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类风湿性关节炎患者caspase-7β亚型基因的多态性分析 被引量:1
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作者 江雨霏 沈波 +2 位作者 金翔 陈佳喜 朱敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2368-2371,共4页
目的:探讨中国台州地区caspase-7β亚型基因rs2227309多态性与类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis,RA)易感性的关系。方法:对204位类风湿性关节炎患者与203位健康体检者进行研究,采用荧光定量单核苷酸多态性(single nucleotide polymor... 目的:探讨中国台州地区caspase-7β亚型基因rs2227309多态性与类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis,RA)易感性的关系。方法:对204位类风湿性关节炎患者与203位健康体检者进行研究,采用荧光定量单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)分析的方法对caspase-7β亚型基因rs2227309多态性进行检测。结果:RA患病组中GG、AG、AA基因型频率分别为33.3%、53.4%、13.2%,健康对照组中GG、AG、AA基因型频率分别为33.0%、44.3%、22.7%。RA患者组与健康对照组相比,caspase-7β亚型基因rs2223709基因型分布的差异显著(P<0.05)。RA患病组GG+AG基因型频率高于健康对照组,差异显著(P<0.05,OR=1.921,95%CI为1.140~3.236)。RA患者组与健康对照组中G等位基因频率分别为60.0%与55.2%。RA患者组与健康对照组相比,等位基因分布的差异不显著(P>0.05,OR=1.221,95%CI为0.924~1.613)。结论:Caspase-7β亚型基因rs2227309可能与中国台州地区人群类风湿性关节炎易感性有关,这种关系可能是由于caspase-7非功能亚型转录水平相对升高致使滑膜细胞凋亡活性减弱所致。 展开更多
关键词 caspase-7β亚型 基因多态性 关节炎 类风湿性
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H7亚型禽流感病毒荧光微球抗体检测方法的建立
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作者 朱向东 李文钢 +3 位作者 尹春博 王犇 王健春 赵静 《中国动物检疫》 CAS 2024年第10期85-90,共6页
为建立一种简便、快速、特异的H7亚型禽流感病毒抗体检测方法,将荧光微球偶联标记鼠抗鸡IgG,并将羊抗鼠IgG和重组H7亚型禽流感病毒HA蛋白分别作为质控线(C线)和检测线(T线),喷涂于硝酸纤维素膜上。采用单一变量分析法对反应体系进行了优... 为建立一种简便、快速、特异的H7亚型禽流感病毒抗体检测方法,将荧光微球偶联标记鼠抗鸡IgG,并将羊抗鼠IgG和重组H7亚型禽流感病毒HA蛋白分别作为质控线(C线)和检测线(T线),喷涂于硝酸纤维素膜上。采用单一变量分析法对反应体系进行了优化,随后对该方法的敏感性、特异性、重复性及符合率进行了评估。结果显示:本研究建立的H7亚型禽流感病毒荧光微球抗体检测方法比参照国标建立的血凝抑制试验灵敏度高2倍;特异性较好,对H5亚型禽流感病毒、H9亚型禽流感病毒、鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性法氏囊病病毒和鸡减蛋综合征病毒等常见禽病病原阳性血清的检测结果均为阴性;重复性试验结果的变异系数为3.13%~8.46%,具有较好的重复性;本研究方法和血凝抑制试验血清抗体检测结果的总体符合率为95.67%,两种方法具有较高的一致性。结果表明,本研究建立的H7亚型禽流感病毒荧光微球抗体检测方法性能稳定、结果可靠,为H7亚型禽流感快速检测提供了新方法。 展开更多
关键词 H7亚型禽流感病毒 荧光微球 抗体检测
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表达H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒构建及其免疫效果评估
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作者 万志敏 李亚锋 +9 位作者 孙建文 姜文杰 赵喆泓 汤婷 谢泉 李拓凡 邵红霞 秦爱建 钱琨 叶建强 《中国家禽》 北大核心 2024年第11期25-33,共9页
