大围山微型鸡与科宝肉鸡免疫球蛋白含量及CATH-2基因表达差异研究

试验以相同条件下饲养的4、8、12周龄的大围山微型鸡和科宝肉鸡为研究对象,分别测定其免疫球蛋白含量(IgA、IgG、IgM)及胸肌、肝脏、小肠中的CATH-2 mRNA表达量,比较二者之间的差异。结果显示:大围山微型鸡血液中免疫球蛋白含量总体上低于科宝肉鸡,两个鸡种随着日龄的增加IgA、IgG含量均呈现先下降后上升趋势,IgM含量呈现下降趋势,且两个试验鸡种在4周龄时IgA、IgM、IgG含量均不同程度的高于8、12周龄。CATH-2 mRNA表达量在两个鸡种间存在差异,大围山微型鸡胸肌和肝脏中CATH-2 mRNA表达量均低于科宝肉鸡,而小肠中CATH-2 mRNA表达量显著高于科宝肉鸡。结果表明:在相同饲养条件下,大围山微型鸡免疫机能强于科宝肉鸡,具有潜在的较强的抗感染能力。

氯化汞对中国大鲵皮肤CATH-BF基因及心脏和胰腺CATH-2、CATH-3基因表达的影响

为探讨氯化汞(HgCl 2)对大鲵皮肤CATH-BF基因及心脏和胰腺CATH-2、CATH-3基因表达的影响,将幼龄中国大鲵分别暴露于0(对照)、1、10、100 ng/L HgCl 2中24、48、72 h,采用实时定量RT-PCR方法分析HgCl 2处理不同时间后,大鲵皮肤CATH-BF、心脏和胰腺中CATH-2、CATH-3基因的表达情况。结果显示,与对照组相比,大鲵暴露于HgCl 224 h后,大鲵皮肤CATH-BF基因表达水平均呈现下降变化趋势,即1、100 ng/L HgCl 2对大鲵暴露24 h极显著下调了大鲵皮肤CATH-BF基因表达水平(P<0.01),10 ng/L HgCl 2对大鲵暴露24 h显著下调了大鲵皮肤CATH-BF基因表达水平(P<0.05),10、100 ng/L HgCl 2对大鲵暴露48 h显著诱导了大鲵皮肤CATH-BF基因表达(P<0.05),大鲵暴露于HgCl 272 h后,HgCl 2对大鲵皮肤CATH-BF基因表达无显著影响;大鲵暴露于HgCl 224 h后,不同质量浓度HgCl 2对大鲵心脏CATH-2基因表达水平有不同的影响,即1、10 ng/L对大鲵暴露24 h极显著下调了心脏CATH-2基因表达水平(P<0.01),100 ng/L HgCl 2对大鲵暴露24 h极显著上调了心脏CATH-2基因表达水平(P<0.01),10、100 ng/L HgCl 2对大鲵暴露48 h后显著下调了大鲵心脏CATH-2基因表达水平(P<0.05);10、100 ng/L HgCl 2对大鲵暴露24 h显著下调了大鲵胰腺CATH-2基因表达水平(P<0.05);1、10 ng/L HgCl 2对大鲵暴露24 h极显著诱导了心脏CATH-3基因表达水平(P<0.01),大鲵暴露于HgCl 224、48、72 h后,HgCl 2对胰腺CATH-3基因表达均无显著性影响。可见,HgCl 2对大鲵皮肤CATH-BF基因及胰腺和心脏CATH-2、CATH-3基因表达的影响处于动态变化模式,并且HgCl 2对大鲵胰腺和心脏CATH-2、CATH-3基因表达影响存在组织特异性差异。

新诊断2型糖尿病患者血清非甲基化胰岛素DNA水平的意义及其影响因素

目的用病例对照研究血非甲基化胰岛素DNA(INSDNA)在新诊断2型糖尿病(NT2DM)中的意义及影响因素。方法选择2018年10月至2020年5月在东莞市厚街医院内分泌科住院的NT2DM患者45例,其中男30例、女15例,年龄(47.0±9.6岁);长病程2型糖尿病(LT2DM)患者23例,其中男15例、女8例,年龄(48.6±8.6岁);糖耐量正常(NGT)20例,其中男13例、女7例,年龄(40.2±5.5岁)。用液滴数字PCR技术(ddPCR)检测血清非甲基化INSDNA及ELSA检测人组织蛋白酶S(Cath-S)和白介素6(IL-6)水平,采用单因素方差分析各组非甲基化INSDNA水平差异及用Spearman相关分析空腹C肽(FC)、Cath-S、IL-6与非甲基化INSDNA水平的相关性。统计学方法采用独立样本t检验、χ^(2)检验。结果NT2DM组患者的血清非甲基化INSDNA水平明显高于NGT组和LT2DM组[3.01(4.64)copies/μl比0.59(0.19)copies/μl、1.77(2.80)copies/μl],差异均有统计学意义(均P<0.01)。NT2DM组的患者Cath-S水平[683.37(283.90)nmol/L比479.70(111.30)nmol/L]、IL-6水平[28.95(9.99)pg/ml比3.42(6.90)pg/ml)]均明显高于NGT组(均P<0.01)。相关分析显示,非甲基化INSDNA水平在NT2DM患者与Cath-S、IL-6和FC呈正相关(r=0.354,P=0.017;r=0.320,P=0.032;r=0.434,P=0.003)。结论血清非甲基化INSDNA水平在NT2DM疾病早期水平较高,随着病程延长而降低,血Cath-S、IL-6和FC可能是影响NT2DM血清非甲基化INSDNA水平的重要因素。

利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立亨廷顿病(HD)细胞模型

目的:探索CRISPR/Cas9基因编辑技术在构建亨廷顿病(Huntington's Disease,HD)细胞模型中的应用。方法:借助CRISPR/Cas9靶点设计网站对IT15基因进行分析并设计gRNA靶点序列,检测gRNA靶点序列的体外Cas9酶切活性。选择体外活性较好的一对gRNA靶点序列并装载到VK001-05打靶质粒上,根据靶点位置设计并构建50个CAG(Poly Q)重复且有EGFP和PuroR标记的Donor质粒。将打靶质粒和Donor质粒混合并借助转染试剂转染CATH-a细胞,提取转染后细胞基因组DNA鉴定gRNA靶点位置的基因型。结果:转染后CATH-a细胞的gRNA靶点位置准确无误地敲入50个CAG重复碱基。结论:研究进一步拓展了CRISPR/Cas9基因编辑技术在构建遗传性基因突变疾病模型方面的应用,同时也为未来临床治疗该类疾病提供了参考基础和研究平台。