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The effects of tumor necrosis factor on cultured hepatocytes and non-parenchymal liver ceils in the mouse
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作者 王宇明 大西弘生 +1 位作者 武藤泰敏 刘沛 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1992年第3期287-290,共4页
The effects of tumor necrosis factor(TNF)on the cultured mouse hepa-tocytes and non-parenchymal liver cells were observed.It was found that therewere no significant changes of the morphological integrity and viability... The effects of tumor necrosis factor(TNF)on the cultured mouse hepa-tocytes and non-parenchymal liver cells were observed.It was found that therewere no significant changes of the morphological integrity and viability of thehepatocytes and the aspartate transferase level in the culture supernate after theaddition of TNF into the culture medium as compared with those of the normalcontrol,which indicates that TNF exerts no obvious cytotoxocity on the culturedmouse hepatocytes. In addition,there were also no significant changes of theabove mentioned parameters after TNF was added to the cocultures of hepato-cytes and non-parenchymal liver cells,which implies that the unactivated non-parenchymal liver cells are not involved in the TNF-related hepatocyte injury. 展开更多
关键词 tumor necrosis factor CULTURED hepatocytE non-parenchymal LIVER cell mouse
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A new risk assessment method for evaluation of oxidative chemicals using catalase mutant mouse primary hepatocytes
2
作者 Da-Hong Wang Yasuo Ishikawa +5 位作者 Masahiro Miyazaki Hirofumi Fujita Ken Tsutsui Kuniaki Sano Noriyoshi Masuoka Keiki Ogino 《Health》 2011年第5期288-291,共4页
We examined the possibility of developing a new risk assessment method for potentially hazardous chemicals by using mouse primary hepatocytes from acatalasemic mice (Csb) and the wild-type (Csa) as predictive model. C... We examined the possibility of developing a new risk assessment method for potentially hazardous chemicals by using mouse primary hepatocytes from acatalasemic mice (Csb) and the wild-type (Csa) as predictive model. Chemical-induced cytotoxicities, such as hydrogen peroxide and lawsone, a