miR-421靶向调控Menin/Caspase-3影响抑郁症的机制

目的探讨miR-421影响抑郁症发生发展的作用机制。方法采取单次腹腔注射脂多糖(LPS)方法建立抑郁大鼠模型,采用糖水偏好度测试和旷场实验进行抑郁行为检测。通过miRNA微阵列芯片和RT-PCR分析miR-421在抑郁大鼠海马组织中的表达量,运用TargetScan数据库和mi RDB数据库进行预测miR-421的靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验观察其与靶基因的结合情况,观察过表达和抑制miR-421对靶基因的影响,随后过表达和抑制靶基因,观察其对下游因子的影响,最终探究miR-421影响抑郁症的相关机制。结果miRNA微阵列芯片和RT-PCR检测表明miR-421在抑郁大鼠海马组织中呈高表达(P<0.001),抑制miR-421的表达可显著恢复抑郁大鼠的体重和运动能力(P<0.001)。TargetScan数据库预测得到Menin与miR-421存在结合靶点,双荧光素酶报告基因实验表明Menin与miR-421具有相互作用;当miR-421过表达时,Menin表达量会下调(P<0.001),相反,当抑制miR-421表达时,Menin表达量会上调(P<0.001)。qPCR检测提示,Menin下游因子Caspase-3、NF-κB在抑郁大鼠模型海马组织中的表达显著提高(P<0.001),IL-1β在抑郁大鼠模型海马组织中的表达明显提高(P<0.01),当抑制Menin表达时,Caspase-3、NF-κB、IL-1β表达量会升高(P<0.001),当过表达Menin时,Caspase-3、NF-κB、IL-1β表达量则降低(P<0.001)。结论抑制miR-421表达可升高Menin表达,降低Caspase-3含量,减少神经炎症反应,从而改善抑郁症状。

葫芦茶苷对肝损伤大鼠肝组织Caspase-3与Caspase-8活性的影响及保肝作用研究

目的:研究葫芦茶苷对四氯化碳(CCl4)诱导急性肝损伤大鼠的保护作用及对肝组织Caspase-3与Caspase-8活性的影响。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组,肝损伤模型组,阳性对照组(水飞蓟宾胶囊),葫芦茶苷低中高剂量组(3、6、12 mg·kg-1),每日灌胃给药1次,连续给药14 d,正常组与模型组每天灌服等体积的生理盐水,末次灌胃给药1 h后,除空白对照组外,皮下注射CCl4原液建立急性肝损伤大鼠模型,检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和γ-氨基酰转肽酶(γ-GT)、胆碱酯酶(CHE)、总胆汁酸(TBA)和总胆红素(TBIL);检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性以及还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和肝微粒体一氧化氮(NO)的含量,并检测肝组织Caspase-3,Caspase-8活性。结果:与模型组比较,葫芦茶苷能降低血清ALT,AST,LDH,γ-GT活性及TBA和TBIL含量(P<0.05或P<0.01),升高血清CHE含量;降低肝微粒体NO含量和MDA含量,增加肝组织SOD,GSH-PX活性和GSH含量,并降低肝组织Caspase-3,Caspase-8的活性(P<0.05或P<0.01)。结论:葫芦茶苷对四氯化碳致急性肝损伤大鼠具有明显的保护作用,其机制可能与其抗氧自由基、抑制脂质过氧化作用以及下调Caspase-3和Caspase-8的活性有关。

细胞色素P450-3A4相关的药物相互作用

目的：综述与细胞色素Ｐ４５０ ３Ａ４相关的药物相互作用。方法：检索Ｍｅｄｌｉｎｅ 和中国药学文摘。结果：发现多种由ＣＹＰ３Ａ４催化代谢的药物之间可以竞争药物代谢酶，引起药物相互作用，ＣＹＰ３Ａ４的抑制剂和诱导剂均可以抑制或诱导ＣＹＰ３Ａ４催化代谢的药物代谢，导致有益或不良的药物相互作用。结论：ＣＹＰ３Ａ４催化代谢的药物联合使用，特别是ＣＹＰ３Ａ４抑制剂与底物联合使用时，可能因为抑制了药物的代谢而导致严重的药物不良反应。