为构建H7N9亚型禽流感病毒和血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的二联疫苗候选株,试验通过CRISPR/Cas9和Cre-Loxp系统,以课题组前期构建的表达EGFP蛋白的重组病毒FAdV4-EGFP为载体,构建能够稳定表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素(HA)蛋白的重组血清4... 为构建H7N9亚型禽流感病毒和血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的二联疫苗候选株,试验通过CRISPR/Cas9和Cre-Loxp系统,以课题组前期构建的表达EGFP蛋白的重组病毒FAdV4-EGFP为载体,构建能够稳定表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素(HA)蛋白的重组血清4型腺病毒;并通过PCR、间接免疫荧光试验(IFA)、Westernblot试验以及SPF鸡保护性试验等方法,探究此重组病毒体外生物学特性并评估其为鸡提供的保护力。结果显示:研究成功构建能稳定表达H7N9禽流感亚型病毒HA蛋白的重组血清4型腺病毒,命名为FAdV4-H7;FAdV4-H7能在LMH细胞高效复制,并能在LMH细胞传代15次后仍能稳定表达HA蛋白;FAdV4-H7不仅高度致弱,而且能诱导机体产生高滴度针对H7N9亚型禽流感病毒HI抗体和FAdV-4的中和抗体,能为SPF鸡提供足够保护来抵抗致死性FAdV-4感染。研究表明,试验成功构建了重组病毒FAdV4-H7,为H7N9亚型禽流感病毒和FAdV-4的联防联控提供了二联苗候选疫苗株。 展开更多
关键词 H7N9亚型禽流感病毒 HA蛋白 重组血清4型腺病毒 CRISPR/Cas9 疫苗
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2株2023年禽源H7N9亚型禽流感病毒的分离鉴定及遗传进化分析
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作者 赵学楠 熊俊龙 +3 位作者 周江涛 崔芸绮 张家豪 亓文宝 《中国家禽》 北大核心 2024年第11期95-105,共11页
为了解H7N9亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的遗传进化特点,探究我国H7N9亚型AIV的流行特征,试验对2023年采集自四川、河北两地活禽市场禽类咽拭子及泄殖腔拭子进行病原分离鉴定,并对分离株进行全基因组序列测定,进一步构建... 为了解H7N9亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的遗传进化特点,探究我国H7N9亚型AIV的流行特征,试验对2023年采集自四川、河北两地活禽市场禽类咽拭子及泄殖腔拭子进行病原分离鉴定,并对分离株进行全基因组序列测定,进一步构建进化树并分析其遗传演化情况和分子特征。结果显示:共分离2株H7N9亚型AIV,其遗传距离较近,HA基因均属于YRD-B分支;2株AIV的HA蛋白裂解位点均含有连续碱性氨基酸,具有高致病性的分子特征;PB2、HA和NA蛋白均具有哺乳动物适应性突变,其中HA蛋白第226位受体结合位点均由谷氨酰胺(Q)突变为亮氨酸(L),使其能够识别人流感病毒唾液酸受体,并且HA蛋白A27S、I96V、V143T、A169T、I187V和D457N抗原位点发生突变;2株AIV虽均能与Re-4和H7N9rHN7903灭活疫苗免疫血清产生交叉血凝抑制反应,但HI抗体效价较低。研究表明,从活禽市场分离到2株H7N9亚型AIV,其对家禽具有高致病性,且抗原性发生变化。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H7N9亚型 遗传进化 活禽市场
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同时鉴别诊断H7亚型和5种NA亚型禽流感病毒GeXP检测方法的建立
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作者 罗思思 谢芝勋 +8 位作者 李孟 李丹 谢丽基 王盛 张民秀 黄娇玲 谢志勤 曾婷婷 张艳芳 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期670-677,共8页
目的旨在建立同时鉴别诊断H7亚型及其5种NA亚型(N2、N3、N4、N7和N9)AIV的检测方法。方法针对H7亚型HA基因、5种NA亚型NA基因和所有亚型AIV M基因的保守序列,分别设计了6对亚型特异性引物和1对AIV亚型通用检测引物,利用GeXP多基因表达... 目的旨在建立同时鉴别诊断H7亚型及其5种NA亚型(N2、N3、N4、N7和N9)AIV的检测方法。方法针对H7亚型HA基因、5种NA亚型NA基因和所有亚型AIV M基因的保守序列,分别设计了6对亚型特异性引物和1对AIV亚型通用检测引物,利用GeXP多基因表达和毛细管电泳分析技术,建立同时检测H7亚型和5种NA亚型AIV的GeXP高通量分型鉴别诊断方法,对其进行特异性、敏感性和临床样品检测。结果特异性结果显示该法单管可同时检测H7、N2、N3、N4、N7和N9亚型AIV,均能检出对应的亚型AIV,通用检测引物检出所有亚型AIV,与其它常见禽病病原体不存在交叉反应。敏感性结果显示该法对7种AIV目的基因(含H7、N2、N3、N4、N7、N9基因)浓度均为100拷贝/μL时,仍可同时检测出。该法对150份临床样品的检测结果与病毒分离鉴定一致。结论本研究建立的同时鉴别诊断H7亚型和5种亚型AIV GeXP高通量检测方法具有特异性强、敏感性高、快速和简便等优点,为防控AIV提供新型检测方法。 展开更多