main hair dye ingredient of henna, were examined. We observed the differences in cell survival between the Csa and Csb in a dose-dependant manner after treatment with either hydrogen peroxide or lawsone, supporting the usefulness of this newly established method for hazard identification of oxidative chemicals in a risk assessment process. More chemicals will be tested to confirm the usefulness of this method for the preliminary screening of oxidative chemicals before animal experimentation. 展开更多
关键词 catalase-mutant mouse hepatocytes Reactive Oxygen Species Hydrogen PEROXIDE Hazard Assessment LAWSONE CYTOTOXICITY
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Fah^(-/-)Rag2^(-/-)IL2Rg^(-/-)小鼠肝脏原位异种重建模型的建立及其评价
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作者 张蒙 周琪 胡正 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1358-1365,共8页
目的:构建猪-小鼠肝细胞嵌合模型,探讨猪肝细胞在无T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)介导排斥条件下的移植及再生的相关条件,评估猪肝细胞在异种受体中的定居、增殖和功能因子分泌情况,为提高猪源化小鼠模型中猪肝细胞的重... 目的:构建猪-小鼠肝细胞嵌合模型,探讨猪肝细胞在无T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)介导排斥条件下的移植及再生的相关条件,评估猪肝细胞在异种受体中的定居、增殖和功能因子分泌情况,为提高猪源化小鼠模型中猪肝细胞的重建效率提供依据。方法:采用脾脏内注射法将猪肝细胞移植至Fah^(-/-)Rag2^(-/-)IL2Rg^(-/-)(FRG)小鼠体内,构建移植模型。将16只FRG小鼠随机分为对照组、空白对照组、实验组和绿色荧光蛋白(GFP)基因实验组,每组4只。空白对照组小鼠停止给予2-(2-硝基-4-三氟甲基苯甲酰基)-1,4-环己二酮(NTBC),监测体质量;对照组4只小鼠注射猪肝细胞,移植前1周停止给予NTBC,移植后监测体质量,当体质量下降20%时,给予NTBC 3 d;实验组小鼠注射猪肝细胞,移植前1周停止给予NTBC,移植后监测体质量,当体质量下降20%时,给予NTBC 3 d;GFP基因实验组小鼠注射携带GFP基因猪肝细胞,移植前1周停止给予NTBC,移植后监测体质量,当体质量下降20%时,给予NTBC 3 d。观察各组小鼠体质量、生存情况。检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,流式细胞术检测各组小鼠外周血中CD19+、CD3+和NK1.1+细胞表达情况,ELISA法检测各组小鼠血清中猪白蛋白表达水平,免疫组织化学法检测各组小鼠猪肝细胞再生效率。结果:与剪碎后再以胶原酶消化的方式比较,两步灌注法消化过程更温和、对细胞损伤更小,细胞活性可以达到92%。停止给予NTBC后,对照组小鼠体质量进行性降低,生命活力逐渐降低。连续停药第28天小鼠开始出现死亡现象。小鼠肝组织中出现肝细胞肿大、细胞浆疏松透亮和细胞核溶解等不可逆细胞损伤。空白对照组小鼠停药后血清中ALT水平逐渐升高。对照组停药小鼠重新给予NTBC后,体质量逐渐恢复至正常水平。流式细胞术,停止给予NTBC后,小鼠外周血中CD19+、CD3+和NK1.1+细胞完全缺失。免疫组织化学染色,实验组小鼠肝组织中未见深色Fah+阳性细胞,移植小鼠肝组织中可见深色Fah+阳性细胞,猪肝细胞再生效率为(11±4)%。GFP基因实验组小鼠可见同一视野经三色激光分别激发,猪肝细胞再生效率为(10±2)%。结论:成功构建了猪源化FRG小鼠肝脏嵌合模型,建立了长效稳定扩增猪肝细胞的小鼠模型。 展开更多
关键词 肝细胞异种移植 Fah 肝细胞 猪-小鼠肝细胞嵌合模型 免疫缺陷小鼠
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基于转录组测序对胆汁酸诱导肝细胞反应的Hub基因的筛选及验证
4