Caspase-3通路在脑卒中相关性肌萎缩中的作用机制

目的探究Caspase-3通路在脑卒中相关性肌萎缩中的作用机制。方法采用大脑中动脉线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型,成功后采用随机数表法分为模型组、Z-DEVD-FMK(Caspase-3抑制剂)组,每组12只,另取12只设定为假手术组,Z-DEVD-FMK组大鼠侧脑室注射Z-DEVD-FMK溶液治疗,假手术组及模型组大鼠侧脑室注射等剂量二甲基亚砜(DMSO),持续7d,末次给药24h后进行抓力检测,然后处死大鼠,蛋白免疫印迹法(Westernblot)法检测大鼠脑组织及大腿肌肉组织中Caspase-3蛋白的表达水平,HE染色检测大鼠大腿肌肉组织肌纤维横截面积,TUNEL染色检测大鼠大腿肌肉组织肌细胞凋亡情况,实时荧光定量(qRT-PCR)检测大腿肌肉组织中肌蛋白降解因子MuRF-1及MAFbx、成肌分化抗原(Myod1)、肌细胞生成素(Myog)mRNA表达水平。结果与假手术组相比,模型组大鼠脑组织及大腿肌肉组织中Caspase-3蛋白的表达、大腿肌肉组织中TUNEL阳性细胞比例、MuRF-1及MAFbxmRNA表达均升高,大鼠抓力、大腿肌肉组织中肌纤维横截面积、Myod1及MyogmRNA表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,Z-DEVD-FMK组大鼠脑组织及大腿肌肉组织中Caspase-3蛋白的表达、大腿肌肉组织中TUNEL阳性细胞比例、MuRF-1及MAFbxmRNA表达均降低,大鼠抓力、大腿肌肉组织中肌纤维横截面积、Myod1及MyogmRNA表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抑制Caspase-3通路激活,可抑制肌细胞凋亡,增加肌纤维横截面积,上调Myod1、Myog表达,下调MuRF-1、MAFbx表达,对抗脑卒中相关性肌萎缩。

金银花提取物及主要成分对药物代谢酶CYP3A4的活性抑制作用研究

目的:考察金银花提取物及其主要成分绿原酸、咖啡酸和芦丁对CYP3A4活性的抑制作用。方法:采用重组人CYP3A4孵育法,以咪达唑仑作为该酶的活性探针药物,采用液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)测定代谢产物1′-羟基咪达唑仑的浓度,计算代谢产物的初始生成速度,比较加入待测药物和空白对照时代谢产物的初始生成速度。结果:金银花提取物、绿原酸、芦丁对该酶有抑制作用,IC50值分别为2.13mg/mL、28.8μmol/L和17.6μmol/L,且金银花提取物和绿原酸对该酶的抑制作用不可逆,咖啡酸的抑制作用很弱,几乎不会导致药物相互作用。结论:金银花可能影响联合使用的CYP3A4的底物药物的代谢。

CHD病人心肌细胞凋亡及bcl-2家族蛋白和caspase-3的调节作用

目的 观察CHD病人心肌细胞凋亡情况及bcl 2、bcl xl、bax和bad及caspase 3和心肌氧化性应激对心肌细胞凋亡的调节作用。方法 研究以进行常规CPB手术无肺动脉高压的ASD病人为对照组 (ASD组 ,n =5 )、以合并CHD的RHD病人为观察组 (RHD组 ,n =5 )。并行循环后留取右心室全层心肌标本。用原位TUNEL技术检测凋亡心肌细胞。用流式细胞仪测定右心室bcl 2、bcl xl、bax和bad蛋白表达。分别用Z DEVD AMC底物降解法和TBARS方法测定右心室caspase 3活性和MDA含量。结果 CHD病人右心室心肌细胞凋亡数、caspase 3活性和MDA含量均明显高于ASD病人 (分别P =0 0 2 6,0 0 13和 0 0 0 2 ) ;与ASD病人比较 ,CHD病人右心室促凋亡蛋白bax和bad表达明显上调 (P <0 0 0 3和 0 0 0 1)。而两组抗凋亡蛋白bcl 2和bcl xl表达之间无显著性差异 (均P >0 0 5 )。结论 心肌细胞凋亡参与CHD的病理生理过程。CHD病人的心肌细胞凋亡与心肌细胞bax和bad蛋白表达上调、caspase 3激活以及心肌氧化性应激增高有关。

Caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO对氧化损伤诱导晶状体上皮细胞凋亡的防护作用

目的 探讨半胱氨酸天冬氨酸酶(caspase-3)及其抑制剂Ac-DEVD-CHO对过氧化氢(H_2O_2)诱导大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响,为进一步研究晶状体氧化损伤机制及其防护提供实验依据。方法 采用大鼠离体晶状体器官培养的方法,用Western blot法分析氧化损伤后晶状体上皮细胞内caspase-3蛋白酶活性,流式细胞AnnexinV-PI双染色法定量检测caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO对晶状体上皮细胞凋亡率的影响。结果 氧化损伤诱导晶状体上皮细胞凋亡过程中,细胞内caspase-3酶活性明显增强,caspase-3特异性抑制剂Ac-DEVD-CHO可有效降低晶状体上皮细胞凋亡率。结论 caspase-3蛋白酶在氧化损伤诱导晶状体上皮细胞凋亡过程中占有重要地位,caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO可有效防护体外晶状体上皮细胞氧化损伤。

腹腔内注射IL-2重组腺病毒、IL-3重组腺病毒增强化疗药物抗白血病作用的研究

对实验性白血病小鼠模型大剂量化疗后,直接腹腔注射IL-2重组腺病毒(Ad-IL-2)和/或IL-3重组腺病毒(Ad-IL-3),发现腹腔注射对照腺病毒载体小鼠虽经大剂量化疗,仍有大量白血病细胞浸润至骨髓、血管、肝脏及脾脏。而腹腔注射Ad-IL-2或Ad-IL-3组小鼠肿瘤生长缓慢,注射Ad-IL-2组小鼠脾NK、CTL活性显著提高,注射Ad-IL-3组小鼠腹腔巨噬细胞数量及杀伤活性明显提高,联合应用Ad-IL-2,Ad-IL-3组小鼠抗白血病作用最为明显,骨髓中虽然仍见白血病细胞,但可见较多正常造血细胞,且肝、脾中未见白血病细胞浸润。表明腹腔内注射Ad-IL-2和Ad-IL-3可显著增强大剂量化疗对白血病的治疗效果。

化疗药物对胰腺癌细胞株Aspc-1和Bxpc-3生长抑制作用的研究

目的 探讨不同化疗药物浓度、作用时间及联合用药对胰腺癌细胞株 (Aspc 1和Bxpc 3)的生长抑制作用。方法 单独或联合使用不同浓度的 4种化疗药物 :5 氟尿嘧啶、丝裂霉素、顺铂和表柔比星 (浓度分为d1、d2、d3、d4 ) ,分别作用 2 4、4 8和 72h后 ,用四唑盐比色法检测药物对两株细胞的生长抑制作用 ,并对计算出的每组细胞生长抑制率行t检验分析。结果 两细胞株的生长抑制率随着药物浓度的增加和作用时间的延长而显著上升 (P <0 .0 5 ) ,联合用药能显著提高药物对两细胞株的抑制作用 (P <0 .0 5 )。结论 通过动脉灌注或保留导管持续灌注以提高化疗药物局部浓度和延长药物作用时间 。

一种新型DHA复合物的抑瘤作用及对Caspase-3凋亡蛋白表达的影响

目的评价一种新型DHA复合物(AT-158)对荷瘤小鼠移植瘤及体外培养肿瘤细胞的抑瘤作用,并对其可能的作用机制做初步探讨。方法建立移植瘤荷瘤小鼠动物模型和体外细胞培养的方法,评价AT-158在体内和体外的抑瘤作用,观察体外培养的Hela细胞在药物作用下的核形态的改变,测定移植瘤中Caspase-3凋亡蛋白表达的变化。结果AT-158在体内和体外均显示显著的抑瘤作用。肿瘤细胞的核形态发生凋亡细胞特征性改变。诱导凋亡执行蛋白Caspase-3表达增加。结论AT-158显示一定的抑瘤效果,具有较高的开发价值。