关键词 H7亚型 NA亚型 禽流感病毒 GeXP 高通量
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H5、H7亚型二价灭活疫苗悬浮培养工艺及免疫效果研究
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作者 刘哲 《中文科技期刊数据库(全文版)自然科学》 2024年第1期0071-0074,共4页
为获得高质量禽流感灭活疫苗候选株,研究其遗传稳定性与免疫原性。将利用反向遗传技术构建的H5N2亚型(rD8株)和H7N9亚型(rGD76株)AIV分别在MDCK悬浮细胞上传代培养,检测各代病毒液的血凝效价,并制备二价油乳剂灭活疫苗免疫4周龄SPF鸡。... 为获得高质量禽流感灭活疫苗候选株,研究其遗传稳定性与免疫原性。将利用反向遗传技术构建的H5N2亚型(rD8株)和H7N9亚型(rGD76株)AIV分别在MDCK悬浮细胞上传代培养,检测各代病毒液的血凝效价,并制备二价油乳剂灭活疫苗免疫4周龄SPF鸡。免疫后21d检测两种亚型抗体的HI效价,分别用H5N1亚型和H7N9亚型效检毒株对免疫鸡群进行攻毒保护实验。两株病毒传代后其血凝效价rD8株可达8log2,rGD76株可达9log2,与亲本毒株基本一致。对传代后的第1、5、15代病毒液进行HA、NA基因测序分析,各代次序列同源性较高,关键位点氨基酸序列未发生变异,与亲本毒株保持一致。实验鸡免疫后21d,血清中H5亚型HI抗体几何平均值为8.0log2,H7亚型HI抗体几何平均值为 8.4log2,攻毒后5d各组试验鸡均未检测到有排毒现象。两株病毒经传代后逐渐适应了悬浮培养的MDCK细胞,血凝效价稳定,且均具有较好的免疫原性,可作为禽流感疫苗种毒。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H5亚型 H7亚型 悬浮培养 二价灭活疫苗
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H7亚型禽流感病毒微滴式数字PCR检测方法的建立及应用 被引量:5
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作者 蒋文明 李金平 +6 位作者 尹馨 彭程 刘朔 李阳 于晓慧 王静静 刘华雷 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第2期39-43,共5页
为了建立灵敏、特异的H7亚型禽流感病毒(AIV)微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法,本研究根据GenBank和GISAID中H7亚型AIV血凝素(HA)基因的核苷酸序列,设计合成H7亚型AIV的引物和探针,对反应条件进行优化,从而建立检测H7亚型AIV的ddPCR方法,... 为了建立灵敏、特异的H7亚型禽流感病毒(AIV)微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法,本研究根据GenBank和GISAID中H7亚型AIV血凝素(HA)基因的核苷酸序列,设计合成H7亚型AIV的引物和探针,对反应条件进行优化,从而建立检测H7亚型AIV的ddPCR方法,并测定其特异性、敏感性和重复性。结果显示,最佳引物浓度和探针浓度分别为900 nmol/L和250 nmol/L,最佳退火温度为55℃,最佳升降温速率为2.0℃/s,最佳反转录时间为20 min。特异性试验结果显示,该方法仅对H7亚型AIV进行特异性检测,对H5亚型AIV、H9亚型AIV、新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、传染性法氏囊病毒均不能检出。敏感性试验结果显示,该方法对重组质粒标准品检测下限为0.8 copies/μL,比荧光定量PCR(qPCR)方法敏感性高10倍。组内和组间重复性试验结果显示,变异系数均小于3%。对60份临床样品检测显示,该方法与鸡胚分离方法的符合率为100%。结果表明,本研究建立的H7亚型AIV ddPCR检测方法具有较好的特异性、重复性和敏感性,可用于H7亚型AIV的早期诊断、流行病学调查、诊断方法评估、标准物质研制、免疫效果评估,为H7亚型AIV的科学防控和研究提供了有力的技术储备。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H7亚型 数字PCR
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2022年湖南省家禽H7N9亚型禽流感监测与分析
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作者 黄建龙 郭永祥 +2 位作者 张朝阳 范仲鑫 鲁杏华 《中国动物检疫》 CAS 2023年第11期21-24,共4页