作者 张孟妮 张晓珣 +2 位作者 欧阳佳凤 柴进 吴晓玲 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第18期1883-1893,共11页
目的通过转录组测序分析结合型胆汁酸诱导肝细胞的基因表达情况,筛选和验证结合型胆汁酸诱导肝细胞代谢的Hub基因。方法使用牛磺胆酸(taurocholate acid,TCA)处理野生型小鼠的原代肝细胞,转录组测序(RNA sequencing,RNA-Seq)检测经TCA... 目的通过转录组测序分析结合型胆汁酸诱导肝细胞的基因表达情况,筛选和验证结合型胆汁酸诱导肝细胞代谢的Hub基因。方法使用牛磺胆酸(taurocholate acid,TCA)处理野生型小鼠的原代肝细胞,转录组测序(RNA sequencing,RNA-Seq)检测经TCA诱导后肝细胞的基因表达情况,将Fold Change≥1.5且P<0.05作为筛选标准获取差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)并进行生物信息学分析。使用STRING(search tool for the retrieval of interesting genes)数据库建立DEGs的蛋白质-蛋白质互作网络(protein-protein interaction,PPI),基于PPI网络利用Cytoscape软件找寻Hub基因。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)在体内外水平对目标Hub基因进行验证,使用蛋白质免疫印迹试验检测肝细胞内PSAT1/AKT/GSK3β信号通路相关蛋白的表达,使用糖原检测试剂盒检测肝细胞和肝组织糖原水平。结果TCA处理小鼠原代肝细胞共有差异基因293个,其中上调基因122个,下调基因171个。基因本体(Gene Ontology,GO)功能富集分析、京都基因与基因百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析及基因集富集分析(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA)的结果显示,DEGs主要富集在代谢、炎症、肿瘤等通路。使用Cytohubba插件得到16个Hub基因,包括Ccnd1、Ppara、Irs1、Ccl2、Ddit3、Serpine1、Nr0b2、Atf3、Phgdh、Trib3、Lepr、G6pc、Psat1、Cxcl2、Asns、Fgf21。RT-qPCR检测结果显示,多种结合型胆汁酸包括TCA、甘氨鹅去氧胆酸(glycochenodeoxycholic acid,GCDCA)、甘氨胆酸(glycocholic acid hydrate,GCA)均能诱导小鼠原代肝细胞内Psat1 mRNA表达水平增高(P<0.05)。此外,胆管结扎(bile duct ligation,BDL)胆汁淤积小鼠肝脏中的Psat1 mRNA水平增高(P<0.05)。Western blot检测结果显示,TCA能够诱导肝细胞内Psat1表达及激活AKT/GSK3β信号通路。TCA能够诱导小鼠原代肝细胞糖原合成增加,与BDL小鼠模型肝组织糖原合成增加以及血糖水平降低的结果一致(P<0.05)。结论Psat1可能是胆汁酸影响肝细胞糖代谢的相关基因,其高水平表达可能与肝细胞糖代谢的改变有关。 展开更多
关键词 胆汁淤积 糖代谢 小鼠原代肝细胞 转录组测序
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新生小鼠肝细胞的体外培养 被引量:19
5
作者 张阳德 赖毅 赵俊玲 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期1-3,共3页
探讨体外培养新生小鼠肝细胞的方法。方法 :采用肝组织块外植培养和肝组织块胶原酶消化法培养新生小鼠肝细胞 ,并比较两种方法。结果 :运用这两种方法成功地培养出原代肝细胞 ,并能够传代 ,光镜证实培养细胞为肝细胞。结论
关键词 新生小鼠 肝细胞 体外培养 细胞培养
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烟酰胺对小鼠肝细胞能量代谢的影响 被引量:5
6
作者 臧坤 刘晓牧 +2 位作者 宋恩亮 万发春 潘庆杰 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第B08期115-118,共4页
利用原代培养的小鼠肝细胞,研究烟酰胺(Nieotinamide,NA)对细胞能量代谢的影响。以不同浓度的NA(0—500μmol/L)干预24h后,检测细胞和培养介质中一氧化氮(NO)含量,一氧化氮合酶(NOS)活力及三种能量代谢指标乳酸(LD)、乳... 利用原代培养的小鼠肝细胞,研究烟酰胺(Nieotinamide,NA)对细胞能量代谢的影响。以不同浓度的NA(0—500μmol/L)干预24h后,检测细胞和培养介质中一氧化氮(NO)含量,一氧化氮合酶(NOS)活力及三种能量代谢指标乳酸(LD)、乳酸脱氢酶(LDH)和三磷酸腺苷酶(ATPase)。结果表明,随着NA浓度的增加,其对肝细胞能量代谢的促进作用逐渐上升,当浓度为200μmol/L时达到高峰,即200μmol/LNA的促进效果最为显著,而当NA浓度达到500舢oL/L时,肝细胞能量代谢水平反而低于对照组。表明一定浓度范围内烟酰胺具有促进肝细胞能量代谢的作用。 展开更多