EMC6与Apaf-1、Caspase-3在宫颈癌组织中的表达及临床预后意义

目的 探讨宫颈癌中EMC6、Apaf-1和Caspase-3蛋白的表达情况,并分析其与患者临床病理特征和预后的关系。方法 采用免疫组化方法检测宫颈癌及癌旁组织中EMC6、Apaf-1和Caspase-3蛋白的表达,并收集患者的临床病理资料进行分析,Spearman检测变量间的相关性,单因素及多因素Cox分析预后影响因素。结果 EMC6、Apaf-1及Caspase-3蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率均低于癌旁组织,差异有统计学意义(P均<0.05);不同临床病理特征间EMC6蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);不同分化程度宫颈癌患者中Apaf-1蛋白阳性表达率差异有统计学意义(χ^(2)=4.723,P=0.030);不同临床分期和分化程度宫颈癌患者中Caspase-3蛋白阳性表达率差异有统计学意义(χ^(2)=4.495,P=0.034;χ^(2)=5.010,P=0.025)。EMC6与Apaf-1、Caspase-3相关性系数分别为r=0.626(P<0.001)、r=0.554(P<0.001),均呈正相关;单因素检验得出,病理类型(P=0.047)、肿瘤大小(P<0.001)、EMC6(P=0.004)、Apaf-1(P=0.029)和Caspase-3(P=0.039)是影响宫颈癌患者总体生存期的预后因素;多因素分析显示,EMC6(P=0.005)、肿瘤大小(P<0.001)是宫颈癌患者不良预后的独立影响因素。结论 宫颈癌组织中EMC6、Apaf-1和Caspase-3的低表达与患者预后不良相关,其中EMC6与Apaf-1、Caspase-3呈正相关,且EMC6和肿瘤大小是独立的预后因素,这些蛋白在宫颈癌进展中发挥重要作用,有望成为预后标志物和治疗靶点。

苦参碱对人孕烷X受体介导的CYP3A4调节及药物相互作用分析

目的:研究苦参碱(Matrine)对CYP3A4转录激活、mRNA诱导作用的影响,并对其在联合用药中药物的相互作用进行评价。方法:利用CCK-8方法检测苦参碱对人结直肠癌LS174T细胞、人肝癌Hep G2细胞增殖的影响;瞬时共转染报告基因方法检测苦参碱对人孕烷X受体(PXR)介导的CYP3A4荧光素酶活性影响;Real-time PCR检测苦参碱对人孕烷X受体、CYP3A4 mRNA诱导作用影响。结果:在一定的浓度范围内,苦参碱对Hep G2和LS174T细胞的增殖均具有抑制作用;在Hep G2细胞中,苦参碱可通过激活PXR而诱导CYP3A4转录,并通过诱导PXR mRNA表达进而上调CYP3A4 mRNA表达。在LS174T细胞中,苦参碱可通过激活PXR诱导CYP3A4转录,并通过诱导PXR mRNA表达进而上调CYP3A4 mRNA表达,且其作用呈浓度依赖性。结论:苦参碱对CYP3A4的诱导可能与人孕烷X受体通路有关,与其他药物联合使用时有可能干扰其他药物的代谢。

Survivin与Caspase-3在光动力诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡中的作用

目的:探讨Survivin与Caspase-3在血卟啉化衍生物(hematoporphyrin derivative,HPD)光动力作用(photodynamic therapy,PDT)诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡中作用。方法:应用流式细胞术检测光动力作用后细胞凋亡率。用免疫组化法检测细胞内Survivin及Caspase-3蛋白表达情况,并用RT-PCR检测其基因水平。结果:血卟啉衍生物光动力组人肝癌细胞SMMC-7721凋亡率达(33.42±5.52)%,与对照组相比,差异有显著意义(P<0.05);光动力作用后Survivin的蛋白表达及基因水平显著低于对照组(P<0.05),而Caspase-3却显著高于对照组(P<0.05)。结论:血卟啉衍生物光动力作用具有诱导人肝癌细胞SMMC7721凋亡的生物学效应,其作用机制可能与光动力作用抑制凋亡调控蛋白Survivin表达,并且直接或间接促进Caspase-3的表达,从而促进细胞凋亡。