为了解湖南省家禽(鸡、鸭、鹅)H7N9亚型禽流感的免疫抗体水平及其流行情况,2022年在全省14个市州,采用配额抽样方法,在种禽场、商品代场、散养户和活禽市场共采集46112份禽血清和53246份禽拭子样品,通过血凝抑制试验、荧光定量PCR方法... 为了解湖南省家禽(鸡、鸭、鹅)H7N9亚型禽流感的免疫抗体水平及其流行情况,2022年在全省14个市州,采用配额抽样方法,在种禽场、商品代场、散养户和活禽市场共采集46112份禽血清和53246份禽拭子样品,通过血凝抑制试验、荧光定量PCR方法分别进行免疫抗体和病毒核酸检测。结果显示:H7N9亚型禽流感免疫抗体平均场群合格率为93.27%,平均个体合格率为90.60%,仅在活禽市场的1份鸡拭子样品中检测到病毒核酸阳性;鸡H7N9亚型禽流感免疫抗体平均场群合格率和个体合格率(94.66%和91.51%)均高于水禽(83.26%和81.86%);种禽场的免疫抗体平均场群合格率和个体合格率最高,活禽市场最低,两者差异具有统计学意义(P<0.05);全省14个市州的H7N9亚型禽流感免疫抗体平均场群合格率和个体合格率均在70%以上。结果表明:2022年湖南省家禽H7N9亚型禽流感免疫效果较好,在饲养场禽群中也未检出病原,发生大规模疫情的风险较低,但在活禽市场中仍检出病原,且水禽以及散养户和活禽市场禽群的免疫抗体水平略低,疫情散发风险依然存在。建议进一步加强对H7N9亚型禽流感的免疫监测以及动物检疫监管工作,不断提升公共卫生安全防护水平。 展开更多
关键词 H7N9亚型禽流感 家禽 监测 湖南省
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miR-216a对重症急性胰腺炎腺泡损伤及P2X7-NLRP3/caspase-1 通路的影响
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作者 薛冰 赵春艳 +1 位作者 郭中霞 王志兵 《肝胆外科杂志》 2023年第1期57-61,共5页
目的探索miR-216a对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)腺泡细胞损伤及P2X7-NLRP3/caspase-1通路的影响.方法将大鼠胰腺腺泡细胞AR42J分为Con组、SAP组、anti-miR-NC组、anti-miR-216a组、Sch+miR-NC组、Sch+miR-216a组.Co... 目的探索miR-216a对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)腺泡细胞损伤及P2X7-NLRP3/caspase-1通路的影响.方法将大鼠胰腺腺泡细胞AR42J分为Con组、SAP组、anti-miR-NC组、anti-miR-216a组、Sch+miR-NC组、Sch+miR-216a组.Con组不做任何处理,其余各组采用雨蛙肽(10 nmol/L)联合脂多糖(lipo poly saccharide,LPS)(10 mg/L)处理大鼠胰腺腺泡细胞株AR42J构建SAP细胞模型,anti-miR-NC组、anti-miR-216a组、Sch+miR-NC组、Sch+miR-216a组分别转染anti-miR-NC、anti-miR-216a、miR-NC、miR-216a mimics.酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)浓度;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测各组细胞中miR-216a及P2X7、NLRP3、caspase-1 mRNA相对表达量;Western blot法检测各组细胞中P2X7、NLRP3、Caspase-1、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cellymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved cysteinyl aspartate specific protease-3,Cleaved caspase-3)蛋白表达情况.结果各组细胞中IL-6、TNF-α含量比较,Con组<anti-miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<Sch+miR-216a组,差异有统计学意义(P<0.05).各组细胞凋亡率和Bax蛋白、Cleaved caspase-3蛋白相对表达量比较,Con组<Sch+miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<anti-miR-216a组,差异有统计学意义(P<0.05);各组细胞Bcl-2蛋白相对表达量比较,anti-miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<Sch+miR-216a组<Con组,差异有统计学意义(P<0.05).各组细胞中miR-216a和P2X7、NLRP3、Caspase-1 mRNA及其蛋白相对表达量比较,Con组<anti-miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<Sch+miR-216a组,差异有统计学意义(P<0.05).结论miR-216a可通过抑制P2X7-NLRP3/caspase-1信号通路减轻SAP腺泡细胞炎症,并诱导细胞凋亡,从而减轻SAP腺泡损伤. 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎(SAP) 腺泡细胞损伤 miR-216a P2X7-NLRP3/caspase-1通路