关键词 烟酰胺 能量代谢 肝细胞 小鼠
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急性硒中毒后小鼠肝细胞线粒体损伤的体视学研究 被引量:6
7
作者 曹晓哲 邢传平 +2 位作者 高自芳 刘华福 董亮 《西北国防医学杂志》 CAS 1999年第3期169-171,共3页
目的:对急性二氧化硒中毒所致肝细胞线粒体损伤进行定量研究,以利于临床合理使用硒制剂。方法:雄性 B A L B/ C 小鼠110 只,随机分11 组,每组10 只。其中10 组用于测定口服 L D50 ,用改良寇氏法进行统计处理... 目的:对急性二氧化硒中毒所致肝细胞线粒体损伤进行定量研究,以利于临床合理使用硒制剂。方法:雄性 B A L B/ C 小鼠110 只,随机分11 组,每组10 只。其中10 组用于测定口服 L D50 ,用改良寇氏法进行统计处理,求得小鼠口服 L D50 。剩余一组10 只小鼠,再随机分为正常对照组与染毒组,每组5 只。染毒组用二氧化硒( Se O2) ,以小鼠口服 L D50 腹腔注射。两组均在1 h 后处死。应用体视学方法对肝细胞的体密度( Vv) 、比表面(δ) 、面密度( Sv) 、平均体积( V) 和数密度( Nv) 进行测算。结果: B A L B/ C小鼠的口服 L D50 为2 .04 mg/kg 。体视学结果显示:硒中毒后小鼠肝细胞线粒体与对照组相比,其比表面减小、平均体积增大及数密度降低( P< 0 .05) ;而体密度和面密度则无显著性差异( P> 0 .05) 。结论:硒中毒可直接导致肝细胞线粒体的损伤,表现为线粒体体积增大,数量减少,从而导致其功能降低。为以后更好地认识和预防硒中毒提供了基础病理资料。 展开更多
关键词 硒中毒 小鼠 肝细胞 线粒体检测 体视学
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高活力原代小鼠肝细胞的分离与纯化 被引量:7
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作者 王燕 周露婷 +1 位作者 章卫平 谢志芳 《医学研究杂志》 2011年第3期28-31,共4页
目的建立一种稳定的能获得高活力和高纯度原代小鼠肝细胞的分离和纯化方法。方法对传统的两步原位胶原酶灌注法进行4个方面的优化,主要包括选择逆向灌流、将持续灌注法改为间断灌注后夹闭门静脉法、严格控制胶原酶消化时间和将分离的肝... 目的建立一种稳定的能获得高活力和高纯度原代小鼠肝细胞的分离和纯化方法。方法对传统的两步原位胶原酶灌注法进行4个方面的优化,主要包括选择逆向灌流、将持续灌注法改为间断灌注后夹闭门静脉法、严格控制胶原酶消化时间和将分离的肝细胞悬液进行低速Percoll单密度离心纯化。分离后的肝细胞进行体外培养。肝细胞活力和得率用台盼蓝染色法检测。结果新鲜分离的小鼠原代肝细胞活力能稳定达到87%±3%,平均活细胞总数为8×105每克小鼠体重,绝大部分细胞在体外培养2h后贴壁生长。结论优化后的肝细胞分离方法更为稳定、有效,分离到的肝细胞具有高活力的优点。 展开更多
关键词 小鼠肝细胞 分离 灌注 原代培养
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虾青素对小鼠肝脏原代细胞氧化应激的影响 被引量:4
9
作者 张珊珊 吴旻 +2 位作者 张晓音 兰海楠 郑鑫 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期14-19,共6页
【目的】研究虾青素对过氧化氢(H_2O_2)诱导小鼠肝脏原代细胞产生氧化应激的影响。【方法】原位二步灌流法提取ICR小鼠的肝脏原代细胞,用丙二醛(Malondialdehyde,MDA)作为指标、采用H_2O_2处理建立氧化应激模型。采用流式细胞仪测定细... 【目的】研究虾青素对过氧化氢(H_2O_2)诱导小鼠肝脏原代细胞产生氧化应激的影响。【方法】原位二步灌流法提取ICR小鼠的肝脏原代细胞,用丙二醛(Malondialdehyde,MDA)作为指标、采用H_2O_2处理建立氧化应激模型。采用流式细胞仪测定细胞中活性氧(Reative oxygen species,ROS)含量及凋亡水平变化,生物化学法测定细胞中MDA和谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的含量、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性,用荧光定量PCR检测抗氧化酶SOD、GSH-px mRNA的相对表达量,Western-blot检测细胞核中Nrf2蛋白相对表达量。【结果】使用5μg·mL^(–1)虾青素预保护细胞3 h,10μmol·L–1H_2O_2刺激3 h的情况下氧化应激模型效果最好。虾青素降低了H_2O_2诱导后小鼠肝脏原代细胞的细胞凋亡率以及ROS、MDA和GSH含量,提升了SOD、GSH-px的活性以及SOD、GSH-px的mRNA相对表达量,抑制了Nrf2蛋白的核转移。【结论】虾青素对H_2O_2诱导产生氧化应激的肝脏原代细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 小鼠肝脏原代细胞 虾青素 抗氧化酶 Nrf2蛋白 H2O2