脑缺血再灌注时半暗带calpain和caspase-3的相互作用

calpain和caspase-3都属于半胱氨酸蛋白酶家族。calpain主要参与兴奋毒性引起的神经细胞死亡，caspase-3主要参与细胞的凋亡。一些研究提示calpain和caspase-3之间存在功能上的关联。本研究探讨了大鼠大脑中动脉阻断1h后再灌注期间半暗带内calpain和caspase-3的相互作用。在缺血前15min经脑室给予calpain抑制剂1或caspase-3抑制剂z—DEVD—CHO。在再灌注3h和23h时留取半暗带组织，采用酪蛋白酶谱法、荧光法和免疫印迹法分别测定胞浆部分μ-和m—calpain的活性、caspase-3的活性以及calpastatin（内源性calpain抑制剂）、微管相关蛋白-2（MAP-2）和血影蛋白的含量。结果和结论如下：（1）在再灌注早期（3h）和晚期（23h），半暗带内μ-和m—calpain及caspase-3的活性明显升高，MAP-2和血影蛋白的含量明显降低，calpain和caspase-3抑制剂均可明显升高MAP-2血影蛋白的含量，表明局灶性脑缺血再灌注早期和晚期半暗带内calpain及caspase-3可被同时活化，继而水解细胞骨架蛋白；（2）在再灌注早期和晚期，半暗带内calpastatin的蛋白含量明显升高，提示局灶性脑缺血再灌注可诱导calpastatin蛋白的表达；

葡萄籽原花青素调控NLRP3/Caspase-1通路介导的焦亡途径对糖尿病视网膜病变大鼠的保护作用

目的探讨葡萄籽原花青素调控NLRP3/Caspase-1通路介导的焦亡途径对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠的保护作用。方法建立DR大鼠模型,随机分为模型组、葡萄籽原花青素组、VX-765组、葡萄籽原花青素+VX-765组(每组各12只),另取12只大鼠为对照组,药物干预14 d,HE染色观察各组大鼠视网膜组织病理学变化;TUNEL染色检测各组大鼠视网膜神经节细胞(RGC)焦亡情况;采用试剂盒测定各组大鼠视网膜组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)及血清中炎症因子糖基化终末产物(AGEs)、白细胞介素(IL)-1β与IL-18水平;Western blot检测各组大鼠视网膜组织NLRP3/Caspase-1通路蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组大鼠视网膜组织明显变薄,结构疏松,细胞结构层次紊乱、排列不规则,RGC变少、稀疏,呈现严重病理损伤变化,RGC焦亡率,ROS与MDA水平,AGEs、IL-1β、IL-18水平,NLRP3与Caspase-1蛋白表达水平均显著升高(均为P<0.05),SOD与CAT水平均显著降低(均为P<0.05)。与模型组相比,葡萄籽原花青素组、VX-765组大鼠视网膜组织形态结构得到恢复,病理损伤均有不同程度减轻,RGC焦亡率,ROS与MDA水平,AGEs、IL-1β与IL-18水平,NLRP3与Caspase-1蛋白表达水平均降低(均为P<0.05),SOD与CAT水平均升高(均为P<0.05)。与葡萄籽原花青素组及VX-765组分别相比,葡萄籽原花青素+VX-765组大鼠视网膜组织病理损伤进一步减轻,形态结构几乎恢复正常,RGC焦亡率,ROS与MDA水平,AGEs、IL-1β与IL-18水平,NLRP3与Caspase-1蛋白表达水平均降低(均为P<0.05),SOD与CAT水平均升高(均为P<0.05)。结论葡萄籽原花青素可以抑制炎症发生发展,增强DR大鼠抗氧化活性,减轻过氧化反应,缓解视网膜组织病理学损伤,减少RGC焦亡,可能是通过抑制NLRP3/Caspase-1信号通路实现的。