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基于血凝素蛋白特异性抗体的H7亚型流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法建立 被引量:1
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作者 王泽敏 祁贤 +2 位作者 鲍倡俊 焦永军 卫平民 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期455-460,共6页
目的基于H7亚型流感病毒,制备针对于HA抗原的单克隆抗体,并建立双抗体夹心ELISA检测体系,为其在流感病毒快速检测试剂研发中提供技术储备。方法用H7亚型禽流感病毒HA重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤技术制备HA特异性单克隆抗体,... 目的基于H7亚型流感病毒,制备针对于HA抗原的单克隆抗体,并建立双抗体夹心ELISA检测体系,为其在流感病毒快速检测试剂研发中提供技术储备。方法用H7亚型禽流感病毒HA重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤技术制备HA特异性单克隆抗体,筛选可在双抗体夹心ELISA技术平台上使用的配对抗体,初步探索该ELISA体系的检测特异性、敏感性和广谱性。结果共制备出6株HA特异性单克隆抗体,并成功筛选出捕获抗体8B11-C9及检测抗体7C3-G5的最佳配对。该双抗体夹心体系对HA重组蛋白的检测灵敏度可达到1.56 ng/mL,能有效检测出不同宿主来源的H7亚型流感病毒,与其他亚型流感病毒无交叉。结论成功制备出H7亚型流感病毒HA单克隆抗体,建立了H7亚型流感病毒特异性的双抗体夹心ELISA检测方法,为其快速检测试剂研发奠定了基础。 展开更多
关键词 H7亚型流感病毒 单克隆抗体 HA蛋白 双抗体夹心ELISA
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稳定表达H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白的293T细胞株构建及应用 被引量:2
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作者 曹永忠 邓婧 +2 位作者 黄雅 薄宗义 胡增垒 《中国家禽》 北大核心 2023年第10期59-64,共6页
为获得用于评价H7N9亚型禽流感疫苗诱导的抗体Fc免疫效应的靶细胞,研究采用慢病毒包装与感染技术构建一株稳定表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)HA蛋白的细胞株,并以该细胞株为靶细胞建立H7N9亚型禽流感疫苗免疫血清补体介导的细胞毒(AD... 为获得用于评价H7N9亚型禽流感疫苗诱导的抗体Fc免疫效应的靶细胞,研究采用慢病毒包装与感染技术构建一株稳定表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)HA蛋白的细胞株,并以该细胞株为靶细胞建立H7N9亚型禽流感疫苗免疫血清补体介导的细胞毒(ADCML)活性的检测方法。结果显示成功包装了一株重组慢病毒,滴度可达108 FU/mL;构建了稳定表达H7N9 AIV HA蛋白的293T细胞株,HA蛋白主要在细胞膜上表达。基于新城疫病毒(NDV)载体的H7N9亚型禽流感疫苗免疫鸡后,诱导产生的HA结合性IgG抗体滴度为2180。以稳定细胞株为靶细胞,载体疫苗血清诱导的细胞死亡水平显著高于空载体与未免疫鸡血清(P<0.001);补体灭活后,载体疫苗血清诱导的细胞死亡水平显著降低(P<0.001)。研究表明,基于NDV载体的H7N9亚型禽流感疫苗免疫鸡血清具有较强的ADCML活性,稳定表达H7N9 AIV HA蛋白的细胞株可作为评价H7N9亚型禽流感疫苗免疫血清Fc免疫效应的靶细胞。 展开更多
关键词 H7N9亚型禽流感 HA蛋白 稳定细胞株 疫苗 Fc免疫效应 补体 抗体保护
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禽流感病毒H7和N2亚型nano-dPCR检测方法的建立和应用 被引量:1
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作者 李丹 谢芝勋 +7 位作者 李孟 罗思思 张民秀 谢丽基 华俊 粟永春 翟国胜 黄娇玲 《山西农业科学》 2023年第6期709-715,共7页