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Retrorsine对小鼠肝损伤后肝细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 周晓飞 王茜 +1 位作者 褚建新 刘爱莲 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期31-35,共5页
目的:比较倒千里光碱(retrorsine)对小鼠与大鼠肝损伤后肝细胞增殖的影响,探讨应用retrorsine建立小鼠肝细胞移植模型的可行性。方法:雄性小鼠和大鼠均各自分为retrorsine处理组和生理盐水注射组(未处理组),每组30只。Retrorsine处理组... 目的:比较倒千里光碱(retrorsine)对小鼠与大鼠肝损伤后肝细胞增殖的影响,探讨应用retrorsine建立小鼠肝细胞移植模型的可行性。方法:雄性小鼠和大鼠均各自分为retrorsine处理组和生理盐水注射组(未处理组),每组30只。Retrorsine处理组动物分别接受2次(间隔2周)retrorsine注射(小鼠剂量为70 mg/kg,大鼠剂量为30 mg/kg);未处理组用生理盐水代替retrors-ine。末次注射4周后,所有的动物均予CCl4注射(0.5 mg/kg),分别在CCl4注射前即刻(记为0时)、注射后第1、2、3、4、6和15天取动物肝组织样本。H-E染色检查动物肝组织病理学变化,Ki-67染色检测动物肝细胞增殖情况。结果:H-E染色发现retrors-ine处理组大鼠肝组织出现明显的巨细胞增多、小胆管增生和小肝细胞增生并形成结节,而未处理组大鼠未出现这些表现,两组间有显著差异;然而,retrorsine处理组及未处理组小鼠肝组织均表现为肝细胞变性、肝小叶中央静脉周围区坏死,未出现巨细胞增生,两组表现类似。Retrorsine处理组大鼠Ki-67染色阳性肝细胞主要出现在小肝细胞结节中,CCl4注射后第3天Ki-67染色阳性肝细胞数明显少于未处理组(P<0.05);而retrorsine处理组小鼠Ki-67阳性细胞计数几乎在各时间点均高于未处理组,尤其在CCl4注射后第4天(P<0.001),两组变化趋势一致。结论:应用retrorsine可明显抑制大鼠肝损伤后肝细胞增殖,适用于建立大鼠肝细胞移植模型;retrorsine对小鼠肝损伤后肝细胞增殖无明显抑制作用,不适用于建立小鼠肝细胞移植模型。 展开更多
关键词 倒千里光碱 小鼠 大鼠 肝细胞 细胞增殖
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小鼠肝脏细胞摄取镨的动态研究──电镜和X射线微区分析术观察 被引量:4
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作者 邹仲之 谢远哲 +3 位作者 陈爱军 王伟 朱秀雄 栗振宝 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期48-50,T009,共4页
在给小鼠1次静脉注射氯化错(60mg/kg体重)后5min至48h内的9个间期应用电镜结合X射线微区分析术,对镨在肝细胞与枯否细胞中的运转进行了追踪观察。在5min~2h,两种细胞均以胞吞方式摄取肝血窦中含镨微粒,在... 在给小鼠1次静脉注射氯化错(60mg/kg体重)后5min至48h内的9个间期应用电镜结合X射线微区分析术,对镨在肝细胞与枯否细胞中的运转进行了追踪观察。在5min~2h,两种细胞均以胞吞方式摄取肝血窦中含镨微粒,在胞质中形成吞噬体。在吞噬体内,微粒群处于由稀疏至密集的浓缩过程,小吞噬体互相融合。这种胞吞作用在枯否细胞极为活跃,在肝细胞则较微弱。在4~48h,许多枯否细胞的胞质几乎被吞噬体充满,细胞变性;肝细胞内的吞噬体汇聚于胆小管周围。在胆小管腔内可见高电子致密微粒群,表明镨可经胆汁途径排出。 展开更多
关键词 肝细胞 枯否细胞 吞噬体 Pu
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异烟肼和利福平致小鼠原代肝细胞损伤时CYP2E1和CYP3A酶活性的变化 被引量:2
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作者 郭丁妮 吴红海 +2 位作者 薛改 张运好 侯艳宁 《解放军药学学报》 CAS 2011年第3期221-223,共3页