伊曲康唑与细胞色素P4503A(CYP3A)底物和调节CYP3A活性的药物临床相互作用研究

目的:分析伊曲康唑与其他三种与CYP3A4相互作用的药物之间的药物相互作用,以进一步丰富伊曲康唑的药物相互作用谱,为临床安全使用伊曲康唑提供数据基础。方法:40名健康受试者随机分为单独伊曲康唑给药组、伊曲康唑与左炔诺孕酮炔雌醇给药组、伊曲康唑与利福平给药组和伊曲康唑与利福布汀给药组进行PK分析和安全性分析。结果:与单独使用每种药物相比,伊曲康唑与伊曲康唑的共同给药改变了浓度-时间曲线下面积(AUC∞)和最大浓度(C max),如下所示:左炔诺孕酮炔雌醇不影响伊曲康唑的PK参数;利福平联用伊曲康唑相比伊曲康唑单用,暴露量下降约16%,终末半衰期消除下降约27%;利福布汀轻微影响伊曲康唑的PK参数。本研究中,没有死亡,常见不良事件为头痛,且导致研究中止的不良事件很少见。结论:伊曲康唑可以与左炔诺孕酮炔雌醇共同给药,不推荐伊曲康唑与强CYP3A诱导剂(如利福平)共同给药,也不推荐伊曲康唑与弱CYP3A诱导剂利福布汀同时给药。

CYP3A4酶相关的临床药物相互作用

目的为CYP3A4酶的强抑制剂、强诱导剂的合理使用提供参考。方法查阅国内外相关文献,对CYP3A4酶强抑制剂、强诱导剂相关的临床药物相互作用研究及案例进行归纳和总结。结果 CYP3A4酶强抑制剂克拉霉素、蛋白酶抑制剂、三唑类抗真菌药等的临床药物相互作用报道较多,特别是与钙通道阻滞剂、他汀类药物、激素类药物、他克莫司等;强诱导剂利福平、卡马西平、苯妥英等的临床药物相互作用也有报道,如与口服避孕药、他克莫司、替格瑞洛等。结论临床应用CYP3 A4酶强抑制剂、强诱导剂时需注意其对CYP3A4底物的影响,及时调整用药方案。

基于NLRP3/caspase-1通路研究丹参提取物对系膜增生性肾小球肾炎大鼠的保护作用

目的基于NLRP3/caspase-1通路探讨丹参提取物对系膜增生性肾小球肾炎(mesangial proliferative glomerulonephritis,MsPGN)大鼠的保护作用。方法取48只大鼠建立MsPGN模型,随机分为4组:(1)模型组:不给予药物治疗;(2)丹参提取物组:每日给予丹参提取物(10 mL/kg)灌胃;(3)VX-765组:每日给予VX-765(NLRP3炎性小体抑制剂,50 mg/kg)腹腔注射;(4)丹参提取物+VX-765组:每日给予丹参提取物(10 mL/kg)灌胃,并给予VX-765(50 mg/kg)腹腔注射。另取12只大鼠设为假手术组。各组均持续给药28 d。末次给药结束24 h后,收集各组大鼠24 h尿液,检测24 h尿蛋白含量;检测各组大鼠血清中BUN、Scr、IL-1β、IL-18水平;观察各组大鼠肾组织病理变化,并根据肾小球系膜细胞增殖程度、肾小管-间质病变程度进行病理评分;采用实时荧光定量PCR及免疫印迹法检测各组大鼠肾组织中NLRP3、caspase-1的mRNA和蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠出现肾小球体积变大、内部细胞数量增多,系膜细胞弥漫性增生、细胞基质增多,肾间质有炎性细胞浸润等肾组织病理损伤症状,肾小球系膜细胞增殖程度评分、肾小管-间质病理评分、24 h尿蛋白含量、血清BUN、Scr、IL-1β、IL-18、肾组织NLRP3及caspase-1表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,丹参提取物组、VX-765组、丹参提取物+VX-765组大鼠上述病理损伤症状减轻,肾小球系膜细胞增殖程度评分、肾小管-间质病理评分、24 h尿蛋白含量、血清BUN、Scr、IL-1β、IL-18、肾组织NLRP3及caspase-1表达均显著降低(P<0.05);与丹参提取物组及VX-765组分别比较,丹参提取物+VX-765组大鼠上述病理损伤症状进一步减轻,肾小球系膜细胞增殖程度评分、肾小管-间质病理评分、24 h尿蛋白含量、血清BUN、Scr、IL-1β、IL-18、肾组织NLRP3及caspase-1表达均显著降低(P<0.05)。结论丹参提取物可以减轻MsPGN大鼠炎症反应及系膜增生性病变,保护大鼠肾组织,修复大鼠肾功能,可能通过下调NLRP3/caspase-1通路实现。