为建立一种同时检测H7亚型和N2亚型禽流感病毒(AIV)的双重纳米PCR(nano-dPCR)方法,从GenBank中分别下载H7亚型AIV的HA基因序列和N2亚型AIV的NA基因序列,采用Primer 7.0和Oligo 6.0软件设计了2对特异性引物,通过对nano-dPCR反应条件进行... 为建立一种同时检测H7亚型和N2亚型禽流感病毒(AIV)的双重纳米PCR(nano-dPCR)方法,从GenBank中分别下载H7亚型AIV的HA基因序列和N2亚型AIV的NA基因序列,采用Primer 7.0和Oligo 6.0软件设计了2对特异性引物,通过对nano-dPCR反应条件进行优化确定最佳反应体系;利用优化好的反应体系开展nano-dPCR方法的特异性和敏感性试验;采集活禽市场家禽咽喉及泄殖腔拭子样品进行临床样品检测并进行验证。结果表明,成功建立了一种同时检测H7亚型(723 bp)和N2亚型(314 bp)AIV的nano-dPCR方法,该方法特异性良好,其他亚型禽流感病毒及常见禽类呼吸道病毒均未出现特异性的条带,H7亚型AIV和N2亚型AIV的最低核酸检测量分别达到了5×103、5×103拷贝/μL,其敏感性是普通双重PCR检测方法的10倍,其对临床样品检测结果准确率达到100%,可以用于禽流感临床样品鉴别诊断和日常防控监测。 展开更多
关键词 禽流感病毒 双重纳米PCR H7亚型 N2亚型
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2019~2021年花溪区H5、H7亚型禽流感免疫抗体监测情况及分析 被引量:1
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作者 浦同灿 李世静 +1 位作者 周莉 罗时霞 《家禽科学》 2023年第7期37-42,I0005,共7页
为了解2019~2021年花溪区的禽流感免疫效果,对其管辖的部分涉农乡镇(街道)随机采集120~400日龄的鸡群血清样品4 391份,采用血凝抑制试验对禽流感H5和H7亚型进行免疫抗体检测,根据高致病性禽流感诊断技术中抗体效价标准进行判定,HI抗体... 为了解2019~2021年花溪区的禽流感免疫效果,对其管辖的部分涉农乡镇(街道)随机采集120~400日龄的鸡群血清样品4 391份,采用血凝抑制试验对禽流感H5和H7亚型进行免疫抗体检测,根据高致病性禽流感诊断技术中抗体效价标准进行判定,HI抗体效价≥4log2,判定个体免疫效力合格;群体免疫抗体合格率≥70%,判为群体抗体合格率达标。检测结果显示,花溪区(H5+H7亚型)禽流感免疫抗体合格率2019、2020、2021年依次为91.03%、91.78%、96.19%,呈现逐年上升趋势;H7亚型抗体合格率高于H5亚型,规模化鸡场抗体合格率高于大户和散养户。综上所述,禽流感免疫抗体合格率均高出国家标准,说明全区免疫工作较扎实有效;监测禽流感免疫抗体为花溪区科学预防H5、H7亚型禽流感的流行提供数据支撑,推动花溪区的家禽业健康持续发展。 展开更多
关键词 H5、H7亚型禽流感 血凝抑制试验 抗体合格率 评估
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贵州省正安县不同养殖模式下鸡H5、H7和H9亚型禽流感血清学调查
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作者 何娅 钱林 +7 位作者 邓位喜 王娜 周林 杨玉能 鲍娟 孙宝盛 代佳娣 经有林 《中南农业科技》 2023年第7期247-249,共3页
为了监测并评价贵州省正安县各养殖模式禽流感的免疫效果,采用血凝试验与血凝抑制试验检测血清中H5、H7、H9亚型禽流感病毒(AIV)的抗体情况,2020—2022年累计采集贵州省正安县鸡血样660份,为做好禽流感监测预警与防控工作奠定基础。结... 为了监测并评价贵州省正安县各养殖模式禽流感的免疫效果,采用血凝试验与血凝抑制试验检测血清中H5、H7、H9亚型禽流感病毒(AIV)的抗体情况,2020—2022年累计采集贵州省正安县鸡血样660份,为做好禽流感监测预警与防控工作奠定基础。结果表明,2020—2022年,鸡H5抗体阳性率分别为81.00%、79.20%、76.30%,H7抗体阳性率分别为74.00%、77.90%、82.00%,H9抗体阳性率分别为78.64%、70.00%、84.00%。禽流感H5、H7、H9免疫抗体合格率均达到国家标准。 展开更多
关键词 禽流感 免疫抗体监测 H5、H7、H9亚型 血清学调查 贵州省正安县
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新型水禽用三价禽流感病毒载体疫苗可有效阻断H5和H7亚型禽流感病毒感染与传播
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作者 ZHAO YU-BO CHEN PU-CHENG HU YU-ZHEN 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1093-1093,共1页