目的研究异烟肼和利福平对小鼠原代肝细胞的损伤作用及对CYP450同工酶CYP2E1和CYP3A酶活性的影响。方法从小鼠肝脏中分离出肝细胞,原代培养3 d后,加入药物后孵育2 d。收集细胞培养上清液,测定其中的乳酸脱氢酶(LDH)释放量以反映药物对... 目的研究异烟肼和利福平对小鼠原代肝细胞的损伤作用及对CYP450同工酶CYP2E1和CYP3A酶活性的影响。方法从小鼠肝脏中分离出肝细胞,原代培养3 d后,加入药物后孵育2 d。收集细胞培养上清液,测定其中的乳酸脱氢酶(LDH)释放量以反映药物对肝细胞的损伤作用。测定CYP450酶活性的细胞分别加入CYP2E1和CYP3A的特异性底物(对硝基酚和咪达唑仑)孵育2 h,反应终止后用高效液相色谱-质谱法测定特异性底物的浓度,浓度减少程度代表CYP2E1和CYP3A活性的变化。结果与对照组比,异烟肼中、高浓度组,利福平高浓度组,合用中、高浓度组LDH的释放量显著增加。与对照组比较,异烟肼组与合用组CYP2E1底物对硝基酚浓度均显著降低;利福平组与合用组CYP3A底物咪达唑仑浓度均显著降低。结论高浓度的异烟肼和利福平均对小鼠原代肝细胞有损伤作用,两药合用时,低浓度能引起肝细胞损伤。异烟肼和利福平对CYP2E1和CYP3A酶活性的诱导可能是其导致肝损伤的机制之一。 展开更多
关键词 小鼠原代肝细胞 异烟肼 利福平 CYP2E1 CYP3A 肝细胞毒性
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虎金丸对CCl_4所致实验性肝损伤的保护作用 被引量:18
13
作者 黄兆胜 黎俏梅 《中国实验方剂学杂志》 CAS 1999年第2期21-23,共3页
虎金丸ig小鼠,能显著降低CCl4所致血中ALT、AST、GST和肝中MDA水平的升高;虎金丸ig大鼠制得药物血清后,以10%浓度加入原代培养大鼠肝细胞培养液中,能显著降低10mmol/LCCl4所致培养液中ALT和... 虎金丸ig小鼠,能显著降低CCl4所致血中ALT、AST、GST和肝中MDA水平的升高;虎金丸ig大鼠制得药物血清后,以10%浓度加入原代培养大鼠肝细胞培养液中,能显著降低10mmol/LCCl4所致培养液中ALT和MDA的升高,并使细胞存活率由55.90%提高至82.45%。 展开更多
关键词 虎金丸 CCL4 肝损伤 保护作用
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用毫微球增加体外小鼠腹腔巨噬细胞与大鼠肝细胞对庆大霉素的摄取 被引量:9
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作者 张强 廖工铁 +1 位作者 魏大鹏 章崇杰 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期375-380,共6页
用3H-庆大霉素制备了聚氰基丙烯酸正丁酯毫微球。结果表明,毫微球可使小鼠腹腔巨噬细胞的cpm达3H-庆大霉素溶液对照组的6.34倍,使大鼠肝细胞的cpm在1,12和24h分别达到‘比庆大霉素溶液对照组的27.74,9... 用3H-庆大霉素制备了聚氰基丙烯酸正丁酯毫微球。结果表明,毫微球可使小鼠腹腔巨噬细胞的cpm达3H-庆大霉素溶液对照组的6.34倍,使大鼠肝细胞的cpm在1,12和24h分别达到‘比庆大霉素溶液对照组的27.74,9.03和8.36倍。毫微球的粒径、使用的稳定剂种类、表面活性剂包裹以及庆大霉素的投药量等对摄取量均有明显影响。本研究为筛选细胞内给药系统提供了依据。 展开更多
关键词 庆大霉素 毫微球 腹腔巨噬细胞 肝细胞 药物载体
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定向诱导小鼠原始生殖细胞向肝细胞分化的研究 被引量:3
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作者 刘晓萍 高英茂 邴鲁军 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期650-654,共5页
目的探索诱导小鼠原始生殖细胞向肝细胞定向分化的最佳条件。方法分离提取小鼠的原始生殖细胞,体外培养扩增后,接种到6孔培养板中。向不同孔中分别加入不同浓度的bFGF、EGF、-βNGF、RA、肝细胞提取液和与胎肝组织分隔培养,进行诱导分... 目的探索诱导小鼠原始生殖细胞向肝细胞定向分化的最佳条件。方法分离提取小鼠的原始生殖细胞,体外培养扩增后,接种到6孔培养板中。向不同孔中分别加入不同浓度的bFGF、EGF、-βNGF、RA、肝细胞提取液和与胎肝组织分隔培养,进行诱导分化。用靛青绿摄入试验和α-1-抗胰蛋白酶(AAT)、白蛋白(ALB)免疫细胞化学染色鉴定原始生殖细胞向肝细胞分化的状况。结果与胎肝组织分隔培养2 d,可见原始生殖细胞向肝样细胞分化,分化细胞呈圆形和星形,圆形细胞多呈簇状,可以摄入靛青绿呈绿色,并呈AAT和ALB免疫阳性着色,培养12 d时分化率达80%。肝细胞提取液也可诱导原始生殖细胞向肝样细胞分化,12 d时分化率达70%以上;0.5 g/L和1 g/L的肝细胞提取液的诱导分化率无显著差异;但是0.5 g/L提取液诱导组圆形细胞较多;而1 g/L肝提取液诱导组,星状分化细胞多。β-神经生长因子(-βNGF)诱导4 d,可见肝样细胞出现,随诱导时间延长,分化细胞增多,圆形分化细胞较多,12 d时分化率达60%以上;20μg/L和50μg/L两种浓度的-βNGF诱导分化率无显著差异。bFGF、EGF、RA诱导组未见ALB免疫反应阳性细胞。RA可以增强-βNGF的诱导分化作用,使星状细胞增多明显。结论-βNGF和肝细胞因子可诱导原始生殖细胞向肝细胞定向分化。 展开更多
