占比与对照组差异无统计学意义。rs141992399 C>G、rs139265120 A>G突变率特别低。rs10870077 CG基因型AP患者血清Card 9 mRNA表达量显著高于对照组(6.20±2.82比3.90±1.96),差异有统计学意义(P<0.05),而rs4077515AG、rs10781499AG基因型AP患者血清Card 9 mRNA水平与对照组差异无统计学意义。rs10870077 CG基因型AP患者血清IL-6水平较rs10870077 CC、GG基因型显著升高[(614.7±1531.8)ng/L比(372.5±1127.9)、(385.5±598.7)ng/L],而CRP水平较GG基因型显著降低[(34.84±50.64)mg/L比(55.30±87.02)mg/L],降钙素原水平较GG基因型显著升高[(1.98±4.70)μg/L比(0.77±1.12)μg/L],差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论Card 9基因rs10870077 C>G突变可上调Card 9 mRNA表达,增加血清IL-6水平,该突变可能是AP发生的高风险因素。 展开更多
关键词 胰腺炎 胱天蛋白酶募集域蛋白9 基因型 点突变
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胱天蛋白酶募集域蛋白9基因多态性与急性胰腺炎及生长抑素临床疗效的关系 被引量:3
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作者 任大宾 杨志文 《中国综合临床》 2022年第2期97-102,共6页
目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain protein 9,Card9)基因多态性与急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)及生长抑素临床疗效的关系。方法选取2019年6月至2020年5月上海市松江区中心医院就诊的86例AP患者为研究对... 目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain protein 9,Card9)基因多态性与急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)及生长抑素临床疗效的关系。方法选取2019年6月至2020年5月上海市松江区中心医院就诊的86例AP患者为研究对象,同期选择健康志愿者81名为对照组,进行前瞻性队列研究。查阅国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)核苷酸数据库,筛选Card9的10个常见单核苷酸多态性位点。SNapShot微测序法检测Card9单核苷酸多态性位点。AP患者均给予生长抑素治疗,观察Card9单核苷酸多态性与AP患者临床症状、辅助检查指标的关系。正态分布的计量资料两组间比较采用独立样本t检验;非正态分布计量资料以M(Q1,Q3)表示,组间比较应用秩和检验。计数资料组间比较采用χ^(2)检验。结果AP组患者Card9 rs10870077 C>G单核苷酸多态性位点频率较健康对照组显著增加,差异有统计学意义(OR=1.934,95%CI=1.011~3.700,P=0.046)。与CC基因型相比,Card9 rs10870077 C>G中重症AP患者生长抑素治疗组腹痛腹胀消失时间明显延长[(5.64±2.06)d与(3.76±1.23)d,t=2.98,P=0.006],Card9 rs10870077 C>G重症AP患者生长抑素治疗组住院时间增加[(13.25±5.31)d与(9.00±3.68)d,t=1.51,P=0.170]。结论Card9 rs10870077 C>G是AP的易感因素,与重症AP生长抑素临床疗效的个体差异存在一定相关性。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 胱天蛋白酶募集域蛋白9 基因多态性 生长抑素
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