2020年以来,H5亚型高致病性禽流感病毒先后在欧洲出现,并在欧洲引发大规模疫情,随后通过野鸟迁徙传入非洲、亚洲及北美多个国家,引起更大规模的疫情暴发。据世界动物卫生组织(WOAH)统计,新型H5N8和H5N1病毒在全球已累计导致约3亿多只家... 2020年以来,H5亚型高致病性禽流感病毒先后在欧洲出现,并在欧洲引发大规模疫情,随后通过野鸟迁徙传入非洲、亚洲及北美多个国家,引起更大规模的疫情暴发。据世界动物卫生组织(WOAH)统计,新型H5N8和H5N1病毒在全球已累计导致约3亿多只家禽死亡或被扑杀,给养禽业造成了巨大损失。此次禽流感疫情导致大量家禽死亡或被扑杀,部分国家出现了“鸡蛋荒”。 展开更多
关键词 世界动物卫生组织 高致病性禽流感病毒 禽流感 养禽业 H7亚型禽流感病毒 H5亚型 病毒载体疫苗 扑杀
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H7亚型禽流感病毒HA蛋白在Sf9中的表达与纯化
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作者 刘郁夫 郝文茜 +2 位作者 冯美莹 欧阳征亮 陈瑞爱 《广东农业科学》 CAS 2023年第10期149-156,共8页
【目的】真核表达H7亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)HA蛋白,为进一步制备H7亚型HIV亚单位疫苗,评价其免疫原性提供基础。【方法】首先根据草地贪夜蛾卵巢细胞(Spodoptera frugiperda clone 9,Sf9)的密码子偏嗜性,优化并合成H... 【目的】真核表达H7亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)HA蛋白,为进一步制备H7亚型HIV亚单位疫苗,评价其免疫原性提供基础。【方法】首先根据草地贪夜蛾卵巢细胞(Spodoptera frugiperda clone 9,Sf9)的密码子偏嗜性,优化并合成H7亚型AIV的HA序列,将其克隆至穿梭质粒pFastBac1中;接着将重组HA基因的杆状病毒质粒转染至Sf9中,通过间接免疫荧光和Westernblots试验鉴定重组病毒是否拯救成功;再通过SYBRgreen染料法荧光定量PCR试验,建立基于gp64基因的杆状病毒qPCR定量方法,筛选出在Sf9中表达HA重组蛋白的最佳感染复数和孵育时间;最后通过His镍株亲和纯化HA重组蛋白。【结果】表达H7亚型AIV HA蛋白的重组杆状病毒在Sf9盲传3代后,Sf9开始出现肿胀、脱落、死亡等细胞病变,表明重组杆状病毒拯救成功;通过间接免疫荧光和Western blots试验发现,Sf9内出现可与HA重组蛋白特异性结合的绿色荧光信号,特异性结合的HA重组蛋白条带大小约70 kD左右,与预期相符,且HA重组蛋白可与H7亚型AIV阳性血清反应,表明HA重组蛋白表达成功;以构建的pUC19-gp64质粒为标准,建立基于gp64基因的杆状病毒qPCR检测方法,该方法在1×103~1×108 copy/μL间呈现良好的线性关系,标准曲线的相关系数R2=0.993;利用qPCR检测方法对杆状病毒液滴度进行定量,并通过Western blots试验筛选HA蛋白表达的最佳感染复数和孵育时间,结果显示以10MOI的比例接种Sf9,孵育72h,蛋白表达效果最好;通过His镍株亲和纯化HA重组蛋白,蛋白浓度为0.268mg/mL,鸡红细胞凝集效价为4log2。【结论】本试验在Sf9中成功表达并纯化H7亚型AIVHA蛋白,并建立与之相应的杆状病毒荧光定量PCR检测方法,可为进一步评价H7亚单位疫苗的免疫原性提供参考。 展开更多
关键词 H7亚型禽流感病毒 血凝素蛋白(HA) 昆虫细胞 杆状病毒 基因表达 蛋白纯化
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鸽H9N2亚型禽流感病毒的分离鉴定及致病性试验
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作者 贺祥 徐久鹏 +5 位作者 袁嘉欣 卢佳慧 范雨欣 常伽翌 李龙飞 徐彤 《北方牧业》 2024年第12期15-15,共1页
H9N2亚型禽流感病毒属于A型流感病毒,目前H9N2亚型禽流感病毒不仅可以感染家禽,而且可以感染猪、猫等哺乳动物,甚至出现人类感染现象。因此,H9N2亚型流感病毒不仅影响畜禽的健康养殖,同时也具有一定的公共卫生学意义。近年来鸽群感染流... H9N2亚型禽流感病毒属于A型流感病毒,目前H9N2亚型禽流感病毒不仅可以感染家禽,而且可以感染猪、猫等哺乳动物,甚至出现人类感染现象。因此,H9N2亚型流感病毒不仅影响畜禽的健康养殖,同时也具有一定的公共卫生学意义。近年来鸽群感染流感病毒时有报道,这其中包括H5N1、H7N9以及H9N2亚型禽流感病毒。虽然H9N2亚型禽流感毒株的致病性相对于H5和H7亚型较低,但是该亚型病毒在我国家禽中存在较为普遍,且目前从鸽子已分离到重组的H9N2毒株,该毒株不仅引起鸽子感染而且具有优先与人类呼吸道表面受体结合的能力,因此加强流感病毒在鸽群中流行情况具有重要的现实意义。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒 A型流感病毒 感染现象 公共卫生学 致病性试验 H7亚型 H5N1 健康养殖
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不同因素对禽流感病毒H7亚型血凝——血凝抑制试验的影响