关键词 原始生殖细胞 肝细胞 Β-神经生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 表皮生长因子 维甲酸 诱导分化 小鼠
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异种肝细胞移植进展 被引量:2
16
作者 刘菲 刘雁冰 +1 位作者 陈锡美 赵中辛 《国际消化病杂志》 CAS 2007年第1期27-30,共4页
肝细胞移植是治疗严重肝脏疾病的有效方法。在动物实验中,已证明猪肝细胞移植可改善急性肝衰竭大鼠的预后。但肝细胞移植尤其是异种肝细胞移植还有一些关键问题有待解决。此文就当前异种肝细胞移植作一综述。
关键词 肝细胞移植 肝脏疾病 肝衰竭动物模型 免疫隔离技术 嵌合肝模型
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HepaRG细胞移植治疗鼠特异性Fas抗体诱导的小鼠急性肝衰竭 被引量:2
17
作者 蒋黎 兰林 +2 位作者 李俊刚 王宇明 刘国栋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第18期1724-1727,共4页
目的探讨HepaRG细胞移植对鼠特异性Fas抗体诱导的急性肝衰竭小鼠的治疗作用和人肝细胞异种移植的策略。方法利用特异性鼠抗Fas抗体(Jo2mAb)腹腔注射,剂量为0.3mg/kg,诱导20只SCID小鼠制备急性肝衰竭模型,24h内按照实验动物随机数字表分... 目的探讨HepaRG细胞移植对鼠特异性Fas抗体诱导的急性肝衰竭小鼠的治疗作用和人肝细胞异种移植的策略。方法利用特异性鼠抗Fas抗体(Jo2mAb)腹腔注射,剂量为0.3mg/kg,诱导20只SCID小鼠制备急性肝衰竭模型,24h内按照实验动物随机数字表分组方法,经脾移植2×106HepaRG细胞的小鼠为实验组(10只),未经HepaRG细胞移植的小鼠为对照组(10只)。观察小鼠的存活率、肝脏功能、肝组织变化情况。实验组移植4周免疫组化检测肝组织人白蛋白、人CK18、人HepPar1的表达,免疫荧光检测人白蛋白的表达。结果实验组小鼠有9只存活超过4周,而对照组小鼠3d内先后死亡9只,实验组血清ALT和AST趋于正常,显著低于对照组(P<0.01),且存活时间显著高于对照组(P<0.01)。实验组经HepaRG细胞移植能避免Jo2mAb所致肝组织出血、坏死,移植后4周免疫组化可见人白蛋白、CK18、HepPar1阳性表达细胞,肝组织免疫荧光可见人白蛋白阳性细胞的表达。结论移植HepaRG细胞可治疗Jo2mAb腹腔注射小鼠诱导的急性肝衰竭,HepaRG细胞不仅在小鼠肝内存活,且得以增殖。 展开更多
关键词 肝细胞移植 Fas抗体/Jo2 MAB 急性肝衰竭 动物模型/鼠
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鼠特异性Fas抗体对人鼠嵌合肝中人肝细胞增殖的促进作用 被引量:3
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作者 蒋黎 李俊刚 +2 位作者 兰林 王宇明 刘国栋 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第16期1734-1740,共7页
目的:探讨人胎肝细胞移植联合使用JO2抗体的策略,促进人胎肝细胞在小鼠肝内存活和增殖.方法:裸鼠经脾移植1×106人胎肝细胞,移植后第1天ipJO2抗体,剂量为0.2mg/kg,1次/wk,持续12wk为实验组,裸鼠经人胎肝细胞移植后未给予JO2抗体为... 目的:探讨人胎肝细胞移植联合使用JO2抗体的策略,促进人胎肝细胞在小鼠肝内存活和增殖.方法:裸鼠经脾移植1×106人胎肝细胞,移植后第1天ipJO2抗体,剂量为0.2mg/kg,1次/wk,持续12wk为实验组,裸鼠经人胎肝细胞移植后未给予JO2抗体为对照组,建立人鼠嵌合肝动物模型.采用HE染色、原位末端标记方法(TUNEL染色)观察未经人胎肝细胞移植而给予JO2抗体24h后处死的裸鼠肝脏组织.免疫组化、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时相点实验组和对照组嵌合肝中肝组织人白蛋白、特异人增殖细胞核抗原(PCNA)和人白蛋白mRNA表达.结果:未经人胎肝细胞移植而给予JO2抗体的裸鼠病理组织切片发现肝组织出血、坏死和细胞凋亡.实验组和对照组裸鼠均能存活至24wk.移植后嵌合鼠肝组织表达人白蛋白和人PCNA阳性细胞的时间:实验组2-20wk,对照组2-12wk;白蛋白mRNA表达:实验组4-16wk,对照组4-8wk;实验组与对照组移植后8、12wkPCNA表达差异有显著性(25.7%±8.5%vs13.4%±7.8%,29.4%±5.0%vs8.5%±2.3%,均P<0.05).结论:人肝细胞异种移植于裸鼠体内能够存活,经小剂量JO2抗体ip裸鼠,使人鼠嵌合肝中人肝细胞得以增殖,存活时间延长. 展开更多