混合谱系激酶结构域样蛋白、caspase-8及受体相互作用蛋白激酶3 mRNA在不同阶段乙型肝炎病毒感染患者中的表达及诊断价值

目的探讨混合谱系激酶结构域样蛋白(MLKL)、caspase-8及受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)mRNA在不同阶段乙型肝炎病毒(HBV)感染患者中的表达水平及诊断价值。方法选择2016年11月至2019年11月新乡市传染病医院收治的175例HBV感染患者为研究对象,根据病情程度将患者分为慢性乙型肝炎(CHB)组(n=67)、肝硬化(LC)组(n=61)和肝细胞肝癌(HCC)组(n=47);另选择同期于本院体检的80例体检健康者为对照组。采集各组受试者外周静脉血,应用实时荧光定量聚合酶链反应法检测外周血单个核细胞(PBMC)中MLKL、caspase-8及RIPK3 mRNA表达水平;采用Pearson相关检验分析HBV感染不同阶段患者PBMC中MLKL、caspase-8及RIPK3 mRNA表达水平的相关性,受试者操作特征曲线下面积(AUC)评估MLKL、caspase-8及RIPK3 mRNA表达水平对不同阶段HBV感染患者的鉴别诊断价值。结果4组受试者PBMC中MLKL、RIPK3、caspase-8 mRNA表达水平比较差异有统计学意义(F=1019.364、1009.381、159.407,P<0.05)。CHB组、LC组、HCC组患者PBMC中MLKL、RIPK3 mRNA表达水平显著高于对照组,caspase-8 mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05)。LC组、HCC组患者PBMC中MLKL、RIPK3 mRNA表达水平显著高于CHB组,caspase-8 mRNA表达水平显著低于CHB组(P<0.05)。HCC组患者PBMC中MLKL、RIPK3 mRNA表达水平显著高于LC组,caspase-8 mRNA表达水平显著低于LC组(P<0.05)。Pearson相关检验结果显示,不同阶段HBV感染组患者PBMC中MLKL mRNA表达与RIPK3 mRNA表达呈正相关(r=0.414、0.432、0.449,P<0.01),MLKL mRNA表达与caspase-8 mRNA表达呈负相关(r=-0.556、-0.378、-0.721,P<0.01),RIPK3 mRNA表达与caspase-8 mRNA表达呈负相关(r=-0.415、-0.400、-0.416,P<0.01)。PBMC中MLKL、caspase-8及RIPK3 mRNA表达水平鉴别CHB和HCC的AUC分别为0.918、0.859和0.912,三者联合鉴别CHB和HCC的AUC为0.945。PBMC中MLKL、caspase-8及RIPK3 mRNA表达水平鉴别LC和HCC的AUC分别为0.768、0.834和0.839,三者联合鉴别LC和HCC的AUC为0.895。结论HBV感染不同阶段患者PBMC中MLKL、caspase-8及RIPK3 mRNA表达水平显著上升,且三者之间存在显著相关性,MLKL、caspase-8及RIPK3 mRNA表达水平可作为鉴别诊断不同阶段HBV感染患者的生物学标志物。

金匮肾气丸对药物性聋豚鼠耳蜗凋亡蛋白caspase-3的影响

目的:观察补肾方金匮肾气丸对庆大霉素(GM)中毒性聋豚鼠耳蜗凋亡蛋白caspase-3的影响。方法:将30只健康级白色红目豚鼠,雌雄各半,随机分为3组。正常对照组(n=10):普通饲料喂养;模型组(n=10):每日肌肉注射庆大霉素120mg/kg,连续10天造成耳聋模型;中药干预组(n=10):在模型组的基础上,以药量为20.3g/kg·天的金匮肾气丸制剂灌胃,连续10天。免疫组化法检测各组耳蜗毛细胞平均光密度值并比较。结果:模型组和中药干预组豚鼠耳蜗毛细胞平均光密度较正常组有明显差异(P<0.01),中药干预组和模型组比较也有明显差异(P<0.01)。结论:金匮肾气丸可通过抑制caspase-3的表达,而减轻GM的耳毒性反应,起到保护听功能的作用。