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作者 张蕾蕾 《中兽医学杂志》 2023年第10期10-12,共3页
本文分别从抗体稀释液、红细胞悬液、孵育温度、抗体作用时间等不同因素分析禽流感病毒H7亚型血凝血凝实验效果的影响,在操作、方法、人为等因素进行规范,从而避免血凝抑制试验的失败和实验准确性,进而提高免疫抗体的监测准确性、可靠... 本文分别从抗体稀释液、红细胞悬液、孵育温度、抗体作用时间等不同因素分析禽流感病毒H7亚型血凝血凝实验效果的影响,在操作、方法、人为等因素进行规范,从而避免血凝抑制试验的失败和实验准确性,进而提高免疫抗体的监测准确性、可靠性、稳定性,为一线疫病监测特别是流感检测提供可鉴之资。 展开更多
关键词 血凝抑制实验 禽流感病毒H7亚型 抗体监测 影响因素
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蒽贝素对MCF-7乳腺癌细胞荷瘤裸鼠肿瘤生长的影响
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作者 苏华 郑海平 +4 位作者 柴玲 甘彩玉 曾宪彪 刘果 周光宇 《中国药业》 CAS 2024年第20期34-38,共5页
目的探讨蒽贝素对7乳腺癌MCF-细胞荷瘤裸鼠肿瘤生长的影响。方法取Balb/c-nu雌性裸鼠30只,随机分为模型组[等体积0.025%氨水溶液(pH 8.2)],5-氟尿嘧啶组(20 mg/kg),以及(蒽贝素)高、中、低剂量组(400,200,100μg/kg),各6只。取0.1 mL MC... 目的探讨蒽贝素对7乳腺癌MCF-细胞荷瘤裸鼠肿瘤生长的影响。方法取Balb/c-nu雌性裸鼠30只,随机分为模型组[等体积0.025%氨水溶液(pH 8.2)],5-氟尿嘧啶组(20 mg/kg),以及(蒽贝素)高、中、低剂量组(400,200,100μg/kg),各6只。取0.1 mL MCF-7细胞悬液皮下接种于裸鼠双侧腋下,以复制乳腺癌荷瘤裸鼠模型。建模成功后,各组裸鼠灌胃(或腹腔注射)相应药物或等体积0.025%氨水溶液(pH 8.2),均每日1次,连续14 d。末次给药后,称定瘤体质量并计算抑瘤率;苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤细胞形态学,Tunel染色分析肿瘤细胞凋亡情况并计算凋亡率;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;免疫组化染色法检测Caspase-3蛋白表达水平。结果与模型组比较,5-氟尿嘧啶组和高剂量组裸鼠瘤体质量显著减小(P<0.01或P<0.05);各给药组细胞凋亡率显著升高;5-氟尿嘧啶组和高、中剂量组裸鼠血清TNF-α水平显著升高(P<0.01或P<0.05);各给药组Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论蒽贝素可促进荷瘤裸鼠MCF-7细胞凋亡,其机制可能与上调Caspase-3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 蒽贝素 MCF-7细胞 乳腺癌 雌性裸鼠 细胞凋亡 caspase-3蛋白
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重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗免疫黄鸡抗体水平分析
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作者 黄青 杨建德 刘燕霏 《天津农学院学报》 CAS 2024年第3期59-62,共4页
H5或H7亚型高致病性禽流感是一种高度致死性传染病,它不仅给养禽业造成了巨大的危害和损失,还威胁着人类的生命健康安全。为了分析重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株+H5N1 Re-12株和H7N9 H7-Re3株)免疫抗体水平,本研究对... H5或H7亚型高致病性禽流感是一种高度致死性传染病,它不仅给养禽业造成了巨大的危害和损失,还威胁着人类的生命健康安全。为了分析重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株+H5N1 Re-12株和H7N9 H7-Re3株)免疫抗体水平,本研究对如皋市内14个养殖场近2万只黄鸡进行重组禽流感病毒三价灭活疫苗肌肉注射,免疫三周后,随机采集420份血液样品进行HI抗体效价检测。结果表明,免疫后的鸡群均无明显不良反应,可以诱导黄鸡产生良好的抗体,检测时具有较高的抗体效价,H5亚型Re-11株平均抗体效价为7.8log2,Re-12株平均抗体效价为8.2log2,H7亚型Re-3株的平均抗体效价为6.8log2,并且免疫抗体合格率均达到70%以上,对黄鸡具有良好的安全性和免疫保护效果,研究结果为有效地控制高致病性禽流感提供参考依据。 展开更多
关键词 重组禽流感病毒 H5+H7亚型 三价灭活疫苗 免疫 抗体水平
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