关键词 FAS抗体 人肝细胞 移植 人鼠嵌合肝 增殖
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葡萄原花青素对乙醇诱发小鼠肝细胞增殖活性损伤的防护作用 被引量:2
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作者 李静 钟进义 +1 位作者 綦晓 尹衍玲 《青岛大学医学院学报》 CAS 2011年第4期317-319,323,共4页
目的研究葡萄原花青素(GPC)对乙醇诱发小鼠肝细胞增殖活性损伤的防护作用。方法将小鼠随机分为5组,乙醇对照组和各剂量GPC组小鼠均每天经口灌胃乙醇4 g/kg体质量,低、中、高剂量GPC组同时分别给予GPC 50、100和200 mg/kg体质量,连续4周... 目的研究葡萄原花青素(GPC)对乙醇诱发小鼠肝细胞增殖活性损伤的防护作用。方法将小鼠随机分为5组,乙醇对照组和各剂量GPC组小鼠均每天经口灌胃乙醇4 g/kg体质量,低、中、高剂量GPC组同时分别给予GPC 50、100和200 mg/kg体质量,连续4周。眼球取血,颈椎脱臼处死小鼠,取肝组织用MTT法检测各组小鼠的肝细胞增殖活性,苏木精-伊红染色光镜下观察肝组织切片病理学改变,用免疫组织化学法检测肝细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达水平,用全自动生化分析仪检测血清中谷丙转氨酶(ALT)活性,用ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果高、中剂量GPC组ALT水平均显著低于乙醇对照组(F=14.05,q=4.29、5.53,P<0.05),细胞增殖活性显著高于乙醇对照组(F=68.68,q=5.71、8.57,P<0.05)。与乙醇对照组比较,高剂量GPC组Bcl-2/Bax比值显著升高(F=388.03,q=4.90,P<0.05),高、中剂量GPC组血清TNF-α浓度显著降低(F=10.09,q=3.01、5.68,P<0.05)。同时,GPC能不同程度改善肝脏病理损伤。结论 GPC可通过调整肝组织中Bcl-2/Bax比值,降低血清中TNF-α浓度,从而对乙醇诱发的小鼠肝细胞增殖活性损伤起到防护作用。 展开更多
关键词 葡萄 原花青素类 肝细胞 细胞增殖 小鼠
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急性硒中毒后小鼠肝细胞线粒体损伤的时间形态学研究 被引量:3
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作者 曹晓哲 邢传平 +2 位作者 高自芳 钱震 董亮 《中国体视学与图像分析》 2001年第2期70-72,77,共4页
对急性二氧化硒中毒所致肝细胞线粒体损伤进行时间形态学定量研究 ,以发现其敏感时间点 ,为临床合理地使用硒制剂提供基础资料。雄性BALB/C小鼠 60只 ,随机分为正常对照组与染毒组 ,每组 30只。每组再随机分为 6个时间组 ,每隔 4小时各... 对急性二氧化硒中毒所致肝细胞线粒体损伤进行时间形态学定量研究 ,以发现其敏感时间点 ,为临床合理地使用硒制剂提供基础资料。雄性BALB/C小鼠 60只 ,随机分为正常对照组与染毒组 ,每组 30只。每组再随机分为 6个时间组 ,每隔 4小时各一组 ,每组 5只。染毒组小鼠以口服LD50量腹腔注射二氧化硒 (SeO2 )。两组均在 1小时后处死。应用体视学方法对肝细胞线粒体的体密度 (Vv)、比表面 (δ)、表面积密度 (Sv)、平均体积 (V)和数密度 (Nv)进行测算。硒中毒后小鼠肝细胞线粒体与对照组相比 ,δ除 0 4 :0 0组外 ,其他时间组则明显减小 (P <0 .0 5) ,最低值出现在 12 :0 0 ;V除 0 8:0 0组外 ,其他时间组普遍增大 ,其中 12 :0 0组明显增大 (P <0 .0 5)。Nv 在 12 :0 0、16:0 0和 2 0 :0 0组与对照组相比明显减少 (P <0 .0 5) ,其他时间组与对照组相比则未见显著性差异 (P <0 .0 5) ;而体密度和表面积积密度则无明显改变。硒中毒可直接导致肝细胞线粒体的损伤 ,表现为线粒体体积增大 ,比表面及数量减少 ,从而导致其功能降低。硒中毒时其线粒体损伤变化表现为夜间较轻 ,白天较重。 0 4 :0 0h可能为肝细胞线粒体的不敏感时间点 ;而 12 :0 0h可能是其硒中毒的最敏感时间点。 展开更多
关键词 小鼠 肝细胞 线粒体 时间形态学 体视学
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